食用菌菌種生產

1、第三章食用菌菌種生產第三章食用菌菌種生產本章重點：食用菌制種條件，培養(yǎng)基種類及本章重點：食用菌制種條件，培養(yǎng)基種類及配方，菌種分離方法，無菌接種技術，菌種配方，菌種分離方法，無菌接種技術，菌種培養(yǎng)、保藏等方法措施。培養(yǎng)、保藏等方法措施。教學目的：使學生掌握食用菌母種、原種、教學目的：使學生掌握食用菌母種、原種、栽培種的制種技術。栽培種的制種技術。第一節(jié)食用菌菌種的概念第一節(jié)食用菌菌種的概念一、菌種的概念一、菌種的概念原意是指孢子（相當于植物的種子） ，但在實際生產中，常將經過人工培養(yǎng)的純菌絲體連同培養(yǎng)基質一同叫做菌種。二、菌種的類型二、菌種的類型在生產中根據菌種的來源、繁殖代數及生產目的，把菌

2、種分為母種、原種和栽培種。分別叫一級種、二級種、三級種。母種：將純菌絲體或孢子在試管培養(yǎng)基中繁母種：將純菌絲體或孢子在試管培養(yǎng)基中繁殖而成?？梢苑敝吃N，也適宜菌種保藏。殖而成?？梢苑敝吃N，也適宜菌種保藏。原種：母種菌絲在固體培養(yǎng)基上繁殖而成。原種：母種菌絲在固體培養(yǎng)基上繁殖而成。這一過程增強菌絲對培養(yǎng)環(huán)境的適應性，又這一過程增強菌絲對培養(yǎng)環(huán)境的適應性，又起到擴繁的作用。原種可以直接出菇。起到擴繁的作用。原種可以直接出菇。栽培種：由原種擴繁而成。主要是為了擴繁，栽培種：由原種擴繁而成。主要是為了擴繁，為生產提供足夠的菌種。為生產提供足夠的菌種。第二節(jié)食用菌制種條件第二節(jié)食用菌制種條件一、食用

3、菌制種程序一、食用菌制種程序種菇試管培養(yǎng)基培養(yǎng)母種固體培養(yǎng)基原種固體培養(yǎng)基栽培種培養(yǎng)培養(yǎng)料滅菌培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)料滅菌培養(yǎng)二、制種的基本設備和條件二、制種的基本設備和條件1.接種條件接種條件接種室接種室接種箱接種箱超凈工作臺超凈工作臺酒精燈和接種工具酒精燈和接種工具2.培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件菌種培養(yǎng)室菌種培養(yǎng)室恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱3.消毒滅菌條件消毒滅菌條件滅菌條件滅菌條件高壓滅菌鍋高壓滅菌鍋手提式手提式大型高壓滅菌鍋常壓滅菌鍋常壓滅菌鍋常壓滅菌鍋常壓滅菌鍋3.消毒條件消毒條件常用的消毒藥劑有：常用的消毒藥劑有：酒精、甲醛、硫磺、多菌靈、克霉靈、氣霧消毒劑、生石灰、酒精、甲醛、硫磺、多菌靈、克霉靈、氣霧

4、消毒劑、生石灰、高錳酸鉀等。高錳酸鉀等。紫外線燈紫外線燈30W30W4.制種常用容器制種常用容器玻璃容器：玻璃容器：試管、培養(yǎng)皿、三角瓶、罐頭瓶、菌種瓶等。試管、培養(yǎng)皿、三角瓶、罐頭瓶、菌種瓶等。塑料容器：塑料容器：聚乙烯、聚丙烯塑料袋或筒料，塑料套環(huán)，聚丙烯膜等。聚乙烯、聚丙烯塑料袋或筒料，塑料套環(huán)，聚丙烯膜等。5.菌種保藏條件菌種保藏條件 冰箱冰箱 冷藏室冷藏室 冷庫冷庫第三節(jié)食用菌菌種的培養(yǎng)基第三節(jié)食用菌菌種的培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基1. 1.概念：培養(yǎng)基是采用人工的方法，按照一定比例配制概念：培養(yǎng)基是采用人工的方法，按照一定比例配制各種營養(yǎng)物質，以供給食用菌生長繁殖的基質。各種營養(yǎng)物

5、質，以供給食用菌生長繁殖的基質。2.2.種類：液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固化培養(yǎng)基種類：液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固化培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基優(yōu)點是營養(yǎng)分布均勻，有利于菌絲吸收，液體培養(yǎng)基優(yōu)點是營養(yǎng)分布均勻，有利于菌絲吸收，理化條件易控制，便于機械化操作；菌絲生長迅速，理化條件易控制，便于機械化操作；菌絲生長迅速，產量高。產量高。固體培養(yǎng)基優(yōu)點是原材料廣泛價格低廉，配制容易。固體培養(yǎng)基優(yōu)點是原材料廣泛價格低廉，配制容易。固化培養(yǎng)基是指將各種營養(yǎng)物質按比例配成營養(yǎng)液后，固化培養(yǎng)基是指將各種營養(yǎng)物質按比例配成營養(yǎng)液后，再加入適量的凝固劑，冷卻后凝固。再加入適量的凝固劑，冷卻后凝固。二、母種培養(yǎng)基二、母種培養(yǎng)基1.常用

6、母種培養(yǎng)基配方常用母種培養(yǎng)基配方馬鈴薯馬鈴薯200g，葡萄糖，葡萄糖20g，瓊脂，瓊脂20g，水，水1000ml。馬鈴薯馬鈴薯200g，葡萄糖，葡萄糖20g，瓊脂，瓊脂20g，磷酸二氫，磷酸二氫鉀鉀3g，硫酸鎂，硫酸鎂1.5g，維生，維生B110mg，水，水1000ml。2.2.試管培養(yǎng)基制作試管培養(yǎng)基制作稱重馬鈴薯去皮切成小塊加水煮沸稱重馬鈴薯去皮切成小塊加水煮沸3030分鐘分鐘左右過濾取汁加糖、瓊脂及其它營養(yǎng)趁左右過濾取汁加糖、瓊脂及其它營養(yǎng)趁熱分裝試管塞好棉塞每熱分裝試管塞好棉塞每7 7個捆成一個捆成一梱梱棉棉塞部位用牛皮紙包好滅菌擺塞部位用牛皮紙包好滅菌擺鈄鈄面。面。裝入試管的量為試管

7、的裝入試管的量為試管的1/51/41/51/4高度。高度。三、原種和栽培種培養(yǎng)基三、原種和栽培種培養(yǎng)基1. 1.培養(yǎng)基配方培養(yǎng)基配方1 1）闊葉樹鋸末）闊葉樹鋸末78%78%，米糠或麩皮，米糠或麩皮20%20%，石膏粉，石膏粉1%1%，蔗糖，蔗糖1%1%，加水至含水量，加水至含水量50%50%60%60%。2 2）谷粒（玉米、麥粒等）谷粒（玉米、麥粒等）10001000克，石膏粉克，石膏粉1313克，克，碳酸鈣碳酸鈣4 4克?？?。2.2.培養(yǎng)基制作培養(yǎng)基制作拌料滅菌谷粒煮熟而又不脹破，拌入石膏粉，拌料滅菌谷粒煮熟而又不脹破，拌入石膏粉，裝瓶滅菌。裝瓶滅菌。第四節(jié)食用菌菌種分離第四節(jié)食用菌菌種分

8、離 菌種分離是菌種純化的基本方法，菌種分離是菌種純化的基本方法，是制種的重要環(huán)節(jié)。是制種的重要環(huán)節(jié)。 組織分離組織分離 菌種分離孢子分離菌種分離孢子分離 種木分離種木分離一、接種箱和超凈工作臺的使用一、接種箱和超凈工作臺的使用1. 1.接種箱擦凈放入物品（培養(yǎng)基、接種工接種箱擦凈放入物品（培養(yǎng)基、接種工具等其它物品熏蒸具等其它物品熏蒸3030分鐘或紫外燈照射分鐘或紫外燈照射3030分分鐘點燃酒精燈接種鐘點燃酒精燈接種2.2.超凈工作臺擦凈放入物品紫外燈照射超凈工作臺擦凈放入物品紫外燈照射3030分鐘關掉紫外燈打開過濾風機點燃酒分鐘關掉紫外燈打開過濾風機點燃酒精燈接種精燈接種. .無菌操作及轉管

9、無菌操作及轉管1. 1.無菌操作即在無菌操作即在絕對無菌的條件絕對無菌的條件下接種。下接種。2.2.轉管轉管將母種接到試管將母種接到試管培養(yǎng)基上，目的培養(yǎng)基上，目的擴大數量，也叫擴大數量，也叫擴繁。擴繁。無菌室超凈工作臺酒精燈三、菌種的分離三、菌種的分離1. 1.組織分離法組織分離法選擇頭潮菇，菌選擇頭潮菇，菌肉肥厚，形正，肉肥厚，形正，未散孢，八分成未散孢，八分成熟的種菇。熟的種菇。消毒接種培消毒接種培養(yǎng)純化試驗養(yǎng)純化試驗孢子分離法孢子分離法是用成熟的有性是用成熟的有性孢子萌發(fā)培養(yǎng)成孢子萌發(fā)培養(yǎng)成菌絲體而得到的菌絲體而得到的菌種。菌種。消毒采集孢子消毒采集孢子接種培養(yǎng)挑接種培養(yǎng)挑菌落純化菌落

10、純化第五節(jié)食用菌菌種制作第五節(jié)食用菌菌種制作這節(jié)內容主要是通過實這節(jié)內容主要是通過實踐課來完成，下面僅介紹制種踐課來完成，下面僅介紹制種的工作程序和需要注意的問題的工作程序和需要注意的問題一、培養(yǎng)基的選擇與制備一、培養(yǎng)基的選擇與制備1. 1.培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)基的選擇根據菌類所需要的營養(yǎng)，菌種的保存時根據菌類所需要的營養(yǎng)，菌種的保存時間，栽培季節(jié)，栽培料資源來確定培養(yǎng)間，栽培季節(jié)，栽培料資源來確定培養(yǎng)基配方。基配方。2.2.培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備注意：含水量適宜，裝瓶的松緊度適宜，注意：含水量適宜，裝瓶的松緊度適宜，培養(yǎng)基做好后或拌料裝瓶后應馬上滅菌。培養(yǎng)基做好后或拌料裝瓶后應馬上滅菌。二、接種二

11、、接種一支試管可以擴繁一支試管可以擴繁為為20203030支試管支試管一支試管可以一支試管可以擴繁為五瓶原種擴繁為五瓶原種一瓶原種可以接一瓶原種可以接30304040瓶栽培種瓶栽培種第六節(jié)菌種的培養(yǎng)第六節(jié)菌種的培養(yǎng)1.營養(yǎng)成分營養(yǎng)成分2.水分和空氣水分和空氣3.溫度溫度4.光線光線5.酸堿度酸堿度6.培養(yǎng)時間培養(yǎng)時間7.定期檢查定期檢查第七節(jié)菌種質量的鑒定第七節(jié)菌種質量的鑒定 菌種質量的鑒定一般是從菌種的純度、長勢、顏色、菌齡、均勻度和出菇快慢等6方面進行鑒定的，最可靠的方法就是出菇試驗。一、母種質量鑒定一、母種質量鑒定1.轉管次數最多不超過轉管次數最多不超過45次次2.菌齡低溫保存不超過菌齡

12、低溫保存不超過6個月個月3.外觀菌絲濃白、粗壯、富有彈性、爬瓶力強，沒外觀菌絲濃白、粗壯、富有彈性、爬瓶力強，沒有干燥、收縮現象和大量紅褐色液體。有干燥、收縮現象和大量紅褐色液體。4.長勢菌絲生長快、整齊、濃而健壯。長勢菌絲生長快、整齊、濃而健壯。5.溫度適應性在適溫培養(yǎng)后，放在高溫下培養(yǎng)幾小溫度適應性在適溫培養(yǎng)后，放在高溫下培養(yǎng)幾小時，菌絲仍能健壯生長的。時，菌絲仍能健壯生長的。6.干濕性鑒定干濕性鑒定7.出菇試驗出菇試驗二、原種和栽培種質量的鑒定二、原種和栽培種質量的鑒定原種、栽培種最好不做貯備菌種，按栽培時期有計劃地生原種、栽培種最好不做貯備菌種，按栽培時期有計劃地生產。接原種的母種轉管

13、次數要少。產。接原種的母種轉管次數要少。外觀要求：外觀要求：1. 1.菌絲生長健壯，絨狀菌絲多，生長整齊。菌絲生長健壯，絨狀菌絲多，生長整齊。2.2.菌絲己長菌絲己長滿滿培養(yǎng)基，有的要求有分化的子實體原基。有培養(yǎng)基，有的要求有分化的子實體原基。有菇香味，無異味。菇香味，無異味。3.3.菌絲色澤潔白或符合該菌的顏色。菌絲色澤潔白或符合該菌的顏色。4.4.菌種瓶內無雜色出現和無雜菌污染。菌種瓶內無雜色出現和無雜菌污染。5.5.菌種瓶內無黃色汁液滲出。菌種瓶內無黃色汁液滲出。6.6.菌種培養(yǎng)基不能干縮與瓶壁分開。菌種培養(yǎng)基不能干縮與瓶壁分開。第八節(jié)菌種保藏和復壯第八節(jié)菌種保藏和復壯一、菌種保藏一、菌

14、種保藏通常采用干燥、低溫、冷凍、缺氧和真通常采用干燥、低溫、冷凍、缺氧和真空保藏，即使生命處于休眠狀態(tài)?？毡２?，即使生命處于休眠狀態(tài)。1.斜面低溫保藏斜面低溫保藏42.液體石蠟保藏液體石蠟保藏3.濾紙保藏濾紙保藏4.自然基質保藏自然基質保藏二、菌種復壯二、菌種復壯菌種復壯是使生活力降低的菌種恢復或提高到菌種復壯是使生活力降低的菌種恢復或提高到原有健壯的程度。原有健壯的程度。1.加富培養(yǎng)法加富培養(yǎng)法2.交替培養(yǎng)法交替培養(yǎng)法3.頂端菌絲復壯法頂端菌絲復壯法復習思考題復習思考題什么叫食用菌菌種？它有哪些類型？什么叫食用菌菌種？它有哪些類型？為什么要繁殖一、二、三級的菌種？為什么要繁殖一、二、三級的菌種？食用菌制種需要哪些條件？食用菌制種需要哪些條件？高壓滅菌鍋和常壓滅菌鍋各有哪些優(yōu)缺點？高壓滅菌鍋和常壓滅菌鍋各有哪些優(yōu)缺點？培養(yǎng)基有哪些類型？培養(yǎng)基有哪些類型？怎樣進行無菌室、無菌箱消毒？怎樣進行無菌室、無菌箱消毒？什么是