在體小腸吸收實驗

1、專業(yè)：別f尹丿占實驗報告姓名：學(xué)號：日期：地點：課程名稱： 指導(dǎo)老師： 成績： 實驗名稱：實驗類型：同組學(xué)生姓名一、實驗?zāi)康暮鸵螅ū靥睿?三、主要儀器設(shè)備（必填） 五、實驗數(shù)據(jù)記錄和處理七、討論、心得二、實驗內(nèi)容和原理（必填） 四、操作方法和實驗步驟六、實驗結(jié)果與分析（必填）一、實驗?zāi)康?掌握大鼠在體腸管泵循環(huán)法研究吸收的試驗方法。ka）和吸收半衰期ti/2的方法。2、掌握藥物腸管吸收的機理和計算吸收速度常數(shù)（二、實驗原理1、研究藥物消化管吸收試驗方法：體外試驗法、在體試驗法和體內(nèi)試驗法。2、 消化管吸收藥物主要方式是被動擴散。這種形式的吸收不消耗能量，其透過速度與膜兩側(cè)的濃度差成 正比，可

2、用下式表示：-dQ/dt=DKS（C-Cb）/h （ 1）/dt=PSC/h=k'C（ 2）dQ/dt ：分子型藥物的透過速度 D:藥物在膜內(nèi)的擴散系數(shù)k:藥物在膜/水溶液中的分散系數(shù)C:消化管內(nèi)藥物濃度Cb:血液中的藥物濃度h:膜的厚度式（2）說明藥物透過速度屬于表觀一級速度過程：以消化液中藥物量的變化率dx/dt表示透過速度,則：-dX/dt=KaX lnX=lnXO-KatlnX對取樣時間t作圖，可得一直線，從直線的斜率可求得吸收速度常數(shù)ka，其吸收半衰期t1/2為：t1/2= 0.693/Ka小腸在吸收過程中，不僅吸收藥物，也吸收水分，導(dǎo)致供試液體積減少，故不能用直接測定藥物濃

3、度 的方法計算剩余的藥量。酚紅不被小腸吸收，因此向供試液中加入定量的酚紅，在一定間隔時間測定酚紅 的濃度，就可以計算出不同時間供試液的體積，再根據(jù)測定的藥物濃度，就可以得出不同時間小腸中剩余 的藥量或被吸收的藥量。三、實驗儀器及試劑儀器：蠕動泵試劑：供試液（SD濃度：20ug/ml、酚紅濃度：20ug/ml ）、酚紅液（酚紅濃度：20ug/ml ）、20%烏拉坦、生理鹽水、0.1%NaNO2溶液、1mol/L鹽酸、0.2mol/L NaOH、0.5%氨基磺酸銨（NH2SQNH ）溶液、0.1%萘乙.胺溶液四、實驗步驟1循環(huán)試驗的操作(1) 恒溫水浴調(diào)節(jié)：將水浴溫度調(diào)節(jié)為37 ± 0.

4、5 C。(2) 供試液的準(zhǔn)備：量取 75-80ml供試液加入循環(huán)裝置的燒瓶中，置恒溫水浴中預(yù)熱至37± 0.5 C。(3) 生理鹽水的準(zhǔn)備：取生理鹽水適量，預(yù)熱至37 C備用。(4) 蠕動泵流速的調(diào)節(jié)：調(diào)節(jié)流速為5ml/min和2.5ml/min 。(5) 大鼠麻醉：取大鼠一只稱重，按1.1g/kg體重腹腔注射烏拉坦(濃度為20%麻醉，并固定于固定臺上。(6) 小腸兩端插管；沿大鼠腹部中線打開腹腔(約3cm),在12指腸上部和回腸下部各切一小口，插入 直徑為0.3cm的玻璃管，并用線扎緊。(7) 腸管洗滌：用注射器將37 C的生理鹽水緩緩注入腸管，洗去腸管內(nèi)容物至凈。(8) 作成回路

5、：將腸管兩端的玻璃管按圖所示與膠管連接，作成回路，開動蠕動泵，其流速為5ml/min。(9) 取樣：以5ml/min流速循環(huán)10min后，將流速調(diào)節(jié)為 2.5ml/min時，立即自供試液燒瓶中取樣兩份(1ml和0.5ml各一份)，分別作為 SD和酚紅零時間樣品，另向燒瓶中補加酚紅液2ml，其后每隔15min亦按同法取樣及補加酚紅液，共取樣9次，停止循環(huán)。2、SD的測定取樣品1ml置10ml帶塞試管中加入1mol/LHCI 5ml,搖勻，力口 0.1% NaNO1ml,搖勻，放置3min加0.5% NHSONH1ml，搖勻，放置 3min 再加0.1%萘乙二胺2ml，搖勻，放置 20min。在5

6、50nm的波長處 測定吸收度。比色空白液：取酚紅液1ml代替樣品，其余操作與樣品處理一致。3、酚紅的測定取樣品0.5ml置10ml帶塞試管中，加 0.2mol/L NaOH 5ml，搖勻，在555nm的波長處測定吸收度。比色空白液：0.2mol/LNaOH五、實驗數(shù)據(jù)記錄和處理1、標(biāo)曲回歸方程：2SD : y=0.0210x-0.0332(R=0.9981)2酚紅：y=0.0153x+0.0082(R =0.9973)2、SD和酚紅樣品濃度計算計算結(jié)果如下表：表1大鼠在體小腸吸收量的計算取樣時 間(h)SD酚紅供試液體積ml剩余藥量X(ug)lnXabs濃度ug/mlabs濃度ug/ml循環(huán)前

7、20207515007.31300.38720.0100.32620.77172.221444.9927.2760.250.38019.6760.35422.60166.761343.5797.2030.50.36619.0100.35922.92866.071315.5557.1820.750.35418.4380.35122.40567.871339.3597.20010.34417.9620.35522.66767.371325.7057.1901.250.33317.4380.36823.51665.191279.3667.1541.50.32216.9140.36823.51665.

8、391274.7777.1511.750.31116.3900.37223.77864.871257.3727.13720.30015.8670.36223.12466.891280.0437.15574 ?05.-¥-0.052axr7.23S87-+-T7.230壬 7.260Li寶 /.24U禺 7.22072007.1530/.lbu7.14000.52InXt作圖，得一條直線，作圖如下:圖1大鼠在體小腸吸收后剩余藥量對時間的曲線求得 Ka=0.0528，11/2=13.125 h3、每小時吸收率計算 每小時吸收率（% =（零時間剩余藥量-1h的剩余藥量）/零時間剩余藥量 * 100% =8.26%六、實驗結(jié)果及分析實驗結(jié)果詳見實驗數(shù)據(jù)記錄七、討論心得思考題：1、在體吸收實驗法的特點是什么？在體試驗法不切斷血管和神經(jīng)，藥物透過上皮細(xì)胞后即被血液運走，能避免胃內(nèi)容物排出及消化管固有運動等的生理影響，對溶解藥物是一種較好的研究吸收的試驗方法。但本法只限于溶解狀態(tài)藥物，并有 可能將其它因素引起的藥物濃度的變化誤作為吸收。2、影響實驗結(jié)果的主要因素有哪些？主要因素有：大鼠手術(shù)是否順利，小腸內(nèi)容物是否洗凈，所取得藥物量是否準(zhǔn)確，蠕動泵的轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié) 等。P.3、供試液中為什么要加入酚紅？小腸在吸收過程中，不僅吸收藥物，也吸收水分，導(dǎo)致供試液體積減少，