冷針與溫針對(duì)痛風(fēng)模型大鼠效應(yīng)差異觀察

1、冷針與溫針對(duì)痛風(fēng)模型大鼠效應(yīng)差異觀察程波、陳歡、劉保君、楊玲、李露萍、鄢常敖指導(dǎo)老師：魏建子（上海中醫(yī)藥大學(xué)03針英（七）、04運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)，上海201203）摘要 目的：觀察冷針與溫針對(duì)痛風(fēng)模型大鼠的效應(yīng)差異，為冷針的臨床推廣應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：24只SD大鼠隨機(jī)分成模型對(duì)照組、溫針組和冷針組3組，采用踝關(guān)節(jié)腔注射尿酸鈉溶液法復(fù)制急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型。溫針組用溫針后三里治療，冷針組用冷針后三里治療，用YLS7A足趾容積測(cè)量?jī)x測(cè)定造模前、造模后20h、26h、32h和43h的大鼠踝關(guān)節(jié)的容積。結(jié)果：冷針組造模后26h、32h和43h各時(shí)段鼠足踝關(guān)節(jié)容積消腫程度均顯著大于溫針組（p<0.0

2、1），與模型對(duì)照組比較則無明顯差異；溫針組造模后26h、32h和43h各時(shí)段鼠足踝關(guān)節(jié)容積消腫程度均顯著小于模型對(duì)照組（p<0.01）。結(jié)論：冷針效果明顯優(yōu)于溫針，具有臨床推廣價(jià)值。關(guān)鍵詞冷針, 溫針, 痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎痛風(fēng)1是嘌呤代謝紊亂及或尿酸排泄減少所引起的一種晶體性關(guān)節(jié)炎，以男性多見。痛風(fēng)的臨床表現(xiàn)為高尿酸血癥和尿酸鹽結(jié)晶沉積所致的特征性急性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)石形成或痛風(fēng)性慢性關(guān)節(jié)炎。該病可誘發(fā)尿酸鹽腎病、尿酸性尿路結(jié)石等癥狀，嚴(yán)重者可導(dǎo)致關(guān)節(jié)殘疾、腎功能不全。目前痛風(fēng)尚無特效藥物的治療，西藥雖可暫時(shí)的緩解療效，但是在會(huì)復(fù)發(fā)的同時(shí)，還會(huì)有不同程度的不良反應(yīng)。近年來針灸治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎取

3、得滿意療效5，如丁氏6采用溫針灸治療急性痛風(fēng)性跖趾關(guān)節(jié)炎31例，均全部治愈。但文獻(xiàn)中多以傳統(tǒng)治療為主，本實(shí)驗(yàn)采用踝關(guān)節(jié)腔注射尿酸鈉溶液復(fù)制急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型，觀察冷針、溫針的效應(yīng)差異，旨在對(duì)冷針治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎，乃至各種熱證提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，開辟一條新的治療思路。 1材料與方法1.1 實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)試劑氫氧化鈉（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，編號(hào) F20070307）；尿酸（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，編號(hào) Lot. NO. WL20060411）；戊巴比妥鈉（中國醫(yī)藥上海化學(xué)試劑公司生產(chǎn)，編號(hào) F2003816）；吐溫80（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，編號(hào) F20070417）；艾條（蘇

4、州市東方艾絨廠生產(chǎn) 批號(hào)Z32021062）。 實(shí)驗(yàn)儀器0.3×40mm針灸針（吳江市神力醫(yī)療衛(wèi)生材料有限公司 準(zhǔn)字 2002 第2270474號(hào)）、0.25×13mm針灸針（吳江市神力醫(yī)療衛(wèi)生材料有限公司 準(zhǔn)字2006 第2270685） YLS7A足趾容積測(cè)量?jī)x（山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備組生產(chǎn)，編號(hào)005090064）36g） 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物普通成年SD雄性大鼠24只，體重200250g 由上海中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，隨機(jī)分成三組：模型組、溫針組和冷針組，每組8只，在濕度和溫度均正常的環(huán)境中，予以普通飼料喂養(yǎng)，自由飲水。1.2 實(shí)驗(yàn)方法 尿酸鈉的制備取2g的NaOH加蒸餾水至

5、50ml制備出1mol/L的NaOH，將194mL蒸餾水加1molL NaOH 6 ml，煮沸后加入1g尿酸（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）溶解后，放入電熱恒溫箱45低溫干燥 ，尿酸鈉1g溶于10的吐溫-80溶液（2ml吐溫-80加入18ml生理鹽水）中，成均勻混懸狀。2 動(dòng)物造模用 6號(hào)注射針從受試大鼠左后肢踝關(guān)節(jié)背側(cè)45度方向插入脛骨肌腱內(nèi)側(cè) ，將0.05 ml尿酸鈉溶液注入到踝關(guān)節(jié)腔，復(fù)制踝關(guān)節(jié)腔注射尿酸鈉溶液復(fù)制急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型。3 針具的制備將艾條切成2cm固定于1.5寸針灸針頂端制成溫針；將針柄垂直插入果凍中央放入冰箱0°C冷凍至凝固呈固體狀制成冷針。 麻醉方法用1的戊巴

6、比妥鈉以0.4ml/100g的比例腹腔注入大鼠體內(nèi)。 治療方法溫針組于造模后20小時(shí)和26小時(shí)分別進(jìn)行一次溫針灸治療，時(shí)間各為20分鐘，先將大鼠麻醉，擺成左后足（患肢）在上的右側(cè)臥位。用溫針刺入左后足的后三里約6mm，輔以同側(cè)跟端的普通針刺，不進(jìn)行手法操作；冷針組治療時(shí)間、體位、部位、麻醉方法均與溫針組相同，用冷針刺入大鼠左后足的后三里約6mm，輔以同側(cè)跟端的普通針刺，不進(jìn)行手法操作；模型組只造模，不治療。 鼠足踝關(guān)節(jié)容積的測(cè)量分別于造模前，造模后20小時(shí)、26小時(shí)、32小時(shí)、43小時(shí)測(cè)量鼠足踝關(guān)節(jié)容積。（每次測(cè)量三次，取平均值）大鼠戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，用YLS7A鼠足趾容積測(cè)量?jī)x測(cè)量踝

7、關(guān)節(jié)的容積。 統(tǒng)計(jì)分析原始數(shù)據(jù)運(yùn)用EXCEL進(jìn)行整理，最后取得的消腫度采用單因素方差分析，選用 LSD或 Tamhanes T2分析，運(yùn)用SPSS 12分析軟件進(jìn)行分析。2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.1 冷針、溫針后鼠足容積的變化趨勢(shì)冷針組和模型組均在20小時(shí)后開始消腫，而溫針組還在逐步的腫脹，在26小時(shí)達(dá)到峰值后開始消腫。（圖1） 圖1 冷針、溫針后鼠足踝關(guān)節(jié)容積的變化2. 2 冷針、溫針對(duì)鼠足容積的影響冷針組造模后26h、32h和43h各時(shí)段鼠足踝關(guān)節(jié)容積消腫程度均顯著大于溫針組（p<0.01），與模型對(duì)照組比較則無明顯差異；溫針組造模后26h、32h和43h各時(shí)段鼠足踝關(guān)節(jié)容積消腫程度均顯著小于

8、模型對(duì)照組（p<0.01）。腫脹率()=（某時(shí)段鼠足容積20h鼠足容積）/20h鼠足容積×100表1 不同組在不同時(shí)段的足消腫度實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較(x±s，%)26小時(shí)（n8）32小時(shí)（n8）43小時(shí)（n8）溫針組-7.26±26.71*0.90±33.18*4.81±40.39*冷針組3.85±52.03787±13.8912.37±10.81模型組0.55±25.206.134±23.9812.76643±12.6429溫針與模型比較* p<0.01 冷針與溫針比較p<

9、0.01)3 討論痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎其關(guān)節(jié)局部癥狀，僅是病之標(biāo)，嘌呤代謝紊亂導(dǎo)致高尿酸血癥，是其基本病理。根據(jù)臨床所見，它是由于脾腎清濁功能失司，濕濁阻滯所致。該癥好發(fā)于中老年形體肥腴之體，喜食高粱厚味者，由于其臟腑功能漸衰，脾失健運(yùn)，升清降濁無權(quán)，腎不氣化，分清泌濁失司，故不能運(yùn)化水谷，使清者不升濁者不降，濕濁內(nèi)生，滯留血中，遂致病變。故在本法中選用足三里以健脾助運(yùn)，并局部取穴跟端以減輕關(guān)節(jié)腫脹之癥狀4。 但此次實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性，無論溫針或冷針均無明顯療效，溫針甚至出現(xiàn)腫脹程度增大的現(xiàn)象，進(jìn)行原因分析如下：首先，冷針對(duì)于痛風(fēng)可能確實(shí)沒有明顯的療效。從中醫(yī)的角度來講，痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎屬于熱痹，是濕熱內(nèi)蘊(yùn)所

10、致。冷針取寒涼之意，并未達(dá)病所引熱邪外出，故而僅僅治其標(biāo)、解其表。從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)角度來講，雖然冷針可以收縮大鼠踝關(guān)節(jié)腔內(nèi)微血管并減少血漿的滲出，起到治療的作用，但冷針也造成大鼠關(guān)節(jié)局部溫度降低，使尿酸鹽從血液中析出而沉積于關(guān)節(jié)周圍，從而影響到療效7。亦有可能實(shí)驗(yàn)過程中針尖與皮膚表面溫差過小以至于未能達(dá)到治療所需，不足以取得療效。其次，冷溫針對(duì)于痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的治療可能均有療效。本實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的陰性結(jié)果由于外界因素造成的偏差：針刺次數(shù)太少：由于實(shí)驗(yàn)的場(chǎng)地和時(shí)間有限，只能進(jìn)行兩次治療。而相對(duì)于臨床上的治療來講，兩次治療并不一定能達(dá)到治療效果。實(shí)驗(yàn)間隔時(shí)間太長：由于每次數(shù)據(jù)的采集、治療的進(jìn)行均要在麻醉的基礎(chǔ)上

11、，為防止大鼠的意外死亡，必須用延長間隔時(shí)間的方法來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，而此次是急性模型，病程較短，造成觀察的次數(shù)減少，采集的數(shù)據(jù)較少，錯(cuò)過了實(shí)驗(yàn)中較多有意義的數(shù)據(jù)。樣本量過?。河捎诖舜螌?shí)驗(yàn)的資金有限，每組只采取8只大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，又由于此次數(shù)據(jù)較為精密，而過小的樣本含量必然造成方差較大。故而成為實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的現(xiàn)象的原因之一。未進(jìn)行手法操作：在臨床上，手法是進(jìn)行針灸操作的重要內(nèi)容，因此次實(shí)驗(yàn)要對(duì)溫針和冷針，即溫度的差異對(duì)疾病的療效進(jìn)行比較，故而忽略了手法造成的機(jī)械刺激對(duì)其造成的影響，溫針反“熱者寒之”的理論而行，使熱邪更加深入，造成病程的加重，而冷針由于針刺次數(shù)較少，單獨(dú)的“熱者寒之”療法不夠顯著，

12、致使實(shí)驗(yàn)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。麻藥的影響：如上文所述，實(shí)驗(yàn)中大鼠要經(jīng)歷一天六次的反復(fù)麻醉，麻醉的量過多，使得個(gè)別大鼠甚至出現(xiàn)了耐藥的情況，而過度的使用麻藥也可導(dǎo)致療效的變化。實(shí)驗(yàn)誤差：儀器誤差 鼠足容積測(cè)量裝置雖然精度很高，但是缺少可操作性，使得測(cè)量中人為因素的影響增加，測(cè)量裝置的精度大打折扣，從而使實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)誤差。 藥品問題 尿酸鈉的懸濁液理論上是現(xiàn)配現(xiàn)用，但鑒于實(shí)驗(yàn)條件有限，我們改為將藥劑一次性配齊，而且進(jìn)入冰箱保存的時(shí)間也由理論上的全天，變?yōu)閷?shí)驗(yàn)空余時(shí)間的每天13小時(shí)。在這樣的保存條件下，藥品尿酸鈉很可能變質(zhì)，既而影響造模效果。 實(shí)驗(yàn)時(shí)間問題 由于實(shí)驗(yàn)的條件有限，沒有充足的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地供我們進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，

13、原應(yīng)在一批同時(shí)做完的三組實(shí)驗(yàn)，改為三次完成，使得在實(shí)驗(yàn)的過程中增加了很多外來因素，造成了實(shí)驗(yàn)的誤差。 雖然此次實(shí)驗(yàn)是陰性結(jié)果，但是由冷針的治療趨勢(shì)來看，冷針還是有一定的療效的，如果能夠加大針刺的密度，輔助以手法，增加治療的穴位等方法改進(jìn)實(shí)驗(yàn)，本實(shí)驗(yàn)還是有一定的繼續(xù)探索價(jià)值的。參考文獻(xiàn)1. 中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病學(xué)分會(huì) 原發(fā)性痛風(fēng)診治指南(草案) 中華風(fēng)濕學(xué)雜志. 2004, 8(3)：178 2. Coderre TJ, et a1Ankle joint urate arthritis in rat：an alternative animal model of arthritis to that produced by Freunds adjuvantJPain，1987， 28：3793. 黃蔚霞藥物對(duì)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型II-1、II -6的影響中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2002