用高效液相滲透凝膠色譜法法分析動物皮膚和兔關(guān)節(jié)液中透明質(zhì)酸

1、文獻(xiàn)1:ANALYSIS BY HIGH-PERFORMANCE GEL PERMEATION CHROMATOGRAPHYOF HYALURONIC ACID IN ANIMAL SKINS AND RABBIT SYNOVIAL FLUID用高效液相滲透凝膠色譜法法分析動物皮膚和兔關(guān)節(jié)液中透明質(zhì)酸文獻(xiàn)來源:正式出版物Journal of Chromatography A Volume 435, 1988,Pages 335342文獻(xiàn)摘要:作者描述了用兩根色譜柱同時測定生物樣品中透明質(zhì)酸的濃度和分子量。作者在開頭的介紹中這樣說:我們曾經(jīng)用Shodex OHpak B-806成功把HA跟其他多

2、糖分離,并且測定了它的分子量。但是,要測定HA的濃度需要HA跟其他物質(zhì)完全分離,因此我們用兩根柱子(Shodex OHpak 和B-806 and B-805合用來達(dá)到更高的分離度和覆蓋不同的分子量范圍。色譜條件equipped with two Shodex OHpak columns (Showa Denko, Tokyo,Japan, B-806 and B-805 (50 cm x 8 mm I.D., a guard column of Shodex OHpak800P (50 mm x 6 mm I.D. The eluent was 0.02 M sodium chloride,

3、The flow-rate was 0.5 ml/min.對照品作者自制不同分子量的HA(過特定的柱子或者透析,HA的濃度是作者用咔唑法測糖醛酸的方法測定。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備作者用不同分子量的自制HA做曲線,結(jié)果如下: 1:DNA,M=3千1百萬;2 :純化的HA,M=1百萬;3:純化的HA,M=61萬;4:純化的HA,M=33.5萬;5:純化的HA,M=25.7萬;結(jié)果表明:在分子量60萬和20萬之間是成線性關(guān)系的;作者同時進(jìn)了Pullulan (GPC葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品,結(jié)果發(fā)現(xiàn)用上述曲線測出來的Pullulan分子量跟實(shí)際的分子量有差別,說明HA的標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)該用HA標(biāo)準(zhǔn)品校正。結(jié)論這個結(jié)果證明了可

4、用此方法同時測定生物樣品中HA的分子量和濃度。然而,此色譜技術(shù)對于大于1百萬分子量的HA卻不能提供精確的分子量。文獻(xiàn)2 Analysis of Over 15 Million Dalton Polymers by Aqueous SEC Method用水性凝膠滲透色譜法分析超過1500萬分子量的多聚體文獻(xiàn)來源:SHODEX公司網(wǎng)站下載文獻(xiàn)摘要:這篇文章主要是SHODEX公司介紹用Shodex OHpak SB-807 HQ色譜柱來分析高分子量HA(大于100萬,主要介紹了兩個試驗(yàn):一.分別用SB-807柱子和SB-806柱子分析了Mw=550萬的HA,結(jié)果如下(綠色曲線為806,紅色為807: 結(jié)果:用806峰形不對稱(拖尾,作者分析原因?yàn)镠A超出了806的排阻限度,高分子量的HA在同一時間流出的結(jié)果;807峰形對稱,可以準(zhǔn)確的表示出樣品的分子量分布,同時,807的大顆粒可以保護(hù)潛在的剪切降解。二.用SB-807分