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1、本文格式為word版,下載可任意編輯免疫真題大題考試復(fù)習(xí)重點(diǎn)總結(jié) 2021 年 年 10 月 免疫 26、簡(jiǎn)述抗原自身因素是如何影響抗原抗體反應(yīng)的 p22 抗原的理化性狀、抗原表位的種類(lèi)和數(shù)目均可影響抗原抗體反應(yīng)的結(jié)果。如顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后形成凝集現(xiàn)象;可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后形成沉淀現(xiàn)象;粗糙型細(xì)菌在生理鹽水中易消失自凝;血細(xì)胞同 igg 類(lèi)抗體反應(yīng)可不消失凝集現(xiàn)象;單價(jià)抗原(半抗原)與相應(yīng)抗體結(jié)合后不消失沉淀現(xiàn)象。 27、簡(jiǎn)述免疫濁度測(cè)定的基本原理 p89 抗原、抗體在特別緩沖液中反應(yīng)而又比例合適(抗體過(guò)量)時(shí),形成的小分子可溶性免疫復(fù)合物在增濁劑的作用下,快速形成免疫復(fù)合物微粒
2、,使反應(yīng)液消失濁度。在抗體過(guò)量且固定的條件下,形成的免疫復(fù)合物量隨抗原量增加而增加,反應(yīng)液的濁度亦隨之增加,即待測(cè)抗原量與反應(yīng)后溶液的濁度呈正相關(guān)。用系列已知濃度的抗原標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行試驗(yàn),制備劑量反應(yīng)曲線(xiàn),即可求出標(biāo)本中抗原含量。 28、簡(jiǎn)述凝集反應(yīng)的影響因素 p97 (1)電解質(zhì):顆粒性抗原都帶負(fù)電荷,有相互排斥的作用,電解質(zhì)可降低抗原的電荷,使其易于凝集。一般用 0.85%的氯化鈉溶液稀釋血清與菌液。 (2)ph:一般凝集反應(yīng)合適的 ph 為 6-8. (3)溫度:除冷凝集素,一般溫度凹凸與血清學(xué)反應(yīng)速度正相關(guān)。但超過(guò) 60反而會(huì)破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),故凝集反應(yīng)通常以室溫或 37中進(jìn)行為宜 (4)抗
3、體與抗原的比例:凝集反應(yīng)中多數(shù)狀況下,抗體濃度越高則反應(yīng)越強(qiáng)(前帶現(xiàn)象:抗體濃度過(guò)高,反而不消失明顯凝集) 29、什么叫血清???簡(jiǎn)述其發(fā)生的機(jī)制 p249 (1)血清病屬于 iii 型超敏反應(yīng)的全身性免疫復(fù)合物病。是指初次注射大量異種抗毒素血清1-2 周后,可消失發(fā)熱、皮疹,淋巴結(jié)腫大,關(guān)節(jié)腫痛和一過(guò)性蛋白尿等癥狀。 (2)發(fā)生氣制:一次大量注入異種抗毒素血清后,機(jī)體產(chǎn)生抗異種血清抗體,由于注入的異種血清尚未完全清除,兩者在抗原量多于抗體量的條件下結(jié)合,形成中等大小可溶性 ic,隨血流運(yùn)行至全身,沉積于腎小球基底膜、關(guān)節(jié)滑膜及皮下組織毛細(xì)血管壁中,引起一系列癥狀。 (3)血清病具有自限性停止注
4、射抗毒素后癥狀可自行消退。有時(shí)應(yīng)用大劑量青霉素磺胺等藥物也可引起類(lèi)似血清病樣的反應(yīng)。 30、簡(jiǎn)述對(duì)疫苗平安問(wèn)題的防范措施。 p271 疫苗都是用于健康人群,特殊是兒童的免疫制劑,其質(zhì)量的優(yōu)劣直接關(guān)系到千百萬(wàn)人的健康和生命平安,因此在制作中應(yīng)特殊留意質(zhì)量管理。滅活疫苗菌種為致病性強(qiáng)的微生物,應(yīng)予徹底滅活;活疫苗的菌種要求遺傳性狀穩(wěn)定,無(wú)返祖,無(wú)致癌性;血液制品需對(duì)獻(xiàn)血員進(jìn)行嚴(yán)格檢查,確保血液不含病原體(如 hiv、hbv、hcv 等);應(yīng)盡可能削減各種疫苗接種后的副作用,推舉口服接種或盡量削減注射次數(shù)。 31、什么是放射免疫分析和免疫放射分析?試比較二者之間的區(qū)分 p161 (1)放射免疫分析(
5、ria):標(biāo)記抗原與非標(biāo)記抗原對(duì)特異性抗體的競(jìng)爭(zhēng),待測(cè)的抗原量與結(jié)合的標(biāo)記抗原-抗體復(fù)合物呈反比,與游離的標(biāo)記抗原呈正比。 (2)免疫放射分析(irma):非競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng)。過(guò)量的標(biāo)記抗體與待測(cè)抗原反應(yīng),充分反應(yīng)后去除游離的標(biāo)記抗體,抗原-標(biāo)記抗體復(fù)合物的放射強(qiáng)度與待測(cè)抗原量呈正比。 (3)比較 32、試述 i 型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)與 iv 型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn)的原理 p252 (1)i 型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn): 原理:當(dāng)變應(yīng)原通過(guò)皮膚挑刺、劃痕、皮內(nèi)注射等方法進(jìn)人致敏者皮膚,與吸附在肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的特異性 ige 結(jié)合,導(dǎo)致肥大細(xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒,釋放生物活性介質(zhì)。在 2030
6、 分鐘內(nèi)局部皮膚消失紅暈、紅斑、風(fēng)團(tuán)及瘙癢感,數(shù)小時(shí)后消逝。 應(yīng)用:查找過(guò)敏原,預(yù)防藥物或疫苗過(guò)敏 (2)v 型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn) 原理:用皮內(nèi)注射、皮膚班貼等方法使變應(yīng)原進(jìn)入已致敏機(jī)體,體內(nèi)致敏 t 細(xì)胞再次接觸相同變應(yīng)原后,釋放多種細(xì)胞因子,造成局部以單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為主的炎癥反應(yīng)。4872 小時(shí)內(nèi)局部消失紅腫、硬結(jié)或水皰。 應(yīng)用:查找過(guò)敏原,推斷變應(yīng)原是否引起機(jī)體 v 型超敏反應(yīng)或機(jī)體的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)。 2021 年 年 10 月 免疫 27、簡(jiǎn)述補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(cft)的主要成分及檢測(cè)原理 p115 (1)主要成分有 5 種。已知抗原(或抗體)、待測(cè)抗體(或抗原)、補(bǔ)體系統(tǒng)、綿羊紅
7、細(xì)胞、相應(yīng)抗體 (2)原理 直接補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn):若反應(yīng)系統(tǒng)中抗原與抗體特異結(jié)合,形成的抗原抗體復(fù)合物能將同時(shí)加人的補(bǔ)體激活,消耗掉補(bǔ)體。當(dāng)再加入指示系統(tǒng)時(shí),反應(yīng)液中已無(wú)游離補(bǔ)體,不消失溶血,為補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)陽(yáng)性,待檢標(biāo)本中含有已知抗原(或抗體)相應(yīng)抗體(或抗原)。反之,為補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)陰性。 間接補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn):某些禽類(lèi)抗血清或某些疾病患者血清中常含有所謂抑制性抗體,當(dāng)其與相應(yīng)抗原特異結(jié)合后,既不能結(jié)合補(bǔ)體,還能阻擋抗原與隨后加入的抗體結(jié)合,故不能發(fā)生補(bǔ)體激活反應(yīng),反應(yīng)液中仍有游離補(bǔ)體存在。此時(shí)加入指示系統(tǒng)會(huì)消失溶血反應(yīng),為補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)陽(yáng)性。 28、簡(jiǎn)述細(xì)胞因子的檢測(cè)方法及特點(diǎn)。 p213 (1)細(xì)胞
8、因子:是由活化免疫細(xì)胞和某些基質(zhì)細(xì)胞分泌的,能介導(dǎo)和調(diào)整免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)的小分子多肽 (2)生物學(xué)測(cè)定法:是檢測(cè)細(xì)胞因子某種特定的生物學(xué)活性,而無(wú)生物活性的細(xì)胞因子前體分子、降解產(chǎn)物、聚合物以及與蛋白質(zhì)或可溶性受體結(jié)合的細(xì)胞因子均不能用此法檢出。 (3)免疫學(xué)測(cè)定法:是用免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù),如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫分析、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)和免疫印跡等,將細(xì)胞因子作為蛋白質(zhì)抗原,用相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行測(cè)定;此法所測(cè)定的是細(xì)胞因子的蛋白含量,與其生物活性并不肯定成正比。 (4)分子生物學(xué)測(cè)定法:是采納分子生物學(xué)技術(shù),檢測(cè)細(xì)胞因子相應(yīng)的 dna、rna,反映的是細(xì)胞因子基因及其表達(dá)狀況。 29、簡(jiǎn)述
9、 elisa 雙抗體夾心法"一步法'的原理及優(yōu)點(diǎn) p121 (1)原理:在雙抗體夾心法檢測(cè)抗原時(shí),采納針對(duì)抗原分子兩個(gè)不同抗原打算族的單克隆抗體分別作為固相抗體和原標(biāo)抗體??蓪⒋郎y(cè)樣品與酶標(biāo)抗體并為一步加入。 (2)優(yōu)點(diǎn):使用高親和力的單克隆抗體,雙位點(diǎn)一步法不但操作簡(jiǎn)潔、時(shí)間縮短,而且敏感性和特異性也得到顯著提高。 (3)特點(diǎn):?jiǎn)慰寺】贵w分別作為固定抗體和酶標(biāo)抗體;采納高親和力單抗可提高測(cè)定的敏感性和特異性;標(biāo)本中抗原過(guò)量時(shí)會(huì)消失鉤狀效應(yīng)。 30、試分析由于檢測(cè)試劑因素引起免疫濁度法檢測(cè)結(jié)果假性上升的緣由 p95 抗體效價(jià)低于 1:20 會(huì)增加偽濁度 抗血清滅活處理 抗血清
10、含有交叉反應(yīng)性抗體 peg 濃度過(guò)高引起血清中雜蛋白的非特異性共沉 試劑污染(如細(xì)菌、塵埃等)和變質(zhì) 31、患者小紅近來(lái)早晨消失"打噴嚏、流鼻涕、流眼淚'等癥狀最初賜予感冒藥治療半個(gè) 月無(wú)效,反而時(shí)不時(shí)還伴有晚間咳嗽或氣緊,讓小紅迮覺(jué)也睡擔(dān)心穩(wěn)了。隨后又按氣管炎 用抗生素進(jìn)行治療,治療 6 個(gè)多月末見(jiàn)好轉(zhuǎn)。隨后進(jìn)入另一家醫(yī)院做了一些檢測(cè)項(xiàng)目,結(jié) 果見(jiàn)下: (1)請(qǐng)依據(jù)以上臨床表現(xiàn)及試驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果分析該患者可能患何疾病? ige 明顯上升,懷疑超敏反應(yīng) (2)假如要進(jìn)一步確定該疾病病因,你建議患者做哪些檢測(cè)? p243 2021 年 年 10 月 免疫 28、簡(jiǎn)述細(xì)胞因子的概念
11、及其檢測(cè)方法 p213 (1)細(xì)胞因子:是由活化免疫細(xì)胞和某些基質(zhì)細(xì)胞分泌得而,能介導(dǎo)和調(diào)整免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)的小分子多肽。 (2)檢測(cè)方法分為三大類(lèi): 生物學(xué)測(cè)定法:是檢測(cè)細(xì)胞因子某種特定的生物學(xué)活性,而無(wú)生物活性的細(xì)胞因子前體分子、降解產(chǎn)物、聚合物以及與蛋白質(zhì)或可路性受體結(jié)合的細(xì)胞因子均不能用此法檢出 免疫學(xué)測(cè)定法:將細(xì)胞因子作為蛋白質(zhì)抗原,用相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行測(cè)定。此法所測(cè)定的是細(xì)胞因子的蛋白含量,與其生物活性并不肯定成正比; 分子生物學(xué)測(cè)定法是采納分子生物學(xué)技術(shù),檢測(cè)細(xì)胞因子相應(yīng)的 dna 、rna,反映的是細(xì)跑因子基因及其表達(dá)狀況。 29、簡(jiǎn)述帶現(xiàn)象及其在免疫學(xué)檢測(cè)中的意義 p21
12、 (1)帶現(xiàn)象:抗原抗體分子比例最合適的范圍,稱(chēng)為抗原抗體反應(yīng)的等價(jià)帶。在等價(jià)帶前后分別為抗體過(guò)?;蚩乖^(guò)剩,形成的沉淀物少或無(wú),這種現(xiàn)象在免疫測(cè)定中稱(chēng)為帶現(xiàn)象。 (2)意義:消失抗體過(guò)量時(shí),稱(chēng)為前帶。消失抗原過(guò)量時(shí),稱(chēng)為后帶。 30、簡(jiǎn)述免疫佐劑的概念及在抗血清制備中應(yīng)用免疫佐劑的目的 p68 (1)同抗原一起或預(yù)先注射到機(jī)體內(nèi),能增加機(jī)體對(duì)該抗原的免疫應(yīng)答或轉(zhuǎn)變免疫應(yīng)答類(lèi)型的非特異性免疫增加性物質(zhì),稱(chēng)為免疫佐劑。 (2)目的:是為了提高抗原的免疫原性,從而增加體液免疫和細(xì)胞免疫的水平.獲得高效價(jià)抗體。 31、簡(jiǎn)述直接熒光顯微技術(shù)的原理及評(píng)價(jià) p144 (1)熒光顯微技術(shù)是通過(guò)觀(guān)看固定標(biāo)本上
13、熒光抗體的染色結(jié)果,進(jìn)行抗原的鑒定和定位。 (2)其基本過(guò)程是:在標(biāo)本切片上滴加抗體試劑,使熒光抗體與標(biāo)本切片中組織或細(xì)胞表面的抗原進(jìn)行結(jié)合反應(yīng),洗滌除去游離的熒光抗體后,置熒光顯微鏡下觀(guān)看熒光現(xiàn)象,在黑暗背景上可見(jiàn)光明的特異熒光。 (3)評(píng)價(jià): 熒光顯微鏡所用光源的波長(zhǎng)比傳統(tǒng)顯微鏡光源的波長(zhǎng)短 1/2,因此熒光顯微鏡的辨別力量超出了傳統(tǒng)顯微鏡的辨別率的極限 熒光顯微鏡技術(shù)具有高度靈敏性和專(zhuān)一性。它所用染料的量是極其微小的,只相當(dāng)于傳統(tǒng)顯微技術(shù)中染料消耗量的幾千分之一. 熒光顯微鏡能夠直接顯示細(xì)胞內(nèi)的生物化學(xué)成分,并且顯示的彩色效果很光明,極易觀(guān)看,極易進(jìn)行定量分析,而且能以極低濃度的染料檢測(cè)
14、出含量極微的物質(zhì). 隨著新的熒光染料的創(chuàng)造,可不斷擴(kuò)大被測(cè)物質(zhì)的范圍. 32、某試驗(yàn)室購(gòu)買(mǎi) elisa 試劑盒進(jìn)行乙肝三對(duì)檢測(cè) (1)乙肝三對(duì)包括哪幾個(gè)項(xiàng)目? 乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝 e 抗原、乙肝 e 抗體、乙肝核心抗體 (2)每個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)采納哪種反應(yīng)類(lèi)型? 乙肝表面抗原:雙抗體夾心法 乙肝表面抗體:雙抗原夾心法 乙肝 e 抗原:雙抗體夾心法 乙肝 e 抗體:競(jìng)爭(zhēng)抑制法 乙肝核心抗體:競(jìng)爭(zhēng)抑制法 2021 年 年 10 月 免疫 27、簡(jiǎn)述免疫電泳的原理及用途 【先電泳后集中】p89 (1)定義:將蛋白質(zhì)區(qū)帶電泳和雙向免疫集中相結(jié)合的免疫化學(xué)分析技術(shù) (2)原理:先利用區(qū)帶電泳將
15、樣品中不同的抗原蛋白質(zhì)分子在瓊脂凝膠內(nèi)分別成若干區(qū)帶,然后與電泳方向平行挖一小槽,加入相應(yīng)抗血清,與已分別的抗原在瓊脂凝膠內(nèi)作雙向免疫集中,各種抗原與抗體特異結(jié)合,在二者比例合適處形成弧形沉淀線(xiàn)。依據(jù)沉淀弧得而數(shù)量、形態(tài)、位置,對(duì)比已知標(biāo)準(zhǔn)抗原、抗體生成的,分析樣品中所含抗原成分及其性質(zhì)。 28、簡(jiǎn)述免疫放射分析的優(yōu)點(diǎn) p170 免疫放射分析(irma):非競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合反應(yīng)。過(guò)量的標(biāo)記抗體與待測(cè)抗原反應(yīng),充分反應(yīng)后去除游離的標(biāo)記抗體,抗原-標(biāo)記抗體復(fù)合物的放射強(qiáng)度與待測(cè)抗原量呈正比。 (1)敏感度高:抗體分子含酪氨酸多,可以結(jié)合多個(gè)放射性碘原子;非競(jìng)爭(zhēng)性免疫結(jié)合,抗體過(guò)量能與微少抗原充分結(jié)合
16、。 (2)特異性高:要求待測(cè)物必需具有兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn),才能形成有效的雙抗體夾心復(fù)合物,交叉反應(yīng)低。 (3)標(biāo)記物穩(wěn)定,標(biāo)記簡(jiǎn)單 (4)檢測(cè)范圍較寬:抗體量大,能結(jié)合較多的抗原 (5)穩(wěn)定性好:因標(biāo)記抗體和固相抗體均屬過(guò)量,不易受外界環(huán)境的影響;也不易受試驗(yàn)操作的影響 29、hat 培育基中英文 h、a 和 t 分別代表什么物質(zhì)及其作用 p72 【hat 培育基:骨髓瘤細(xì)胞是一種缺陷型細(xì)胞,在 hat 培育基上無(wú)法生長(zhǎng),所以骨髓瘤細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞也不能在該培育基上存活;脾細(xì)胞和脾細(xì)胞自身融合的細(xì)胞能在 hat培育基上正常生活,但不能增殖,所以經(jīng)過(guò)數(shù)代后,hat 培育基上沒(méi)有脾細(xì)胞和脾細(xì)胞自身
17、融合的細(xì)胞;骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞能在 hat 培育基上正常生活,并無(wú)限增殖?!?hat (hhypoxanthine 次黃嘌呤,aaminopterin 氨基喋呤,tthymidine 胸腺嘧啶核苷) (1)氨基蝶吟(a)為葉酸拮抗物,用以阻斷細(xì)胞合成 dna 的主要途徑 (2)次黃嘌呤(h)和胸腺嘧啶核苷(t)供應(yīng)核苷酸合成的前體,使細(xì)胞能通過(guò)替代途徑合成dna。 30、時(shí)間辨別熒光免疫測(cè)定法具有較高的靈敏性和特異性,試分析其標(biāo)記物-鑭系元素的熒光特點(diǎn) p156 以鑭系元素鎮(zhèn)(eu)鰲合劑作熒光標(biāo)記物,利用其長(zhǎng)熒光壽命的特點(diǎn),延長(zhǎng)熒光測(cè)量時(shí)間,待短壽命的自然本底熒光完全衰退后
18、再行測(cè)定,所得信號(hào)完全為長(zhǎng)壽命鑭系螯合物的熒光,從而有效地消退非特異性本底熒光的干擾。 31、試述 i 型超敏反應(yīng)的發(fā)病機(jī)理及其主要的試驗(yàn)室檢測(cè)方法 p243 (1)發(fā)病機(jī)理: 致敏階段:變應(yīng)原進(jìn)入機(jī)體,激活 cd4+th2 細(xì)胞和特異 b 細(xì)胞,誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性 ige 抗體。ige 抗體吸附于肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面,使機(jī)體處于致敏狀態(tài)。 發(fā)敏階段:已致敏機(jī)體再次遇到相同變應(yīng)原而發(fā)生超敏反應(yīng)的過(guò)程。 (2)試驗(yàn)室檢測(cè)方法i 型超敏反應(yīng)皮膚試驗(yàn): 原理:當(dāng)變應(yīng)原通過(guò)皮膚挑刺、劃痕、皮內(nèi)注射等方法進(jìn)人致敏者皮膚,與吸附在肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的特異性 ige 結(jié)合,導(dǎo)致肥大細(xì)胞或嗜堿性粒細(xì)
19、胞脫顆粒,釋放生物 活性介質(zhì)。在 2030 分鐘內(nèi)局部皮膚消失紅暈、紅斑、風(fēng)團(tuán)及瘙癢感,數(shù)小時(shí)后消逝。 應(yīng)用:查找過(guò)敏原,預(yù)防藥物或疫苗過(guò)敏 2021 年 年 10 月 免疫 27、簡(jiǎn)述捕獲法 elisa 的檢測(cè)原理及應(yīng)用 p122-123 (1)原理:將血清中全部的 igm(特異性或非特異性)捕獲固定在固相上,去除 igg 后,再測(cè)定特異性 igm (2)應(yīng)用:用于檢測(cè)特異性的 igm 抗體 28、試分析皮膚試驗(yàn)消失假陽(yáng)性的常見(jiàn)緣由 p254 (1)試驗(yàn)溶液配置不當(dāng),過(guò)酸或過(guò)堿都會(huì)對(duì)皮膚產(chǎn)生非特異性刺激; (2)被試者皮膚反應(yīng)性過(guò)強(qiáng),如有皮膚劃痕癥; (3)試驗(yàn)抗原變質(zhì)或試驗(yàn)抗原不純; (4)濃度過(guò)大 29、以檢測(cè)尿液 hcg 為例,說(shuō)明間接凝集抑制試驗(yàn)的檢測(cè)原理及結(jié)果推斷 p101 (1)間接凝集抑制試驗(yàn):是指已知抗原致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體為診斷試劑,檢測(cè)標(biāo)本中是否存在與致敏抗原相同的抗原。 (2)不發(fā)生凝集者表明待測(cè)樣品中含有相應(yīng)抗原(或抗體)為陽(yáng)性;發(fā)生凝集者說(shuō)明樣品中無(wú)相應(yīng)抗原(或抗體),為陰性。 30、為保證酶免檢測(cè)結(jié)果的牢靠性,在采集及保存樣本時(shí)應(yīng)留意
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