臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命課件

1、臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命 人類面臨著微生物的挑戰(zhàn), 要打贏這場戰(zhàn)爭不僅需要有經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)生,還需要一支優(yōu)秀的偵察隊伍臨床微生物檢驗(yàn)隊伍。臨床細(xì)菌室規(guī)模和發(fā)展速度與10年或20年前相比已經(jīng)發(fā)生了巨大的變化,但離CLSI(臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所)標(biāo)準(zhǔn)化文件要求還相差很遠(yuǎn),基層細(xì)菌室必須進(jìn)行規(guī)范操作革命才可能應(yīng)對微生物向人類的挑戰(zhàn),才能適應(yīng)臨床的需要.臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命衛(wèi)生部醫(yī)政司 2004年制定中國第一版抗菌藥物合理應(yīng)用指南.國務(wù)院副國務(wù)院副總理吳儀也做出了重要批示總理吳儀也

2、做出了重要批示 05年衛(wèi)生部提出星火培訓(xùn)項目年衛(wèi)生部提出星火培訓(xùn)項目:包括臨床醫(yī)生和細(xì)菌實(shí)驗(yàn)包括臨床醫(yī)生和細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室室 06年，耐藥菌監(jiān)測網(wǎng)正式成立包括128家醫(yī)院。 馬曉偉提出了馬曉偉提出了“藥師管理，合理用藥藥師管理，合理用藥”的指導(dǎo)思想的指導(dǎo)思想。 目前，基層用藥尤其是抗生素情況不很樂觀。社區(qū)醫(yī)院情況也十分讓人擔(dān)憂。三級醫(yī)院規(guī)模雖然大，但是數(shù)量太少。不能滿足絕大多數(shù)看病者的需求。 07年完成了培訓(xùn)教材由人民衛(wèi)生出版社出版年完成了培訓(xùn)教材由人民衛(wèi)生出版社出版, 08年年10月啟動培訓(xùn)月啟動培訓(xùn),在北京在北京.臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命您可能每天面臨以下問題的挑戰(zhàn) 同時做需氧血培養(yǎng)和

3、厭氧血培養(yǎng)時血液先注入需氧瓶或厭氧瓶？ 膿標(biāo)本有時涂片見到細(xì)菌為什么培養(yǎng)陰性？ 非上班時間需要做厭氧培養(yǎng)怎么辦？ 明顯細(xì)菌性腦膜炎為什么培養(yǎng)陰性？ 痰標(biāo)本分離出4種細(xì)菌做哪一種細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)？ 數(shù)量很多的凝固酶陰性葡萄球菌在痰里分離出來是否要做藥敏?臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命參考CLSI M2 M7 M42 M47從以下7方面提出建議 標(biāo)本采集和運(yùn)送的規(guī)范； 培養(yǎng)前標(biāo)本質(zhì)量檢測規(guī)范； 標(biāo)本接種規(guī)范； 細(xì)菌鑒定基本流程規(guī)范； 細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)規(guī)范； 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制； 無菌體液細(xì)菌報告規(guī)范； 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命標(biāo)本采集和運(yùn)送 標(biāo)本采集和運(yùn)送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的最最重要的關(guān)標(biāo)本采

4、集和運(yùn)送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的最最重要的關(guān)鍵鍵 但由于標(biāo)本的采集和運(yùn)送常有護(hù)士或醫(yī)生或病人自己完成,所以也是最不容易做好的事情，而且不知道問題所在之處,造成的后果是: 臨床醫(yī)生最不能接受的問題臨床醫(yī)生最不能接受的問題:陽性率低陽性率低臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命棉 花 纖 維 + 竹 / 木 條 抑 菌 區(qū) 是 因 為 ： 植 物 分 泌 出 來 的 ： 脂 肪 酸 ； 樹 脂 ； 福 爾 馬 林臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命氯 氣 ， 重 金 屬 與 膠 水 的 影 響 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命美美 國國 與與 歐歐 洲洲 對對 實(shí)實(shí) 驗(yàn)驗(yàn) 室室 的的 新新 要要 求求臨床微生

5、物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命多用途運(yùn)送系統(tǒng) 需氧 + 厭氧低 氧 化 的 環(huán) 境 不會對標(biāo)本的微生物造成損害拭 子 是 深 入 培 養(yǎng) 基 中 來 保 護(hù) 苛 養(yǎng) 菌 與 厭 氧 菌臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命ASM 2004流感嗜血桿菌在三種不同的運(yùn)送基的存活率臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命泌尿標(biāo)本采集的規(guī)范 1采集后的標(biāo)本應(yīng)立即送檢。 2采集時間：多數(shù)藥物從尿道排泄，所以不管用哪種方法都應(yīng)在用藥前采集。應(yīng)采集早晨第一次的尿。 3 標(biāo)本管不應(yīng)含防腐劑和消毒劑。 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命泌尿標(biāo)本采集的規(guī)范 1.采集中段尿時要先用肥皂清洗女性的外陰和男性的外生殖器包括包皮內(nèi)，然

6、后用清水沖洗。 2.長期留置導(dǎo)尿管的患者應(yīng)在更換新管時留取尿標(biāo)本。 3. 做厭氧培養(yǎng)時應(yīng)膀胱穿刺采集尿。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命分泌物采集規(guī)范 1. 對開放性病灶的采集：如眼結(jié)膜膿性分泌物、扁桃體、外耳道、手術(shù)后切口、導(dǎo)管治療感染、瘺管內(nèi)膿液、生殖道分泌物等均屬于開放性病灶。應(yīng)先用滅菌生理鹽水沖洗表面污染菌，去除舊的分泌物，用滅菌拭子采集病灶深部的分泌物，也可取感染部位下的組織送檢。 2. 閉鎖性膿腫：如淋巴膿腫、肺膿腫、肝膿腫、腹腔膿腫、盆腔膿腫等，對封閉的膿腫常采用穿刺或引流的的方法采樣，應(yīng)在用藥前采集，應(yīng)注意膿液的氣味、性狀、顏色注意厭氧菌存在的可能。不能及時送檢應(yīng)應(yīng)用輸送培養(yǎng)

7、基。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命便標(biāo)本采集規(guī)范 1.采集時間：腹瀉患者應(yīng)在用藥前、急性期采集；沙門菌感染、腸熱癥應(yīng)在2周內(nèi)采；厭氧菌出現(xiàn)癥狀即采集。 2.采集方法：自然排便者可用小木棒挑取有膿血和黏液的部位的糞便2-3克，如液狀糞便取絮狀物盛于無菌的、密封的、不吸水的、容器內(nèi)或直接盛于增菌液或保存液中；對不易獲得糞便患者及幼兒，可用直腸拭子采集后置保存液或輸送培養(yǎng)基中送檢。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命便標(biāo)本采集規(guī)范 3. 注意事項： 雖然糞便標(biāo)本本身含很多細(xì)菌但也要用無菌容器。 在患者病情許可的條件下應(yīng)在用藥前采集標(biāo)本。 應(yīng)床邊接種或置輸送培養(yǎng)基送檢。 厭氧細(xì)菌（難辯梭菌）培養(yǎng)的標(biāo)

8、本應(yīng)盡量減少與空氣接觸。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命痰標(biāo)本的采集和運(yùn)送 1. 標(biāo)本采集時間：用抗生素前 2. 采集方法： 自然咳痰：必須用請水漱口3次，應(yīng)包括咽喉部，立即用力咳出痰，于滅菌容器中或輸送培養(yǎng)基中。 支氣管鏡或支氣管毛刷:由醫(yī)生采集，建議直接種入輸送培養(yǎng)基臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命厭培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范 1.痰標(biāo)本的厭氧培養(yǎng)標(biāo)本采集：必須用氣管穿刺法獲得痰液，從口腔吐出的痰標(biāo)本不能用于厭氧培養(yǎng)。 2.尿標(biāo)本的厭氧培養(yǎng)標(biāo)本采集：恥骨上膀胱穿刺獲得尿標(biāo)本可用于厭氧菌培養(yǎng) 3便標(biāo)本厭氧培養(yǎng)標(biāo)本采集： 可用排出的便做厭氧培養(yǎng)但也應(yīng)少與空氣接觸。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命C

9、LSI血培養(yǎng)的血培養(yǎng)的原則原則和操作程序推薦和操作程序推薦（Proposed）指南指南 2006年10月出版：M47-P 只是協(xié)商后的推薦稿（consensus proposed） 收集來自全球的評論和建議 收集截止日期：2007年1月29日 下一步要出版投票通過的試行指南臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命英國英國HPA 的血培養(yǎng)的研究及操作程序的血培養(yǎng)的研究及操作程序2005-09-08出版：出版：BSOP 37 Issue 5INVESTIGATION OF BLOOD CULTURES (FOR ORGANISMS OTHER THAN MYCOBACTERIUM SPESIES) 參編

10、單位：參編單位： 醫(yī)學(xué)微生物協(xié)會, 臨床微生物協(xié)會 蘇格蘭微生物協(xié)會, IBMS, Welsh微生物協(xié)會 統(tǒng)一由衛(wèi)生防護(hù)署 （Health Protection Agency）領(lǐng)導(dǎo)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命優(yōu)質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室操作優(yōu)質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室操作 取血合適的時間取血合適的時間 盡可能抗菌藥使用前 寒顫和發(fā)熱初起；心內(nèi)膜炎（持續(xù)性菌血癥）例外 標(biāo)本類型和取血方法 不要和測血?dú)饧把恋娜⊙瑫r進(jìn)行（或在先） 穿刺點(diǎn)消毒：以醇類、洗必泰為好臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命血標(biāo)本的收集血標(biāo)本的收集優(yōu)質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室操作優(yōu)質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室操作1. 從靜脈取血2. 不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口取血3. 若導(dǎo)管設(shè)施取血

11、*，必需同時靜脈取血，以求對比和解釋不要棄去初段血，不用抗凝劑沖洗 4.不推薦靜脈血直接入瓶不推薦靜脈血直接入瓶5.不主張換針頭入瓶不主張換針頭入瓶6.有血的培養(yǎng)瓶不可放入冰箱和凍箱保存臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命建議第一天 1-3套血，每套16-20ml第二天 ,如無跡象有細(xì)菌生長 1-2套，每套16-20ml臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命瓶數(shù)及血量瓶數(shù)及血量結(jié)論1： 絕對不能只用一瓶 寒戰(zhàn)升溫之間應(yīng)采血20毫升分裝兩個瓶內(nèi) 先分配在需氧瓶10ml，然后剩余的入?yún)捬跗績?nèi)，因?yàn)檎婢?、綠膿桿菌、窄食單胞菌只長在需氧瓶內(nèi)。結(jié)論2：2-5天內(nèi)不必重復(fù)取血結(jié)論3：只有可疑為持續(xù)性菌血癥：如心

12、內(nèi)膜炎、導(dǎo)管相關(guān)sepsis時，才要有間隔地(1h至24h)幾次取血監(jiān)測、捕捉、指導(dǎo)治療；特別是金葡菌時。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命 血液及骨髓標(biāo)本采集運(yùn)送的規(guī)范血液及骨髓標(biāo)本采集運(yùn)送的規(guī)范 1. 采血時間：盡可能在用抗生素前，心內(nèi)膜炎例外。 2. 采血量：采一次或采一瓶是錯誤的，至少應(yīng)采一套 2瓶，分需氧和厭氧。2瓶血量不少于16-20ml，先將10ml注入需氧瓶，再將剩余血采血注入?yún)捬跗俊?3. 采血方法：不要與血?dú)夂脱翗?biāo)本一起采血；不推薦血入瓶前換針頭；不推薦靜脈血直接入瓶；不宜在靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口采血。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命抽血量和體重的關(guān)系體重 Kg抽血量 m

13、l套（需氧+厭氧）=36.340-602-3臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命血液及骨髓標(biāo)本采集運(yùn)送的規(guī)范血液及骨髓標(biāo)本采集運(yùn)送的規(guī)范 4. 采血間隔：如第一次采集2套（4瓶）血培養(yǎng)標(biāo)本，在以后的2-5天不必采血，但除外心內(nèi)膜炎和導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥。 5. 兒童：采血量是總血量的1%。 6. 延遲培養(yǎng)瓶處理: 延遲培養(yǎng)瓶不要放冰箱或孵箱,放常溫，盡早送往臨床細(xì)菌室。 7. 皮膚消毒液推薦：建議先用70-80%異丙醇去脂，再用葡萄糖酸氯乙定消毒。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命其他無菌體液的采集運(yùn)送規(guī)范 1 無菌采集是培養(yǎng)成功的首要因素 2 采集的標(biāo)本應(yīng)立即送至臨床細(xì)菌室，腦膜炎球菌有自溶酶，離

14、體后回迅速自溶。肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌離體后極易死亡。 3延遲送檢時一定不能放冰箱，肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌等對溫度敏感的細(xì)菌在冰箱會很快死亡。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命參考CLSI M2 M7 M42 M47從以下7方面提出建議 標(biāo)本采集和運(yùn)送的規(guī)范； 培養(yǎng)前標(biāo)本質(zhì)量檢測規(guī)范；培養(yǎng)前標(biāo)本質(zhì)量檢測規(guī)范； 標(biāo)本接種規(guī)范； 細(xì)菌鑒定基本流程規(guī)范； 細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)規(guī)范； 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制； 無菌體液細(xì)菌報告規(guī)范； 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命痰培養(yǎng)標(biāo)本培養(yǎng)前規(guī)范規(guī)范 實(shí)驗(yàn)室在接種前必須作痰涂片革蘭染色，當(dāng)在低倍鏡下白細(xì)胞小于10個每視野、上皮細(xì)胞大于25個每視野時應(yīng)作為不宜做培養(yǎng)的標(biāo)

15、本； 當(dāng)白細(xì)胞小于10個每視野，上皮細(xì)胞小于25個每視野時再參照油鏡觀察標(biāo)本中細(xì)菌分布作出判斷： 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命痰培養(yǎng)標(biāo)本培養(yǎng)前規(guī)范規(guī)范 當(dāng)標(biāo)本中細(xì)菌種類超過3種以上，未見到釬毛拄狀上皮細(xì)胞，作為不合格標(biāo)本；如見到數(shù)量不等的白血胞或釬毛拄狀上皮細(xì)胞或兩者同在，含1-2種不同細(xì)菌，可考慮繼續(xù)培養(yǎng)，結(jié)果可根據(jù)病情再作分析；當(dāng)涂片中見到1-3種細(xì)菌，少量的扁平上皮細(xì)胞，少量或較多釬毛拄狀上皮細(xì)胞均可按合格標(biāo)本繼續(xù)培養(yǎng)。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命厭氧培養(yǎng) 在正常上班時間： 申請厭氧培養(yǎng)的科室應(yīng)邀請實(shí)驗(yàn)室，由臨床醫(yī)生或護(hù)士采集，細(xì)菌室行床邊接種。 自然排出的尿標(biāo)本、用棉拭子采

16、集的分泌物、自然咳出的痰標(biāo)本均為不合格的厭氧培養(yǎng)的標(biāo)本，應(yīng)于退檢。 沒有條件或不能及時送檢的情況下均應(yīng)用輸送培養(yǎng)基放置標(biāo)本 。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命培養(yǎng)結(jié)果結(jié)合涂片判斷定植菌或致病菌培養(yǎng)結(jié)果結(jié)合涂片判斷定植菌或致病菌 尿培養(yǎng)分離出3種以上的細(xì)菌，或分離出凝固酶陰性葡萄球菌、革蘭陽性棒狀桿菌等非定義為致病菌的細(xì)菌，涂片未見到，應(yīng)在報告中提示可能是污染細(xì)菌建議結(jié)合臨床表現(xiàn)考慮結(jié)果的參考價值。 眼結(jié)膜拭子分離出凝固酶陰性葡萄球菌，涂片未見到，可能是污染細(xì)菌，應(yīng)建議重送標(biāo)本。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命培養(yǎng)結(jié)果結(jié)合涂片判斷定植菌或致病菌培養(yǎng)結(jié)果結(jié)合涂片判斷定植菌或致病菌 前列腺液標(biāo)本

17、分離出凝固酶陰性葡萄球菌或革蘭陽性小桿菌，涂片未見到，可能是污染細(xì)菌，應(yīng)建議重送標(biāo)本。 當(dāng)涂片中見到的細(xì)菌，并有細(xì)菌吞嗜現(xiàn)象存在，在培養(yǎng)時分離出該細(xì)菌可推測為致病菌。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命培養(yǎng)結(jié)果結(jié)合涂片判斷定植菌或致病菌培養(yǎng)結(jié)果結(jié)合涂片判斷定植菌或致病菌 (5)涂片報告的日期和培養(yǎng)報告日期要對應(yīng)便于醫(yī)生判別結(jié)果的參考價值. （6）并每一視野可見到20個/油鏡或該菌占所見到細(xì)菌的50%,可推測是標(biāo)本中的優(yōu)勢細(xì)菌.臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命參考CLSI M2 M7 M42 M47從以下7方面提出建議 標(biāo)本采集和運(yùn)送的規(guī)范； 培養(yǎng)前標(biāo)本質(zhì)量檢測規(guī)范； 標(biāo)本接種規(guī)范；標(biāo)本接種規(guī)范

18、； 細(xì)菌鑒定基本流程規(guī)范； 細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)規(guī)范； 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制； 無菌體液細(xì)菌報告規(guī)范； 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命 有了合格的標(biāo)本是保證培養(yǎng)成功的重要條件，但如果沒有適宜的分離培養(yǎng)基和培養(yǎng)環(huán)境同樣不能獲得好的結(jié)果，為此制定如下基本條例以保證致病細(xì)菌分離成功。分離培養(yǎng)規(guī)范分離培養(yǎng)規(guī)范臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命痰培養(yǎng) 1培養(yǎng)基：5%羊血瓊脂、5%兔血巧克力瓊脂、中國蘭瓊脂或伊紅美蘭、或加MRSA顯色瓊脂。 2培養(yǎng)環(huán)境：5%羊血瓊脂、5%兔血巧克力瓊脂、置5-7%CO2、35環(huán)境培養(yǎng)，其他培養(yǎng)基置35空氣培養(yǎng)。 3結(jié)核培養(yǎng)：羅氏雞蛋斜面，每一標(biāo)本種2支，37空氣培養(yǎng)。臨床微生物

19、實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命尿標(biāo)本 1培養(yǎng)基：5%羊血瓊脂、中國蘭或伊紅美蘭，CP3尿致病菌分離顯色瓊脂。 2.菌落計數(shù)：每個標(biāo)本都要做，用加樣器或定量接種環(huán)取樣本200ul分別接種于上述培養(yǎng)基均勻涂布整個平皿，此日作菌落計數(shù)。 3培養(yǎng)環(huán)境：35空氣環(huán)境培養(yǎng) 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命便培養(yǎng) 1 培養(yǎng)基：中國蘭或伊紅美蘭，沙門氏志賀氏瓊脂（SS瓊脂）或加沙門菌分離瓊脂。 2培養(yǎng)環(huán)境：35空氣環(huán)境培養(yǎng)。 3疑似偽膜性腸炎：5%羊血瓊脂、沙保弱瓊脂斜面、梭狀芽孢桿菌分離瓊脂（CCFA）。5%羊血瓊脂、沙保弱瓊脂斜面置35空氣環(huán)境培養(yǎng)。CCFA置35厭氧環(huán)境培養(yǎng)。 其他特殊腸道致病菌培養(yǎng)按國家C

20、DC要求執(zhí)行。 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命腦脊液培養(yǎng) 1培養(yǎng)基：5%兔血巧克力瓊脂、5%羊血瓊脂。 2培養(yǎng)環(huán)境：35，5-10%CO2環(huán)境培養(yǎng)。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命分泌物培養(yǎng) 1培養(yǎng)基：5%羊血瓊脂、5%兔血巧克力瓊脂、中國蘭或伊紅美蘭、葡萄糖肉湯 2培養(yǎng)環(huán)境：35空氣環(huán)境培養(yǎng)。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命膽汁或胸水或腹水 1培養(yǎng)基：如標(biāo)本量大時可按血液培養(yǎng)方法直接取16-20ml分別種入需氧和厭氧培養(yǎng)瓶。如標(biāo)本量有限，可接種5%羊血瓊脂、5%兔血巧克力瓊脂、中國蘭或伊紅美蘭、葡萄糖肉湯。 2培養(yǎng)環(huán)境：35空氣環(huán)境培養(yǎng)。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命參考CLSI

21、 M2 M7 M42 M47從以下7方面提出建議 標(biāo)本采集和運(yùn)送的規(guī)范； 培養(yǎng)前標(biāo)本質(zhì)量檢測規(guī)范； 標(biāo)本接種規(guī)范； 細(xì)菌鑒定基本流程規(guī)范；細(xì)菌鑒定基本流程規(guī)范； 細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)規(guī)范； 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制； 無菌體液細(xì)菌報告規(guī)范； 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命細(xì)菌鑒定 涂片染色 涂片染色：應(yīng)具備最基本的兩種染色技術(shù)，即革蘭氏染色和抗酸染色。 1 革蘭染色：革蘭染色報告必須包括染色反應(yīng)或微生物種類和類別，描述物種的形態(tài)或結(jié)構(gòu)。如革蘭染色見到革蘭陽性球菌，呈葡萄狀排列；又如革蘭染色見到真菌小分生孢子及菌絲。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命涂片染色 2.抗酸染色：抗酸染色報告應(yīng)顯示找到或未找到或

22、可疑抗酸桿菌三種結(jié)果，報告中應(yīng)以加號體現(xiàn)標(biāo)本中抗酸桿菌的存在量。如找到抗酸桿菌+；見到染色不典型抗酸桿菌+，建議再送標(biāo)本。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命細(xì)菌鑒定 趨向性鑒定試驗(yàn) 革蘭陽性球菌:觸酶試驗(yàn)，凝固酶試驗(yàn) 革蘭陽性球菌:氧化酶試驗(yàn) 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命血清學(xué)試驗(yàn) 腸道致病菌生化特征符合的前提下必須有血清學(xué)的試驗(yàn)作最后確認(rèn)，基層細(xì)菌室應(yīng)具備1-3項血清試劑。 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命血清學(xué)鑒定 1.志賀氏菌多價和單價凝集血清： 2.沙門氏菌多價和單價凝集血清 3.致病性大腸桿菌多價和單價凝結(jié)血清 4. 耶爾森氏菌凝集血清臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命真菌檢

23、測 1每一基層實(shí)驗(yàn)室必須開展真菌涂片，報告臨床是否找到真菌；是否見到真菌菌絲；從形態(tài)辨別曲菌或毛霉菌。 2開展真菌分離培養(yǎng)，應(yīng)具備最基本的沙保弱培養(yǎng)基或用顯色培養(yǎng)基。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命參考CLSI M2 M7 M42 M47從以下7方面提出建議 標(biāo)本采集和運(yùn)送的規(guī)范； 培養(yǎng)前標(biāo)本質(zhì)量檢測規(guī)范； 標(biāo)本接種規(guī)范； 細(xì)菌鑒定基本流程規(guī)范； 細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)規(guī)范；細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)規(guī)范； 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制； 無菌體液細(xì)菌報告規(guī)范； 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命藥敏標(biāo)準(zhǔn)藥敏標(biāo)準(zhǔn) 1. 用用CLS指南推薦的指南推薦的KB藥敏標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行常藥敏標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行常規(guī)藥敏試驗(yàn)判斷。規(guī)藥敏試驗(yàn)判斷。 2.根

24、據(jù)根據(jù)CLSI更新及時替換應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)。更新及時替換應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)。 3.根據(jù)根據(jù)CLSI推薦的方法，開展重要耐藥菌推薦的方法，開展重要耐藥菌的檢測，如的檢測，如MRSA、VRE、HLARE、ESBL。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命參考CLSI M2 M7 M42 M47從以下7方面提出建議 標(biāo)本采集和運(yùn)送的規(guī)范； 培養(yǎng)前標(biāo)本質(zhì)量檢測規(guī)范； 標(biāo)本接種規(guī)范； 細(xì)菌鑒定基本流程規(guī)范； 細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)規(guī)范； 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制； 無菌體液細(xì)菌報告規(guī)范； 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命質(zhì)量控制的規(guī)范化 1藥物敏感試驗(yàn)的質(zhì)量控制：應(yīng)包括30天的初始質(zhì)量穩(wěn)定測試；每周一次的常規(guī)質(zhì)量控制；5天

25、的糾控程序。 2鑒定試劑質(zhì)量控制：購入新的試劑；在更換批號；更換生產(chǎn)廠家；結(jié)果發(fā)生異常等情況時均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制。 3染色液質(zhì)量控制：應(yīng)包括染色結(jié)果陽性和陰性的對照物及染色液污染的質(zhì)量控制。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命質(zhì)量控制內(nèi)容 4分離培養(yǎng)基：如血瓊脂和巧克力，用肺炎鏈球菌、B-溶血和草綠色溶血的鏈球菌、流感嗜血桿菌、等苛養(yǎng)細(xì)菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株或經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化試劑已證實(shí)結(jié)果正確的菌株進(jìn)行測試，判斷其分離能力。 5.培養(yǎng)箱的質(zhì)量控制：每天第一個開箱和最后離開實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)對培養(yǎng)箱的溫度作記錄；CO2培養(yǎng)箱還應(yīng)記錄CO2的含量。 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命質(zhì)量控制內(nèi)容 6冰箱溫度記錄：按每一冰箱存放的物品不同設(shè)置不同的質(zhì)控范圍，特別對低溫冰箱；每天記錄一次。 7自動化設(shè)備：按廠家提供的SOP文件進(jìn)行質(zhì)控；在設(shè)備軟件升級或修改版本時均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制程序。臨床微生物實(shí)驗(yàn)室必須進(jìn)行規(guī)范化革命參考CLSI M2 M7 M42 M47從以下7方面提出建議 標(biāo)本采集和運(yùn)送的規(guī)范； 培養(yǎng)前標(biāo)本質(zhì)量檢測規(guī)范； 標(biāo)本接種規(guī)范； 細(xì)菌鑒定基本流程規(guī)范； 細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)規(guī)范； 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制； 細(xì)菌報