格林-巴利綜合征患者幽門螺桿菌抗體測定

1、    格林-巴利綜合征患者幽門螺桿菌抗體測定        摘要： 目的探討幽門螺桿菌（Hp）感染與格林-巴利綜合征（GBS）發(fā)病的相關(guān)性。方法用免疫法對GBS及對照組血清、CSF進(jìn)行Hp特異性IgA、IgG、IgM測定。結(jié)果 49例GBS血清IgG含量為（48.62±57.30）U/L，陽性率67.3%，對照組為（12.45±15.07）U/L，陽性率35.9%，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗，t=4.87,x2=8.55，P均<0.01；IgA分別為（8.62&

2、#177;9.19）U/L、（5.48±4.12）U/L（t=3.64,P<0.01）；IgM分別為（20.58±26.43）U/L、（13.06±17.52）U/L（t=1.83,P>0.05）。21例GBSCSFHp特異性IgG為（4.19±4.21）U/L，20例對照組為（2.21±0.34）U/L（t=5.37,P<0.01）；IgA分別為（2.89±1.21）U/L、（2.54±0.67）U/L（t=1.84,P>0.05）；IgM分別為（4.41±1.83）U/L、（3.98&#

3、177;1.02）U/L（t=1.26,P>0.05）。結(jié)論 Hp抗體水平與GBS發(fā)病呈正相關(guān)，提示Hp感染可能是GBS發(fā)病誘因之一。關(guān)鍵詞： 格林-巴利綜合征 ; 幽門螺桿菌中分類號： R745 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A 文章編號： 1006-2963 （2000）02-083-04Detection of Antibody to Helicobacter Pylori in Patients with Guillain-Barre SyndromeZHU Yong-liangLU Xin-liangXIN Qi-junDU QinQIAN Ke-da（Gastroenterology Lab

4、oratory, The 2nd Affiliated Hospital, Medical College of Zhejiang University, Hangzhou 310009, China）ABSTRACT： ObjectiveTo investigate the relationship between infection of helicobacter pylori(Hp) and Guillain-Barre syndrome(GBS). Method An enzyme immunoassay was employed to determine the concentrat

5、ion of antibodies(IgA,IgG,IgM) in serum and CSF in patients with GBS and controls. ResultsThe concentration of serum IgG in 49 patients with GBS was (48.62±57.30) U/L(x±s), positive rate 67.3%, but in 39 controls was only (12.45 ±15.07) U/L, positive rate 35.9%(t=4.87,P<0.01); IgA

6、was(8.62±9.19) U/L, (5.48±4.12) U/L, respectively(t=3.64,P<0.01), but IgM was (20.58±26.43) U/L, (13.06±17.52) U/L, respectively (t=1.83,P>0.05). The IgG in CSF 21 patients was (4.19±4.21) U/L, and (2.21±0.34) U/L in 20 controls(t=5.37,P<0.01), however IgA was

7、(2.89±1.21) U/L, (2.54±0.67) U/L( t=1.84,P>0.05)；IgM was (4.41±1.83) U/L, (3.98±1.02) U/L(t=1.26,P>0.05). ConclusionThe concentration of Hp antibodies has positive relationship with GBS, it suggests that the infection of Hp may be of an inducing factor of GBS.Key words: hel

8、icobacter pylori; Guillain-Barre syndrome幽門螺桿菌（helicobacter pylori，Hp）感染與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，且已被國際抗癌聯(lián)盟列為I類致癌物1。近來研究表明，Hp感染還與其它疾病相關(guān)2,3。格林-巴利綜合征（Guillain-Barre syndrome，GBS）是一種周圍神經(jīng)系統(tǒng)急性炎癥性脫髓鞘疾病，其病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為它是一種感染后自身免疫變態(tài)反應(yīng)性疾病，空腸彎曲菌是引起GBS最常見的感染因素之一4,5。Hp的生物學(xué)性狀與空腸彎曲菌相似，是否也是引起GBS的感染因素迄今國內(nèi)外尚未見報道

9、。本研究采用酶免疫法（ELISA）測定了GBS患者和對照組血清、CSFHp特異性IgA、IgG、IgM，以探討Hp感染與GBS之間的關(guān)系。1材料和方法1.1材料6。對照組39例（男27例，女12例），皆為獻(xiàn)血員，年齡2450歲，平均（33.6±13.1）歲。以上血清均新鮮分離，分裝后置-20 保存?zhèn)溆?。同時收集21例GBS患者CSF（男13例，女8例），年齡2070 歲，平均（41.2±12.9）歲，對照組20例為非GBS神經(jīng)科住院患者。1.2方法2SO414C尿素呼氣試驗和W-S銀染色均陽性血清以評價方法敏感性，以上述二法均陰性同時伴快速尿素酶試驗和培養(yǎng)均陰性的血清以評價

10、方法特異性1。以同一樣本同時測定20孔評價方法批內(nèi)差異，以同一樣本不同時間連續(xù)測定20次評價方法批間差異。2結(jié)果2.1GBS組和對照組血清Hp特異性IgA、IgG、IgM含量和陽性率比較GBS血清Hp特異性IgA、IgG含量顯著高于對照組，經(jīng)t檢驗，t=3.64、4.87，P值均<0.01，但I(xiàn)gM兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=1.83，P>0.05）（表1）。若以Hp感染陰性（14C尿素呼氣試驗、W-S銀染色、快速尿素酶試驗和細(xì)菌培養(yǎng)均陰性）血清的平均含量加2個標(biāo)準(zhǔn)差以上者作為Hp感染陽性標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果示GBS組Hp感染率顯著高于對照組。提示Hp感染與GBS發(fā)病有關(guān)，但Hp近期感染則與

11、GBS無關(guān)。2.2GBS組和對照組腦脊液Hp特異性IgA、IgG、IgM測定 GBS組腦脊液Hp特異性IgG顯著高于對照組（t=5.37，P<0.01），而IgA、IgM則兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=1.84、1.26，P均>0.05）（表2）。表1GBS組和對照組血清Hp特異性IgA、IgG、IgM測定比較Table 1Comparison between IgA,IgG,IgM to Hp in serum from patients with GBS and controls (U/L, ±s)nIgAIgGIgMConcentrationPositiverate(

12、%)ConcentrationPositiverate(%)ConcentrationPositiverate(%)GBS498.62±9.19*36.78*48.62±57.30#67.3#20.58±26.436.1Control395.48±4.1212.812.45±15.0735.913.06±17.522.6* P<0.01,#P<0.01 ，P>0.05 compared with control, respectively 表 2 GBS組和對照組腦脊液Hp特異性IgA、IgG、IgM測定Table

13、2 Detection of IgA,IgG,IgM against Hp in CSF from patients with GBS and controls(U/L, ±s)nIgAIgGIgMGBS212.89±1.21*4.19±4.21#4.41±1.83Control202.54±0.672.21±0.343.98±1.02* P>0.05,P<0.01，P>0.05 compared with control, respectively2.3測定方法評價 本方法測定的敏感性為90.2%，特異性

14、93.6%，重復(fù)性100%，方法學(xué)批內(nèi)差異7.6%，批間差異9.4%。采用蛋白質(zhì)免疫印跡法鑒定結(jié)果表明Hp純化抗原與空腸彎曲菌抗體無反應(yīng)，提示與空腸彎曲菌無交叉抗原成分。 3討論Hp于1983年由Marshall和Warren首次分離以來，引起了消化系學(xué)者的廣泛關(guān)注7。數(shù)年的研究證實，Hp感染不僅是慢性活動性胃炎、消化性潰瘍的主要病因之一，也與胃癌、胃粘膜相關(guān)淋巴組織樣淋巴瘤的發(fā)病相當(dāng)密切8。Hp是一種專性微需氧的革蘭陰性彎曲樣細(xì)菌，由于其特有的高效脲酶得以在胃粘膜粘液層中定植，分泌多種毒性成分對胃粘膜細(xì)胞造成損傷。Hp感染具有以下特點(diǎn)：長期性，不經(jīng)抗Hp治療感染可持續(xù)數(shù)年、數(shù)十年乃至終生。易

15、傳染性，可通過口-口和糞-口傳播。不易根治，用單聯(lián)或二聯(lián)抗生素治療Hp的根除率約60%。研究證實，Hp可誘發(fā)機(jī)體強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答。局部引起粘膜大量炎癥細(xì)胞浸潤及免疫反應(yīng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生多種細(xì)胞因子如TNF、IL-1、IL-6、IL-8和熱休克蛋白等，并激活補(bǔ)體系統(tǒng)，引起組織炎癥反應(yīng)；Hp感染患者外周血的IFN-和LAK細(xì)胞增殖與殺傷力均顯著低于Hp陰性患者。近年來文獻(xiàn)報道Hp與慢性腎功能不全、肝硬化和冠心病等亦有關(guān)9。格林-巴利綜合征是臨床急性遲緩性癱瘓的常見原因之一。其發(fā)病機(jī)制尚未完全明了，由于此病大多起病急驟，約半數(shù)以上患者在發(fā)病前有急性感染病史，病程呈自限性，預(yù)后良好，所以認(rèn)為GBS主要與空

16、腸彎曲菌、巨細(xì)胞病毒、EB病毒、呼吸合胞病毒等感染有關(guān)。其中對空腸彎曲菌的研究較多?？漳c彎曲菌可與神經(jīng)組織間發(fā)生交叉免疫反應(yīng)；對神經(jīng)有毒素性損傷及誘導(dǎo)細(xì)胞免疫損傷4，5。鄭錦志等發(fā)現(xiàn)GBS患者存在細(xì)胞免疫功能的激活10。由于Hp與空腸彎曲菌有少量交叉抗原，因此在制備Hp純化抗原時需先用空腸彎曲菌標(biāo)準(zhǔn)株超聲粉碎抗原免疫家兔獲得的抗體吸收交叉抗原，然后用蛋白質(zhì)印跡法檢測。結(jié)果表明Hp純化抗原與空腸彎曲菌抗體無反應(yīng)性，純化的人抗Hp抗體與空腸彎曲菌粉碎抗原亦無反應(yīng)性，確保了本研究結(jié)果的準(zhǔn)確性。通過對血清、腦脊液Hp特異性抗體的測定表明，GBS患者Hp特異性IgG、IgA的陽性率和含量均顯著高于對照組

17、，提示Hp感染與GBS的發(fā)病有關(guān)。正常人群Hp感染率為50%以上1，但臨床GBS發(fā)病率并不高，可能因只有某些Hp菌株與GBS發(fā)病有關(guān)，或某些Hp菌株產(chǎn)生的毒素可突破機(jī)體的防御機(jī)制而對神經(jīng)產(chǎn)生毒素性損傷。Hp誘導(dǎo)的免疫損傷有明顯的個體易感性，與致病性空腸彎曲菌可能有交叉抗原。但均需進(jìn)一步研究證實。作者簡介：朱永良（1969-），男，浙江海鹽縣人，主管檢驗師，在讀碩士。通訊地址：浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬二院消化實驗室，杭州 310009。聯(lián)系電話：(0571)7783566。朱永良（浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬二院消化實驗室，杭州310009）陸新良（浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬二院消化實驗室，杭州310009）忻琪君（浙

18、江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬二院消化實驗室，杭州310009）杜勤（浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬二院消化實驗室，杭州310009）錢可大（浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬二院消化實驗室，杭州310009）參考文獻(xiàn)：1 胡伏蓮，周殿元，賈博琦. 幽門螺桿菌感染的基礎(chǔ)與臨床M. 北京：中國科學(xué)技術(shù)出版社， 1997，210.2Bode G, Mauch F, Malfertheiner P, et al. The coccoid forms of Helicobacter pylori. Criteria for their viabilityJ. Epidemiol Infect, 1993,111:483-490.3Mendal

19、l MA, Goggin PM, Molineaux N, et al. Relation of Helicobacter pylori infection and coronary heart diseaseJ. Br Heart J, 1994,71:437-439.4Speed BR, Kaldor F, Cavanagh P, et al. Guillain-Barre syndrome associated with campylobacter jejuni enteritisJ. J Infect, 1984,8:85-87.5Olivia C, Constant C, Bentley AM, et al. The Guillain-Barre S