JC整理細(xì)胞生物學(xué)復(fù)習(xí)完整版DOC

1、細(xì)胞生物學(xué)第一章歷史與展望細(xì)胞生物學(xué)研究細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能和生活史。當(dāng)代生物科學(xué)四大基礎(chǔ)學(xué)科：細(xì)胞,分子,神經(jīng)生物學(xué)和生態(tài)學(xué)1. 細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容分三個層次：1) 顯微水平，光學(xué)顯微鏡下可見的結(jié)構(gòu)。2) 超微水平，電子顯微鏡下可見的結(jié)構(gòu)。3) 分子水平，細(xì)胞結(jié)構(gòu)的分子組成，及其在生命活動中的作用。2. 細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)：1590年J.和乙Janssen父子制作第一臺復(fù)式顯微鏡，放大倍數(shù)不超過10倍。1665年英國人Robert Hooke出版顯微圖譜。觀察了軟木，并首次用cells來描述“細(xì) 胞”。1831年R Brown在蘭科植物表皮細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞核。1836年GG. Valentin在動物神

2、經(jīng)細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞核與核仁。3. 細(xì)胞學(xué)說Cell Theory 通常認(rèn)為施萊登(MJ. Schleiden )和施旺(T. Schwann)正式提 出了細(xì)胞學(xué)說。1838年 Schleiden 發(fā)表“植物發(fā)生論” ;Schwann 提出了 “細(xì)胞學(xué)說”(Cell Theory) ； 1939 年發(fā)表了“關(guān)于動植物結(jié)構(gòu)和生長一致性的顯微研究”。4. 細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)研究：1932年德國人E. Ruska和M. Knoll發(fā)明透射電鏡Cytology發(fā)展為 Cell Biology 。5. 分子細(xì)胞生物學(xué)時代：1953年,JD. Wats on和FHC. Cric k提出DNA雙螺旋模型。與Wilk

3、 ins分享1962年諾貝爾生理學(xué)與醫(yī)學(xué)獎 。1958年Crick提出分子遺傳的“中心法則”。1961-1964年Nirenberg 等破譯遺傳密碼。國家科技圖書文獻(xiàn)中心(NSTL EBSCOhost外文全文數(shù)據(jù)庫Springer外文電子期刊第二章細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)光學(xué)顯微鏡：以可見光（或紫外線）為光源。電子顯微鏡：以電子束為光源。1. 光學(xué)顯微鏡：（1）普通光學(xué)顯微鏡：構(gòu)成：照明系統(tǒng) 光學(xué)放大系統(tǒng) 機(jī)械裝置（2）熒光顯微鏡（3）激光共聚焦掃描顯微境LCSM（4）暗視野顯微鏡（5）相差顯微鏡（6） 偏光顯微鏡（7）微分干涉差顯微鏡（DIC）（ 8）倒置顯微鏡2. 電子顯微鏡（1）透射電子顯微鏡

4、TEM（2）掃描電子顯微鏡（3）掃描隧道顯微鏡1）超薄切片：用于電鏡觀察的標(biāo)本須制成厚度僅 50nm的超薄切片，用超薄切片機(jī)制作。通 常以鋨酸和戊二醛固定樣品，丙酮逐級脫水，環(huán)氧樹脂包埋，以熱膨脹或螺旋推進(jìn)的方式切 片，重金屬（鈾、鉛）鹽染色。2）負(fù)染技術(shù)：用重金屬鹽（如磷鎢酸）染色；吸去染料干燥后，樣品凹陷處鋪了一層重金屬鹽，而凸的出地方?jīng)]有染料沉積，從而出現(xiàn)負(fù)染效果，分辨力可達(dá)1.5 nm左右。3）冰凍蝕刻freeze-etching :亦稱冰凍斷裂。標(biāo)本置于干冰或液氮中冰凍。然后斷開，升 溫后，冰升華，暴露斷面結(jié)構(gòu)。向斷面噴涂一層蒸汽碳和鉑。然后將組織溶掉，把碳和鉑的 膜剝下來，此膜即為

5、復(fù)膜（replica ）斷面的三種處理方法：蝕刻、不蝕刻、深度蝕刻3顯微操作技術(shù)：是在倒置顯微鏡下利用顯微操作器進(jìn)行細(xì)胞或早期胚胎操作的一種方法。 包括細(xì)胞核移植、顯微注射、嵌合體技術(shù)、胚胎移植以及顯微切割等。第三章細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交1. 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（cell culture ）是指細(xì)胞的體外培養(yǎng)。即在無菌條件下，把動物和植物的 細(xì)胞從有機(jī)體分離出來，在模擬體內(nèi)的環(huán)境中，給以營養(yǎng)物質(zhì)，使細(xì)胞不斷生長，繁殖或傳 代，借以觀察細(xì)胞生長，分裂以及細(xì)胞衰老，死亡等生命現(xiàn)象。2. 細(xì)胞株（cell strain ）:從原代培養(yǎng)細(xì)胞群中篩選出的具有特定性質(zhì)或標(biāo)志的細(xì)胞群， 能夠繁殖50代左右，在培養(yǎng)過程

6、中其特征始終保持。3. 細(xì)胞系（cell line ）:從腫瘤組織培養(yǎng)建立的細(xì)胞群或培養(yǎng)過程中發(fā)生突變或轉(zhuǎn)化的細(xì) 胞，在培養(yǎng)條件下可無限繁殖4. 克隆(clone ):亦稱無性繁殖系或簡稱無性系。對細(xì)胞來說，克隆是指由同一個祖先細(xì) 胞通過有絲分裂產(chǎn)生的遺傳性狀一致的細(xì)胞群。5. 動物細(xì)胞培養(yǎng)：細(xì)胞培養(yǎng)方式大致可分為兩種：群體培養(yǎng)(mass culture )、克隆培養(yǎng)(clonal culture )群體培養(yǎng)：將含有一定數(shù)量細(xì)胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中，讓細(xì)胞貼壁生長，匯合后形成均勻的 單細(xì)胞層。6. 細(xì)胞融合：通過培養(yǎng)和誘導(dǎo)，兩個或多個細(xì)胞合并成一個雙核或多核細(xì)胞的過程稱為細(xì)胞融(cell fus

7、ion )或細(xì)胞雜交(cellhybridization)。7. 基因型相同的細(xì)胞融合成的雜交細(xì)胞稱為同核體(homokaryon);來自不同基因型的雜交 細(xì)胞則稱為異核體(heterokaryon )。8. 同種細(xì)胞在培養(yǎng)時2個靠在一起的細(xì)胞自發(fā)合并，稱 自發(fā)融合；異種間的細(xì)胞必須經(jīng)誘導(dǎo) 劑處理才能融合，稱誘發(fā)融合。9. 誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法：生物方法(病毒)、化學(xué)方法(聚乙二醇 PEG、物理方法(電激 和激光)。某些病毒如：仙臺病毒、副流感病毒和新城疫雞瘟病毒的被膜中有融合蛋白(fusion protein )，可介導(dǎo)病毒同宿主細(xì)胞融合，也可介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞的融合，因此可以用紫外線滅活的此類病

8、毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合?；瘜W(xué)和物理方法可造成膜脂分子排列的改變， 去掉作用因素之后，質(zhì)膜恢復(fù)原有的有序結(jié)構(gòu)，在恢復(fù)過程中便可誘導(dǎo)相接觸的細(xì)胞發(fā)生融合。第四章生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)1. 細(xì)胞化學(xué)技術(shù)：組織化學(xué)或細(xì)胞化學(xué)染色(histochemical or cytochemical staining )是利用染色劑可同細(xì)胞的某種成分發(fā)生反應(yīng)而著色的原理，對某種成分進(jìn)行定性或定位研究的技術(shù)。利用這種方法對細(xì)胞的各種成分幾乎都能顯示，包括有無機(jī)物、醛、蛋白質(zhì)、糖類、脂類、核酸、酶等。2. 固定物理固定：血膜空氣快速干燥、冷凍干燥?；瘜W(xué)固定。3. 顯示方法：金屬沉淀法Schiff反應(yīng)聯(lián)苯胺反應(yīng)脂溶染色法茚三

9、酮反應(yīng)4. 免疫細(xì)胞化學(xué)(immu no cytochemistry )是根據(jù)免疫學(xué)原理，利用抗體同特定抗原專一結(jié)合，對抗原進(jìn)行定位測定的技術(shù)?？乖饕獮榇蠓肿踊蚺c大分子相結(jié)合的小分子；抗體則是 由漿細(xì)胞針對特定的抗原分泌的丫球蛋白。如果將抗體結(jié)合上標(biāo)記物，再與組織中的抗原發(fā) 生反應(yīng)，即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。常用的標(biāo)記物有熒光素和酶：免疫熒光法、酶標(biāo)免疫法。5顯微光譜分析技術(shù)：細(xì)胞中有一些成分具有特定的吸收光譜，核酸、蛋白質(zhì)、細(xì)胞色素、 維生素等都有自己特征性的吸收曲線。 有的成分經(jīng)組織化學(xué)染色后，對可見光有特定的吸收 光譜。根據(jù)細(xì)胞成分所具有的這種特性，可利用顯微分

10、光光度計(jì)對某些成分進(jìn)行定位、 定性， 甚至定量測定。6. 放射自顯影術(shù)：用于研究標(biāo)記化合物在機(jī)體、組織和細(xì)胞中的分布、定位、排出以及合成、 更新、作用機(jī)理、作用部位等等。原理：將放射性同位素標(biāo)記的化合物導(dǎo)入生物體內(nèi)，經(jīng)過 一段時間后，制取切片，涂上鹵化銀乳膠，經(jīng)放射性曝光，使乳膠感光。這種技術(shù)與電鏡樣 品處理，則為電鏡放射自顯影。7. 雜交技術(shù)：具有互補(bǔ)核苷酸序列的兩條單鏈核苷酸分子片段，在適當(dāng)條件下，通過氫鍵結(jié)合，形成DNA-DNADNA-RN或RNA-RN雜交的雙鏈分子。這種技術(shù)可用來測定單鏈分子核苷 酸序列間是否具有互補(bǔ)關(guān)系。（1）原位雜交（in situ hybridization ）

11、:用于檢測染色體上的特殊DN序列。最初是使用放射性DN探針，后來又發(fā)明了免疫探針法。（2） Nouthern雜交：是體外分析特異DN序列的方法，操作時先用限制性內(nèi)切酶將核 DNA或線粒體DNAH成 DNZ片段，經(jīng)凝膠電泳分離后，轉(zhuǎn)移到醋酸纖維薄膜上，再用探針雜交，通過放射自顯影， 即可辨認(rèn)出與探針互補(bǔ)的特殊核苷序列將 RNA專移到薄膜上，用探針雜交，則稱為 Northern 雜交。8. PCR 技術(shù) PCR卩：polymerase chain reaction。反應(yīng)體系：樣品 DNA 引物（primer ）, 約15-20個核苷酸；4種dNTPTag DNAS合酶，最適作用溫度7580C，短時

12、間在95C下 不失活。緩沖體系和Mg2+反應(yīng)過程：變性：94C ;退火4565C :延伸：72C;重復(fù) “變性一一退火一一延伸”過程20-30次循環(huán)。9. 離心技術(shù)是分離細(xì)胞器及各種大分子基本手段。轉(zhuǎn)速為1025kr/min的離心機(jī)稱為高速離心機(jī)。轉(zhuǎn)速25kr/mi n ,離心力89Kg者稱為超速離心機(jī)。超速離心機(jī)的最高轉(zhuǎn)速可達(dá) 100000r/min，離心力超過 500Kg（1）差速離心 Differentialcentrifugation 特點(diǎn)：介質(zhì)密度均一；速度由低向高，逐級離心。用途：分離大小相差懸殊的細(xì)胞和細(xì)胞器。沉降順序：核線粒體溶酶體與過氧化物酶體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體核蛋白體。可將細(xì)胞

13、器初步分離，常需進(jìn)一步通過密度梯度離心再行分離純化。（2）密度梯度離心：用介質(zhì)在離心管內(nèi)形成一連續(xù)或不連續(xù)的密度梯度，將細(xì)胞混懸液或勻漿置于介質(zhì)的頂部，通過離心力場的作用使細(xì)胞和細(xì)胞成分分層、分離。類型：速度沉降、等密度沉降。常用介質(zhì)：氯化銫、蔗糖、多 聚蔗糖。分離活細(xì)胞的介質(zhì)要求：1）能產(chǎn)生密度梯度，且密度高時，粘度不高；2）PF中性或 易調(diào)為中性；3）濃度大時滲透壓不大；4）對細(xì)胞無毒。10. 流式細(xì)胞術(shù)：用途：對單個細(xì)胞進(jìn)行快速定量分析與分選的一門技術(shù)包被細(xì)胞的液流稱 為鞘液，所用儀器稱為流式細(xì)胞計(jì)11. 細(xì)胞電泳：原理：在一定PH直下細(xì)胞表面帶有凈的正或負(fù)電荷，能在外加電場的作用下發(fā)生

14、泳動。各種細(xì)胞或處于不同生理狀態(tài)的同種細(xì)胞荷電量有所不同，故在一定的電場中的泳動速度不同。用途：檢測細(xì)胞生理狀態(tài)、分離不同種類的細(xì)胞。第五章 細(xì)胞（質(zhì)）膜及表面結(jié)構(gòu)1. 質(zhì)膜（plasma membrane）包在細(xì)胞外面所以又稱細(xì)胞膜。圍繞各種細(xì)胞器的膜，稱為細(xì) 胞內(nèi)膜。 質(zhì)膜和內(nèi)膜在起源、結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成的等方面具有相似性，故總稱為生物膜（biomembrane）。生物膜是細(xì)胞進(jìn)行生命活動的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。質(zhì)膜表面寡糖鏈形成細(xì)胞外被（cell coat ）或糖萼（glycocalyx ）。質(zhì)膜下的表層溶膠中具有細(xì)胞骨架成分組成的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，除對質(zhì)膜有支持作用外，還與維持質(zhì)膜的功能有關(guān)，所以這部分細(xì)

15、胞骨架又稱為膜骨架。細(xì)胞外被、質(zhì)膜和表層胞質(zhì)溶膠 構(gòu)成細(xì)胞表面。2. 膜脂主要包括磷脂、糖脂和膽固醇三種類型：（1）磷脂（2）鞘磷脂（sphingomyelin，SM 在腦和神經(jīng)細(xì)胞膜中特別豐富。原核細(xì)胞、植物中沒有鞘磷脂。 （3）糖脂：最簡單的糖脂是半乳糖腦苷脂，在髓鞘的多層膜中含量豐富；變化最多、最復(fù)雜的糖脂是神經(jīng)節(jié)苷脂（p43）,神經(jīng)節(jié)苷脂是神經(jīng)元質(zhì)膜中具有特征性的成分。（4）膽固醇：主要存在真核細(xì)胞膜上，其功 能是提高雙脂層的力學(xué)穩(wěn)定性，調(diào)節(jié)雙脂層流動性，降低水溶性物質(zhì)的通透性。（5）脂質(zhì)體（liposome）:是一種人工膜。人工脂質(zhì)體可用于：轉(zhuǎn)基因制備的藥物 研究生物膜的特性3. 膜

16、蛋白：是膜功能的主要體現(xiàn)者。根據(jù)膜蛋白與脂分子的結(jié)合方式，可分為：整合蛋白（integral protein） /膜內(nèi)在蛋白,夕卜周蛋白（peripheral protein ）,脂錨定蛋白（lipid-a nchored prote in ）脂錨定蛋白可以分為兩類：糖磷脂酰肌醇連接的蛋白；另一類脂錨定蛋白與插入質(zhì)膜內(nèi)小葉的長碳?xì)滏溄Y(jié)合。4. 質(zhì)膜的流動鑲嵌模型 根據(jù)Fluid-mosaic model :細(xì)胞膜由流動的雙脂層和嵌在其中的蛋 白質(zhì)組成。磷脂分子以疏水性尾部相對，極性頭部朝向水相組成生物膜骨架；蛋白質(zhì)或嵌在雙脂層表面， 或嵌在其內(nèi)部，或橫跨整個雙脂層，表現(xiàn)出分布的不對稱性。5.

17、質(zhì)膜的流動性：由膜脂和蛋白質(zhì)的分子運(yùn)動兩個方面組成。（1）膜脂分子的運(yùn)動：側(cè)向擴(kuò)散運(yùn)動：同一平面上相鄰的脂分子交換位置。旋轉(zhuǎn)運(yùn)動：圍繞與膜平面垂直的軸進(jìn)行快速旋轉(zhuǎn)。擺動運(yùn)動：圍繞與膜平面垂直的軸進(jìn)行左右擺動。伸縮震蕩運(yùn)動：脂肪酸鏈進(jìn)行伸縮震蕩運(yùn)動。翻轉(zhuǎn)運(yùn)動：膜脂分子從脂雙層的一層翻轉(zhuǎn) 到另一層。旋轉(zhuǎn)異構(gòu)化運(yùn)動：脂肪酸鏈圍繞C-C鍵旋轉(zhuǎn)。（2）影響膜脂流動性的因素 膽固醇：膽固醇的含量增加會降低膜的流動性。脂肪酸鏈的飽和度：脂肪酸鏈所含雙鍵越多 越不飽和，使膜流動性增加。脂肪酸鏈的鏈長：長鏈脂肪酸相變溫度高，膜流動性降低。卵磷脂/鞘磷脂：該比例高則膜流動性增加，是因?yàn)榍柿字扯雀哂诼蚜字?-6

18、 倍）。其 他因素：溫度、酸堿度、離子強(qiáng)度等。（3）膜蛋白的分子運(yùn)動：主要有側(cè)向擴(kuò)散和旋轉(zhuǎn)擴(kuò)散 兩種運(yùn)動方式。6. 膜流動性的生理意義：質(zhì)膜的流動性是保證其正常功能的必要條件當(dāng)膜的流動性低于一 定的閾值時，許多酶的活動和跨膜運(yùn)輸將停止，反之如果流動性過高，又會造成膜的溶解.利 用細(xì)胞融合技術(shù)觀察蛋白質(zhì)運(yùn)動.7. 膜的不對稱性：質(zhì)膜內(nèi)外兩層的組分和功能的差異，稱為膜的不對稱性。膜脂的不對稱性：同一種脂分子在脂雙層中呈不均勻分布。膜脂的不對稱性還表現(xiàn)在膜表面具有膽固醇和鞘磷脂等形成的微結(jié)構(gòu)域一一脂筏。復(fù)合糖的不對稱性：糖脂和糖蛋白只分布于細(xì)胞膜的外表面。膜蛋白的不對稱性：每種膜蛋白分子在細(xì)胞膜上都

19、具有特定的方向性和分布的區(qū)域性。8. 脂筏lipid raft:富含膽固醇和鞘磷脂的微結(jié)構(gòu)域(microdomain )。9. 細(xì)胞表面的特化結(jié)構(gòu)女口：膜骨架、鞭毛和纖毛、微絨毛及細(xì)胞的變形足等等，分別與細(xì)胞 形態(tài)的維持、細(xì)胞運(yùn)動、細(xì)胞的物質(zhì)交換等功能有關(guān)。10. 細(xì)胞外被：動物細(xì)胞表面的一層富含糖類物質(zhì)的結(jié)構(gòu)，稱為細(xì)胞外被或糖萼作用：保護(hù)， 細(xì)胞通信，并與細(xì)胞表面的抗原性有關(guān)。11. 膜骨架作用：維持質(zhì)膜的形狀并協(xié)助質(zhì)膜完成多種生理功能。成熟的哺乳動物血紅細(xì)胞沒有核和內(nèi)膜系統(tǒng)，是研究膜骨架的理想材料。紅細(xì)胞經(jīng)低滲處理，細(xì)胞破裂釋放出內(nèi) 容物，留下一個保持原形的空殼，稱為 血影(ghost )

20、。12. 經(jīng)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析，血影成分主要有：血影蛋白錨蛋白帶三蛋白 血型糖蛋白13. 質(zhì)膜的特化結(jié)構(gòu)：質(zhì)膜常帶有許多特化的附屬結(jié)構(gòu)。如：微絨毛、褶皺、纖毛、鞭毛等等第六章細(xì)胞骨架1. 真核細(xì)胞核有核骨架一核纖層體系：廣義包括細(xì)胞質(zhì)骨架，細(xì)胞核骨架，細(xì)胞膜骨架和細(xì)胞外基質(zhì).狹義指細(xì)胞質(zhì)骨架，指通過整個細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的微絲(microfilament )微管(microtubule )和中間纖維(intemediate filament)相互連接，構(gòu)成的復(fù)雜的纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu).均由單體蛋白以較弱的非共價鍵結(jié)合在一起，構(gòu)成纖維型多聚體微絲確定細(xì)胞表 面特征，使細(xì)胞能夠運(yùn)動和收縮微管確定膜性細(xì)胞

21、器的位置和作為膜泡運(yùn)輸?shù)膶?dǎo)軌中間 纖維使細(xì)胞具有張力和抗剪切力2. 微絲microfilament , MF又稱肌動蛋白纖維actin filament，是由球形具有極性的肌動 蛋白（Gactin ）單體形成的多聚體螺旋。3. 微絲的裝配溶液中ATP-肌動蛋白的濃度處于臨界濃度時，ATP-肌動蛋白在（+）端添加，而從（-）端分離，表現(xiàn)出“踏車”現(xiàn)象（tread milling ）。細(xì)胞松弛素（cytochalasin ）可切斷微絲纖維，并結(jié)合在微絲末端抑制肌動蛋白加合到微絲纖維上，特異性的抑制微絲功能。鬼筆環(huán)肽（phalloidin ）與微絲能夠特異性的結(jié)合，使微絲纖維穩(wěn)定而抑制其解聚功 能。

22、熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可特異性的顯示微絲。4. 微絲結(jié)合蛋白分為以下類型：1.核化蛋白單體2.封端蛋白3.單體聚合蛋白4.微絲解聚蛋白5. 交聯(lián)蛋白6.纖維切斷蛋白7.膜結(jié)合蛋白8.隱蔽蛋白5. 肌肉的組成：由肌原纖維組成，肌原纖維包括粗肌絲和細(xì)肌絲，粗肌絲主要成分是肌球蛋白，細(xì)肌絲的主要成分是肌動蛋白、原肌球蛋白和肌鈣蛋白。肌肉收縮的基本單位是肌小節(jié)（sarcomere ）。肌小節(jié)是相鄰兩Z線間的單位.肌球蛋白（myosin）屬于馬達(dá)蛋白，趨向微 絲的（+）極。（1）原肌球蛋白（tropomyosin.Tm ）主要作用是加強(qiáng)和穩(wěn)定肌動蛋白絲，抑 制肌動蛋白與肌球蛋白結(jié)合。（2）肌鈣蛋白（trop

23、onin,Tn ）主要作用是調(diào)節(jié)肌肉收縮.（3） 肌肉的收縮6. 微絲的功能：微絲除參與形成肌原纖維外還具有以下功能：1.形成應(yīng)力纖維（stressfiber ）:結(jié)構(gòu)類似肌原纖維，使細(xì)胞具有抗剪切力。 2.形成微絨毛。3.細(xì)胞的變形運(yùn)動。4. 胞質(zhì)分裂；5.頂體反應(yīng)；6.其他功能：抑制微絲的藥物（細(xì)胞松弛素）可增強(qiáng)膜的流 動、破壞胞質(zhì)環(huán)流.7. 微管Microtubule, MT:微管在胞質(zhì)中形成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，作為運(yùn)輸路軌并起支撐作用。微管是由微管蛋白組成的管狀結(jié)構(gòu)，對低溫、高壓和秋水仙素敏感。微管和微絲一樣具有踏車行為。 秋水仙素、長春花堿抑制微管裝配。紫杉酚能促進(jìn)微管的裝配，并使已形成的微管

24、穩(wěn)定。8. 微管組織中心microtubule organizing center, MTOC中心體由兩個相互垂直的中心粒構(gòu) 成。周圍是一些無定形物質(zhì)，叫做外中心粒物質(zhì)（ PCM。中心粒由9組3聯(lián)微管構(gòu)成，具有 召集PCI的作用。9. 微管的功能：支架作用纖毛與鞭毛運(yùn)動基粒和中心粒形成紡錘體10.中間纖維 in termediate filame nts,IF: IF是最穩(wěn)定的細(xì)胞骨架成分，主要起支撐作用IF在細(xì)胞中圍繞著細(xì)胞核分布，成束成網(wǎng)，并擴(kuò)展到細(xì)胞質(zhì)膜，與質(zhì)膜相連結(jié)。11.IF類 型：(1)角蛋白(2)結(jié)蛋白又稱骨骼蛋白，存在于肌細(xì)胞中，主要功能是使肌纖 維連在一起。(3)神經(jīng)膠質(zhì)纖維

25、：起支撐作用。(4)波形纖維蛋白(5)神經(jīng)元纖維蛋白12.IF特點(diǎn)：IF沒有極性；無動態(tài)蛋白庫；裝配與溫度和蛋白濃度無關(guān)；不需要 ATP GTP 或結(jié)合蛋白的輔助。13.IF的結(jié)合蛋白IFAP: 一類在結(jié)構(gòu)和功能上與中間纖維有密切聯(lián)系，但其本身不是中間纖維結(jié)構(gòu)組分的蛋白質(zhì)。功能：使中間纖維交聯(lián)成束、成網(wǎng)，把中間纖維交聯(lián)到質(zhì)膜或其它骨架 成分上第七章細(xì)胞增值及其調(diào)控1. 由細(xì)胞分裂結(jié)束開始，經(jīng)過物質(zhì)積累過程，直到下一次細(xì)胞分裂結(jié)束所經(jīng)歷的循環(huán)過程， 叫細(xì)胞周期。分為4個期：G期S期G2期M期又稱D期.2. 細(xì)胞同步化(synchronization) 是指在自然過程中發(fā)生或經(jīng)人為處理造成的細(xì)胞周

26、期同 步化.(1 )自然同步化(2 )人工同步化:1)選擇同步化：有絲分裂選擇法細(xì)胞沉降分離法2)誘導(dǎo)同步化：DNA合成阻斷法中期阻斷法3. 減數(shù)分裂的類型：配子減數(shù)分裂或稱終端減數(shù)分裂：存在于一般動物中，是卵子和精子發(fā) 生過程的一部分；合子減數(shù)分裂或始端減數(shù)分裂：存在于原生生物和真菌中孢子減數(shù)分 裂或稱中間減數(shù)分裂：存在于高等植物和一些藻類中4. 減數(shù)分裂的特殊過程主要發(fā)生在前期I，通常分為5個時期：細(xì)線期(leptotene )， 偶線期(zygotene )，粗線期(pachytene)，雙線期(diplotene )，終變期(diak in esis )。5. 聯(lián)會復(fù)合體(synapt

27、onemal complex ， SC) :SC由兩條同源染色體沿縱軸形成，外觀呈梯 子狀。SC幫助交換的完成，SC上有重組節(jié)(recombination nodules)，是交換發(fā)生的部位。SC主要由堿性蛋白質(zhì)和RN齟成，并含有少量DNA SC形成合線期，成熟于粗線期，消失于雙 線期。在細(xì)線期或合線期加入DNA合成抑制劑，則抑制SC勺形成。CDC與細(xì)胞周期蛋白結(jié)合才具有激酶的活性，故名細(xì)胞 周期蛋白依賴性激酶CDC又被稱為CDK1可將特定蛋白磷酸化，促進(jìn)細(xì)胞周期運(yùn)行，又稱作細(xì)胞周期引擎。如將 核纖層蛋白磷酸化導(dǎo)致核纖層解體、核膜消失；將H1磷酸化導(dǎo)致染色體的凝縮等。6. 細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn) AT

28、M( ataxia telangiectasia-mutated gene)編碼一個蛋白激酶，結(jié)合在損傷的DNAt,其信號通路有兩條。激活Chk1 (checkpoint kinase),使CDC2的Ser216 磷酸化失去活性，抑制M-CDI的活性，中斷細(xì)胞周期。激活Chk2,使P53被磷酸化而激活， 然后P53乍為轉(zhuǎn)錄因子，導(dǎo)致P2啲表達(dá)，P21抑制G1-S期CD的活性，中斷細(xì)胞周期。第八章細(xì)胞核與染色體、核糖體1. 細(xì)胞核結(jié)構(gòu)：核被膜核仁染色質(zhì) 核骨架。功能：遺傳信息的儲存場所，在這里 進(jìn)行基因復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄初產(chǎn)物的加工過程，從而控制細(xì)胞的遺傳和代謝活動2. 核被膜Nuclear en

29、 velope構(gòu)成：內(nèi)核膜(外核膜核周間隙(peri nuclear space )或核周池核被膜是雙層膜結(jié)構(gòu)核被膜是雙層膜結(jié)構(gòu)3. 核纖層是位于內(nèi)核膜的內(nèi)表面的纖維網(wǎng)絡(luò)由 核纖肽(lamin )構(gòu)成，核纖肽是一類中間纖 維。作用：1.可支持核膜，保持核的形態(tài)和穩(wěn)定性2.提供了染色質(zhì)和核被膜之間的連接3. 通過磷酸化和去磷酸化參與染色質(zhì)和核的組裝，核纖層在細(xì)胞分裂時呈現(xiàn)出周期性的變化4. 核孔復(fù)合體 Nuclear pore complex (NPC : NP(主要由核孔蛋白(nucleoporin ，Nup)構(gòu) 成，NP(主要由胞質(zhì)環(huán)、核質(zhì)環(huán)、輻和栓構(gòu)成5. NPC的功能：核質(zhì)交換的雙向選擇

30、性通道；NP(是一個雙功能、雙向性的親水性核質(zhì)交換通 道；雙功能表現(xiàn)在它有兩種運(yùn)輸方式：被動擴(kuò)散和主動運(yùn)輸；雙向性表現(xiàn)在既介導(dǎo)蛋白質(zhì)的 入核轉(zhuǎn)運(yùn)又介導(dǎo)PNA核蛋白(RNP的出核轉(zhuǎn)運(yùn)6. 染色質(zhì)DNA (1)3種序列：單一序列；中度重復(fù)序列(1015)；高度重復(fù)序列(>105)。(2)3種構(gòu)像：B-DNAZ-DNAA-DNA (3)3種基本元素：自主復(fù)制序列(ARS)，是DNAC制的起點(diǎn)。著絲粒序列(CEN)，含a衛(wèi)星DNA端粒序列(TEL)。酵母人工染色體 (YAC ):含上述3種成分，用于轉(zhuǎn)基因。7. 非組蛋白功能：幫助DN折疊；協(xié)助DNAC制；調(diào)節(jié)基因表達(dá)8. 核小體(nucleos

31、ome): 一種串珠狀結(jié)構(gòu)，由核心顆粒和連結(jié)線DN兩部分組成.9間期核中染色質(zhì)可分為異染色質(zhì)和常染色質(zhì)。異染色質(zhì)的特點(diǎn)：在間期核中處于凝縮狀 態(tài)，無轉(zhuǎn)錄活性、是遺傳惰性區(qū)。在細(xì)胞周期中表現(xiàn)為晚復(fù)制、早凝縮(異固縮現(xiàn)象)。 分為兩類：結(jié)構(gòu)(恒定)異染色質(zhì)、兼性(功能)異染色質(zhì)10. 巴氏小體(barr body)。雌性哺乳動物細(xì)胞中一條異固縮化的 X染色體。人的胚胎發(fā)育 到16天以后，出現(xiàn)巴氏小體。11. 著絲粒(centromere )和著絲點(diǎn)(kinetochore )是兩個不同的概念，前者指中期染色單 體相互聯(lián)系在一起的特殊部位，后者指主縊痕處兩個染色單體外側(cè)與紡錘體微管連接的部位。12.

32、 著絲粒包含3個結(jié)構(gòu)域：1、著絲點(diǎn)結(jié)構(gòu)域位2、中央結(jié)構(gòu)域3、配對結(jié)構(gòu)域13. 核型與帶型：核型：即細(xì)胞分裂中期染色體特征的總和。包括染色體的數(shù)目、大小和形態(tài) 特征等方面。帶型：染色體經(jīng)物理、化學(xué)因素處理后，再進(jìn)行分化染色，使其呈現(xiàn)特定的深 淺不同帶紋(band)的方法。分帶技術(shù)可分為兩類：一類是產(chǎn)生的染色帶分布在整個染色體 的長度上；另一類是局部性的顯帶14. 核仁(nucleolus)主要功能是轉(zhuǎn)錄rRNA和組裝核糖體單位。核仁在分裂前期消失，分裂末期又重新出現(xiàn)。核仁形態(tài)：纖維中心(fibrillarcenters ，F(xiàn)C):致密纖維組分(densefibrillar component，

33、DFC顆粒組分(granular component ，GC)15. 核糖體的結(jié)構(gòu)：含40%勺蛋白質(zhì)、60%勺RNA由兩個亞單體構(gòu)成。分為70S和80S兩種 類型。由大小兩個亞基構(gòu)成，只在以 mRN為模板合成蛋白質(zhì)時才結(jié)合在一起，肽鏈合成終 止后，大小亞單位又解離。核糖體并不是單獨(dú)工作的，而是由多個甚至幾十個串連在一條 mRN分子上，稱多聚核糖體。16. 核骨架nucleoskeleton 核基質(zhì)(nuclear matrix )或稱核骨架，為真核細(xì)胞核內(nèi)的網(wǎng)絡(luò) 結(jié)構(gòu)，是指除核被膜、染色質(zhì)、核纖層及核仁以外的核內(nèi)網(wǎng)架體系。17. 核基質(zhì)的組成：非組蛋白性纖維蛋白，10多種次要蛋白質(zhì)，包括肌動蛋

34、白和波形蛋白，后者構(gòu)成核骨架的外罩。核骨架碎片中還存在三種支架蛋白(scaffold proteins , SCI、 sen、san), sei則是dnA拓樸異構(gòu)酶u。少量 rna(占0.5%)和dna占0.8%,即：mar)少量磷脂(1.6%)和糖類(0.9%)。18. 核骨架的功能：1.為DNA勺復(fù)制提供支架2.是基因轉(zhuǎn)錄加工的場所有RN聚合酶的結(jié)合 位點(diǎn)，RNA勺合成在核骨架上進(jìn)行。3.與染色體構(gòu)建有關(guān)1 細(xì)胞連接cell junction是細(xì)胞與細(xì)胞間或細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間的聯(lián)結(jié)結(jié)構(gòu)。分為三大類，即：圭寸閉連接 (occludi ng jun cti on)、錨定連接 (an chori

35、 ng jun cti on)和通訊連接 (com muni cat ing jun cti on)。2封閉連接：存在于脊椎動物的上皮細(xì)胞間。連接區(qū)域具有蛋白質(zhì)焊接線，也稱嵴線，由跨 膜細(xì)胞粘附分子構(gòu)成。主要作用：封閉相鄰細(xì)胞間的接縫，防止溶液中的分子沿細(xì)胞間隙滲 入體內(nèi)，構(gòu)成腦血屏障和睪血屏障。3. 錨定連接：(1)粘合帶與粘合斑：粘合帶(adhesion belt):呈帶狀環(huán)繞細(xì)胞，位于緊 密連接下方。相鄰細(xì)胞間的粘合分子為 E鈣粘素。質(zhì)膜內(nèi)側(cè)有多種附著蛋白形成的致密斑。連接的細(xì)胞骨架成分為act in(肌動蛋白)。粘合斑(adhesion plaque):位于細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì) 間，粘附分

36、子為integrin (整合蛋白)、胞內(nèi)骨架成分也是actin。(2)橋粒與半橋粒：橋粒(desmosome)是相鄰細(xì)胞間形成的紐扣狀結(jié)構(gòu)。通過質(zhì)膜下的致密斑連接 中間纖維。橋粒 中間為鈣粘素(desmoglein及desmocollin)。半橋粒(hemidesmosomg：位于上皮細(xì)胞基面 與基膜之間，連接蛋白為整合素。連接的細(xì)胞內(nèi)骨架成分為角蛋白。4通訊連接：(1)間隙連接gap junction :存在于大多數(shù)動物組織。連接處有 24nm的縫隙。 基本單位稱連接子(conn exo n),由6個相同或相似的跨膜蛋白亞單位環(huán)繞而成。注射染料 證明間隙連接可允許分子量小于1.5KD的分子通

37、過，但通透性是可調(diào)節(jié)的。(2)胞間連絲plasmodesmata由穿過植物細(xì)胞壁的原生質(zhì)構(gòu)成中央有 SER形成的連絲小管。功能上與動物 細(xì)胞間的間隙連接類似。允許分子量小于800Da的分子通過，在相鄰細(xì)胞間起通訊作用。通透性可調(diào)節(jié)。某些植物病毒能制造特殊的蛋白質(zhì)，使胞間連絲的有效孔徑擴(kuò)大。5化學(xué)突觸synapse :是存在于可興奮細(xì)胞間的一種連接方式，其作用是通過釋放神經(jīng)遞質(zhì)來傳導(dǎo)興奮。由突觸前膜、突觸后膜、突觸間隙三部分組成。突觸前神經(jīng)元的突起末梢膨大呈球形，稱突觸小體。突觸小體內(nèi)有突觸小泡，內(nèi)含神經(jīng)遞質(zhì) 各類連接的比較封閉連掛緊密連接/上皮組織Q間壁連接只存在于無脊椎動物中我錨定連接&qu

38、ot;連接肌動蛋白衛(wèi)粘合帶空上皮組織2粘合斑上皮細(xì)胞基部.連接中間纖維£橋粒心心肌、表皮Q半橋粒"上皮細(xì)胞基部通訊連接衛(wèi)間隙連接"大多數(shù)動物組織中"化學(xué)突觸+-神經(jīng)細(xì)胞間和神經(jīng) 肌肉間*胞何連終植物細(xì)胞間衛(wèi)6.細(xì)胞粘附分子Cell Adhesion Molecu，CAMCAM介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞間及細(xì)胞與 ECM間的相 互作用。為糖蛋白、分為五類，分子結(jié)構(gòu)由三部分組成：胞外區(qū)，N端部分，負(fù)責(zé)與配體識別；跨膜區(qū)，多為單次跨膜；胞質(zhì)區(qū)，C端部分，與質(zhì)膜下的骨架成分直接相連，或與胞內(nèi) 的信號分子相連。多數(shù)細(xì)胞粘附分子依賴二價陽離子，如CsT, Mg2+O7細(xì)胞粘附分

39、子的作用機(jī)制有三種模式：親同性粘附；親異性粘附；通過胞外連接分子相互識別 與結(jié)合。8鈣粘素cadherin作用：介導(dǎo)細(xì)胞連接：如E鈣粘素。參與細(xì)胞分化：決定胚胎細(xì)胞間 的粘附，影響細(xì)胞分化。抑制細(xì)胞遷移哺乳動物細(xì)胞表面的主要鈣粘素分子9選擇素（selectir）屬親異性CAM;作用依賴于Ca2 ;參與白細(xì)胞與脈管內(nèi)皮細(xì)胞之間的 識別與粘合.第十章細(xì)胞外基質(zhì)EXTRACELLULAR MATRIX /ECM1. ECM是細(xì)胞外大分子構(gòu)成的網(wǎng)絡(luò)。包括：膠原、非膠原糖蛋白、氨基聚糖與蛋白聚糖、彈 性蛋白等。2. 膠原Collagen組成：由原膠原交聯(lián)而成，原膠原是三條肽鏈形成的三股螺旋，含有三種結(jié)

40、構(gòu)：螺旋區(qū)，非螺旋區(qū)及球形結(jié)構(gòu)域。功能：參與形成結(jié)締組織，如骨、韌帶、基膜、皮膚。3. 纖粘連蛋白（FN）類型：血漿FN細(xì)胞FN:多聚體，不溶，存在于EC及細(xì)胞表面。功能：FN可將細(xì)胞連接到ECMt; FN上的RGD（Arg-Gly-Asp ）序列可與細(xì)胞表面的整合素結(jié)合。人 工合成的RG三肽可抑制細(xì)胞在FN基質(zhì)上粘附。4. 層粘連蛋白（LN）功能：參與構(gòu)成基膜，是胚胎發(fā)育中出現(xiàn)最早的細(xì)胞外基質(zhì)成分。氨基聚糖（GAG GAG是重復(fù)二糖單位構(gòu)成的無分枝長鏈多糖.可分為六種：透明質(zhì)酸、硫酸 軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸乙酰肝素、肝素、硫酸角質(zhì)素。透明質(zhì)酸 （HA）是唯一不硫酸化的 GAG可結(jié)合大量水分

41、子，賦予組織一定的抗壓性。5. 蛋白聚糖proteoglycan是氨基聚糖（除HA與核心蛋白質(zhì)的共價結(jié)合物。6細(xì)胞外基質(zhì)的生物學(xué)作用：影響細(xì)胞的存活、死亡：定著依賴性：如，上皮細(xì)胞一旦脫離 了 ECM則會發(fā)生anoikis （凋亡）。決定細(xì)胞的形狀：不同細(xì)胞具有不同的細(xì)胞外基質(zhì)，介 導(dǎo)的細(xì)胞骨架組裝的狀況不同，從而表現(xiàn)出不同的形狀。調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖：定著依賴性生長（anchorage dependent growth ）?？刂萍?xì)胞的分化如成肌細(xì)胞在纖粘連蛋白上增殖并 保持未分化的表型；而在層粘連蛋白上則停止增殖，進(jìn)行分化，融合為肌管。參與細(xì)胞的 遷移:細(xì)胞的遷移依賴于細(xì)胞的粘附與細(xì)胞骨架的組裝。第一章細(xì)胞分化與凋亡1. 細(xì)胞分裂的不對稱性和細(xì)胞間的相互作用是細(xì)胞分化的兩個基本機(jī)制。全能性：一個細(xì)胞可分化為機(jī)體的所有細(xì)胞.干細(xì)胞多能干細(xì)胞單能干細(xì)胞（祖細(xì)胞）.2. 細(xì)胞間的