RPHPLC法測(cè)定泛昔洛韋分散片的含量及有關(guān)物質(zhì)

1、RPHPLC法測(cè)定泛昔洛韋分散片的含量及有關(guān)物質(zhì)         08-03-20 16:07:00     作者：翁水旺 高祖欽    編輯：studa20【摘要】  目的 建立高效液相色譜法分離測(cè)定泛昔洛韋分散片的含量及有關(guān)物質(zhì)的方法。方法 采用Kromasil C18(4.6mm×250mm，5m)色譜柱；流動(dòng)相：乙腈0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液(2575)；流速：1.0ml/min；有關(guān)物質(zhì)測(cè)定檢測(cè)波長(zhǎng)為

2、220nm，含量測(cè)定檢測(cè)波長(zhǎng)為305nm；進(jìn)樣量20l。結(jié)果 泛昔洛韋濃度在29.4088.20g/ml范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，r=0.99998；平均回收率為100.1%，RSD為0.30%，n=9；泛昔洛韋與有關(guān)物質(zhì)能完全分離。結(jié)論 本方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)，可用于泛昔洛韋分散片的含量及有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定。 【關(guān)鍵詞】  福建省藥品檢驗(yàn)所， 福州350001    Determination of famciclovir and its related substances in      AB

3、STRACT  Objective  To develop an RPHPLC method for the determination of famciclovir and its related substances in famciclovir dispersible tablets.  Methods  The chromatographic analysis was performed on Kromasil C18 (4.6 mm×250 mm, 5m) column. The mobile phase consisted of a

4、cetonitrile0.02mol/L phosphate buffer (2575). The flow rate was 1.0 ml/min. The detection wavelength was at 305nm for the content determination of famciclovir and it was 220nm for the analysis of its related substances, with 20 l injection volume.  Results  A good linearity was obtained in

5、 the range of 29.4088.20g/ml (r=0.99998). The average recovery of famciclovir was 100.1% (n=9) with RSD 0.30%. The related substances were separated from famciclovir.  Conclusion  The method was simple, accurate and specific, and could be used for the quality control of famciclovir dispers

6、ible tablets.    KEY WORDS  RPHPLC;  Famciclovir dispersible tablets;  Content determination;  Related substances     泛昔洛韋是一種開環(huán)核苷類新型高效、低毒抗病毒藥物。本品口服吸收快，體內(nèi)在酶促條件下，經(jīng)脫酯和嘌呤環(huán)的氧化作用迅速轉(zhuǎn)化為噴昔洛韋而發(fā)揮藥效。它對(duì)單純皰疹I(lǐng)型和II型(HSV1，HSV2)、水痘、帶狀皰疹病毒(VZV)均有抗病毒活性1，也可用于阿昔洛韋治療無(wú)

7、效或不敏感的嚴(yán)重皰疹病毒感染和乙型肝炎2。泛昔洛韋分散片為該藥的新劑型，它崩解快，起效迅速，效果明顯。本文用反相高效液相色譜法測(cè)定泛昔洛韋分散片的含量及有關(guān)物質(zhì)，專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確簡(jiǎn)便，結(jié)果滿意。    1  儀器與試藥    HP1100型高效液相色譜儀(G1311A四元泵，G1379A脫氣機(jī)，G1316A柱溫箱，G1313A自動(dòng)進(jìn)樣器，G1314A紫外檢測(cè)器)、Ver0801 chemistation色譜工作站(Agilent公司)。Cary100分光光度計(jì)(VARIAN公司)。    泛昔洛韋

8、對(duì)照品，含量98.9%；泛昔洛韋分散片，批號(hào)05010001、 05010003、05010005(廈門建發(fā)制藥有限公司提供)；乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。    2  方法與結(jié)果    2.1  色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)    色譜柱：Kromasil C18(4.6mm×250mm，5m)(大連依利特科學(xué)儀器有限公司)，Varian C18(4.6mm×250mm，5m)(美國(guó)Varian公司)；流動(dòng)相：乙腈0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液(2575)；流

9、速1.0ml/min；有關(guān)物質(zhì)測(cè)定檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm，含量測(cè)定檢測(cè)波長(zhǎng)為305nm；進(jìn)樣量20l。在有關(guān)物質(zhì)測(cè)定的色譜圖中，理論板數(shù)按泛昔洛韋峰計(jì)為14369，泛昔洛韋主峰與相鄰的峰的分離度大于3。    2.2  檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇    精密稱取泛昔洛韋對(duì)照品和樣品細(xì)粉，用流動(dòng)相溶解并制成每1ml含泛昔洛韋10g的溶液，分別在400200nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，結(jié)果泛昔洛韋對(duì)照品及樣品在220、242與305nm波長(zhǎng)處有最大吸收。確定220nm為有關(guān)物質(zhì)測(cè)定的波長(zhǎng)，305nm為含量測(cè)定波長(zhǎng)。   

10、 2.3  有關(guān)物質(zhì)測(cè)定    (1)樣品有關(guān)物質(zhì)  取樣品按上述測(cè)定方法測(cè)定，3批樣品有關(guān)物質(zhì)分別為0.76%、0.82%和0.85%，雜質(zhì)峰與泛昔洛韋主峰均能分離(Fig.1A)。    (2)酸破壞試驗(yàn)  稱取本品細(xì)粉38.80mg，加0.1mol/L鹽酸溶液5ml，放置1h，中和后依法稀釋并測(cè)定，記錄的色譜圖顯示泛昔洛韋主峰面積減小，雜質(zhì)峰面積明顯增大，雜質(zhì)峰總面積為原來未破壞樣品雜質(zhì)峰總面積的9倍多，但各個(gè)峰之間均能較好地分離(Fig.1B)。    (3)堿破壞試

11、驗(yàn)  取本品細(xì)粉38.55mg，加入0.05mol/L氫氧化鈉溶液1ml，放置30min，中和后依法稀釋并測(cè)定，色譜圖顯示泛昔洛韋主峰面積減小，出現(xiàn)三個(gè)峰面積較大的新的雜質(zhì)峰，原雜質(zhì)峰面積明顯增大，雜質(zhì)峰總面積約為原來未破壞樣品雜質(zhì)峰面積的48倍。說明本品在堿中很容易破壞，在堿性下破壞后主成分被部分降解，并產(chǎn)生一些其它的雜質(zhì)(Fig.1C)。    (4)高溫破壞試驗(yàn)  取本品細(xì)粉置90加熱6h，放冷，稱取37.52mg，同法測(cè)定，色譜圖中泛昔洛韋主峰面積減少，出現(xiàn)了一些新的小雜質(zhì)峰，雜質(zhì)峰總面積約為原來雜質(zhì)峰面積的2倍。說明高溫對(duì)泛昔洛韋稍有

12、影響。    (5)高濕試驗(yàn)  取本品，依文獻(xiàn)3進(jìn)行吸濕性試驗(yàn)，結(jié)果顯示本品吸濕性強(qiáng)。稱取適量，同法溶解并稀釋，進(jìn)樣測(cè)定，色譜圖中泛昔洛韋主峰面積減小并產(chǎn)生一個(gè)面積很大的新雜質(zhì)峰，且原雜質(zhì)峰面積明顯增大。說明濕度對(duì)泛昔洛韋影響大(Fig.1D)。    (6)氧化破壞試驗(yàn)  稱取樣品37.47mg，進(jìn)行氧化破壞試驗(yàn)后，取適量加流動(dòng)相使溶解并稀釋，同法測(cè)定，圖中顯示，主峰面積減小，出現(xiàn)三個(gè)新雜質(zhì)峰，原雜質(zhì)峰面積明顯增大(Fig.1E)。    (7)光照試驗(yàn)  取本品細(xì)粉適量，依文獻(xiàn)4進(jìn)行光照試驗(yàn)并測(cè)定，結(jié)果顯示主峰面積減少很多，產(chǎn)生一個(gè)面積很大的新雜質(zhì)峰，且原雜質(zhì)峰面積明顯增