光譜法研究藥物小

1、光譜法研究藥物小分子與HSA的相互作用 目錄1 研究藥物小分子與HSA相互作用的意義2 藥物小分子與HSA相互作用的研究3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案：其他藥物小分子與HSA相互做用戶4 結(jié)語(yǔ)1.研究藥物小分子與HSA相互作用的意義 人血清白蛋白（Human Serum albumin，HSA）是一種人體血漿含最為豐富的蛋白質(zhì)，能夠廣泛地與許多內(nèi)源性、外源性物質(zhì)進(jìn)行結(jié)合，從而起到存儲(chǔ)、轉(zhuǎn)運(yùn)藥物到達(dá)受體部位從而發(fā)揮藥效。研究藥物小分子與人血清白蛋白間的相互作用，可為藥物分子的結(jié)構(gòu)與其藥效方面的對(duì)應(yīng)關(guān)系提供了一定的有利信息，并在人類疾病的診斷與預(yù)防以及新藥的研發(fā)等方面具有重要的理論基礎(chǔ)。2.藥物與HSA作用的熒

2、光光譜2.1 熒光光譜法 熒光光譜法，具有較高的靈敏度、強(qiáng)的選擇性、用量小以及方法簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。在研究藥物小分子與蛋白質(zhì)等生物大分子的相互作用中，是一種較為廣泛使用的方法。在很多情況下是利用蛋白質(zhì)的熒光猝滅法。2.藥物與HSA作用的熒光光譜熒光猝滅法 是指任何能夠使熒光物質(zhì)的熒光量子產(chǎn)率或者熒光強(qiáng)度下降的作用；其中能引起熒光強(qiáng)度下降的物質(zhì)。根據(jù)不同溫度條件下實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不同可將這一碎滅過(guò)程分為兩種情況：動(dòng)態(tài)猝滅與靜態(tài)猝滅(較為普遍)；2.藥物與HSA作用的熒光光譜 圖一2.藥物與HSA作用的熒光光譜 由動(dòng)態(tài)淬滅 Stern-Volmer 方程： F0/F1KSVQ 1Kq 0Q其中F0，F(xiàn)分別為

3、TBMSII 加入前后時(shí) HSA 熒 光強(qiáng)度，KSV為淬滅速率常數(shù)，Kq為雙分子淬滅反應(yīng)速率常數(shù), 0為淬滅劑(TBMSII)不存在時(shí)生物大分子的平均壽命(s)約為10-8S，Q為 TBMSII 濃度， 由 公式得: KSV Kq 02.藥物與HSA作用的熒光光譜， 溫度下Stern-Volme淬滅曲線， 內(nèi)嵌圖為不同溫度下速率常數(shù) 。圖 二2.藥物與HSA作用的熒光光譜TBMSII 與 HSA 的作用方式 對(duì)于靜態(tài)淬滅, TBMSII與HSA反應(yīng)的結(jié)合常數(shù) Ka與結(jié)合位點(diǎn)數(shù)n由Scatchard方程lg(F0F)/FlgKanlgQ 利用lg(F0F)/F對(duì)lgQ作圖可得線性關(guān)系2.藥物與H

4、SA作用的熒光光譜圖 三2.藥物與HSA作用的熒光光譜表 四2.藥物與HSA作用的熒光光譜 有機(jī)小分子和生物大分子之間結(jié)合作用力包括靜電作用、氫鍵作用、范德華力、疏水作用等, 假設(shè)在293308 K范圍內(nèi) TBMS與 HSA 結(jié)合反應(yīng)焓變(H)無(wú) 顯著變化，根據(jù)van,t Hoff方程: lnkaH/RT+S/R2.藥物與HSA作用的熒光光譜2.藥物與HSA作用的熒光光譜自由能變(G)由下式計(jì)算: G H TS 不同溫度TBMSII與HSA反應(yīng)熱力學(xué)參數(shù)結(jié)果見(jiàn)表一，G 為負(fù)值，表明 TBMSII與HSA結(jié)合反應(yīng)為自發(fā)進(jìn)行;H,S均為負(fù)值,根據(jù) Ross判斷生物大分子與小分子作用力性質(zhì)的規(guī)律表明

5、分子間的疏水及氫鍵作用是 TBMSII-HSA 復(fù)合物的主要作用力. 藥物與HSA作用的紫外可見(jiàn)光譜以黃芩素和黃芩苷為例，其結(jié)構(gòu)為 圖 五藥物與HSA作用的紫外可見(jiàn)光譜 黃芩素和黃芩苷在不同溶劑中的紫外可見(jiàn)光譜 圖 六I 帶II帶藥物與HSA作用的紫外可見(jiàn)光譜黃芩素和黃芩苷與HSA作用的紫外可見(jiàn)光譜實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 熒光光譜法動(dòng)態(tài)猝滅靜態(tài)猝滅Ka結(jié)合位點(diǎn)個(gè)數(shù)復(fù)合物穩(wěn)定性 藥物與HSA作用（溫度與動(dòng)態(tài)猝滅常 數(shù)正相關(guān)）根據(jù) van,t Hoff藥物與HSA主要作用力能量轉(zhuǎn)化率對(duì)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)狀態(tài)進(jìn)行分析紫外可將光譜結(jié)語(yǔ)目錄1 研究藥物小分子與HSA相互作用的意義2 藥物小分子與HSA相互作用的研究3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案：其他藥物小分子與HSA相互做用戶4 結(jié)語(yǔ)1.研究藥物小分子與HSA相互作用的意義 人血清白蛋白（Human Serum albumin，HSA）是一種人體血漿含最為豐富的蛋白質(zhì)，能夠廣泛地與許多內(nèi)源性、外源性物質(zhì)進(jìn)行結(jié)合，從而起到存儲(chǔ)、轉(zhuǎn)運(yùn)藥物到達(dá)受體部位從而發(fā)揮藥效。研究藥物小分子與人血清白蛋白間