小腸平滑肌實驗報告

1、實驗十二消化實驗家兔離體小腸平滑肌生理特性 目的要求 1 、學(xué)習(xí)離體腸段平滑肌的實驗方法。2 、了解腸段平滑肌的生理特性。 基本原理 哺乳動物消化管平滑肌與肌肉組織共有的特性， 如興奮性、傳導(dǎo)性和收縮性等。但消化管平滑肌又有其特點，即興奮性較低，收縮緩慢，富有伸展性，具有緊張性、自動節(jié)律性，對化學(xué)、溫度和機械牽張刺激較敏感等。這些特性可維持消化管內(nèi)一定壓力， 保持胃腸等一定的形態(tài)和位置， 適合于消化管內(nèi)容物的理化變化，在體內(nèi)受中樞神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素的調(diào)節(jié)。 將離體組織器官置于摸擬體內(nèi)環(huán)境的溶液中， 可在一定時間內(nèi)保持其功能。 本實驗以臺式液作灌流液， 在體外觀察及記錄哺乳動物離體腸段的一般生理

2、特性。 動物與器材 兔、恒溫平滑肌槽、支架、燒杯、 20ml 注射器、張力傳感器、生物機能實驗系統(tǒng)、溫度計、臺式液、腎上腺素（ 1：10000）、乙酰膽堿（ 1：10000）、阿托品針劑（ 1 支）。 方法與步驟 1 、裝好實驗裝置，平滑肌槽恒溫調(diào)至37。2 、制備離體兔腸段用木槌猛擊兔后頭延髓部，致其昏迷后立即剖開腹腔，找到胃幽門與十二指腸交界處。在十二指腸起始端扎一線， 取出十二指腸、空腸 、放入冷臺式液內(nèi)。先用 20ml 注射器沖洗內(nèi)容物， 沖洗干凈后剪成若干約 1.5cm 長的小腸段（每一實驗小組一段） 在其兩端結(jié)扎， 一端做一短線環(huán)固定在通氣的浴皿內(nèi)， 另一端扎線與張力傳感器相連。

3、將腸段完全浸浴在調(diào)好溫度的平滑肌槽中 ，并調(diào)整好臺式液充氣量（小氣泡接連不斷）。3、開啟生物機能實驗系統(tǒng)，接通與張力傳感器相連的通道。固定管并調(diào)節(jié)扎線與張力傳感器， 使腸段運動自如又能牽動傳感器（注意：扎線不可貼壁或過緊過松）。調(diào)節(jié)增益與掃描速度， 使腸段的運動曲線清晰地顯示在顯示器上并記錄腸段活動曲線。4、實驗觀察（1）記錄對照腸段運動曲線后，停止供氣1 分鐘并記錄曲線變化，同時觀察腸段緊張度變化。當(dāng)出現(xiàn)明顯變化后，立即恢復(fù)供氣。用新鮮 37臺式液沖洗，待恢復(fù)正常（注意作好標記）。（ 2）記錄對照腸段運動曲線后，加入 25臺式液，并記錄曲線變化，同時觀察腸段緊張度變化。同法，當(dāng)出現(xiàn)明顯變化后

4、，立即用 37臺式液沖洗，待恢復(fù)正常。（ 3）同法加入 45臺式液并記錄曲線變化，同時觀察腸段緊張度變化。當(dāng)出現(xiàn)明顯變化后，立即用新鮮 37臺式液沖洗并待恢復(fù)。由于以上流出液中未加入藥物，可以回收使用。以下加入藥物的流出也不可再用。（4）同法，加入 2 滴腎上腺素（ 1： 10000），觀察并記錄曲線變化。（ 5）同法加入 12 滴乙酰膽堿（ 1：10000），觀察并記錄曲線變化。（ 6）加入 3 滴阿托品后立即加入于（ 5）同樣劑量的乙酰膽堿，記錄并觀察曲線變化。同（ 5）比較曲線有何不同。注意： 1 加藥前必須準備好更換用的 37臺式液。上述藥物劑量只是參考，效果不明顯可補加， 每次加藥出

5、現(xiàn)效果后， 必須立即更換浴槽內(nèi)的臺式液并沖洗 3 次，待腸肌恢復(fù)正常后在觀察下一項目。浴槽內(nèi)臺式液要保持一定溫度。2 游離及取出腸段時，動作要快，取兔腸及兔腸穿線時盡可能不用金屬及手指觸及。為保持離體腸段的活性，可先預(yù)冷充氧的營養(yǎng)液，游離腸段及穿線在預(yù)冷的營養(yǎng)液中進行。實驗中始終通氣。思考題1、本實驗是否可用麻醉動物的腸段？為什么？麻醉狀態(tài)影響腸段細胞的反應(yīng)性以及對藥物的敏感度2、進行哺乳動物離體組織器官實驗時，需控制哪些條件？溫度：本實驗控制恒定溫度 37 度濕度：要時刻記住用相應(yīng)的潤濕液潤濕，本次試驗用哺乳動物的臺氏液 PH：要與哺乳動物體液相似避免不必要的刺激：不要用手或者是金屬觸碰離子

6、成分與濃度：要與相關(guān)的動物體液相似，本實驗是臺氏液3、為什么加入各種藥物會引起離體腸段活動的變化？其機理是什么？·adr 對其是抑制作用··可見離體腸管活動減弱，描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變慢，幅度減小以及基線下移···ach 是促進作用，··可見離體腸管活動增強，·描記曲線出現(xiàn)收縮頻率變快，幅度增加。出現(xiàn)上述現(xiàn)象的機理， 與消化道平滑肌細胞產(chǎn)生動作電位的離子基礎(chǔ)是 Ca2+的內(nèi)流有關(guān)。阿托品是 ach 的阻斷劑。所以兩者加入個觀察到曲線無明顯變化。 阻斷乙酰膽堿與肌膜上的 M受體結(jié)合。HCL離體腸管活動減弱，

7、描記曲線出現(xiàn)收縮幅度降低，頻率變慢。··· H+升高能干擾肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過程： H+能與 Ca2+競爭鈣調(diào)蛋白的結(jié)合位點而使肌球蛋白 ATP酶活性降低； 使肌原纖維對 Ca2+的敏感性和 Ca2+從肌質(zhì)網(wǎng)的釋放量減少。加了 NAOH腸管活動增強。···中和了 H 離子··改變了細胞外液的 PH值···所以恢復(fù)正常··4、加入阿托品后再加入乙酰膽堿，腸段活動受到抑制，為什么？這兩種藥對腸道平滑肌的作用正好相反， 乙酰膽堿能促進腸道平滑肌蠕動， 阿托品是膽堿能神經(jīng)阻斷劑， 能抑制腸道平滑肌蠕動。 兩藥同時使用， 阿托品阻斷了乙酰膽堿的作用，所以表現(xiàn)出腸道活動受到抑制。5 、根據(jù)實驗結(jié)果，說明平滑肌的生理特性消化管平滑肌又有其特點， 即興奮性較低， 收縮緩慢，富有伸展性，具有緊張性、自動節(jié)律性， 對化