生物化學綜合實驗---合肥工業(yè)大學精品課程

1、生物化學綜合實驗-合肥工業(yè) 大學精品課程生物化學綜合實驗實驗指導書適用專業(yè)：生物技術(shù)、生物工程、食品科學與工程生物與食品工程學院生物科學系實驗基本情況一、實驗題目1.核酸的分離純化及性質(zhì)研究2.蛋白質(zhì)的分離純化及性質(zhì)研究3.糖蛋白的分離純化及性質(zhì)研究4.脂的分離純化及性質(zhì)研究 二、選題要求1.每小組（2個人組成一個小組）選一個實驗題目；2.實驗中所需生物材料自選，可選用多種生物材料；3.實驗內(nèi)容的安排要有一定工作量，必須包括指導書中要求運用的實驗技術(shù)。三、學生準備的要求 學生選定實驗內(nèi)容后，要寫出實驗方案，包括：實驗目的和意義；實驗方法及操作過 程（至少準備兩種方案） ；各種方法所需儀器（包括

2、設備和玻璃器皿） 、藥品及其數(shù)量。實 驗方案必須在綜合實驗前五周完成，并經(jīng)過指導教師審閱。四、綜合實驗的評分標準 學生綜合實驗成績由指導教師評定，分為優(yōu)秀、良好、中等、及格和不及格幾類。評 定依據(jù)是學生的態(tài)度、出勤率、實驗準備情況、實驗動手能力、實驗結(jié)果、以及實驗的創(chuàng) 新性上進行評分（具體見附錄1）。五、實驗報告要求綜合實驗完成后，必須提供一份實驗記錄和一份實驗報告。實驗報告形式見附錄2實驗1.核酸的分離提取及性質(zhì)研究實驗目的 核酸的分離純化是核酸制備及分析的前提和基礎，通過本實驗將學會和掌握核酸制備 的一些基本操作和方法，通過分光光度法和電泳等實驗技術(shù)研究核酸的性質(zhì)，同時掌握用RFLP技術(shù)分

3、析不同材料之間親緣關(guān)系的方法。實驗儀器與試劑 主要儀器：研缽、高速離心機、紫外分光光度計、渦旋儀、水浴鍋、微量加樣器、電泳儀、 紫外透射反射分析儀、PCR儀、試管、燒杯、試劑瓶、冰箱。主要試劑：液氮、SDS、CTAB、Tris、乙醇、巰基乙醇、EDTA、氯仿、異丙醇、HCl、 蔗糖、NaCl、苯、PCR試劑盒等。要求運用的實驗技術(shù) 紫外分光光度技術(shù)、瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)、高速離心技術(shù)、限制性內(nèi)切酶酶解技術(shù)、PCR技術(shù)等。參考書目 （僅供參考，另外可以查閱期刊雜志）1.生物化學實驗，武漢大學出版2.生物化學實驗，中國科學技術(shù)大學出版社3.生物化學實驗原理和方法，北京大學出版社實驗2.蛋白質(zhì)的分離純

4、化及性質(zhì)研究實驗目的 蛋白質(zhì)（包括酶）的性質(zhì)、結(jié)構(gòu)和功能的研究，以及生物體內(nèi)物質(zhì)代謝途徑的闡明等 都是建立在蛋白質(zhì)和酶的分離純化基礎上的。在蛋白質(zhì)的分離過程中，必須通過濃度、純 度和活性的測定來決定分離步驟的取舍。酶促反應動力學，尤其是抑制劑酶促反應動力學 是研究酶的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的一個重要方面。本實驗通過對蛋白質(zhì)（或酶）的分離純化、 濃度、純度和活性的測定、 動力學進行研究， 從而掌握蛋白質(zhì)和酶的系列研究方法和操作。實驗儀器與試劑 主要儀器：研缽、紗布、離心機、紫外分光光度計、試管、燒杯、試劑瓶、冰箱、真空泵、透析、層析柱、自動收集器、漏斗等。主要試劑：pH試紙、乙酸、硫酸、NaOH、HCI

5、、硼酸、Tris、硫酸銨、胰蛋白酶等要求運用的實驗技術(shù) 鹽析技術(shù)、離心技術(shù)、柱層析技術(shù)、紫外分光光度技術(shù)、聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)、透析技術(shù)等。參考書目（僅供參考，另外可以查閱期刊雜志）1.蛋白質(zhì)技術(shù)手冊，科學出版社2.現(xiàn)代酶學，華東理工大學出版社3.蛋白質(zhì)電泳實驗技術(shù)，科學出版社實驗3.糖蛋白的分離純化及性質(zhì)研究實驗目的 糖蛋白在功能性食品功效中有著重要作用，研究糖蛋白的性質(zhì)、功能都是建立在糖蛋 白質(zhì)分離純化基礎上的。在糖蛋白質(zhì)的分離過程中，必須掌握分級柱層析技術(shù)，進一步理 解生物化學中有關(guān)成分分離提純的基本理論。本實驗通過對糖蛋白質(zhì)進行分離純化、相對 分子質(zhì)量測定、簡單理化性質(zhì)測定等，從而掌

6、握和理解糖蛋白研究方法和操作。實驗儀器與試劑 主要儀器：研缽、紗布、離心機、層析柱、微量加樣器、水浴鍋、可見與紫外分光光度計、 試管、燒杯、試劑瓶、冰箱、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等。主要試劑：苯酚、硫酸、雙縮脲試劑、Folin-酚試劑、HCl、Tris、NaOH、乙醇、丙酮、 乙醚、牛血清、硫酸、葡萄糖、DEAE-52纖維素、SephadexG-100、透析袋等要求運用的實驗技術(shù) 柱層析技術(shù)、透析技術(shù)、離心技術(shù)、分光光度技術(shù)等。參考書目（僅供參考，另外可以查閱期刊雜志）1.生物化學實驗，武漢大學出版2.生物化學技術(shù)原理及其應用（第二版） ，武漢大學出版社3.生物化學實驗方法和技術(shù)，科學出版社實驗4.脂的分離

7、純化及性質(zhì)研究實驗目的研究作為一重要的生物大分子脂的基本性質(zhì)。脂類物質(zhì)的研究也是基于分離純化的基 礎上的。通過對脂的分離，使學生掌握非極性物質(zhì)的柱層析技術(shù)，進一步理解生物化學中 有關(guān)成分分離提純的基本理論。本實驗通過對脂類物質(zhì)進行分離純化、皂化脂與非皂化脂 的分離、脂的簡單理化性質(zhì)測定等，從而掌握和理解脂的研究方法和操作。實驗儀器與試劑 主要儀器：研缽、紗布、離心機、層析柱、索氏抽提儀、冰箱等。主要試劑：硅膠H、石油醚、乙酸乙酯、KOH甲醇、乙醇、硫酸鈉、磷鉬酸、硅膠板、B-谷甾醇等要求運用的實驗技術(shù) 索氏抽提技術(shù)、薄層層析技術(shù)、萃取技術(shù)、柱層析技術(shù)等。參考書目（僅供參考，另外可以查閱期刊雜志

8、）1.生物化學與分子生物學實驗技術(shù)，高等教育出版社2.生物化學實驗，武漢大學出版3生化實驗方法和技術(shù)（第二版） ，高等教育出版社附錄1：生物化學綜合實驗評分標準評分項目具體內(nèi)容分數(shù)備注實驗 態(tài)度（30分）出勤：滿分10分，無故 缺勤半天減5分；若缺勤 三個半天，綜合實驗不及 格。10服裝：實驗時著實驗服， 整潔。5協(xié)調(diào)：和本實驗小組成員 協(xié)調(diào)性及服從領導情況。5熱情：對所有進行的實驗 充滿熱情，積極主動實驗。5探索：實驗中勇于探索， 有反復實驗，力求準確。5實驗 操作（40分）認真預習實驗，準備相關(guān) 知識和材料，能發(fā)現(xiàn)關(guān)鍵 點。10實驗操作規(guī)范程度及動手 能力。10實驗現(xiàn)象的細心程度及記錄。5實驗過程中保持清潔及有序。5實驗結(jié)束后藥品、器具、 工作臺面上的清潔及歸 位。5具體實驗的思路及啟發(fā)性 思考。5實驗 報告（30實驗報告的完整。10實驗報告的真實。10實驗過程的評價及實驗數(shù)5附錄2：實驗報告形式封面：題目姓名 學號 班級內(nèi)容：中文題目英文題目摘要關(guān)鍵詞AbstractKey words前言：