結(jié)核分枝桿菌GeneXpert核酸擴(kuò)增檢測(cè)操作步驟

1、1/ 6 學(xué)習(xí)交流文檔結(jié)核分枝桿菌GeneXpert核酸擴(kuò)增檢測(cè)操作步驟一、準(zhǔn)備工作：1.開(kāi)機(jī)1依次開(kāi)啟：UBSUBS 電源、儀器電源、打印機(jī)電源、筆記本電腦電源；2等待筆記本電腦進(jìn)入系統(tǒng)，出現(xiàn)四個(gè)用戶圖案時(shí)，選擇用戶CepheidCepheid，輸入密碼： cphdcphd ，等待約一分鐘后系統(tǒng)彈出登錄窗口，依次輸入用戶名和 密碼；3等待 Gene-XpertGene-Xpert 操作軟件的啟動(dòng)與自檢過(guò)程， 自檢過(guò)程中軟件出現(xiàn) “數(shù)據(jù)庫(kù)管理”提示窗，點(diǎn)選“否” ；再在“存檔”提示窗點(diǎn)選“否” ，待模塊進(jìn) 展顯示“可用”。4儀器預(yù)熱 1515 分鐘后再進(jìn)行檢測(cè)。2.耗材準(zhǔn)備1標(biāo)本處理液、 Ca

2、rtridgCartridge e反應(yīng)盒、 前處理管 （帶有蓋子的試管） 、塑料滴管（每個(gè)標(biāo)本準(zhǔn)備 2 2 支）、待檢標(biāo)本。3.樣品預(yù)處理1前處理管標(biāo)號(hào)或粘貼條形碼，再吸取 2ml2ml 標(biāo)本處理液在前處理管中，加入 1ml1ml 標(biāo)本；2旋緊蓋子，旋渦儀振蕩 1010 秒或劇烈搖動(dòng) 10-2010-20 次，室溫靜置 1010 分鐘，再 旋渦儀振蕩 1010 秒或劇烈搖動(dòng) 10-2010-20 次，室溫靜置 5 5 分鐘，觀察無(wú)可見(jiàn)塊狀 痰標(biāo)本存在。2/ 6 學(xué)習(xí)交流文檔4.試劑盒拆開(kāi) CartridgeCartridge 反應(yīng)盒包裝，小心取出，不要接觸到正面的二維碼、上面 膠蓋和后面有尖端

3、區(qū)域，避免污染，可在側(cè)面編號(hào)或粘貼條碼。小心上拔開(kāi)啟 CartridgeCartridge 反應(yīng)盒藍(lán)色上蓋的前部，取處理后的樣品2ml2ml，沿樣品加入口的內(nèi)壁緩緩加入反應(yīng)盒內(nèi) （避免吸到未液化的粘液部分， 吸 液量可以略超過(guò)兩毫升，把尖端殘液保留不注入，以免產(chǎn)生氣泡） 。二、測(cè)定操作：1 1 . .在 GenGen eXperteXpert DxDx 系統(tǒng)窗口的工具欄點(diǎn)擊創(chuàng)建測(cè)試;2.在“掃描患者 IDID 條形碼”彈窗，選“手動(dòng)輸入患者條形碼” ，再輸入 患者的 姓名；3.在“掃描樣品 IDID 條形碼”彈窗選“手動(dòng)輸入” ，再在彈窗內(nèi)輸入痰檢的 實(shí)驗(yàn) 室編號(hào) ；4.在“掃描檢測(cè)盒條形碼”

4、彈窗內(nèi)，用掃碼方法（或手動(dòng)）輸入測(cè)試盒上的條 碼，成功后軟件自動(dòng)指定待運(yùn)行板塊（ （ 注意：為了保障每個(gè)模塊有均等的 運(yùn)行機(jī)會(huì)，軟件會(huì)選擇運(yùn)行次數(shù)最少的模塊；但手工可以選擇不同的模塊） 。 此時(shí)板塊頂部綠色指示燈亮起并開(kāi)始閃爍，點(diǎn)擊“開(kāi)始測(cè)試” 。5打開(kāi)指定的測(cè)定板塊（頂部指示燈閃動(dòng)），將 CartridgeCartridge 反應(yīng)盒放入其中，關(guān)緊板塊前門，檢測(cè)開(kāi)始，系統(tǒng)內(nèi)有測(cè)定完成時(shí)間倒計(jì)時(shí)顯示，等待檢測(cè)結(jié) 束（時(shí)間約 2h2h）。三、打印報(bào)告3/ 6 學(xué)習(xí)交流文檔1.1.在系統(tǒng)窗口的工具欄點(diǎn)擊“查看結(jié)果” ，點(diǎn)擊頁(yè)面下端的“報(bào)告” ，在對(duì)話 框中勾選需要打印的結(jié)果，點(diǎn)擊“生成報(bào)告文件” ，

5、點(diǎn)“保存”；2.2. 確認(rèn)打印機(jī)有紙， 點(diǎn)“預(yù)覽 PFDPFD,再選彈出報(bào)告， 點(diǎn)“打印”， 彈出窗再選 “當(dāng)前頁(yè)”，點(diǎn) 0K0K 之后打印出報(bào)告單。四、關(guān)機(jī)1.取出檢測(cè)完成的 CartridgeCartridge 反應(yīng)盒2.退出筆記本電腦系統(tǒng)，選擇關(guān)機(jī)按鈕，關(guān)閉電腦；3.依次關(guān)斷：檢測(cè)設(shè)備電源、打印機(jī)電源；4.按下 UPSUPS 電源 OFFOFF 開(kāi)關(guān)，等待電源輸出關(guān)閉，之后關(guān)閉排插上的電源開(kāi)關(guān)。五、 質(zhì)量控制措施（一）樣本與保存 ：1.1. 每份樣品需收集痰液至少 1 1 mLmL 痰液，不應(yīng)使用含明顯的食物顆粒的樣本和 血痰。2.2. 標(biāo)本保存：1原始痰標(biāo)本或已處理過(guò)（去污染/ /濃縮

6、）的痰標(biāo)本：2 2 - 8 8 C C 冷藏，最長(zhǎng) 保存 1010 天；2在必要的情況下，標(biāo)本可在室溫下（環(huán)境溫度最高為3535 C C）最長(zhǎng)保存 3 3天，然后再置于 2 2 -8 8 C C 進(jìn)行冷藏，前后累計(jì)天數(shù)最長(zhǎng)仍為 1010 天。4/ 6 學(xué)習(xí)交流文檔3.3. 已加入樣品處理劑的標(biāo)本保存：1原始痰標(biāo)本或已處理過(guò)（去污染/ /濃縮）的痰標(biāo)本：如果可在 2-82-8 C C 冷藏， 1212 小時(shí)內(nèi)完成處理；如果不具備該冷藏條件，需在 5 5 小時(shí)內(nèi)完成處理；2已加人樣品的試劑盒的保存（如：遭遇突然停電）：從加入樣品后至測(cè)試 開(kāi)始時(shí)間在 4 4 小時(shí)之內(nèi)，試劑盒可以直接上機(jī)測(cè)試； 如果

7、超過(guò) 4 4 個(gè)小時(shí)， 則需要換一個(gè)新的試劑盒重新加樣再測(cè)試。（二）試劑盒與加樣1.1.試劑盒保存于 2-282-28 C C,干燥環(huán)境中，避免陽(yáng)光直射。2.2. 開(kāi)啟后，始終保持試劑盒處于直立狀態(tài)，避免震動(dòng)、傾斜或墜落！用手取試 劑盒時(shí)，僅能接觸試劑盒的左右兩側(cè)，不能接觸盒蓋、前面的二維碼，或者 后面的反應(yīng)管。? ? 不要在盒蓋上進(jìn)行標(biāo)記或者妨礙識(shí)別試劑盒已有的二維碼? ? 可以在試劑盒的左右兩側(cè)手寫標(biāo)記樣品編號(hào)或粘貼樣品編號(hào)標(biāo)簽3.3. 用移液管吸取過(guò)程中需小心操作，避免產(chǎn)生氣溶膠和氣泡，不要把制備樣品 中的固體顆粒加入到試劑盒里，在試劑盒操作說(shuō)明建議的 1515 分鐘（ 10+510+5

8、）處理步驟后，如果樣本仍然很粘稠，那么不要直接加入試劑匣，建議額外等待 1010 分鐘直至樣本完全液化，然后再使用一支新的移液管取樣至試劑匣。 樣本的總體積需要在 2-42-4 毫升之間。4.4. 如果發(fā)生以下情況，試劑盒不可使用：檢測(cè)日期超過(guò)試劑盒標(biāo)注的有效期；外部潮濕；5/6 學(xué)習(xí)交流文檔3蓋子有破損或者（意外）開(kāi)啟；加入處理的樣品之后，試劑盒墜落或震蕩；位于試劑盒后面的 PCRPCR 反應(yīng)管破損；已使用過(guò)的試劑盒，掃描之后不能 重復(fù)使用；試劑盒的包裝（指 1010 只試劑盒的袋裝）打開(kāi)長(zhǎng)達(dá) 6 6 周以上。（三）實(shí)驗(yàn)室環(huán)境：溫度保持在 15-2515-25C,并確保機(jī)器處于干燥的環(huán)境中，避免陽(yáng)光直射，避免灰塵。（四） GeneXpertGeneXpert 儀器維護(hù)指引項(xiàng)目方法維護(hù)頻率清潔機(jī)器表面酒精擦拭每月一次清潔試劑盒倉(cāng)室酒精擦拭（注意：不要清潔 I-COREI-CORE 反應(yīng)管插每月一次6/6 學(xué)習(xí)交流文檔縫!）清潔柱塞桿酒精擦拭每月一次清潔風(fēng)扇處空氣過(guò)濾片取下過(guò)濾片，吹掉灰塵每月一次更換風(fēng)扇處空氣過(guò)濾片更換新的空氣過(guò)濾片每年或