側(cè)腦室注射AVP與微電泳AVP對家兔隔區(qū)溫敏神經(jīng)元放電活動(dòng)的影響

1、側(cè)腦室注射AVP與微電泳AVP對家兔隔區(qū)溫敏神經(jīng)元放電活動(dòng)的影響    側(cè)腦室注射AVP與微電泳AVP對家兔隔區(qū)溫敏神經(jīng)元放電活動(dòng)的影響    中國應(yīng)用生理學(xué)雜志 2000年第1期第16卷 研究簡報(bào)    作者：楊永錄石勝剛陳邦勇    單位：解放軍蘭州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校生理教研室，蘭州730020    隔區(qū)不僅分布大量的精氨酸加壓素(AVP)神經(jīng)元，而且也分布溫敏神經(jīng)元，參與生理性與行 為性體溫

2、調(diào)節(jié)。本文觀察了側(cè)腦室注射AVP和微電泳AVP對隔區(qū)溫敏神經(jīng)元放電活動(dòng)的影響， 以證明隔區(qū)注射AVP的抗熱作用是否與AVP直接影響，隔區(qū)溫度敏感神經(jīng)元的活動(dòng)有關(guān)。    1材料與方法    選用體重1.82.6kg家兔36只，用25%烏拉坦溶液靜脈麻醉(1g/kg)，完成有關(guān)手術(shù)。用直 流恒溫電熱毯裹住家兔軀體，使肛溫維持在38.5。    隔區(qū)溫敏神經(jīng)元放電活動(dòng)的記錄定位按Sawyer兔腦圖譜取A35，L12.5， H59(腦表面下)，用充灌3 mol/L KCL溶液的玻璃

3、微電極細(xì)胞外記錄隔區(qū)溫敏神經(jīng) 元 的放電活動(dòng)，然后用超級恒溫泵向循環(huán)變溫裝置分別泵入熱水和冷水使隔區(qū)局部溫度分別升 高或降低23，鑒別神經(jīng)元的類別。側(cè)腦室注射AVP 1 ng(1ng/l)，觀察放電的變化。 記錄部位局部溫度的控制、腦溫的測量以及側(cè)腦室插管定位同以往工作。    神經(jīng)元分類的標(biāo)準(zhǔn)是根據(jù)局部溫度敏感系數(shù)，如溫敏感系數(shù)大于或等于0.8 imp/s,則為 熱敏神經(jīng)元；若溫度系數(shù)小于或等于-0.6 imp/s,，則為冷敏神經(jīng)元。    微電泳采用5管玻璃微電極，電極尖端為36 m。中心管充以含2%滂胺天藍(lán)的

4、2 mol/L氯化 鈉溶液(電阻1020 m)，用以引導(dǎo)神經(jīng)元放電活動(dòng)和電極定位標(biāo)記。側(cè)管按需要分別充人 工腦脊液(ACSF)，AVP(Sigma,6.0×10-5 mol/L,pH5.5)，AVPv1受體阻斷劑d(c H2)5Tyr(me)2AVP(Sigma,2.5×10-5 mol/L,pH 5.5)。給藥注射電流+60 n A，時(shí)間60 s，滯留電流-10 nA。    取自發(fā)放電的平均數(shù)作為對照值，然后觀察施以熱、冷和給藥等一系列項(xiàng)目的放電頻率，分 別求出其平均數(shù)與對照進(jìn)行比較，以便統(tǒng)一判定效應(yīng)。  &#

5、160; 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將腦的有關(guān)部位進(jìn)行切片確認(rèn)微電極尖端的位置。            2實(shí)驗(yàn)結(jié)果    (1)側(cè)腦室注射AVP對隔區(qū)溫敏神經(jīng)元放電活動(dòng)的影響側(cè)腦室注射AVP后隔區(qū)熱敏神經(jīng)元放 電率明顯增加，持續(xù)到第8 min開始逐漸恢復(fù)；而對冷敏神經(jīng)元的放電活動(dòng)則有抑制作用， 在給AVP后第 8min放電頻率恢復(fù)到自發(fā)水平(表1)。    Tab.1Effect of injecti

6、on of AVP into lateral ventricle on discharge activity of WSN and CSN in septal area (imp/s,± s)                    Neurons    n    spont.freq  &

7、#160; Local cooling    Local warming    A fter injection of AVP            0    4    8(min)          

8、0; WSN    11    4.03±1.77    2.54±1.55*    5.92±2.31* *    4.49±2.36*    4.92±2.91*    4.61±2.79     

9、;       CSN    9    3.45±1.60    4.98±2.13*    2.03±0.73 * *    3.97±1.71    2.73±1.27*    3.43±

10、;1.73            WSH:Warm-sensitve neurons,CSN:Cold-sensitive neurons.    *P0.05,*P0.01,*P 0.001,compared with spontaneous frequencyTab.2Effect of microiontophoretically ap plied AVP on discharge activity of WSN and CSN

11、in septal area (imp/s,± s)            Neurons    n    spont.freq    Local coo ling    Local warming    microiontophoretically 

12、0;          ACSF    AVP            WSN    10    4.66±1.74    3.49±1.40    6.84&#

13、177;2.54 *    4.93±1.86    6.05±2.16*            CSN    7    3.05±0.50    4.44±1.04*    2.16±0.

14、25 *    3.00±0.46    2.29±0.52*            *P0.05,*P0.01,*P0.001 c ompared with spontaneous frequency    (2)微電泳AVP對隔區(qū)溫敏神經(jīng)元放電活動(dòng)的影響微電泳AVP能使隔區(qū)熱敏神經(jīng)元放電頻率 明顯增加，冷敏神經(jīng)元放電頻率明顯減少；而正

15、電流注射ACSF對隔區(qū)熱敏和冷敏神經(jīng)元放電 活動(dòng)均無明顯影響(表2)。    4個(gè)熱敏神經(jīng)元微電泳AVPv1-受體阻斷劑d(CH2)5Tyr(Me)2AVP時(shí)，其放電 頻率平均降低了14.8%；5個(gè)冷敏神經(jīng)元微電泳AVPv1受體阻斷劑時(shí)，其中4個(gè)神經(jīng)元 放電頻率平均增加了25.4%，有一個(gè)冷敏神經(jīng)元放電出現(xiàn)減少現(xiàn)象。3討論    本實(shí)驗(yàn)在家兔隔區(qū)記錄到的溫敏神經(jīng)元的機(jī)率較PO-AH要低，因而在36只家兔中只完成了37 個(gè)溫敏神經(jīng)元放電活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)過程，可能與隔區(qū)溫敏神經(jīng)元分布較少有關(guān)。有趣的是神經(jīng)元 的平均放電頻率也

16、較低，這就從一個(gè)側(cè)面為隔區(qū)在體溫調(diào)節(jié)中的主要作用是參與散熱調(diào)節(jié)過 程提供了依據(jù)，因?yàn)榈皖l率的熱敏神經(jīng)元主要是控制散熱調(diào)節(jié)反應(yīng)。    我們往側(cè)腦室注射AVP和微電泳AVP能興奮隔區(qū)熱敏神經(jīng)元和抑制冷敏神經(jīng)元的放電活動(dòng)，特 別是對熱敏神經(jīng)元的興奮效應(yīng)非常明顯。實(shí)驗(yàn)表明，隔區(qū)注射AVP抗熱作用的機(jī)理，除了以 往證明的隔區(qū)注射AVP能影響PO-AH溫敏神經(jīng)元活動(dòng)外，AVP直接引起隔區(qū)熱敏神經(jīng)元的興奮 和抑制冷敏神經(jīng)元的活動(dòng)是一個(gè)重要原因，而且主要是引起熱敏神經(jīng)元的興奮所致。這一結(jié) 果進(jìn)一步為隔區(qū)在體溫調(diào)節(jié)中的主要作用是參與散熱過程的理論提供了新的依據(jù)。    腦內(nèi)注射AVPv1-受體阻斷劑d(CH