IGFⅠ基因的一個(gè)多態(tài)性與食管鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)聯(lián)研究

1、IGF-基因的一個(gè)多態(tài)性與食管鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)聯(lián)研究【摘要】 目的：檢測(cè)類胰島素生長(zhǎng)因子1（IGF-）基因微衛(wèi)星多態(tài)性CA重復(fù)與食管鱗狀細(xì)胞癌是否關(guān)聯(lián)。方法：應(yīng)用熒光標(biāo)記片段分析法對(duì)78例食管鱗狀細(xì)胞癌患者和470例正常對(duì)照進(jìn)行基因分型，并用非條件性Logistic回歸分析微衛(wèi)星多態(tài)性與食管鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)聯(lián)性。結(jié)果：IGF-基因微衛(wèi)星多態(tài)性CA重復(fù)與食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)病沒(méi)有關(guān)聯(lián)。結(jié)論：IGF-基因微衛(wèi)星多態(tài)性CA重復(fù)在食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)病過(guò)程中不起主要作用。 【關(guān)鍵詞】 食管鱗狀細(xì)胞癌；類胰島素生長(zhǎng)因子1；微衛(wèi)星多態(tài)性 Abstract Objective: To investigate the

2、 relationship between a microsatellite polymorphism (CA repeats) in the insulin-like growth factor I gene and the risk of esophageal squamous cell carcinoma. Methods: IGF- microsatellite polymorphism was genotyped among 78 cases with esophageal squamous cell carcinoma and 470 normal controls by fluo

3、rescent labeled fragment analysis. And data were analyzed using unconditional logistic regression to evaluate the association of examined polymorphism with esophageal squamous cell carcinoma. Results: No association was found between IGF- microsatellite polymorphism and esophageal squamous cell carc

4、inoma. Conclusion: IGF- microsatellite polymorphism (CA repeats) does not play a major role in the development of esophageal squamous cell carcinoma. Key words Esophageal squamous cell carcinoma; Insulin-like growth factor I (IGF-); Microsatillite polymorphism 類胰島素生長(zhǎng)因子1（IGF-）是一種多功能肽，能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖、分化和抑制細(xì)

5、胞的凋亡1。有研究顯示IGF-在癌癥的發(fā)生過(guò)程中起到了重要作用1，而其基因的啟動(dòng)子區(qū)域有一個(gè)高度多態(tài)性的微衛(wèi)星標(biāo)記，即CA重復(fù)與血循環(huán)中的IGF-水平相關(guān)聯(lián)2。有一些研究已經(jīng)檢測(cè)了這一多態(tài)性與乳腺癌、前列腺癌和結(jié)腸直腸癌的關(guān)系，但結(jié)果不太一致3-6。到目前為止未見(jiàn)有這一多態(tài)性與食管癌關(guān)系的報(bào)道，因此在本研究中，我們檢測(cè)了兩者之間是否關(guān)聯(lián)。 1 材料與方法 1.1 樣本 我們收集了78例食管鱗狀細(xì)胞癌患者為觀察組，470例為正常對(duì)照組。觀察組所有病例均經(jīng)病理學(xué)確診，年齡范圍4879歲，平均年齡64歲，其中男性57例，女性21例。正常對(duì)照組年齡范圍4880歲，平均年齡62歲，其中男性388例，女性

6、82例。 1.2 基因分型 我們用酚/氯仿抽提法提取DNA，然后采用熒光標(biāo)記片段分析法進(jìn)行基因分型。15L PCR反應(yīng)體系中含有25ng基因組DNA，200M dNTPs,0.3M引物（F:5'-FAM-GCTAGCCAGCTGGTGTTATT-3'R:5'-ACCACTCTGGGAGAAGGGTA-3'），2.5mM MgCl2,0.6U DNA聚合酶。PCR的反應(yīng)條件為：95預(yù)變性12分鐘，然后10圈循環(huán)，每一循環(huán)中94預(yù)變性15秒，55退火15秒，72延伸30秒；然后再20圈循環(huán)，每一循環(huán)中89預(yù)變性15秒，55退火15秒，72延伸30秒；最后72再延伸5

7、分鐘。擴(kuò)增后，1L PCR產(chǎn)物和9L Hi-DiTM甲酰胺以及0.5L GeneScanTM-500LIZTM標(biāo)準(zhǔn)大小片段混合，在ABI 3730分析儀上進(jìn)行毛細(xì)管電泳，并用GeneMapper 4.0生物軟件分析樣品基因型。 1.3 統(tǒng)計(jì)分析 我們用Monte-Carlo法檢測(cè)基因型分布在正常對(duì)照中是否符合Hardy-Weinberg平衡；非條件性Logistic回歸分析來(lái)估計(jì)相對(duì)發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，并以優(yōu)勢(shì)比（ORs）和95%可信區(qū)間（95% CIs）表示。所有的OR值都平衡了性別、年齡、吸煙和飲酒等因素的影響。在本研究中，IGF-基因型分為3組：（1）最常見(jiàn)等位基因192bp純合子；（2）192b

8、p雜合子；（3）其它。 2 結(jié)果 在本研究中，IGF-基因微衛(wèi)星多態(tài)性CA重復(fù)顯示有9個(gè)等位基因，長(zhǎng)度從184bp到200bp,最常見(jiàn)等位基因?yàn)?92bp，等位基因分布在觀察組和對(duì)照組中差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1。在正常對(duì)照組中，基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡，這一多態(tài)性與食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)病沒(méi)有關(guān)聯(lián)，見(jiàn)表2。表1 IGF- (CA)n等位基因在樣本中的分布表2 IGF- (CA)n 基因型與食管鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)聯(lián)3 討論 食管癌是一種高度致死性癌癥，其5年生存率僅為10%，目前改善其低生存率只能通過(guò)早期腫瘤篩查獲得 7，因此識(shí)別一些高度易感人群對(duì)疾病的防治是非常重要的。 大量證

9、據(jù)顯示IGF-系統(tǒng)在食管癌的發(fā)病過(guò)程中作用顯著。一些研究提示在人類食管癌中IGF-可通過(guò)自分泌作用刺激腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)8-9；而一些群組研究（cohort study）也顯示血清中IGF-水平升高與食管癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)呈顯著關(guān)聯(lián)10-11。由于血循環(huán)中IGF-的濃度并不總是能直接反映局部組織中的產(chǎn)生量，因此識(shí)別一些基因多態(tài)性可能會(huì)幫助我們鑒別IGF-在局部和全身中的長(zhǎng)期暴露水平。 雙生子研究顯示不同個(gè)體IGF-水平不同，大約有40%60%是由遺傳因素決定的12。在本研究中我們所檢測(cè)的微衛(wèi)星多態(tài)性CA重復(fù)位于啟動(dòng)子區(qū)域，在轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游約1 kb處，而且含有特異的調(diào)控元件13。因此，這一多態(tài)性等位基

10、因的改變可能導(dǎo)致IGF-基因轉(zhuǎn)錄的改變；或者這一多態(tài)性與其它位于啟動(dòng)子區(qū)域或其附近的多態(tài)性處于連鎖不平衡，從而影響IGF- mRNA的穩(wěn)定性或IGF-的半衰期14。雖然有研究顯示這一多態(tài)性與血循環(huán)中的IGF-水平相關(guān)聯(lián)2，然而我們的研究并不支持它與食管鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)病相關(guān)聯(lián)。但是，我們的樣本量只有約80%的效能檢測(cè)到最低OR值為2，因此，我們并不能排除這一多態(tài)性對(duì)疾病的OR值低于2的效應(yīng)，關(guān)于IGF-微衛(wèi)星標(biāo)記CA重復(fù)與食管鱗狀細(xì)胞癌關(guān)系的最終結(jié)論還需要許多其它大的研究來(lái)確證?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 1 Ibrahim YH,Yee D.Insulin-like growth factor-I and

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