MS培養(yǎng)基母液的配制與保存

1、MS培養(yǎng)基母液的配制與保存一、目的要求1、通過(guò)MS培養(yǎng)基母液的配制，掌握配制與保存培養(yǎng)基母液的基本技能。 2、掌握培養(yǎng)基各種母液的保存方法。二、儀器與用具 1、儀器：各類天平、磁力攪拌器、冰箱等。 2、用具：燒杯、容量瓶、量筒、試劑瓶、標(biāo)簽等。3、試劑：95%酒精，0.1-1 NaOH，0.1-1NHCl，配制MS培養(yǎng)基所需的各種無(wú)機(jī)物、有機(jī)物，蒸餾水。 三、方法步驟 （一）母液的配制 母液是欲配制培養(yǎng)基的濃縮液，一般配成比所需濃度高10100倍的溶液。 優(yōu)點(diǎn)：（1）保證各物質(zhì)成分的準(zhǔn)確性。（2）便于配置時(shí)快速移取。（3）便于低溫保藏。 1、MS大量元素母液（10X） 稱10升量溶解在1升蒸餾

2、水中。配1升培養(yǎng)基取母液100ml?；瘜W(xué)藥品1升量10升量NH4NO31650 mg/L165gKNO31900 mg/L190gCaCl2·2H2O440 mg/L44gMgSO4·7H2O370 mg/L37gKH2PO4170 mg/L17g2、MS微量元素母液（100X） 稱10升量溶解在100ml蒸餾水中。配1升培養(yǎng)基取母液10ml?；瘜W(xué)藥品1升量10升量MnSO4·4H2O（ MnSO4·H2O）223 mg/L（214 mg/L）223mgZnSO4·7H2O86 mg/L86mgCoCl2·6H2O0025mg/L02

3、5mgCuSO4·5H2O0025 mg/L025mgNa2MoO4·2H2O025 mg/L25mgKI083 mg/L83 mgH3BO362 mg/L62 mg注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（025 mgX10=25 mg）或100倍量（25 mg）稱取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，（即含025 mg的量），加入到母液中。 3、MS鐵鹽母液（100X）稱10升量溶解在100ml蒸餾水中。配1升培養(yǎng)基取母液10ml?；瘜W(xué)藥品1升量10升量Na2·EDTA373 mg/L373 mgFeSO4

4、·7H2O278 mg/L278 mg注意配制時(shí)，應(yīng)將兩種成分分別溶解在少量蒸餾水中，其中EDTA鹽較難完全溶解，可適當(dāng)加熱。混合時(shí)，先取一種置容量瓶（燒杯）中，然后將另一種成分逐加逐劇烈震蕩，至產(chǎn)生深黃色溶液，最后定容，保存在棕色試劑瓶中。4、MS有機(jī)物母液（100X） 稱10升量溶解在100ml蒸餾水中。配1升培養(yǎng)基取母液10ml。化學(xué)藥品1升量10升量煙酸05 mg/L5mg鹽酸吡哆素（VB6）05 mg/L5mg鹽酸硫胺素（VB1）肌醇100 mg/L1 g甘氨酸2 mg/L20mg5、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑單獨(dú)配制，濃度為1-5 mg/ml（書(shū)中為05 -1mg/ml），一般配成4 mg/ml 。 配制培養(yǎng)基母液時(shí)注意事項(xiàng)： 一些離子易發(fā)生沉淀，可先用少量蒸餾水溶解，在按配方順序依次混合；配制母液時(shí)必須用蒸餾水或重蒸餾水；藥品應(yīng)用化學(xué)純或分析純；溶解生長(zhǎng)素時(shí)，可用少量05 1N的NaOH 或95%酒精溶解，溶解分裂素類用05 1N的HCl加熱溶解。（二）母液的保存 1、裝瓶：將配