分子生物學(xué)重點習(xí)題

1、一、名詞解釋：1 基因：是核酸中儲存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列信息及表達這些信息所必需的全部核苷酸序列。2 基因組：細胞或生物體一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總稱。3 基因表達：是指原核生物和真核生物基因組中特定的結(jié)構(gòu)基因所攜帶 的遺傳信息，經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過程，合成具有特定的生物學(xué)功能的各種蛋白質(zhì)，表 現(xiàn)出特定的生物學(xué)效應(yīng)的全過程。4 啟動子：RNA 聚合酶特異識別結(jié)合和啟動轉(zhuǎn)錄的DNA序列。5 多順反子：原核生物的一個 mRNA 分子帶有幾個結(jié)構(gòu)基因的遺傳信息， 利用共同的啟動子及終止信號，組成操縱子的基因表達調(diào)控單元。6 單順反子：一個結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄生成一個 mRNA 分子。7 順

2、式作用元件：某些能影響基因表達但不編碼蛋白質(zhì)和 RNA 的 DNA序列，按照功能分為啟動子、增強子、負調(diào)控元件-沉默子。8 核心啟動子：指足以使 RNA 聚合酶轉(zhuǎn)錄正常起始所必需的、最少的 DNA 序列。包括“轉(zhuǎn)錄起始位點”即相當于 mRNA 的 CAP 位點及其上游2530 bp 處的 富含 TA 的典型元件“TATA”盒。核心啟動子單獨起作用時，其功能為確定轉(zhuǎn)錄起始位點并產(chǎn) 生基礎(chǔ)水平的轉(zhuǎn)錄。9 上游啟動子元件：TATA 合上游的一些特定的 DNA 序列， 反式作用因子，可與這些元件結(jié)合，調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的效率。10增強子：指位于啟動子上游或下游并通過啟動子增強鄰近基因轉(zhuǎn)錄效率的DNA 順序，

3、但增強子本身不具備啟動子活性。11沉默子：在真核基因內(nèi)能抑制基因轉(zhuǎn)錄的 DNA 序列。它們與反式作用因子相 互結(jié)合而起作用。不受距離和方向的限制，并可對異源基因的表達起作用。12反式作用因子：指能直接或間接地識別或結(jié)合在各順式作用元件 8 12 bp 核心序列上，參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的一組蛋白質(zhì)。在結(jié)構(gòu)上含有與 DNA 結(jié)合的 結(jié)構(gòu)域。13選擇性剪接：在高等真核細胞中，某個內(nèi)含子 5的供點可以在特定 條件下與另一個內(nèi)含子 3受點進行剪接，同時刪除這兩個內(nèi)含子及其中間的全部外顯子或 內(nèi)含子，即一個外顯子或內(nèi)含子是否出現(xiàn)在成熟的 mRNA 中是可以選擇的，這種剪接方式 稱為選擇性剪接。14點突變

4、：在基因一級結(jié)構(gòu)某個位點上，一個堿基被另一個堿基取代產(chǎn) 生的 DNA 一級結(jié)構(gòu)改變稱為點突變。15基因工程：是指在體外對 DNA 分子按照既定的目的和方案，對DNA進行剪切和重新連接，然后把它導(dǎo)入宿主細胞，從而能夠擴增有關(guān) DNA 片段，表達有關(guān)基因產(chǎn)物，進行 DNA 序列分析、基因治療，研究基因表達的調(diào)節(jié)元件（如啟動子、增強 子等），以及研究基因的功能等。16限制性核酸內(nèi)切酶：限制性核酸內(nèi)切酶是一種核酸內(nèi)切酶，又稱限制性內(nèi)切酶，能識別雙鏈 DNA 分子內(nèi)部的特異位點并且裂解磷酸二酯鍵。17質(zhì)粒：存在于包括細菌、酵母在內(nèi)的多種微生物中，在宿主細胞的染色體外以穩(wěn)定的方式遺傳。結(jié)構(gòu)上，它是一種雙鏈

5、環(huán)狀的DNA分子，含有復(fù)制起始點，此復(fù)制起始點與其他一些順式調(diào)控因子構(gòu)成復(fù)制子，能利用細菌染色體DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的同一套酶系統(tǒng)，在細菌體內(nèi)獨立地進行自我復(fù)制及轉(zhuǎn)錄。18cDNA 文庫：以特定的組織或細胞 mRNA 為模板逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的 cDNA 與適當?shù)妮d體重組得到的重組 DNA 克隆群。19斷裂基因：真核生物基因在編碼區(qū)內(nèi)含有非編碼的插入序列，結(jié)構(gòu)基因不連續(xù)，即。20結(jié)構(gòu)基因：基因中用于編碼 RNA 或蛋白質(zhì)的 DNA 序列為結(jié)構(gòu)基因。21非結(jié)構(gòu)基因：結(jié)構(gòu)基因兩側(cè)一段不編碼的 DNA 片段，含有基因 調(diào)控序列。22內(nèi)含子：真核生物結(jié)構(gòu)基因內(nèi)非編碼的插入序列。23質(zhì)粒：存在于包括細菌、酵母在內(nèi)的

6、多種微生物中，在宿主細胞的染色體外以穩(wěn)定的方式遺傳。結(jié)構(gòu)上，它是一種雙鏈環(huán)狀的 DNA 分子，含有復(fù)制起始點，此復(fù)制 起始點與其他一些順式調(diào)控因子構(gòu)成復(fù)制子，能利用細菌染色體 DNA 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的同一 套酶系統(tǒng)，在細菌體內(nèi)獨立地進行自我復(fù)制及轉(zhuǎn)錄。24操縱子：多個功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因成簇串聯(lián)排列，與上游共同的調(diào)控區(qū)和下游轉(zhuǎn)錄終止信號組成的基因表達單位。25DNA 指紋：利用人類染色體上小衛(wèi)星DNA的核心序列為探針進行RFLP分析時，檢測到大量的高度可變區(qū)，產(chǎn)生相應(yīng)的圖譜，并具有高度的個體特異性， 達到了如同人類指紋那樣的高度專一性，所以稱其為DNA指紋圖譜。26基因組學(xué)：闡明基因組結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)與功

7、能的關(guān)系及基因與基因之間相互作用的一門科學(xué)。27短串聯(lián)重復(fù)：衛(wèi)星DNA中重復(fù)單位為2-6bp的 DNA 序列，常見為(AC)n 和(TG)n，重復(fù)次數(shù) 10-60 次，總長度小于 150bp，高度多態(tài)性，可作遺傳標記。28基因型：逐代傳遞下去的的成對基因的集合，一個來自父本，一個來自母 本。29RNA 干擾：是由雙鏈 RNA 誘發(fā)的基因沉默現(xiàn)象:與其有同源 序列的 mRNA 被降解，從而抑制了該基因的表達。30核酶：是具有酶活性的 RNA，可降解特異的 mRNA 序列。用于基因治療的核酶分子由三個部分組成，中間是保守序列（能夠組成酶活性結(jié)構(gòu)域），兩端是引導(dǎo)序列。與一般的反義 RNA 相比，核酶

8、具有較穩(wěn)定的空間結(jié)構(gòu)，不易受到 RNA 酶的攻擊。更重要的是，核酶在切斷mRNA后，又可從雜交鏈上解脫下來，重新結(jié)合和切割其它的mRNA分子。31蛋白質(zhì)組學(xué)：是應(yīng)用各種技術(shù)手段來研究蛋白質(zhì)組的一門新興科學(xué)，是在整 體水平上研究細胞內(nèi)蛋白質(zhì)組成及其活動規(guī)律的科學(xué)。32免疫共沉淀：免疫沉淀是抗原和抗體之間專一性地相互作用 而沉淀，從而保留下來，其是一種經(jīng)典的檢測蛋白質(zhì)相互作用的方法。其實驗過程比較簡單， 裂解細胞后，加入抗體，抗原被沉淀下來后洗滌，去除非特異性結(jié)合，再分析復(fù)合體?？贵w 可以是單克隆，也可以是多克隆。33 等電聚焦：是依據(jù)蛋白質(zhì)分子的凈電荷或等電點進行分離的技術(shù)。在等電聚焦過程中，電

9、場所采用的載體兩性電解質(zhì)含有脂肪 族多氨基多羧酸，可在電場中形成正極為酸性，負極為堿性的連續(xù) pH 梯度。蛋白質(zhì)分子在一個載體兩性電解質(zhì)形成的連續(xù)而穩(wěn)定的線性 pH 梯度中電泳，當?shù)鞍踪|(zhì)遷移到其等電點位 置時，凈電荷為零，在電場中不再移動。因此可將各種不同等電點性質(zhì)的蛋白質(zhì)分離開來。34Southern 雜交：是利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性 內(nèi)切酶消化的 DNA 片段，將膠上的 DNA 變性并在原位將單鏈 DNA 片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜 或其他固相支持物上，經(jīng)干烤或者紫外線照射固定，再與其互補的標記探針進行雜交，用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色，從而檢測特定 DNA 分子的技術(shù)。因為該技術(shù)由 Southe

10、rn 于 1975 年創(chuàng)建，所以稱為 Southern 印跡雜交技術(shù)。35Northern 雜交：指將 RNA 變性及電泳分離后，將其轉(zhuǎn) 移到固相支持物上，再與其互補的標記探針進行雜交，用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色，從 而檢測特定 RNA 分子的的量與大小。因該技術(shù)與 DNA 印跡技術(shù)相對應(yīng)，故被稱為 Northern 印跡雜交。36聚合酶鏈式反應(yīng) PCR：是體外酶促合成特異 DNA 片段的 一種方法，由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期，循環(huán)進行，使 目的 DNA 得以迅速擴增，具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。37基因芯片：指固定有寡核苷酸、基因組 DNA 或 cD

11、NA 等的生物芯片。利用 這類芯片與標記的生物樣品進行雜交，可對樣品的基因表達譜生物信息進行快速定性和 定量分析。38限制性片斷長度多態(tài)性：基因組中存在 著許多限制性核酸內(nèi)切酶位點，當用某種或幾種限制性核酸內(nèi)切酶對某一段基因消化時，就 會產(chǎn)生大小不同的特定片段，這些片段稱為限制性片段。在同種生物不同個體中出現(xiàn)的不同 長度限制性片段類型就稱為限制性片段長度多態(tài)性。如果由于缺失、重排或核苷酸置換使 DNA 分子中原有的某種限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點發(fā)生改變，使原有的酶切位點消失或 形成了新的酶切位點，于是用這種酶進行酶切后，生成的 DNA 片段的長度或數(shù)目隨之發(fā)生 改變。這種變化如與某種遺傳病的基

12、因有關(guān)，就可作為這種遺傳病的診斷指標。39單核苷酸多態(tài)性：指基因組水平上由于單個核苷酸 位置上存在轉(zhuǎn)換或顛換等變異所引起的 DNA 序列多態(tài)性。SNP 在人類基因組中廣泛存在， 是人類可遺傳變異中最常見的一種。40. 分子克?。涸诜肿铀缴咸峁┮环N純化和擴增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，用體外重組方法將它們插入克隆載體，形成重組克隆載體，通過轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)導(dǎo)的方式，引入適合的寄主體內(nèi)得到復(fù)制與擴增，然后再從篩選的寄主細胞內(nèi)分離提純所需的克隆載體，可以得到插入DNA的許多拷貝，從而獲得目的基因的擴增。41. 組成性基因表達： 無論表達水平高低，管家基因較少受環(huán)境因素影響，而是在個體各個生長階段

13、的大多數(shù)或幾乎全部組織中持續(xù)表達，或變化很小。區(qū)別于其他基因，這類基因表達被視為組成性基因表達。42. 管家基因：在生命的全過程都是必需的，在一個生物體的幾乎 所有細胞中持續(xù)表達的基因。43. 干擾RNA：含22個左右核苷酸的雙鏈RNA，參與RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物（RISC）的組成，這是一種多成分核酸酶，可使特異的mRNA降解，阻斷該mRNA進行翻譯。44. 等電點：在某一pH的溶液中，氨基酸解離成陽離子和陰離子的趨勢及程度相等，所帶凈電荷為零，呈電中性，此時溶液的pH稱為該氨基酸的等電點。45. 結(jié)構(gòu)域：結(jié)構(gòu)域是在二級結(jié)構(gòu)或超二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上形成三級結(jié)構(gòu)的局部折疊區(qū)，一條多肽鏈在這個域范圍內(nèi)

14、來回折疊，但相鄰的域常被一個或兩個多肽片段連結(jié)。通常由50-300個氨基酸殘基組成，其特點是在三維空間可以明顯區(qū)分和相對獨立，并且具有一定的生物功能如結(jié)合小分子。模體或基序（motif）是結(jié)構(gòu)域的亞單位，通常由23二級結(jié)構(gòu)單位組成，一般為螺旋、折疊和環(huán)（loop）。46. 蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)：指蛋白質(zhì)的多條多肽鏈之間相互作用所形成的更為復(fù)雜聚合物的一種結(jié)構(gòu)形式，主要描述蛋白質(zhì) 亞基空間排列以及亞基之間的連接和相互作用，不涉及亞基內(nèi)部結(jié)構(gòu)。47. 模體：表示具有特定功能的或作為一個獨立結(jié)構(gòu)域一部分的相鄰的二級結(jié)構(gòu)的聚合體，它一般被稱為功能模體或結(jié)構(gòu)模體，相當于超二級結(jié)構(gòu)。模體和結(jié)構(gòu)域一起組成了蛋白

15、質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)。二、單項選擇題1. 以下哪項屬于真核生物基因的順式作用元件 ： （C）A.內(nèi)含子 B. 外顯子 C.增強子 D.操縱子 E.轉(zhuǎn)座子2. 原核生物與真核生物基因組比較，以下哪項是原核生物的特點：（A）A.基因密度高 B.無操縱子結(jié)構(gòu)C.有多基因家族和假基因 D.多復(fù)制起點品 E.有大量重復(fù)序列3. 以下哪項是真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點？ （B）A只有一個復(fù)制起點 B. 有大量重復(fù)序列 C. 大部分是編碼序列D. 有操縱子結(jié)構(gòu) E.轉(zhuǎn)錄的 RNA 為多順反子4. 增強子的作用是 （B）A.增強 DNA 復(fù)制 B.增強基因轉(zhuǎn)錄 C.增強基因穩(wěn)定性 D.增強 RNA 的穩(wěn)定性E被 RNA 聚

16、合酶識別結(jié)合5. 以下哪項是原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點 （C）A.由 DNA 或 RNA 組成 B.有單鏈、雙鏈之分C.操縱子結(jié)構(gòu) D.與組蛋白結(jié)合 E. 基因重疊6. 以下哪項屬于啟動子元件 （C）A.內(nèi)含子 B. 外顯子 C.TATA 盒 D.終止子 E.CAAT 盒7. 下列關(guān)于啟動子的論述正確的是下列關(guān)于啟動子的描述正確的是：（C）A可以表達基因產(chǎn)物 B能專一地與阻遏蛋白結(jié)合C是 RNA 聚合酶的結(jié)合部位 D是 DNA 聚合酶的結(jié)合部位 E. 是結(jié)構(gòu)基因8. 不屬于真核基因表達調(diào)控的順式作用元件的是： （C）A啟動子 B增強子 C操縱子 D沉默子 E. 反應(yīng)元件9. 由 AATAAA 和

17、富含 GT 或 T 序列共同組成的順式作用元件是（D）A.啟動子 B. 增強子 C. 反應(yīng)元件 D. 加尾信號 E. 沉默子10. 有關(guān)真核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的反式作用因子描述不正確的是 （C）A. 包括基本和特異性轉(zhuǎn)錄因子B. 通常含有 DNA 結(jié)合結(jié)構(gòu)域C. 基因組上一段 DNA 序列D. 通常還有與其它蛋白結(jié)合的結(jié)構(gòu)域E. 含有轉(zhuǎn)錄活化域11. 下列哪項不屬于真核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的順式作用元件 （D）A. 啟動子 B. 增強子 C. TATA 盒 D. 一種 RNA E. 沉默子12. 有關(guān)基因表達描述錯誤的是（A）A. 其過程總是經(jīng)歷基因轉(zhuǎn)錄及翻譯的過程B. 某些基因表達經(jīng)歷基因轉(zhuǎn)錄及翻譯等過程

18、C. 某些基因表達產(chǎn)物是蛋白質(zhì)分子D. 某些基因表達產(chǎn)物不是蛋白質(zhì)分子E. 某些基因表達產(chǎn)物是 RNA 分子13. 關(guān)于管家基因敘述錯誤的是（C）A在生物個體的幾乎所有細胞中持續(xù)表達B在生物個體的幾乎各生長階段持續(xù)表達C在一個物種的幾乎所有個體中持續(xù)表達D在生物個體的某一生長階段持續(xù)表達E在生物個體全生命過程的幾乎所有細胞中表達14. 大多數(shù)基因表達調(diào)控的最基本環(huán)節(jié)是（C）A. 復(fù)制水平B. 轉(zhuǎn)錄水平C. 轉(zhuǎn)錄起始水平D. 轉(zhuǎn)錄后加工水平E. 翻譯水平15. 當培養(yǎng)基內(nèi)色氨酸濃度較大時，色氨酸操縱子處于（B）A. 誘導(dǎo)表達 B. 阻遏表達 C. 基本表達 D. 組成表達 E. 協(xié)調(diào)表達16.

19、順式作用元件是指 （E）A. 基因的 5 側(cè)翼序列B. 基因的 3 側(cè)翼序列C. 基因的 5、3 側(cè)翼序列D. 基因 5、3 側(cè)翼序列以外的序列E. 具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能的特異 DNA 序列17. 一個操縱子通常含有（B）A. 一個啟動序列和一個編碼基因B. 一個啟動序列和數(shù)個編碼基因C. 數(shù)個啟動序列和一個編碼基因D. 數(shù)個啟動序列和數(shù)個編碼基因E. 兩個啟動序列和數(shù)個編碼基因18. 反式作用因子是指（D）A. 具有激活功能的調(diào)節(jié)蛋白B. 具有抑制功能的調(diào)節(jié)蛋白C. 對自身基因具有表達調(diào)控的蛋白D. 對另一基因具有表達調(diào)控的蛋白E. 對另一基因具有功能的調(diào)節(jié)蛋白19. 阻遏蛋白結(jié)合乳糖操縱子的（

20、B）A、P 序列 B、O 序列 C、CAP 結(jié)合位點 D、I 基因 E、Z 基因20. 對大多數(shù)基因來說，CpG 序列甲基化（A）A、抑制基因轉(zhuǎn)錄B、促進基因轉(zhuǎn)錄C、與基因轉(zhuǎn)錄無關(guān)D、對基因轉(zhuǎn)錄影響不大E、以上都不是21. 別乳糖對乳糖操縱子的作用是 （C）A. 作為阻遏物結(jié)合于操縱基因B. 作為輔阻遏物結(jié)合于阻遏蛋白C. 使阻遏蛋白變構(gòu)而不能結(jié)合 DNAD. 抑制阻遏基因的轉(zhuǎn)錄E. 使 RNA 聚合酶變構(gòu)而活化22. 有關(guān)操縱子學(xué)說的正確論述是（B）A. 操縱子調(diào)控系統(tǒng)是真核生物基因調(diào)控的主要方式B. 操縱子調(diào)控系統(tǒng)是原核生物基因調(diào)控的主要方式C. 操縱子調(diào)控系統(tǒng)由結(jié)構(gòu)基因、啟動子和操縱基因

21、組成D. 誘導(dǎo)物與操縱基因結(jié)合啟動轉(zhuǎn)錄E. 誘導(dǎo)物與啟動子結(jié)合而啟動轉(zhuǎn)錄23. 屬于反式作用因子的是（E）A. 啟動子 B. 增強子 C. 終止子 D. RNA 聚合酶 E. 轉(zhuǎn)錄因子24. RNA 聚合酶結(jié)合于操縱子的（E）A. 結(jié)構(gòu)基因起始區(qū)B. 阻遏物基因C. 誘導(dǎo)物D. 阻遏物E. 啟動子25. 增強子是（D）A. 特異性高的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子B. 真核生物細胞內(nèi)的組蛋白C. 原核生物的啟動子在真核生物中的別稱D. 增強啟動子轉(zhuǎn)錄活性的 DNA 序列E. 在結(jié)構(gòu)基因的 5'-端的 DNA 序列26. 下列哪些不是操縱子的組成部分（A）A. 阻遏蛋白B. 啟動子C. 操縱基因D. 結(jié)構(gòu)

22、基因E. Pribnow 盒27. 轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物是指（C）A. RNA 聚合酶與 TATAAT 序列結(jié)合B. RNA 聚合酶與 TATA 序列結(jié)合C. 各種轉(zhuǎn)錄因子與 DNA 模板、RNA 聚合酶結(jié)合D. 因子與 RNA 聚合酶結(jié)合E. 阻遏物變構(gòu)后脫離操縱基因復(fù)合物28. 下述關(guān)于管家基因表達的描述最確切的是（B）A. 在生物個體的所有細胞中表達B. 在生物個體生命全過程幾乎所有細胞中持續(xù)表達C. 在生物個體生命全過程部分細胞中持續(xù)表達D. 特定環(huán)境下， 在生物個體生命全過程幾乎所有細胞中持續(xù)表達E. 特定環(huán)境下，在生物個體生命全過程部分細胞中持續(xù)表達。29. 紫外線照射引起 DNA 損

23、傷時，細菌 DNA 修復(fù)酶基因表達增強，這種現(xiàn)象被稱為（A）A. 誘導(dǎo)B. 阻遏C. 基本的基因表達D. 正反饋E. 負反饋30. 順式作用元件的最確切定義是（B）A. TATA 盒和 CCAAT 盒B. 具有調(diào)節(jié)功能的各種 DNA 序列C. 具有調(diào)節(jié)功能的 5 側(cè)翼序列D. 具有調(diào)節(jié)功能的 3 側(cè)翼序列E. 所有非編碼序列31. 反式作用因子是（A）A. 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白B. RNA 聚合酶C. DNA 聚合酶D. DNA 酶 IE. RNA 酶32. 構(gòu)成最簡單的啟動子的常見功能組件是（A）A. TATA 盒B. CAAT 盒C. GC 盒D. 上游調(diào)控序列（UAS）E. 以上都不是33. 關(guān)

24、于轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子敘述錯誤的是（A）A所有轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)均含有 DNA 結(jié)合域和轉(zhuǎn)錄激活域B有些轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)可能含有 DNA 結(jié)合域或轉(zhuǎn)錄激活域C通過 DNA-蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用發(fā)揮作用D轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)作用是 DNA 依賴的或 DNA 非依賴的E大多數(shù)轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)節(jié)作用屬反式調(diào)節(jié)34. DNA 聚合酶大片段不具有下面哪些功能：（C）A. 53聚合酶活性B. 35核酸外切酶活性C. 53核酸外切酶活性D. 補齊雙鏈 DNA 的 3末端E. 3末端標記35. 質(zhì)粒：（B）A 不能在細菌體內(nèi)進行自我復(fù)制B 是存在于細菌和某些真核生物染色體外的雙鏈環(huán)狀的 DNA 分子C 能容納大于 10kb 的外

25、源 DNA 片段D 有限制性內(nèi)切酶的多個切點E 能夠溶解細菌36. 大腸桿菌表達載體中不含有：（E）A 復(fù)制起始位點B 抗性基因C 克隆位點D 啟動子E 增強子37. 在進行藍-白篩選時，pUC 載體的 lac Z 基因位點插入外源 DNA，轉(zhuǎn)化細菌后插入了外源 DNA 的重組質(zhì)粒的：（B）A 細菌不能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)板上生長B 細菌在含有 X-gel 和誘導(dǎo)劑 IPTG 的瓊脂培養(yǎng)板上形成白色菌斑C 細菌在含有 X-gel 和誘導(dǎo)劑 IPTG 的瓊脂培養(yǎng)板上形成藍色菌斑D 細菌在含有 X-gel 和誘導(dǎo)劑 IPTG 的瓊脂培養(yǎng)板上形成透明的無色菌斑E 無菌落形成38. 校正和置換致病基因

26、是用正常的基因整合入細胞中的 （A）A基因組 B線粒體 C蛋白質(zhì) D細胞質(zhì) ERNA39. 基因轉(zhuǎn)移的生物學(xué)方法是以什么作為基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng) （B）A質(zhì)粒載體 B病毒載體 C脂質(zhì)體 D粘粒 E磷酸鈣40. 有關(guān)核酶的哪種表述是不正確的（E）A具有引導(dǎo)序列B具有錘頭狀結(jié)構(gòu)C切斷目的 mRNA 而自身沒有消耗D核酶兩端的引導(dǎo)序列與靶分子序列互補E使 mRNA 不能轉(zhuǎn)錄41. 將外源治療性基因?qū)氩溉閯游锛毎姆椒ú话ǎ―）A顯微注射法B電穿孔法CDEAE-葡聚糖法DMgCI2 沉淀法E病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移42. 紫外線照射使 DNA 分子堿基之間形成二聚體, 其中最常見的形式是 （D）A. C-C B

27、. C-T C. T-U D. T-T E. U-C43. E.coli 核苷酸切除修復(fù)過程中，UvrA 的作用是 （B）A. 識別損傷部位 B. 解旋雙鏈 C. 3末端內(nèi)切 D. 5末端內(nèi)切 E. DNA 合成44. 有關(guān) Sanger 測序描述正確的是（A）A. ddNTP 底物帶來了延伸終止 B. 利用高溫終止延伸反應(yīng)C. 以 RNA 鏈合成反應(yīng)為基礎(chǔ) D. 反應(yīng)底物為 dNTP 或 NTPE. 四個延伸終止反應(yīng)可合并進行45. 有關(guān) DNA 序列自動分析技術(shù)描述正確的是（C）A. 電泳分離步驟可省略 B. 四個延伸終止反應(yīng)必須獨立進行C. ddNTP 分別采用了四種不同熒光標記 D.

28、熒光染料標記在引物E. 不需要 DNA 聚合酶46. 有關(guān)核酸分子雜交描述正確的是（A）A. 探針是核酸 B. 不能用于基因表達定量研究 C. 探針不須與待測核酸互補D. 不能用于基因的結(jié)構(gòu)分析 E. 探針多是雙鏈核酸47. Southern 印跡雜交是（A）A. 分析 RNA 的技術(shù) B. 用于 DNA 的定性或定量研究C. 只能用于基因突變分析 D. 利用了 DNA 聚合酶E. 不需要電泳分離48. Northern 印跡雜交是（B）A. 用限制性核酸內(nèi)切酶消化待測核酸 B. 可鑒定特定 mRNA 的含量和大小C. 將探針轉(zhuǎn)移到固相支持物上 D. 分析 DNA 的技術(shù)E. 不需要電泳分離4

29、9. 有關(guān)核酸分子雜交描述錯誤的是（C）A. 可以在組織切片上直接進行 B. 主要用于核酸的檢測C. 也可用于蛋白質(zhì)的檢測 D. 斑點雜交無需電泳分離E. 可用于核酸拷貝數(shù)的檢測50. 有關(guān) PCR 描述正確的是（E）A. 需要 DNA 限制性核酸內(nèi)切酶 B. 退火是為了模板復(fù)性C. 退火的溫度越低越好 D. 延伸的溫度越高越好E. 引物濃度要適中51. PCR 的引物是（B）A. 一段 RNA 序列 B. 限定了 PCR 產(chǎn)物的長度C. 可以無限長 D. 3?端可以任意修飾E. 3?端可以互補重疊52. PCR 的產(chǎn)物是（D）A. 一段單鏈 DNA B. 與循環(huán)數(shù)呈 3 的指數(shù)倍增長C. 只

30、取決于模板 D. 產(chǎn)量與初始模板數(shù)有關(guān)E. 模板的完全拷貝53. Taq DNA 聚合酶是（E）A. 具有 3?5?聚合酶活性 B. 具有 3?5?外切酶活性C. 依賴 RNA 模板 D. 活性非依賴于 Mg2+E. 具有較高的熱穩(wěn)定性54. 以下哪項可以做 PCR 擴增中的模板: （B）A. dNTP B. DNA 片段 C. RNA 片段 D. 蛋白質(zhì) E. 肽核酸55. 有關(guān) PCR 引物描述錯誤的是 （C）A. 為一段核酸序列 B. 限定了產(chǎn)物的長度C.與反應(yīng)的特異性無關(guān) D.不能太長E. 引物之間不應(yīng)有互補56. 可用于分析基因轉(zhuǎn)錄水平變化的是 （B）A. Southern blot

31、 雜交 B. RT-PCR C.PCR-SSCP D. DNA 測序 E. Western 免疫印跡57. 以下不屬于蛋白質(zhì)組功能模式研究技術(shù)的是 （C）A.雙向凝膠電泳B.質(zhì)譜技術(shù)C.酵母雙雜交D.生物信息學(xué)E.定量蛋白質(zhì)組學(xué)58. 有關(guān)基因診斷描述錯誤的是（E）A. 是對基因結(jié)構(gòu)或表達異常的檢測B. 檢測對象包括 DNA 或 RNAC. 可以利用連鎖的遺傳標記進行間接診斷D. 靶基因包括病原微生物的特定基因E. 僅適合遺傳病的診斷59. 利用幾根毛發(fā)進行基因診斷主要體現(xiàn)了基因診斷的哪項特點（C）A高特異性 B. 應(yīng)用廣泛性 C. 高靈敏性 D. 早期診斷性 E. 唯一性60. 下列方法不屬

32、于基因診斷范疇的是 （A）A 光學(xué)顯微鏡下觀察到鐮刀型紅細胞推測患者可能罹患鐮狀細胞貧血病B 以古生物化石標本中殘液為模板進行多態(tài)性位點相關(guān)的 PCR 以判別生物種類C 用 RT-PCR 對乙肝病毒攜帶者進行病毒復(fù)制水平檢測D 用反向點雜交方法對高風(fēng)險家庭進行-珠蛋白生成障礙性貧血的產(chǎn)前診斷E 用基因表達芯片分析腫瘤相關(guān)基因表達變化61. 常用核酸分子雜交技術(shù)不包括（C）A. Southern 印跡雜交B. Northern 印跡雜交C. Western 印跡雜交D. 菌落原位雜交E反向斑點雜交62. 有關(guān)間接基因診斷描述正確的是（E）A. 突變基因的異常結(jié)構(gòu)檢測B.針對是基因的表達產(chǎn)物C.

33、比直接診斷效果好D. 完全可以替代直接診斷E. 利用連鎖遺傳標記進行連鎖分析63. 當點突變沒有帶來限制性酶切位點的改變時，不可以采用的診斷技術(shù)是（B）A. 測序 B. RFLP C. PCR-ASO D. AS-PCR E. 核酸分子雜交64. 導(dǎo)致特異性限制性內(nèi)切酶位點改變的基因點突變最常采用的基因診斷方法是（D）APCR B. 序列分析 C. PCR-SSCP 分析 D. 限制性酶譜分析 E. 核酸雜交65. 使用了限制性核酸內(nèi)切酶的技術(shù)是（B）A. 寡核苷酸探針雜交 B. RFLP C. RT-PCR D. DNA 測序 E. Western blot66. 有關(guān)基因診斷的描述正確的是

34、（D）A. 僅限于對基因突變的檢測B. 不可以利用連鎖的遺傳標記進行C. 致病基因未知時無法進行D. 可以檢測基因的表達產(chǎn)物E. 不適應(yīng)于病毒性疾病的診斷三、簡答題1列舉幾種真核基因的順式作用元件。答：（1）啟動子：Hogness盒，CAAT 盒；（2）增強子：SV40 病毒中，位于早期啟動子 5上游約 200 bp，內(nèi)含 2 個 72 bp 的重復(fù)序 列，其核心序列為 GGTGTGGAAAG；（3）沉默子：SV40 中的 AGGTTTTTT 序列為終止轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件。2簡述基因克隆的主要過程。答：制備目的基因和相關(guān)載體；將目的基因和有關(guān)載體進行連接；將重組的 DNA 導(dǎo)入受體細胞；DNA 重組

35、體的篩選和鑒定；DNA 重組體的擴增、表達和其他研究。3簡述乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)。答：編碼 -半乳糖苷酶、半乳糖苷通透酶和硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙?；傅幕?Z、Y、A 稱為 結(jié)構(gòu)基因，結(jié)構(gòu)基因加上調(diào)控元件：啟動子和操縱基因，即構(gòu)成乳糖操縱子。4. 簡述 RNA 干擾的作用機制。答：RNA干擾包括起始階段和效應(yīng)階段。在起始階段，加入的小分子RNA被切割為 21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段。證據(jù)表明；一個稱為Dicer的酶，是RNase III家族中特 異識別雙鏈RNA的一員，它能以一種ATP依賴的方式逐步切割由外源導(dǎo)入或者由轉(zhuǎn)基因， 病毒感染等各種方式引入的雙鏈RNA，切割將RNA降解為 19-

36、21bp的雙鏈RNAs(siRNAs)，每個片段的 3端都有 2 個堿基突出。在RNAi效應(yīng)階段，siRNA雙鏈結(jié)合一個核酶復(fù)合物從而形成所謂RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物（RNA-induced silencing complex, RISC）。激活 RISC需要一個ATP依賴的將小分子RNA解雙鏈的過程。激活的RISC通過堿基配對定位到同 源mRNA轉(zhuǎn)錄本上，并在距離siRNA3端 12 個堿基的位置切割mRNA。5. 上游啟動子元件是什么答：TATA 合上游的一些特定的 DNA 序列， 反式作用因子可與這些元件結(jié)合，調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的效率。6. GT-AG 法則是什么答：真核生物基因的內(nèi)含子 5端大多

37、數(shù)是以 GT 開始， 3 端大多數(shù)是以 AG 結(jié)束，構(gòu)成 RNA 剪接的識別信號。7. 藍-白篩選的原理。答：有些載體含有-半乳糖苷酶基因（lacZ）的調(diào)控序列和氨基端 145 個氨基酸的編碼序列，這個編碼區(qū)中插入了一個多克隆位點，這種載體適用于可編碼-半乳糖苷酶羧基端部 分序列的宿主細胞。宿主和載體編碼的-半乳糖苷酶片段各自均無酶活性，但它們可以互 補形成具有酶學(xué)活性的蛋白質(zhì)，使 X-gal 轉(zhuǎn)化成藍色的代謝產(chǎn)物，出現(xiàn)藍色的菌落（菌斑）。 如果在多克隆位點上插入外源 DNA 片段，將使載體的 lac Z 基因滅活，不能互補形成有活 性的 -半乳糖苷酶，結(jié)果菌落（菌斑）呈現(xiàn)白色。由于這種顏色標

38、志，重組克隆和非重組 克隆的區(qū)分一目了然，這種篩選方法稱為“藍-白篩選”。8. 真核生物基因組有哪些特點答：每一種真核生物都有一定的染色體數(shù)目；遠大于原核基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜,基因數(shù)龐大；真核生物基因轉(zhuǎn)錄為單順反子；有大量重復(fù)序列;真核基因為斷裂基因;非編碼序列多于編碼序列; 功能相關(guān)基因構(gòu)成各種基因家族。9.PCR 反應(yīng)條件的優(yōu)化應(yīng)注意哪些環(huán)節(jié)？答：變性溫度和時間： 92-95，富含G和C的序列，可適當提高，但過高或時間過長都會導(dǎo)致酶活性損失；退火溫度與時間： 引物中G、 C含量高、 長度長并與模板完全配對時，應(yīng)提高溫度。溫度越高，產(chǎn)物特異性越高，通常37-55、 1-2分鐘；延伸溫度和時間：

39、72，接近Taq酶的最適75；延伸時間過長會導(dǎo)致產(chǎn)物非特異性增加。但對低濃度的目的序列，則可適當增加時間；循環(huán)次數(shù)： 循環(huán)過多，非特異性產(chǎn)物大量增加10.用于基因表達定量研究的方法有哪些？答：蛋白表達水平的研究：定量檢測分析：western biltting、ELISA、HPLC蛋白質(zhì)功能分析：蛋白質(zhì)亞細胞定位分析：熒光免疫技術(shù)；蛋白質(zhì)相互作用研究：酵母雙雜交、免疫共沉淀、熒光共振能量轉(zhuǎn)移；酶活性檢測：ELISA、HPLC。mRNA表達水平檢測：半定量RT-PCR，Northern blot，實時熒光定量PCR。11.同一生物不同的組織細胞的基因組成和表達是否相同？為什么？答：基因表達調(diào)控具有

40、時間和空間特異性，在多細胞生物，個體發(fā)育的各個階段，基因表達嚴格按細胞分化、個體發(fā)育的順序開啟或關(guān)閉；在同一生長發(fā)育階段，基因表達在不同組織細胞空間順序出現(xiàn)，基因表達不相同。12.與原核基因結(jié)構(gòu)相比，真核基因結(jié)構(gòu)有何特點？答：真核生物與原核生物基因組特點的異同：真核生物基因分布在多個染色體上，而原核生物只一個染色體；真核生物基因組遠大于原核生物基因組；真核生物細胞中DNA與組蛋白和大量非組蛋白結(jié)合，并有核膜將其與細胞質(zhì)隔離，結(jié)果真核細胞的轉(zhuǎn)錄和翻譯在時間上和空間上都是分離的，而原核細胞的基因轉(zhuǎn)錄和翻譯是同步的；真核生物的基因是不連續(xù)的，中間存在不被翻譯的內(nèi)含子序列，而原核生物幾乎每一個基因都是

41、完整的連續(xù)的DNA片段；真核生物基因組中非編碼序列遠多于編碼序列；真核生物基因組存在重復(fù)序列，重復(fù)次數(shù)從幾次到幾百萬次不等；真核生物基因組的復(fù)制起點多，缺少明顯的操縱子結(jié)構(gòu)，而原核生物基因組一般是一個復(fù)制子；真核生物與原核基因組中存在轉(zhuǎn)座因子。13.什么叫反式作用因子？與順式作用元件結(jié)合部位的結(jié)構(gòu)形式有哪些？答：是指能直接或間接的識別或結(jié)合在各類順式作用元件核心序列上參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。大多數(shù)真核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子由某一基因表達后，可通過另一基因的特異的順式作用元件相互作用，從而激活另一基因的轉(zhuǎn)錄，這種調(diào)節(jié)蛋白稱反式作用因子。其DNA結(jié)構(gòu)域的常見形式有：鋅指結(jié)構(gòu)、堿性亮氨酸拉鏈、堿性螺旋

42、-環(huán)-螺旋。14.什么叫順式作用元件？常見的順式作用元件有哪些？答：基因中能影響基因表達，但不編碼 RNA 和蛋白質(zhì)的 DNA 序列。順式作用元件主要包括啟動子、增強子、負調(diào)控元件等。15.列出5中常用的分子生物學(xué)技術(shù)并簡述各自原理？答：PCR，Sanger雙脫氧鏈終止法，等電聚焦，Southern 雜交，Northern 雜交。16.DNA芯片的原理？答：是以斑點雜交為基礎(chǔ)建立的高通量檢測基因表達的一種方法，它是通過某些特殊的微加工技術(shù)將大量已知序列的寡核苷酸或cDNA探針有序的固定于固相支持物表面作為探針，然后與標記的待測核酸進行雜交，通過對雜交信號的檢測分析，獲得待測核酸的各種序列及表達

43、信息。17.PCR的基本原理及反應(yīng)條件？答：基本原理是以待擴增的DNA分子為模板，以一對人工合成的、分別與模板的5端及3端互補的單鏈寡核苷酸作為引物，在耐熱DNA聚合酶的催化下，按照半保留復(fù)制的原則合成兩個子代DNA；接著以子代DNA為模板，再次進行合成，如此反復(fù)循環(huán)數(shù)十次，最終將原是模板放大數(shù)百萬倍。18.Sanger雙脫氧鏈終止法的原理?答：DNA合成是在DNA聚合酶的催化下，以單鏈或雙鏈DNA模板，以四種2-脫氧核苷三磷酸(dNTP)為底物，在引物或新和成子鏈的3-OH末端依次連接上新的脫氧核苷一磷酸，使新生鏈不斷延長。DNA分子中核苷酸是通過3,5磷酸二酯鍵相互連接。如果在底物中加入2

44、,3-雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)。那么當ddNTP摻入到新生鏈中時，由于ddNTP沒有3-OH，不能與其他dNTP上的磷酸集團形成磷酸二酯鍵，DNA新鏈的合成就會終止，此即為雙脫氧末端終止法測序的基本原理。四、論述題1 雙脫氧末端終止法測序的基本步驟包括哪些？答：1)分離待測核酸模板，模板可以是DNA，也可以是RNA，可以是雙鏈，也可以是單鏈。2)在4只試管中加入適當?shù)囊?、模板?種dNTP(包括放射性標記dATP，例如?32 PdATP和DNA聚合酶（如以RNA為模板，則用反轉(zhuǎn)錄酶），再在上述4只管中分別加入一種一定濃度的ddNTP(雙脫氧核苷酸)。3)與單鏈模板（如以雙鏈作模板，要作

45、變性處理)結(jié)合的引物，在DNA聚合酶作用下從5端向3端進行延伸反應(yīng)，32P隨著引物延長摻入到新合成鏈中。當ddNTP摻入時，由于它在3位置沒有羥基，故不與下一個dNTP結(jié)合，從而使鏈延伸終止。ddNTP在不同位置摻入，因而產(chǎn)生一系列不同長度的新的DNA鏈。4)用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳同時分離4只反應(yīng)管中的反應(yīng)產(chǎn)物，由于每一反應(yīng)管中只加一種ddNTP(如ddATP)，則該管中各種長度的DNA都終止于該種堿基(如A)處。所以凝膠電泳中該泳道不同帶的DNA 3 末端都為同一種雙脫氧堿基。5)放射自顯影。根據(jù)四泳道的編號和 每個泳道中DNA帶的位置直接從自顯影圖譜上讀出與模板鏈互補的新鏈序列。2 真核 mRNA 選擇性剪接的方式有那些？舉例說明其基本生物學(xué)意義是什么？答：（1）選擇性