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1、新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院醫(yī)用化學(xué)實(shí)驗課教案首頁授課教師姓名及職稱:一、實(shí)驗名稱糖和蛋白質(zhì)的性質(zhì)二、授課對象普本授課形式實(shí)驗教學(xué)三、教學(xué)目標(biāo)1、掌握主要糖類和蛋白質(zhì)的鑒別方法2、熟悉常見糖和蛋白質(zhì)的性質(zhì)四、教學(xué)內(nèi)容1、單糖、雙糖和多糖的性質(zhì)2、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)3、反應(yīng)及現(xiàn)象五、教學(xué)安排與課時分配1、 講解演示40 min2、 學(xué)生操作、教師指導(dǎo)80 min六、授課重點(diǎn)糖和蛋白質(zhì)的性質(zhì)、鑒定七、注意事項1、酒精燈加熱試管時切勿對準(zhǔn)自己或他人八、授課方法教師示范講述,學(xué)生操作九、使用教材醫(yī)用化學(xué)實(shí)驗技術(shù)導(dǎo)論閆福林成都科技大學(xué)出版社 1998十、教研室審查意見主任簽字新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院化學(xué)教研室實(shí)驗 糖和蛋白質(zhì)的性質(zhì)、實(shí)驗?zāi)康?/p>
2、熟悉糖和蛋白質(zhì)的組成及性質(zhì)掌握糖和蛋白質(zhì)的鑒別方法二、實(shí)驗原理對于有機(jī)化合物來說,有確定其結(jié)構(gòu),除了元素分析,波譜技術(shù),或測定其物理常數(shù)(如熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、折光率等)外,利用化學(xué)方法進(jìn)行官能團(tuán)分析也是很重要的方法。特別是官能團(tuán)定性實(shí)驗,操作簡便,速度快,馬上可以知道結(jié)果。官能團(tuán)的定性檢驗是利用有機(jī)化合物中各官能團(tuán)所具有的不同特征,與某些試劑發(fā)生反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)現(xiàn)象(如顏色變化、沉淀、放出氣體等),與其他化合物進(jìn)行區(qū)別。因此,對定性試驗要求反應(yīng)迅速、結(jié)果明顯,而且對某一官能團(tuán)有專一性。1 .糖的性質(zhì)糖是一類含有多個羥基的醛、酮,具有羥基和羰基的官能團(tuán)性質(zhì)。通常分為單糖、雙糖和多糖。單糖及含有半縮醛羥基
3、的雙糖在水溶液中能發(fā)生互變異構(gòu)現(xiàn)象,開鏈結(jié)構(gòu)與環(huán)狀結(jié)構(gòu)具有一定的平衡。因此,具有還原性,也稱為還原糖,能與 Fehling試劑,Benedict試劑 和Tollen試劑等弱氧化劑作用。還原糖Tollen試劑還原糖還原糖+Fehling 試劑Ben edict 試劑A'銀鏡亠CU2O磚紅色沉淀4 CU2O磚紅色沉淀還原性糖與Ben edict試劑作用,產(chǎn)生磚紅色氧化亞銅,臨床上常用此反應(yīng)作血糖和尿糖的定性和定量檢查。還原糖與過量的苯肼成脎,可生成難溶于水的黃色糖脎結(jié)晶,不同的糖脎均有一定的熔點(diǎn)和晶形,可鑒別某些糖。如葡萄糖與過量的苯肼作用,在熱水中很容易生成糖脎。CHOHOHHOHOHH
4、OHHC6H5NHNH 2HOHNNHC6H5C=NNHC6H5OHOHCH2OHCH2OH糖類化合物在濃鹽酸或濃硫酸的作用下,能與酚類化合物發(fā)生顏色反應(yīng),如與a 萘酚的乙醇溶液作用產(chǎn)生紫色,這個反應(yīng)稱為Molish反應(yīng)。Seliwanof反應(yīng),由于此試劑另外,糖還可以與間苯二酚的鹽酸溶液作用呈現(xiàn)紅色,此反應(yīng)稱為 與酮糖反應(yīng)出現(xiàn)紅色較醛糖快得多,常用此反應(yīng)來鑒別酮糖和醛糖。淀粉與碘呈藍(lán)色,是淀粉的特性反應(yīng)。2 .蛋白質(zhì)的性質(zhì)蛋白質(zhì)是由氨基酸縮合而成的大分子化合物,因分子有游離的氨基和羧基,也能發(fā)生兩性電離。蛋白質(zhì)還具有膠體性質(zhì)和生物活性。與一些化學(xué)物質(zhì)作用可以變性發(fā)生沉淀。常利用重金屬離子與蛋
5、H OI IIN C基團(tuán),可以發(fā)生白質(zhì)作用生成不溶性鹽來緩解重金屬中毒。蛋白質(zhì)除了具有a 氨基酸與茚三酮反應(yīng)外,由于分子中含有多個 雙縮脲反應(yīng),即與稀的堿性硫酸銅溶液作用,呈現(xiàn)紫色。對于分子中含有苯環(huán)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì),還可以 發(fā)生蛋白黃色反應(yīng),即與濃硝酸作用呈現(xiàn)黃色。三、實(shí)驗1. 糖的性質(zhì)(1) 儀器與藥品試管燒杯酒精燈水浴鍋點(diǎn)滴板顯微鏡濃硫酸、硫酸(3 mol L-1 )濃鹽酸、NaOH (100 g L-1)碘溶液 Ben edict試劑 鹽酸苯肼醋酸鈉溶液Molish試劑Seliwanoff試劑紅色石蕊試紙葡萄糖、果糖、麥芽糖、蔗糖、淀粉溶液糖與Ben edict試劑反應(yīng)(2) 實(shí)驗內(nèi)容 糖
6、與Benedict試劑反應(yīng)取6支大試管,各加入1 ml Benedict試劑再分別加入2滴葡萄糖、果糖、麥芽糖,蔗糖、淀粉溶 液和蒸餾水(對照管),在沸水中加熱23分鐘,移出試管,觀察并記錄結(jié)果 糖脎的生成取2支大試管,分別加入 1 ml葡萄糖、果糖溶液,再加入 1ml新配置的鹽酸苯肼醋酸鈉溶液, 搖勻后置沸水中30分鐘。取出試管,自行冷卻(為什么?)此時有黃色結(jié)晶生成。取少許結(jié)晶在顯微 鏡下觀察其晶形。 糖的顏色反應(yīng)Molish試驗 取5支大試管,分別加入 1ml葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉溶液和蒸餾水(對照管)。各加入2滴新配制的Molish試劑,搖勻。將每只試管傾斜,沿管壁徐徐注入1ml濃硫
7、酸,使酸進(jìn)入管底。觀察兩層液體交界處的顏色。Seliwanof試驗 取4支大試管,各加入1 ml Seliwanoff試劑,然后再分別加入 5滴I葡萄糖、果 糖、蔗糖溶液和蒸餾水,搖勻,在沸水中加熱2分鐘。比較各管紅色出現(xiàn)的次序。 蔗糖的水解取2支大試管,各加入 1ml蔗糖溶液,并往其中一支試管內(nèi)加入 2滴H2SO4 (3 mol L-1),將兩支 試管均置沸水中加熱 10分鐘。冷卻后加入 NaOH (100 g L-1)至溶液呈堿性(紅色石蕊試紙變藍(lán)) ,再 各加入10滴Ben edict試劑,置沸水中再加熱 3分鐘,取出后觀察結(jié)果。 淀粉的性質(zhì)與碘液作用 取1支大試管,加1滴淀粉溶液,用蒸
8、餾水稀釋10倍,力口 1滴碘液,顯何色?再水解反應(yīng) 用吸管取 用 NaOH 觀察結(jié)果。( 3)在酒精燈上加熱,待顏色退去后,冷卻,顯何色?思考題取 1 支大試管,加入 2ml 淀粉溶液,再加 3 滴濃硫酸,置沸水中加熱。每隔 2 分鐘, 1 滴反應(yīng)液于白瓷板上,加 1 滴碘液,觀察顏色變化。當(dāng)反應(yīng)液不與碘顯色時,取出冷卻, (100 g L-1)中和至石蕊試紙變藍(lán)。加入10滴Ben edict試劑,搖勻,置沸水中加熱3分鐘, 葡萄糖和果糖是否可以用生成糖脎的反應(yīng)鑒別?為什么? 蔗糖和淀粉與 Benedict 試劑均無作用。此實(shí)驗對了解二者的結(jié)構(gòu)有何提示?2. 蛋白質(zhì)的性質(zhì)( 1 )儀器與藥品試
9、管 燒杯 離心管 離心機(jī) 點(diǎn)滴板NaOH (50 g L-1) CUSO4 (30 g L-1) HgCl 2 (30 g L-1) AgNO 3 (30 g L-1)醋酸鉛(30 g L-1) Molish 試劑 鹽酸(0.5 mol L-1)濃硝酸 飽和硫酸銨溶液 硫酸銨粉末 三氯乙酸(100 g L-1)苯酚(10 g L-1) 茚三酮溶液 無水乙醇 苦味酸(50 g L-1)蛋白質(zhì)溶液(100 g L-1)( 2)實(shí)驗內(nèi)容 蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)與茚三酮反應(yīng) 在試管中加入蛋白質(zhì)溶液,然后加 3 滴茚三酮溶液,在沸水浴中加熱 10-15min, 觀察現(xiàn)象?Molish 反應(yīng) 取兩支試管,在一試
10、管中加 3 滴苯酚;在另一支試管中加 3滴蛋白質(zhì)溶液,然后在兩 支試管中各加 3 滴 Molish 試劑(此時在蛋白質(zhì)溶液中有白色沉淀生成) ,將兩支試管放在沸水浴中加 熱,觀察顏色變化。黃蛋白反應(yīng) 取兩支試管,在一試管中加 5滴苯酚;在另一支試管中加 5滴蛋白質(zhì)溶液,然后分 別加入 2 滴濃硝酸,觀察在蛋白質(zhì)溶液中是否有白色沉淀生成?將兩支試管放在沸水浴中加熱,此時 兩支試管各有什么現(xiàn)象。醋酸鉛反應(yīng) 在試管中加入 10 滴醋酸鉛, 滴加 2 滴氫氧化鈉, 搖勻后再加 4 滴蛋白質(zhì)溶液, 振蕩, 將試管放在沸水浴中加熱 23分鐘,觀察顏色變化。二縮脲反應(yīng) 在試管中加入 5滴蛋白質(zhì)溶液和 5滴氫
11、氧化鈉,搖勻后,加入 2滴硫酸銅,振蕩, 觀察顏色變化。 蛋白質(zhì)的沉淀中性鹽沉淀蛋白質(zhì) 在離心管中分別加入 2ml 蛋白質(zhì)溶液和飽和硫酸銨溶液, 混勻后, 靜置 10分 鐘,球蛋白將析出,將其離心,離心后的上層清液用滴管移至另一離心管中,慢慢加硫酸銨粉末,每 加一次,均用玻璃棒充分?jǐn)嚢?,直到粉末不再溶解為止。靜置1 0分鐘,則可見清蛋白沉淀析出,離心并吸去上層清液。向上述兩離心管沉淀中分別加入蒸餾水2 ml,用玻璃棒攪拌,觀察沉淀能否溶解?乙醇沉淀蛋白質(zhì) 在試管中加入 5滴蛋白質(zhì)溶液,沿試管壁加入 10滴無水乙醇,搖勻,靜置數(shù) 分鐘,觀察溶液能否出現(xiàn)渾濁? 蛋白質(zhì)的變性酸沉淀蛋白質(zhì) 在試管中加入 5滴蛋白質(zhì)溶液,然后加入 1 滴鹽酸使其酸化,再滴加 2滴三氯乙 酸,觀察沉淀的生成。取兩滴蛋白質(zhì)溶液于點(diǎn)滴板上,加 1 滴苦味酸, (必要時加 0.1 mol L-1 鹽酸酸化)觀察沉淀生成。重金屬沉淀蛋白質(zhì)在四支試管中,各加入 5滴蛋白質(zhì)溶液,然后依次加3滴HgCl
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