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文檔簡介

1、l 吸光光度法(吸光光度法(Absorption Photometry)是一)是一種基于物質(zhì)對光的選擇性吸收而建立起來的一種種基于物質(zhì)對光的選擇性吸收而建立起來的一種分析方法。包括可見吸光光度法、紫外分析方法。包括可見吸光光度法、紫外-可見吸光可見吸光光度法和紅外光譜法等。光度法和紅外光譜法等。 吸光光度法同滴定分析吸光光度法同滴定分析法、重量分析法相比,有以下一些特點(diǎn):法、重量分析法相比,有以下一些特點(diǎn): l (一一)靈敏度高靈敏度高 吸光光度法測定物質(zhì)的濃度下吸光光度法測定物質(zhì)的濃度下限限(最低濃度最低濃度)一般可達(dá)一般可達(dá)1-10-3%的微量組分。對固的微量組分。對固體試樣一般可測到體試

2、樣一般可測到10-4%。如果對被測組分事先加。如果對被測組分事先加以富集,靈敏度還可以提高以富集,靈敏度還可以提高1-2個數(shù)量級。個數(shù)量級。 l (二二)準(zhǔn)確度較高準(zhǔn)確度較高 一般吸光光度法的相對誤一般吸光光度法的相對誤差為差為2-5%,其準(zhǔn)確度雖不如滴定分析法及重量法,其準(zhǔn)確度雖不如滴定分析法及重量法,但對微量成分來說,還是比較滿意的,因?yàn)樵谶@種但對微量成分來說,還是比較滿意的,因?yàn)樵谶@種情況下,滴定分析法和重量法也不夠準(zhǔn)確了,甚至情況下,滴定分析法和重量法也不夠準(zhǔn)確了,甚至無法進(jìn)行測定。無法進(jìn)行測定。l (三三)操作簡便,測定速度快操作簡便,測定速度快l (四四)應(yīng)用廣泛應(yīng)用廣泛 幾乎所有

3、的無機(jī)離子和有機(jī)化幾乎所有的無機(jī)離子和有機(jī)化合物都可直接或間接地用吸光光度法進(jìn)行測定。合物都可直接或間接地用吸光光度法進(jìn)行測定。一、光的基本性質(zhì)一、光的基本性質(zhì)l 光是電磁波。光是電磁波。 其波長、頻率與速度之間的關(guān)其波長、頻率與速度之間的關(guān)系為:系為:E=h =hc/ h為普朗克常數(shù),其值為為普朗克常數(shù),其值為6.6310-34Js二、物質(zhì)對光的選擇性吸收二、物質(zhì)對光的選擇性吸收l 如果我們把具有不同顏色的各種物體放置在如果我們把具有不同顏色的各種物體放置在黑暗處,則什么顏色也看不到。可見物質(zhì)呈現(xiàn)的黑暗處,則什么顏色也看不到??梢娢镔|(zhì)呈現(xiàn)的顏色與光有著密切的關(guān)系,一種物質(zhì)呈現(xiàn)何種顏顏色與光有

4、著密切的關(guān)系,一種物質(zhì)呈現(xiàn)何種顏色,是與光的組成和物質(zhì)本身的結(jié)構(gòu)有關(guān)的。色,是與光的組成和物質(zhì)本身的結(jié)構(gòu)有關(guān)的。 l(一)(一) 物質(zhì)對光產(chǎn)生選擇性吸收和原因物質(zhì)對光產(chǎn)生選擇性吸收和原因l(二)(二) 物質(zhì)的顏色與吸收光的關(guān)系物質(zhì)的顏色與吸收光的關(guān)系l 從光本身來說、有些波長的光線,作用于眼睛從光本身來說、有些波長的光線,作用于眼睛引起了顏色的感覺,我們把人眼所能看見有顏色的引起了顏色的感覺,我們把人眼所能看見有顏色的光叫做可見光,其波長范圍大約在光叫做可見光,其波長范圍大約在400-760nm之間。之間。實(shí)驗(yàn)證明:白光實(shí)驗(yàn)證明:白光(日光、白熾電燈光、日光燈光等日光、白熾電燈光、日光燈光等)

5、是由各種不同顏色的光按一定的強(qiáng)度比例混合而成是由各種不同顏色的光按一定的強(qiáng)度比例混合而成的。如果讓一束白光通過三棱鏡,就分解為紅、橙、的。如果讓一束白光通過三棱鏡,就分解為紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫七種顏色的光,這種現(xiàn)象稱為黃、綠、青、藍(lán)、紫七種顏色的光,這種現(xiàn)象稱為光的色散。每種顏色的光具有一定的波長范圍。我光的色散。每種顏色的光具有一定的波長范圍。我們把白光叫做復(fù)合光;把只具有一種顏色的光,叫們把白光叫做復(fù)合光;把只具有一種顏色的光,叫做單色光。做單色光。l 實(shí)驗(yàn)還證明,不僅七種單色光可以混合成白光,實(shí)驗(yàn)還證明,不僅七種單色光可以混合成白光,如果把適當(dāng)顏色的兩種單色光按一定的強(qiáng)度比例混如果

6、把適當(dāng)顏色的兩種單色光按一定的強(qiáng)度比例混合,也可以成為白光。這兩種單色光就叫做互補(bǔ)色。合,也可以成為白光。這兩種單色光就叫做互補(bǔ)色。如綠光和紫光互補(bǔ),藍(lán)光和黃光互補(bǔ),等等。如綠光和紫光互補(bǔ),藍(lán)光和黃光互補(bǔ),等等。l 對固體物質(zhì)來說,當(dāng)白光照射到物質(zhì)上時,物對固體物質(zhì)來說,當(dāng)白光照射到物質(zhì)上時,物質(zhì)對于不同波長的光線吸收、透過、反射、折射的質(zhì)對于不同波長的光線吸收、透過、反射、折射的程度不同而使物質(zhì)呈現(xiàn)出不同的顏色。如果物質(zhì)對程度不同而使物質(zhì)呈現(xiàn)出不同的顏色。如果物質(zhì)對各種波長的光完全吸收,則呈現(xiàn)黑色;如果完全反各種波長的光完全吸收,則呈現(xiàn)黑色;如果完全反射,則呈現(xiàn)白色;如果對各種波長的光吸收程

7、度差射,則呈現(xiàn)白色;如果對各種波長的光吸收程度差不多,則呈現(xiàn)灰色;如果物質(zhì)選擇性地吸收某些波不多,則呈現(xiàn)灰色;如果物質(zhì)選擇性地吸收某些波長的光,那么,這種物質(zhì)的顏色就由它所反射或透長的光,那么,這種物質(zhì)的顏色就由它所反射或透過光的顏色來決定。過光的顏色來決定。 l 對溶液來說,溶液呈現(xiàn)不同的顏色,是由于溶液對溶液來說,溶液呈現(xiàn)不同的顏色,是由于溶液中的質(zhì)點(diǎn)中的質(zhì)點(diǎn)(分子或離子分子或離子)選擇性的吸收某種顏色的光所選擇性的吸收某種顏色的光所引起的。如果各種顏色的光透過程度相同,這種物質(zhì)引起的。如果各種顏色的光透過程度相同,這種物質(zhì)就是無色透明的。如果只讓一部分波長的光透過,其就是無色透明的。如果

8、只讓一部分波長的光透過,其他波長的光被吸收,則溶液就呈現(xiàn)出透過光的顏色,他波長的光被吸收,則溶液就呈現(xiàn)出透過光的顏色,也就是溶液呈現(xiàn)的是與它吸收的光成互補(bǔ)色的顏色。也就是溶液呈現(xiàn)的是與它吸收的光成互補(bǔ)色的顏色。例如硫酸銅溶液因吸收了白光中的黃色光而呈藍(lán)色;例如硫酸銅溶液因吸收了白光中的黃色光而呈藍(lán)色;高錳酸鉀溶液因吸收了白光中的綠色光而呈現(xiàn)紫色。高錳酸鉀溶液因吸收了白光中的綠色光而呈現(xiàn)紫色。其實(shí),任何一種溶液對不同波長的光的吸收程度是其實(shí),任何一種溶液對不同波長的光的吸收程度是不相等的。如果將某種波長的單色光依次通過一定濃不相等的。如果將某種波長的單色光依次通過一定濃度的某一溶液,測量該溶液對

9、各種單色光的吸收程度,度的某一溶液,測量該溶液對各種單色光的吸收程度,以波長為縱坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo)可以得到一條曲以波長為縱坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo)可以得到一條曲線,叫做吸收光譜曲線或光吸收曲線。它清楚地描述線,叫做吸收光譜曲線或光吸收曲線。它清楚地描述了溶液對不同波長的光的吸收情況。了溶液對不同波長的光的吸收情況。l(三)吸收曲線三)吸收曲線l 以波長為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)作圖,即以波長為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)作圖,即可得到一條吸光度隨波長變化的曲線,稱之為吸收可得到一條吸光度隨波長變化的曲線,稱之為吸收曲線或吸收光譜。圖曲線或吸收光譜。圖102是四個不同濃度的是四個不同濃度的KMnO4溶

10、液的光吸收曲線。從圖溶液的光吸收曲線。從圖102可以看出,可以看出,在可見光范圍內(nèi),在可見光范圍內(nèi),KMnO4溶液對波長溶液對波長525nm附近附近的綠色光有最大吸收,而對紫色和紅色光則吸收很的綠色光有最大吸收,而對紫色和紅色光則吸收很少。光吸收程度最大處的波長,稱為最大吸收波長,少。光吸收程度最大處的波長,稱為最大吸收波長,常用常用最大最大或或max表示,任何可見光區(qū)內(nèi)、溶液的顏色主表示,任何可見光區(qū)內(nèi)、溶液的顏色主要是由這個數(shù)值決定的。在正常情況下,選用不同要是由這個數(shù)值決定的。在正常情況下,選用不同濃度的某種溶液,最大吸收波長也是固定不變的,濃度的某種溶液,最大吸收波長也是固定不變的,說

11、明光的吸收與溶液中物質(zhì)的結(jié)構(gòu)有關(guān)。說明光的吸收與溶液中物質(zhì)的結(jié)構(gòu)有關(guān)。 圖圖10-2 KMnO4溶液的吸收曲線溶液的吸收曲線l(cKMnO4:l abcd) l一、朗伯一、朗伯-比耳定律比耳定律l(一)朗伯(一)朗伯-比耳定律的推導(dǎo)比耳定律的推導(dǎo)l 朗伯朗伯(Lambert)和比耳和比耳(beer)分別于分別于1760年和年和1852年研究了光的吸收與有色溶液按層的厚度及溶年研究了光的吸收與有色溶液按層的厚度及溶液濃度的定量關(guān)系,奠定了分光光度分析法的理論液濃度的定量關(guān)系,奠定了分光光度分析法的理論基礎(chǔ)。當(dāng)一束平行單色光照射到任何均勻、非散射基礎(chǔ)。當(dāng)一束平行單色光照射到任何均勻、非散射的介質(zhì)(

12、固體、液體或氣體),例如溶液時,光的的介質(zhì)(固體、液體或氣體),例如溶液時,光的一部分被介質(zhì)吸收,一部分透過溶液、一部分被器一部分被介質(zhì)吸收,一部分透過溶液、一部分被器皿的表面反射。如果入射光的強(qiáng)度為皿的表面反射。如果入射光的強(qiáng)度為I0,吸收光的強(qiáng),吸收光的強(qiáng)度為度為Ia,透過光的強(qiáng)度為,透過光的強(qiáng)度為It,反射光的強(qiáng)度為反射光的強(qiáng)度為Ir則它們則它們之間的關(guān)系為之間的關(guān)系為l I0Ir+Ia+It l 在分光光度測定中,盛溶液的比色皿都是采用相在分光光度測定中,盛溶液的比色皿都是采用相同質(zhì)且的光學(xué)玻璃制成的,反射光的強(qiáng)度基本上是不同質(zhì)且的光學(xué)玻璃制成的,反射光的強(qiáng)度基本上是不變的變的(一般約

13、為入射光強(qiáng)度的一般約為入射光強(qiáng)度的4)其影響可以互相抵其影響可以互相抵消,于是可以簡化為消,于是可以簡化為l I0It+Ia l 純水對于可見光的吸收極微,故有色液對光的吸純水對于可見光的吸收極微,故有色液對光的吸收完全是由溶液中的有色質(zhì)點(diǎn)造成的。收完全是由溶液中的有色質(zhì)點(diǎn)造成的。l 當(dāng)入射光的強(qiáng)度當(dāng)入射光的強(qiáng)度I0一定時,如果一定時,如果Ia越大,越大,It就越小,就越小,即透過光的強(qiáng)度越小,表明有色溶液對光的吸收程度即透過光的強(qiáng)度越小,表明有色溶液對光的吸收程度就越大。就越大。 l 實(shí)踐證明,有色溶液對光的吸收程度,與該溶液實(shí)踐證明,有色溶液對光的吸收程度,與該溶液的濃度、液層的厚度以及入

14、射光的強(qiáng)度等因素有關(guān)。的濃度、液層的厚度以及入射光的強(qiáng)度等因素有關(guān)。如果保持入射光的強(qiáng)度不變,則光吸收程度與溶液的如果保持入射光的強(qiáng)度不變,則光吸收程度與溶液的濃度和液層的厚度有關(guān)。濃度和液層的厚度有關(guān)。 l 1.朗伯定律朗伯定律l -dI=k1Idb logI0/I=K1bl2.比耳定律比耳定律 -dI=k2Idc logI0/I=K2cl3.朗伯朗伯-比耳定律比耳定律l 如果同時考慮溶液的濃度和液層的厚度都變化,如果同時考慮溶液的濃度和液層的厚度都變化,都影響物質(zhì)對光的吸收,則上述兩個定律可合并為朗都影響物質(zhì)對光的吸收,則上述兩個定律可合并為朗伯伯-比耳定律,即得到:比耳定律,即得到:lo

15、gI0/I=Kbc 令:令:A=logI0/I 則:則: A=KbCl 此式為光吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式。此式為光吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式。l 式中式中A稱為吸光度,稱為吸光度, K是比例常數(shù),與入射光的是比例常數(shù),與入射光的波長、物質(zhì)的性質(zhì)和溶液的溫度等因素有關(guān)。波長、物質(zhì)的性質(zhì)和溶液的溫度等因素有關(guān)。l I/I0稱為透光率,用稱為透光率,用T表示。它與表示。它與A的關(guān)系為:的關(guān)系為:l A=lg1/Tl(二)吸收系數(shù)和桑德爾靈敏度(二)吸收系數(shù)和桑德爾靈敏度l 1.吸收系數(shù)吸收系數(shù)l (1) 吸收系數(shù)吸收系數(shù)al 當(dāng)當(dāng)c的單位為的單位為g/L,b的單位為的單位為cm時時,K用用a表示,表示,稱為吸

16、收系數(shù),其單位為稱為吸收系數(shù),其單位為L/gcm,這時朗伯,這時朗伯-比耳比耳定律變?yōu)椋憾勺優(yōu)椋?Aabcl (2) 摩爾吸收系數(shù)摩爾吸收系數(shù) l 當(dāng)式中濃度當(dāng)式中濃度c的單位為的單位為mol/L,液層厚度的單位,液層厚度的單位為為cm時,則用另一符號時,則用另一符號表表示,稱為摩爾吸收系數(shù),示,稱為摩爾吸收系數(shù),它表示物質(zhì)的濃度為它表示物質(zhì)的濃度為1mol/L,液層厚度為,液層厚度為1cm時,時,溶液的吸光度。其單位為溶液的吸光度。其單位為L/molcm。這時朗伯。這時朗伯-比比耳定律就變?yōu)槎删妥優(yōu)? l Abc l 在分光光度分析實(shí)踐中在分光光度分析實(shí)踐中,我們不能直接取我們不能直接

17、取1mol/L這樣高濃度的有色溶液來測定摩爾吸光系數(shù)值,而這樣高濃度的有色溶液來測定摩爾吸光系數(shù)值,而是在適宜的低濃度時測定吸光度,然后通過計(jì)算求是在適宜的低濃度時測定吸光度,然后通過計(jì)算求得得值。值。l2. 桑德爾靈敏度桑德爾靈敏度l 吸光光度法的靈敏度除用摩爾吸收系數(shù)吸光光度法的靈敏度除用摩爾吸收系數(shù)表示外,表示外,還常用桑德爾靈敏度還常用桑德爾靈敏度S表示。表示。l 定義:當(dāng)光度儀器的檢測極限為定義:當(dāng)光度儀器的檢測極限為A=0.001時,單時,單位截面積光程內(nèi)所能檢出的吸光物質(zhì)的最低質(zhì)量位截面積光程內(nèi)所能檢出的吸光物質(zhì)的最低質(zhì)量(gcm-2)。)。l由桑德爾靈敏度由桑德爾靈敏度S的定義

18、可得到:的定義可得到: l A=0.001=bc MMbcMbcMS33610001. 0101010001l 即:即: S=M/ l 可見,某物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)可見,某物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)k越大,其桑德越大,其桑德爾靈敏度爾靈敏度S越小,即該測定方法的靈敏度越高。越小,即該測定方法的靈敏度越高。l3.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及應(yīng)用l 配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,在一定條配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,在一定條件下進(jìn)行測定。然后以吸光度為縱坐標(biāo),以濃度為件下進(jìn)行測定。然后以吸光度為縱坐標(biāo),以濃度為橫坐標(biāo)作圖,得到一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,也稱做工作曲線。橫坐標(biāo)作圖,得到一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,也稱做工作曲線

19、。曲線的斜率為曲線的斜率為b,由此可得到摩爾吸收系數(shù),由此可得到摩爾吸收系數(shù);也;也可根據(jù)未知液的可根據(jù)未知液的Ax,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出未知液的濃在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出未知液的濃度度cx。l二、引起偏離朗伯二、引起偏離朗伯-比耳定律的原因比耳定律的原因l(一一)物理因素物理因素l1.單色光不純所引起的偏離單色光不純所引起的偏離l 嚴(yán)格地講,朗伯嚴(yán)格地講,朗伯-比耳定律只對一定波長的單色比耳定律只對一定波長的單色光才成立。但在實(shí)際工作中,目前用各種方法得到光才成立。但在實(shí)際工作中,目前用各種方法得到的入射光并非純的單色光,而是具有一定波長范圍的入射光并非純的單色光,而是具有一定波長范圍的單色光。那么,在

20、這種情況下,吸光度與濃度并的單色光。那么,在這種情況下,吸光度與濃度并不完全成直線關(guān)系,因而導(dǎo)致了對朗伯不完全成直線關(guān)系,因而導(dǎo)致了對朗伯比耳定律的比耳定律的偏離。偏離。l2.非平行入射光引起的偏離非平行入射光引起的偏離l 非平行入射光將導(dǎo)致光束的平均光程非平行入射光將導(dǎo)致光束的平均光程b大于吸大于吸收池的厚度收池的厚度b,實(shí)際測得的吸光度將大于理論值。,實(shí)際測得的吸光度將大于理論值。l3介質(zhì)不均勻性引起的偏離介質(zhì)不均勻性引起的偏離l 朗伯朗伯-比耳定律是建立在均勻、非散射基比耳定律是建立在均勻、非散射基礎(chǔ)上的一般規(guī)律、如果介質(zhì)不均勻,呈膠體、礎(chǔ)上的一般規(guī)律、如果介質(zhì)不均勻,呈膠體、乳濁、懸浮

21、狀態(tài)存在,則入射光除了被吸收乳濁、懸浮狀態(tài)存在,則入射光除了被吸收之外、還會有反射、散射作用。在這種情況之外、還會有反射、散射作用。在這種情況下,物質(zhì)的吸光度比實(shí)際的吸光度大得多,下,物質(zhì)的吸光度比實(shí)際的吸光度大得多,必然要導(dǎo)致對朗伯必然要導(dǎo)致對朗伯-比耳定律的偏離。比耳定律的偏離。 l(二)化學(xué)因素(二)化學(xué)因素l1溶液濃度過高引起的偏離溶液濃度過高引起的偏離l 朗伯朗伯-比耳定律是建立在吸光質(zhì)點(diǎn)之間沒有相比耳定律是建立在吸光質(zhì)點(diǎn)之間沒有相互作用的前提下。但當(dāng)溶液濃度較高時,吸光物互作用的前提下。但當(dāng)溶液濃度較高時,吸光物質(zhì)的分子或離子間的平均距離減小,從而改變物質(zhì)的分子或離子間的平均距離減

22、小,從而改變物質(zhì)對光的吸收能力,即改變物質(zhì)的摩爾吸收系數(shù)。質(zhì)對光的吸收能力,即改變物質(zhì)的摩爾吸收系數(shù)。濃度增加,相互作用增強(qiáng),導(dǎo)致在高濃度范圍內(nèi)濃度增加,相互作用增強(qiáng),導(dǎo)致在高濃度范圍內(nèi)摩爾吸收系數(shù)不恒定而使吸光度與濃度之間的線摩爾吸收系數(shù)不恒定而使吸光度與濃度之間的線性關(guān)系被破壞。性關(guān)系被破壞。l2. 化學(xué)變化所引起的偏離化學(xué)變化所引起的偏離l 溶液中吸光物質(zhì)常因解離、締合、形成新的溶液中吸光物質(zhì)常因解離、締合、形成新的化合物或在光照射下發(fā)生互變異構(gòu)等,從而破壞化合物或在光照射下發(fā)生互變異構(gòu)等,從而破壞了平衡濃度與分析濃度之間的正比關(guān)系,也就破了平衡濃度與分析濃度之間的正比關(guān)系,也就破壞了吸

23、光度壞了吸光度A與分析濃度之間的線性關(guān)系。產(chǎn)生與分析濃度之間的線性關(guān)系。產(chǎn)生對朗伯對朗伯-比耳定律的偏離。比耳定律的偏離。l一、基本部件一、基本部件l 一般由光源、單色器(分光系統(tǒng))、吸收池、一般由光源、單色器(分光系統(tǒng))、吸收池、檢測系統(tǒng)和信號顯示系統(tǒng)等五部分組成。檢測系統(tǒng)和信號顯示系統(tǒng)等五部分組成。l (一)光源(一)光源l 常用的光源為常用的光源為6-12伏低壓鎢絲燈,電源由溫器供伏低壓鎢絲燈,電源由溫器供給,為了保持光源強(qiáng)度的穩(wěn)定,以獲得準(zhǔn)確的測定給,為了保持光源強(qiáng)度的穩(wěn)定,以獲得準(zhǔn)確的測定果,電壓必須穩(wěn)定。果,電壓必須穩(wěn)定。l (二)單色器(分光系統(tǒng))(二)單色器(分光系統(tǒng))l 單色

24、器的作用從光源發(fā)出的復(fù)合光中分出所需單色器的作用從光源發(fā)出的復(fù)合光中分出所需要的單色光。要的單色光。l 單色器通常由由入射狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件、單色器通常由由入射狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件、聚焦鏡和出射縫組成。聚焦鏡和出射縫組成。l(三)吸收池(比色皿)(三)吸收池(比色皿)l 比色皿是用透明無色的光學(xué)玻璃制作的。大多比色皿是用透明無色的光學(xué)玻璃制作的。大多數(shù)比色皿為長方形,也有圓柱形的。一般厚度為數(shù)比色皿為長方形,也有圓柱形的。一般厚度為0.5、1、2和和3厘米。厘米。l(四)檢測系統(tǒng)(四)檢測系統(tǒng)(又叫光電轉(zhuǎn)化器又叫光電轉(zhuǎn)化器)l 在光度計(jì)中,常用的是硒光電池。曬光電池和眼在光度計(jì)中,常用的

25、是硒光電池。曬光電池和眼睛相似,對于各種不同波長的光線,靈敏度是不同的。睛相似,對于各種不同波長的光線,靈敏度是不同的。對于波長為對于波長為500-600nm的光線最靈敏。而對紫外線,的光線最靈敏。而對紫外線,紅外線則不能應(yīng)用。紅外線則不能應(yīng)用。l 光電管和光電倍增管用于較精密的分光光度計(jì)中。光電管和光電倍增管用于較精密的分光光度計(jì)中。具有靈敏度高、光敏范圍廣及不易疲勞等特點(diǎn)。具有靈敏度高、光敏范圍廣及不易疲勞等特點(diǎn)。 l(五)信號顯示系統(tǒng)(五)信號顯示系統(tǒng)l 早期使用的是檢流計(jì)、微安表、電位計(jì)、數(shù)字早期使用的是檢流計(jì)、微安表、電位計(jì)、數(shù)字電壓表、自動記錄儀等。電壓表、自動記錄儀等。l 現(xiàn)代的

26、分光光度計(jì)廣泛采用數(shù)字電壓表、函數(shù)現(xiàn)代的分光光度計(jì)廣泛采用數(shù)字電壓表、函數(shù)記錄儀、示波器及數(shù)據(jù)處理臺等。記錄儀、示波器及數(shù)據(jù)處理臺等。l 測量光電流的檢流計(jì)常用懸鏡式檢流計(jì)測量光電流的檢流計(jì)常用懸鏡式檢流計(jì)(也稱作也稱作直流復(fù)射式檢流計(jì)直流復(fù)射式檢流計(jì)),其靈敏度可達(dá),其靈敏度可達(dá)10-9安培格。安培格。為了保護(hù)檢統(tǒng)計(jì),使用中要防止震動或大電流通過。為了保護(hù)檢統(tǒng)計(jì),使用中要防止震動或大電流通過。檢流計(jì)標(biāo)尺上有兩種刻度,等刻度的是表示百分透檢流計(jì)標(biāo)尺上有兩種刻度,等刻度的是表示百分透光率光率(T),對數(shù)刻度表示吸光度,對數(shù)刻度表示吸光度(A)。l 根據(jù)透光率根據(jù)透光率T,如果把入射光強(qiáng)度,如果把入射光強(qiáng)度IO當(dāng)作當(dāng)作IO光強(qiáng)光強(qiáng)單位,透過光強(qiáng)度當(dāng)作單位,透過光強(qiáng)度當(dāng)作100光強(qiáng)單位中的一部分,這光強(qiáng)單位中的一部分,這一數(shù)值為百分透光度,亦稱為百分透光率。一數(shù)值為百分透光度,亦稱為百分透光率。 二、吸光度的測量原理二、吸光度的測量原理l 分光光度計(jì)實(shí)際上測得的是光電流或電壓,通分光光度計(jì)實(shí)際上測得的是光電流或電壓,通過轉(zhuǎn)換器將測得的電流或電壓轉(zhuǎn)換為對應(yīng)的吸光度過轉(zhuǎn)換器將測得的電流或電壓轉(zhuǎn)換為對應(yīng)的吸光度A。測定時,只

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