病理科免疫組化在臨床上地應(yīng)用及其意義

1、標(biāo)準(zhǔn)病理科免疫組化在臨床上的應(yīng)用及其意義免疫組化技術(shù)是以免疫學(xué)的抗原抗體反應(yīng)為其理論基礎(chǔ)發(fā)展起來(lái)的一門(mén)方法學(xué)，在生物學(xué)領(lǐng)域尤其是在醫(yī)學(xué)的基礎(chǔ)和臨床研究中發(fā)揮重要的作用，對(duì)疾病尤其是腫瘤的診斷、鑒別診斷及發(fā)病機(jī)制的研究提供了強(qiáng)有力的手段。免疫組化技術(shù)是 20世紀(jì)70年代初Sterb Berger 在酶標(biāo)法的基礎(chǔ)上發(fā)明的，80年代在外國(guó)開(kāi)始應(yīng)用于臨床研究和診斷，90年代初在我國(guó)逐漸開(kāi)始應(yīng)用于疑難病例的診斷和鑒別診斷。隨著新技術(shù)的不斷發(fā)展，抗體種類(lèi)從研發(fā)開(kāi)始的十幾種發(fā)展到目前數(shù)百種抗體應(yīng)用于臨床科研的各個(gè)領(lǐng)域，我國(guó)在臨床病理診斷上可用抗體293種。由于抗體較昂貴，所以各院根據(jù)活檢量和病種不同選擇不同

2、的抗體，這些抗體對(duì)大部分疑難病例的診斷起到重要的輔助作用。對(duì)病人的預(yù)后及指導(dǎo)治療具有重要的意義。一、目前常用的抗體分四大類(lèi)1 .上皮性標(biāo)記物：CK high （AE3）, CK low , CK-pan , CK19 , CK7 , CK20 , EMA, CEA,-CA15-3 , SCLC , E - Caldeherin, CA125, Tg（甲狀腺球蛋白），TTF-1AFP。這些抗體陽(yáng)性，表明腫瘤組織起源于上皮組織，如果是惡性腫瘤，就是癌2 .間葉組織標(biāo)記物：SMA , Desmin , Vimentin , Lysozyme , AACT , CD68 MyoD1 , CD117 ,

3、 這些抗體陽(yáng)性，表明腫瘤組織起源于間葉組織，如果是惡性腫瘤，就是肉瘤。3 .神經(jīng)及神經(jīng)分泌標(biāo)記物：CgA , Synaptophysin , NSE , S-100 : NF （神經(jīng)纖維絲蛋白），GFAP, CD99 , CD56。4淋巴細(xì)胞標(biāo)志物：T cell 標(biāo)記物：CD3, CD45RO , CD43, CD5, CD8,CD4,ALK,GranmB , CD56。B cell 標(biāo)記物：CD-20, CD79a , CD23 , CD10 , Kappa , Lambda CD21 CD38 ,CyclinD1 , Bcl-2。文案標(biāo)準(zhǔn)其它：LCA , CD15 , CD30 , MPO

4、 , CD34 , TdT,這些抗體用于淋巴瘤 33個(gè)亞型的診斷和鑒 別診斷。二、目前開(kāi)展的系列檢查和意義1 .乳腺癌五項(xiàng)（ER、PR、C-erbB-2（Her-2） 、Ki-67、P53 ）ER、PR陽(yáng)性，90 %的病人對(duì)三苯氧胺類(lèi)藥物療效好。C-erbB-2 陽(yáng)性（2+ 3+）可服用抗Her-2基因藥物。如果 ER和PR均陰TC erbB 2強(qiáng)陽(yáng)性預(yù)示預(yù)后不好。Ki-67是細(xì)胞生長(zhǎng)指數(shù)，代表細(xì)胞周期中除G0期以外的細(xì)胞生長(zhǎng)速度。Ki-67值越高表明腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)越快，預(yù)后越不好。P53是廣譜致癌基因，在許多腫瘤中都有表達(dá)，表達(dá)值越高預(yù)后越不好。據(jù)報(bào)道，國(guó)際上目前有抗P53基因陽(yáng)性的藥物用于治

5、療腫瘤。2 .垂體腺瘤功能六項(xiàng)檢查L(zhǎng)H （促黃體生成素），F(xiàn)SH （卵泡刺激素），ACTH （促腎上腺皮質(zhì)激素），TSH （促甲狀腺素），PRL （泌乳素）GH （生長(zhǎng)激素）。根據(jù)某一種抗體陽(yáng)性表達(dá)進(jìn)行術(shù)后藥物治療。3 .惡性腫瘤的Ki-67和P53常規(guī)檢查目前的研究表明，大部腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移取決于Ki-67值和P53值，而與腫瘤的組織的分型關(guān)系不是十分密切，如中分化腺癌，如果 Ki-67和P53值超過(guò)50%,預(yù)后不佳，相反，如腫瘤的組織分型為低分化腺癌，而Ki-67和P53值較低，預(yù)后也會(huì)較中分化或高分化癌的預(yù)后稍好。4 .GIST （胃腸道間質(zhì)瘤）和 EGIST （胃腸道外間質(zhì)瘤）的診斷G

6、IST是90年代新發(fā)現(xiàn)的腫瘤，過(guò)去均診斷為平滑肌瘤或平滑肌肉瘤，現(xiàn)在經(jīng)過(guò)一組免疫組化可將其診斷，GIST的生物學(xué)形為一般無(wú)良性，因?yàn)樾∮?2cm的GIST偶而也有轉(zhuǎn)移。其良惡性程度取決于腫瘤的大小和核分裂像，國(guó)際確定 GIST侵襲行為危險(xiǎn)性的推薦方案如下：危險(xiǎn)程度大小核分裂數(shù)文案標(biāo)準(zhǔn)彳艮彳氐<2cm <5/50HPF低 2-5cm <5/50HPF中等 <5cm5-10cm 6-10/50HPF<5/50HPF高 >5cm>10cm 不計(jì) >5/50HPF 不計(jì) >10/50HPFGIST 的免疫組化結(jié)果為：CD117 (+)、CD34 (

7、士)、S-100 (士)Actin (士)、Desmin(-) 。CD117陽(yáng)性可用格林衛(wèi)治療，且效果較好。5 .淋巴瘤的WHO分型淋巴瘤 WHO最新分型有33個(gè)亞型，每個(gè)亞型的預(yù)后和治療方案均有所不同，而淋巴瘤的診斷和分型又是極其困難的，是病理中的難中之難，“沒(méi)有一個(gè)病理學(xué)家不在淋巴瘤上犯錯(cuò)誤”這是我國(guó)一位病理名家說(shuō)得話，美國(guó)的淋巴瘤誤診率為33%,所以診斷淋巴瘤的免疫組化方案必須“雙份套餐式”的，即每一種組織的標(biāo)記物必須用2種以上的抗體，如我們?cè)\斷 B細(xì)胞淋巴瘤，必須有CD20和CD79a陽(yáng)性正面證實(shí)，同時(shí)還需要用CD3陰性反面來(lái)證實(shí)，因此診斷淋巴瘤需8-10種左右的抗體，才能準(zhǔn)確地反應(yīng)出

8、淋巴瘤各種亞型的信息。三、免疫組化在腫瘤靶向治療中的作用1 .目前腫瘤的靶向治療已經(jīng)引起人們的重視，許多靶向藥物逐漸應(yīng)用于臨床治療。第一個(gè)靶向治療的藥物是治療淋巴瘤的抗CD20嵌和性抗體是 Rituxan。抗腫瘤單抗偶聯(lián)物Zevalin(Ibritumomab tiuxetan )用于Rituxan治療無(wú)效或復(fù)發(fā)的低度惡性B細(xì)胞瘤。2 .抗血管皮生長(zhǎng)因子 (VEGF)重組人源化單抗 Avastin(Bevacizumab) 有抗腫瘤新生血管形成作 用，最近被批準(zhǔn)為治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的一線藥物。3 .抗表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)嵌合性單抗 Erbitux (Cetuximab )用于治療標(biāo)準(zhǔn)化

9、療無(wú)效，且 EGFR陽(yáng)性的轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌。文案標(biāo)準(zhǔn)4 .抗Ckit(CD117)的藥物格林衛(wèi)對(duì)治療大部分GIST有明顯的療效。5 . Herceptin 是一種人源化單抗用于治療Her-2高表達(dá)的乳腺癌和其它實(shí)體瘤如卵巢癌、前列腺癌和非小細(xì)胞肺癌。因?yàn)橛辛诉@些靶向藥物的治療，因此在病理上檢測(cè)這些靶基因的表達(dá)對(duì)于指導(dǎo)臨床用藥非常有意義。34BE12 :角收白抗體，陽(yáng)性提示良性病變。前列腺抗基底細(xì)胞特異抗體(34BE12 )是一種高分子量細(xì)胞角蛋白抗體，它標(biāo)記前列腺基底細(xì)胞陽(yáng)性率高，而惡性分泌上皮細(xì)胞陰性， 前列腺基底細(xì)胞存在與否是判斷癌與非癌的一個(gè)重要標(biāo)志，34BE12明確陽(yáng)性者都應(yīng)診斷良性，

10、侵潤(rùn)性前列腺癌34BE12陰性。P63:抑癌基因，陽(yáng)性提示良性病變。是一種新近認(rèn)識(shí)的基底細(xì)胞標(biāo)記物，與P53具有同源性，染基底細(xì)胞比34BE12更敏感，因P53在良性增生、萎縮、腺病和不典型增生中可有假陰性，而P63幾乎均呈陽(yáng)性，在疑難的前列腺病變中應(yīng)用P63或P63加34BE12的混合試劑檢測(cè)對(duì)診斷更有幫助。P504S : 一前列腺癌的新標(biāo)記，即使在小的針刺活檢中癌的P504S陽(yáng)性率仍為95%,而良性腺體(萎縮、腺病、硬化性腺病和基底細(xì)胞增生)均陰性，與 34BE12及P63染色結(jié)果正相反， 三者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)比明顯，對(duì)前列腺良惡性病變的診斷很有幫助。Ki 67:為細(xì)胞增值的一種標(biāo)記，在細(xì)胞周期

11、G1、S、G2、M期均有表達(dá)，G0期缺如，其和許多腫瘤分化程度、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移、預(yù)后密切相關(guān)。文案標(biāo)準(zhǔn)PCNA :增埴細(xì)胞核抗原。CEA:多數(shù)腺癌表達(dá)。Rb ： （retinoblastoma視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤）基因是腫瘤抑制基因，調(diào)節(jié)細(xì)胞周期。P53：在免疫組化中均為突變型，陽(yáng)性率越高，預(yù)后約差。野生型半衰期很短。Nm23 :是轉(zhuǎn)移抑制基因，其陽(yáng)性表達(dá)和腫瘤轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。E-Ca, E鈣粘附蛋白，介導(dǎo)細(xì)胞間粘連作用的跨膜糖蛋白，其功能喪失引起細(xì)胞之間連接的破壞，主要用于腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移方面的研究。PS2:（雌激素調(diào)節(jié)蛋白），其表達(dá)和ER表達(dá)有關(guān)，可作為分泌治療和預(yù)后判斷的指標(biāo)之一。CK18 :低分子量

12、角蛋白，主要標(biāo)記各種單層上皮包括腺上皮，而復(fù)層鱗狀上皮常陰性，主要用 于腺癌診斷。CK19 :分布于單層上皮和間皮，常用于腺癌診斷，肝細(xì)胞不表達(dá)，而膽管為陽(yáng)性反應(yīng)。Hepparl :肝細(xì)胞抗原，正常肝細(xì)胞和高分化肝細(xì)胞癌陽(yáng)性，低分化肝細(xì)胞癌多弱陽(yáng)性或陰性。CK20 :用于胃腸道腺癌、卵巢黏液性腫瘤、皮膚 Merkel細(xì)胞癌診斷。鱗癌、乳腺癌、肺癌、文案標(biāo)準(zhǔn)子宮膜和卵巢非黏液性腫瘤常陰性。CK7 :卵巢、肺和乳腺上皮常陽(yáng)性，結(jié)腸、前列腺、胃腸道上皮陰性。Villin :絨毛蛋白，正常組織中，villin通常只表達(dá)于有刷狀緣的細(xì)胞上，如胃腸道上皮細(xì)胞、胰腺和膽管上皮細(xì)胞以及腎實(shí)質(zhì)的上皮細(xì)胞中(特別

13、是近曲小管)。Villin在胃腸道癌、胰腺癌、膽囊癌和膽管癌組織中有很高的表達(dá)率，具有明顯腺樣結(jié)構(gòu)的腫瘤上沒(méi)有villin表達(dá)，則這個(gè)腫瘤為胃腸道、胰腺、膽囊或膽管來(lái)源的可能性極低。乳腺癌也經(jīng)常成為女性患者未知原發(fā)部位轉(zhuǎn)移癌要鑒別排除的一種疾病。因?yàn)樵谵D(zhuǎn)移癌組織上觀察到明顯的villin免疫組化陽(yáng)性染色，則這個(gè)腫瘤就極不可能為乳腺來(lái)源。其他 villin免疫組化染色通常為陰性表達(dá)的腫瘤還有：如卵巢漿液性癌、尿道移行細(xì)胞癌和前列腺癌。間皮瘤也經(jīng)常為villin陰性表達(dá)，因此在一些情況下Villin還可以作為鑒別間皮瘤和腺癌使用抗體的一種。但是也有一些非胃腸道來(lái)源的腫瘤可表達(dá)villin ,如子宮

14、膜樣腺癌、卵巢粘液性癌、腎細(xì)胞癌和小部分肺癌。也有一些專(zhuān)家報(bào)道Villin在部分宮頸膜腺癌病例中表達(dá)。肝癌的診斷：Villin免疫組化染色可以顯示出毛細(xì)膽管結(jié)構(gòu)，因此它也可能在表達(dá)部分肝癌的管狀結(jié)構(gòu)上很有用。多克隆CEA是用于此目的的第一種試劑，而且CD10 (CALLA)在表達(dá)肝癌的該結(jié)構(gòu)上也非常有用。多克隆 CEA、villin和CD10 (CALLA)在肝癌病例上的表達(dá)，相互之間并沒(méi)有任何的沖突，因此如果懷疑肝癌的可能性，建議將這三種抗體共同使用以協(xié)助疑難病例的診斷。文案標(biāo)準(zhǔn)Villin在神經(jīng)分泌腫瘤上的應(yīng)用：Villin在神經(jīng)分泌腫瘤的研究上也很有幫助。眾所周知，類(lèi)癌和胰腺的胰島細(xì)胞腫

15、瘤具有相相似的形態(tài)學(xué)特征，僅在形態(tài)學(xué)上區(qū)分這兩種腫瘤幾乎是不可能的。Villin在這種情況下特別有用，因?yàn)閾?jù)文獻(xiàn)報(bào)道在 85 %的胃腸道類(lèi)癌病例中有villin的表達(dá)，但在胰島細(xì)胞腫瘤上未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)報(bào)道。Villin在類(lèi)癌上的表達(dá)通常為胞膜陽(yáng)性。另外，有一些證據(jù)表明villin在胃和下消化道的小細(xì)胞癌上的表達(dá)率比在其他部位的小細(xì)胞癌上要高。如：肺、食道、膀胱或前列腺等。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，大約有40 %的肺類(lèi)癌病例 villin陽(yáng)性，在其他一些神經(jīng)分泌腫瘤上，如甲狀腺髓樣癌和少數(shù)的美克爾細(xì)胞瘤上也有villin的表達(dá)。MRP1 :多藥耐藥相關(guān)蛋白1 ,影響化療敏感性，和預(yù)后相關(guān)。MDR多藥耐藥基因。T

16、S:胸背合成酶，是 5 FU重要作用靶點(diǎn)，如果其高表達(dá)，陽(yáng)性反映+ +以上，提示腫瘤細(xì)胞 對(duì)5FU耐藥。Syn：突觸素神經(jīng)組織標(biāo)志：S-100神經(jīng)組織標(biāo)志，存在于神經(jīng)組織，垂體、頸動(dòng)脈體，腎上腺髓質(zhì)、唾液腺、少數(shù)間葉組織，常用于神經(jīng)鞘瘤、惡黑、脂肪肉瘤、軟骨腫瘤診斷。NSE:主要用于神經(jīng)分泌腫瘤診斷。Chr：嗜銘素，腎上腺髓質(zhì)含量很高，鑒別腎上腺髓質(zhì)和皮質(zhì)，用于神經(jīng)分泌腫瘤診斷。CKH :高分子角蛋白，主要標(biāo)記鱗狀細(xì)胞腫瘤。文案標(biāo)準(zhǔn)CKL:低分之角蛋白，主要標(biāo)記單層上皮、腺上皮。EMA :上皮膜抗原，糖蛋白，廣泛分布各種上皮及其腫瘤。Vim (Vimentin ):波形蛋白，間葉組織標(biāo)志。P5

17、04 :甲酰基輔酶 A消旋酶檢測(cè)診斷前列腺癌的敏感性為97%,特異性為100 %。AMACR :優(yōu)點(diǎn)在于它是癌癥特異性，只存在于癌癥組織。Rubin稱，AMACR亦可用作其他癌癥的診斷標(biāo)志物。對(duì)各種癌癥細(xì)胞進(jìn)行檢查后發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、肺 癌、淋巴瘤和黑素瘤都過(guò)度表達(dá)AMACR ,以結(jié)腸直腸癌和前列腺癌表達(dá)最高。CD117 :胃腸間質(zhì)瘤。CD10 :作為共同急性淋巴母細(xì)胞型白血病抗原，主要表達(dá)于未成熟淋巴細(xì)胞，在Burkitt淋巴癌，慢性髓性白血病等造血系統(tǒng)疾病的診斷中具有應(yīng)用價(jià)值。近幾年來(lái)發(fā)現(xiàn)該抗原在造血系統(tǒng)外的某些腫瘤中有表達(dá)， 如子宮膜間質(zhì)肉瘤、惡性黑色素瘤等。 抗

18、體在對(duì)腎細(xì)胞癌進(jìn)行診斷和鑒別時(shí)有一定的參考價(jià)值。SMA :平滑肌肌動(dòng)蛋白，標(biāo)記平滑肌。文案標(biāo)準(zhǔn)CD56 :為神經(jīng)細(xì)胞黏附分子，主要分布于大多數(shù)神經(jīng)外胚層來(lái)源細(xì)胞，常用于星型細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)分泌腫瘤診斷，也是 NK細(xì)胞瘤的重要標(biāo)志，也標(biāo)記小細(xì)胞肺癌。Des (Desmin ):結(jié)蛋白，廣泛分布于平滑肌、 心肌、骨骼肌細(xì)胞和肌上皮細(xì)胞，高分化高表達(dá)、低分化低表達(dá)。MSA :肌特異性肌動(dòng)蛋白，廣泛分布于幾乎所有肌型細(xì)胞中。CD68 :存在于骨髓和各神經(jīng)組織的巨噬細(xì)胞用于粒細(xì)胞白血病、各種單核細(xì)胞來(lái)源腫瘤、包括 惡性纖維組織細(xì)胞瘤診斷(首選)。CD34 :表達(dá)于早期淋巴造血干細(xì)胞、祖細(xì)胞、皮

19、細(xì)胞、胚胎纖維母細(xì)胞和某些神經(jīng)組織細(xì)胞， 多用于標(biāo)記血管皮細(xì)胞，血管源性腫瘤的診斷，GIST80 90 %。CD31也標(biāo)記血管皮。NESTIN :神經(jīng)干細(xì)胞中極為豐富。Ost:成骨素，為骨化細(xì)胞分泌。AAT:抗胰蛋白酶纖維組織細(xì)胞來(lái)源腫瘤ACT抗糜蛋白酶。GFAP:膠質(zhì)纖維酸性蛋白神經(jīng)組織標(biāo)志，多用于星形膠質(zhì)瘤診斷。文案標(biāo)準(zhǔn)Tg：甲狀腺球蛋白，甲狀腺癌TG陽(yáng)性。CT:降鈣素甲狀腺髓樣癌陽(yáng)性。PH:甲狀旁腺素甲狀旁腺腫瘤陽(yáng)性。TTFI:甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1: TTF-1表達(dá)于甲狀腺腺上皮和肺的上皮細(xì)胞中。在肺腫瘤研究中發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)肺的小細(xì)胞癌、原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性肺腺癌、少部分大細(xì)胞未分化肺癌、大多數(shù)非典

20、型神經(jīng)分泌腫瘤免疫組化結(jié)果顯示TTF-1陽(yáng)性，而肺鱗癌及絕大多數(shù)典型類(lèi)癌TTF- 1陰性。在甲狀腺乳頭狀腺癌中TTF-1亦陽(yáng)性，而TTF在其它組織表達(dá)陰性。據(jù)此認(rèn)為 TTF-1可用來(lái)鑒別肺腺癌與鱗癌，并有助于與肺轉(zhuǎn)移性腺癌的鑒別。TTF - 1 :在甲狀腺及其腫瘤中的表達(dá)：TTF-1主要表達(dá)在甲狀腺濾泡細(xì)胞中和甲狀旁腺的主細(xì)胞中，TTF- 1為甲狀腺分化和甲狀腺球蛋白分泌調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)物質(zhì)，可促進(jìn)甲狀腺過(guò)氧化物酶、碘/鈉的轉(zhuǎn)運(yùn)，TTF 1與血清TSH的活性有關(guān)，活性的 TSH- R可增強(qiáng)TTF- 1的表達(dá)。TTF-1在良惡性甲狀腺組織中表達(dá)不同，正常甲狀腺和良性腺瘤表達(dá)多，甲狀腺乳頭狀癌與濾泡癌中

21、表達(dá)少，未分化癌中不表達(dá)，TTF- 1在惡性甲狀腺病變中的表達(dá)強(qiáng)度隨年齡增加而增強(qiáng)，而且病變存瘤期長(zhǎng)，復(fù)發(fā)機(jī)率高。TTF - 1 :在肺癌中的表達(dá)：75 %的肺非小細(xì)胞癌(NSCLCs)陽(yáng)性表達(dá)，腺癌(ACs )明顯高于鱗癌(SCC), 90 %以上的原發(fā)性小細(xì)胞肺癌( SCLC)表達(dá)陽(yáng)性，TTF- 1在非小細(xì)胞肺癌(NSCLCs)陽(yáng)性表達(dá)強(qiáng)度與病人的預(yù)后成呈負(fù)相關(guān)，可作為一項(xiàng)獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)，肺的典型性文案標(biāo)準(zhǔn)類(lèi)癌（TCS）均為陰性，表明小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌可能有一個(gè)不同于TCS的共同起源的理論。PGp：多藥耐藥基因蛋白（PGp） 藥泵作用 胞膜/胞漿 陽(yáng)性率越iWj,對(duì)下列藥物耐藥性越強(qiáng)

22、：阿霉素、柔紅霉素、表阿霉素、米托慈醍、花堿、新堿、紫彬醇、泰素帝。谷光甘肽 S轉(zhuǎn)移酶（GSTti）:解毒作用胞漿陽(yáng)性率越高，對(duì)下列藥物耐藥性越強(qiáng)：阿 霉素、順鉗、氮芥、環(huán)磷酰胺、瘤可寧。拓?fù)洚悩?gòu)酶n（ topo n）:靶點(diǎn)作用胞核陽(yáng)性率越高，對(duì)下列藥物越有效：意環(huán)類(lèi)抗生素和鬼臼毒素類(lèi)，如 VP16、替尼泊甘、玫瑰樹(shù)堿、新霉素、柔紅霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26。陽(yáng)性率高者對(duì) VP16尤其有效。雌激素受體（ER）:性激素作用-胞核-陽(yáng)性率越高，腫瘤對(duì)分泌治療越有效，預(yù)后越好。孕激素受體（PR）:性激素作用-胞核-陽(yáng)性率越高，腫瘤對(duì)分泌治療越有效，預(yù)后越好。C-erbB -2:癌基因產(chǎn)物胞漿陽(yáng)

23、性率越高，腫瘤惡性程度越高。ER、PE陽(yáng)性而 C-erbB -2也陽(yáng)性者，用三苯氧胺治療效果不好。Ki 67 細(xì)胞增殖標(biāo)志胞核陽(yáng)性率越高，腫瘤增殖越快，惡性程度越高。Ki 67:為細(xì)胞增值的一種標(biāo)記，在細(xì)胞周期G1、S、G2、M期均有表達(dá)，G0期缺如，其和文案標(biāo)準(zhǔn)許多腫瘤分化程度、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移、預(yù)后密切相關(guān)。EMA :在1977年由Ceriani等從乳球蛋白中提取，其分子量511000KD ,存在于上皮細(xì)胞中，研究表明EMA在乳腺癌、胰腺癌、肺鱗癌、肺腺癌、惡性間皮瘤等上皮源性腫瘤中表達(dá)。CK:起源于上皮細(xì)胞，是上皮細(xì)胞和上皮來(lái)源的惡性腫瘤中間絲的組成成分，幾乎占細(xì)胞總蛋白的85%, EMA和C

24、K都是上皮組織通用的標(biāo)記物，可作為上皮源性腫瘤的診斷及鑒別診斷的依據(jù)之一及應(yīng)用于檢測(cè)上皮源性腫瘤的淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移。MASSON 染色：膠原纖維呈藍(lán)色，肌纖維、胞質(zhì)、紅細(xì)胞呈紅色，胞核呈藍(lán)褐色p16 :陽(yáng)性提示惡性?；蚨ㄎ挥谌祟?lèi)染色體9P21 ,通過(guò)與細(xì)胞周期蛋白D競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合 CDK4/6,阻止細(xì)胞從 G1期至S期，從而對(duì)有絲分裂進(jìn)行負(fù)反饋調(diào)節(jié)。p16蛋白在正常、炎癥性宮頸組織上皮中均為陰性表達(dá)，而在CIN和宮頸SCC病變中具有極高的陽(yáng)性表達(dá)；在CIN病變中伴隨病變級(jí)別升高，其表達(dá)強(qiáng)度亦相應(yīng)升高。借助 p16的陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果，有助于診斷 CIN病變 以及對(duì)CIN病變進(jìn)行客觀分級(jí)。1、惡性腫瘤免疫組

25、化耐藥預(yù)后標(biāo)記，全套 4項(xiàng)：P-gP , GSTn，TOPO n , Ki-67。2、乳癌免疫組化耐藥預(yù)后標(biāo)記，全套7項(xiàng)：P-gp , GST Tt , TOPO n , Ki-67 , ER, PR, C-erbB-2 03、意義：標(biāo)記物-作用-陽(yáng)性部位-臨床意義多藥耐藥基因蛋白（P-Gp ）藥泵作用-胞膜/胞漿-陽(yáng)性率越高，對(duì)下列藥物耐藥性越強(qiáng)：阿文案標(biāo)準(zhǔn)霉素、柔紅霉素、表阿霉素、米托慈醍、花堿、新堿、紫彬醇、泰素帝。谷光甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GSTn）-解毒作用胞學(xué)-陽(yáng)性率越高，對(duì)下列藥物耐藥性越強(qiáng)：阿霉素、順粕、氮芥、環(huán)磷酰胺、瘤可寧。拓?fù)洚悩?gòu)酶n（ TOPO n）-靶點(diǎn)彳用-胞核-陽(yáng)性率越高

26、，對(duì)下列藥物越有效：意環(huán)類(lèi)抗生素和鬼臼毒素類(lèi)，如VP16、替尼泊甘、玫瑰樹(shù)堿、新霉素、柔紅霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26。 陽(yáng)性率高者對(duì)VP16尤其有效。雌激素受體（ER）-性激素作用-胞核-陽(yáng)性率越高，腫瘤對(duì)分泌治療越有效，預(yù)后越好。孕激素受體（PR）-性激素作用-胞核-陽(yáng)性率越高，腫瘤對(duì)分泌治療越有效，預(yù)后越好。C-erbB-2-癌基因產(chǎn)物胞漿陽(yáng)性率越高，腫瘤惡性程度越高。ER、PE陽(yáng)性而C-erbB-2 也陽(yáng)性者，用三苯氧胺治療效果不好。Ki-67-細(xì)胞增殖標(biāo)志-胞核-陽(yáng)性率越高，腫瘤增殖越快，惡性程度越高。Ki-67為細(xì)胞增值的一種標(biāo)記，在細(xì)胞周期G1、S、G2、M期均有表達(dá)，G0期

27、缺如，其和許多腫瘤分化程度、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移、預(yù)后密切相關(guān)。PCNA（增埴細(xì)胞核抗原）。CEA多數(shù)腺癌表達(dá)CEA文案標(biāo)準(zhǔn)Rb （retinoblastoma視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤）基因是腫瘤抑制基因，調(diào)節(jié)細(xì)胞周期。P53在免疫組化中均為突變型，陽(yáng)性率越高，預(yù)后約差。野生型半衰期很短N(yùn)m23 是轉(zhuǎn)移抑制基因，其陽(yáng)性表達(dá)和腫瘤轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。目前已被廣泛應(yīng)用于乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、胃癌、大腸癌、肝癌、喉癌等多種惡性腫瘤的檢測(cè)。幾乎所有的研究都表明，nm23蛋白高表達(dá)患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率相對(duì)較低，存活期相對(duì)較長(zhǎng)。E-Ca , E鈣粘附蛋白，介導(dǎo)細(xì)胞間粘連作用的跨膜糖蛋白，其功能喪失引起細(xì)胞之間連接的破壞，主要用于腫瘤侵

28、襲和轉(zhuǎn)移方面的研究。PS2 （雌激素調(diào)節(jié)蛋白），其表達(dá)和ER表達(dá)有關(guān)，可作為分泌治療和預(yù)后判斷的指標(biāo)之一。CK18 ,低分子量角蛋白，主要標(biāo)記各種單層上皮包括腺上皮，而復(fù)層鱗狀上皮常陰性，主要用 于腺癌診斷。CK19 ,分布于單層上皮和間皮，常用于腺癌診斷，肝細(xì)胞不表達(dá)，而膽管為陽(yáng)性反應(yīng)Hep par 1,肝細(xì)胞抗原，正常肝細(xì)胞和高分化肝細(xì)胞癌陽(yáng)性，低分化肝細(xì)胞癌多弱陽(yáng)性或陰性。CK20 ,用于胃腸道腺癌、卵巢黏液性腫瘤、皮膚 Merkel細(xì)胞癌診斷。鱗癌、乳腺癌、肺癌、 子宮膜和卵巢非黏液性腫瘤常陰性。文案標(biāo)準(zhǔn)CK7卵巢、肺和乳腺上皮常陽(yáng)性，結(jié)腸、前列腺、胃腸道上皮陰性。Villin絨毛蛋白

29、，正常組織中，villin通常只表達(dá)于有刷狀緣的細(xì)胞上，如胃腸道上皮細(xì)胞、胰腺和膽管上皮細(xì)胞以及腎實(shí)質(zhì)的上皮細(xì)胞中(特別是近曲小管)。Villin在胃腸道癌、胰腺癌、膽囊癌和膽管癌組織中有很高的表達(dá)率，具有明顯腺樣結(jié)構(gòu)的腫瘤上沒(méi)有villin表達(dá)，則這個(gè)腫瘤為胃腸道、胰腺、膽囊或膽管來(lái)源的可能性極低。乳腺癌也經(jīng)常成為女性患者未知原發(fā)部位轉(zhuǎn)移癌要鑒別排除的一種疾病。因?yàn)樵谵D(zhuǎn)移癌組織上觀察到明顯的villin免疫組化陽(yáng)性染色，則這個(gè)腫瘤就極不可能為乳腺來(lái)源。其他 villin免疫組化 染色通常為陰性表達(dá)的腫瘤還有：如卵巢漿液性癌、尿道移行細(xì)胞癌和前列腺癌。間皮瘤也經(jīng)常為villin陰性表達(dá)，因此在

30、一些情況下Villin還可以作為鑒別間皮瘤和腺癌使用抗體的一種。但是也有一些非胃腸道來(lái)源的腫瘤可表達(dá)villin ,如子宮膜樣腺癌、卵巢粘液性癌、腎細(xì)胞癌和小部分肺癌。也有一些專(zhuān)家報(bào)道Villin在部分宮頸膜腺癌病例中表達(dá)。肝癌的診斷Villin免疫組化染色可以顯示出毛細(xì)膽管結(jié)構(gòu)，因此它也可能在表達(dá)部分肝癌的管狀結(jié)構(gòu)上很有用。多克隆CEA是用于此目的的第一種試劑，而且 CD10 (CALLA)在表達(dá)肝癌的該結(jié)構(gòu)上也非常有用。多克隆 CEA、villin和CD10 (CALLA)在肝癌病例上的表達(dá)，相互之間并沒(méi)有任何的沖突，因此如果懷疑肝癌的可能性，建議將這三種抗體共同使用以協(xié)助疑難病例的診斷。

31、文案標(biāo)準(zhǔn)Villin在神經(jīng)分泌腫瘤上的應(yīng)用Villin在神經(jīng)分泌腫瘤的研究上也很有幫助。眾所周知，類(lèi)癌和胰腺的胰島細(xì)胞腫瘤具有相相似的形態(tài)學(xué)特征，僅在形態(tài)學(xué)上區(qū)分這兩種腫瘤幾乎是不可能的。Villin在這種情況下特別有用，因?yàn)閾?jù)文獻(xiàn)報(bào)道在 85%的胃腸道類(lèi)癌病例中有 villin的表達(dá)，但在胰島細(xì)胞腫瘤上未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá)報(bào)道。Villin在類(lèi)癌上的表達(dá)通常為胞膜陽(yáng)性。另外，有一些證據(jù)表明villin在胃和下消化道的小細(xì)胞癌上的表達(dá)率比在其他部位的小細(xì)胞癌上要高。如：肺、食道、膀胱或前列腺等。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，大約有40%的肺類(lèi)癌病例 villin陽(yáng)性，在其他一些神經(jīng)分泌腫瘤上，如甲狀腺髓樣癌和少數(shù)的美克

32、爾細(xì)胞瘤上也有villin的表達(dá)。MRP1多藥耐藥相關(guān)蛋白1 ,影響化療敏感性，和預(yù)后相關(guān)。MDR多藥耐藥基因TS胸背合成酶，是5-FU重要作用靶點(diǎn)，如果其高表達(dá)，陽(yáng)性反映+以上，提示腫瘤細(xì)胞對(duì) 5FU耐藥。Syn突觸素神經(jīng)組織標(biāo)志S-100神經(jīng)組織標(biāo)志，存在于神經(jīng)組織，垂體、頸動(dòng)脈體，腎上腺髓質(zhì)、唾液腺、少數(shù)間葉組織，常用于神經(jīng)鞘瘤、惡黑、脂肪肉瘤、軟骨腫瘤診斷。NSE主要用于神經(jīng)分泌腫瘤診斷Chr,嗜銘素，腎上腺髓質(zhì)含量很高，鑒別腎上腺髓質(zhì)和皮質(zhì)，用于神經(jīng)分泌腫瘤診斷。CKH高分子角蛋白，主要標(biāo)記鱗狀細(xì)胞腫瘤CKL低分之角蛋白，主要標(biāo)記單層上皮、腺上皮EMA上皮膜抗原，糖蛋白，廣泛分布各種

33、上皮及其腫瘤文案標(biāo)準(zhǔn)Vim波形蛋白，間葉組織標(biāo)志P504甲酰基輔酶A消旋酶檢測(cè)診斷前列腺癌的敏感性為97%,特異性為100%。AMACR的優(yōu)點(diǎn)在于它是癌癥特異性，只存在于癌癥組織。 Rubin稱，AMACR亦可用作其他癌癥的診斷標(biāo)志物。對(duì)各種癌癥細(xì)胞進(jìn)行檢查后發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、肺 癌、淋巴瘤和黑素瘤都過(guò)度表達(dá)AMACR ,以結(jié)腸直腸癌和前列腺癌表達(dá)最高。CD117胃腸間質(zhì)瘤CD10作為共同急性淋巴母細(xì)胞型白血病抗原，主要表達(dá)于未成熟淋巴細(xì)胞，在Burkitt淋巴癌,慢性髓性白血病等造血系統(tǒng)疾病的診斷中具有應(yīng)用價(jià)值。近幾年來(lái)發(fā)現(xiàn)該抗原在造血系統(tǒng)外的某些腫瘤中有表達(dá)，如子宮

34、膜間質(zhì)肉瘤、惡性黑色素瘤等?？贵w在對(duì)腎細(xì)胞癌進(jìn)行診斷和鑒別時(shí)有 一定的參考價(jià)值。CD15是一種細(xì)胞粘附分子，因其對(duì)霍奇金淋巴瘤（HD ）中的R-S細(xì)胞具有良好的標(biāo)記作用，被認(rèn)為是HD的重要標(biāo)志物。除 HD的鑒別診斷外，對(duì)胃癌、結(jié)直腸癌、甲狀腺 癌、乳腺癌等腫瘤CD15的表 達(dá)研究發(fā)現(xiàn)，CD15表達(dá)隨癌細(xì)胞分化程度下降、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期增高而明顯增高。認(rèn)為 CDl5的表達(dá)是判斷腫瘤的發(fā)展、預(yù)測(cè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后的良好指標(biāo)。免疫電鏡觀察顯示，CD15抗原主要分布于大腸癌細(xì)胞漿的界膜、質(zhì)網(wǎng)、高爾基體及近細(xì)胞核膜處，CD15可能是通過(guò)對(duì)所結(jié)合的鋪基構(gòu)型改變影響和參與腫瘤的形成和轉(zhuǎn)移過(guò)程。SMA平滑肌

35、肌動(dòng)蛋白，標(biāo)記平滑肌CD56為神經(jīng)細(xì)胞黏附分子，主要分布于大多數(shù)神經(jīng)外胚層來(lái)源細(xì)胞，常用于星型細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)分泌腫瘤診斷，也是 NK細(xì)胞瘤的重要標(biāo)志，也標(biāo)記小細(xì)胞肺癌Des,結(jié)蛋白，廣泛分布于平滑肌、心肌、骨骼肌細(xì)胞和肌上皮細(xì)胞，高分化高表達(dá)、低分化低 表達(dá)。MSA肌特異性肌動(dòng)蛋白，廣泛分布于幾乎所有肌型細(xì)胞中文案標(biāo)準(zhǔn)CD68存在于骨髓和各神經(jīng)組織的巨噬細(xì)胞用于粒細(xì)胞白血病、各種單核細(xì)胞來(lái)源腫瘤、包括惡性纖維組織細(xì)胞瘤診斷(首選)。CD34表達(dá)于早期淋巴造血干細(xì)胞、祖細(xì)胞、皮細(xì)胞、胚胎纖維母細(xì)胞和某些神經(jīng)組織細(xì)胞，多用于標(biāo)記血管皮細(xì)胞，血管源性腫瘤的診斷，GIST 80-90%.C

36、D31也標(biāo)記血管皮。CD44是一種分布廣泛的跨膜糖蛋白分子，分CD44s和CD44V兩大類(lèi)。CD44s主要作為透明質(zhì)酸受體，結(jié)合透明質(zhì)酸后影響腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。而 CD44V則主要表達(dá)于轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞。道明等用免疫組化LSAB法檢測(cè)了 42例食管鱗癌 CD44V4 /5的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率為76. 19% (16/21),而非轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性率為42 . 86 % (9 /12),兩組間有顯著性差異。癌巢周邊的癌細(xì)胞、肌間浸潤(rùn)的癌細(xì)胞、有核分裂的癌細(xì)胞和癌栓中的癌細(xì)胞及浸潤(rùn)脈管壁的癌細(xì)胞均呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。成武等檢測(cè)了20例正常胃粘膜上皮、43例異型增生和85例胃癌組織CD44V6的表達(dá)，結(jié)果正常胃粘膜無(wú)表達(dá)，而異型增生和胃癌組織陽(yáng)性率分別為 30 . 2 %和74 . 1%,其表達(dá)強(qiáng)度與胃癌浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤生長(zhǎng)方式、靜脈和淋巴管侵襲及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移