CIK細(xì)胞免疫治療對(duì)術(shù)后腎癌患者免疫功能的影響-

1、作者簡(jiǎn)介李莉(1978,女,河北張家口市人,醫(yī)學(xué)碩士,住院醫(yī)師,主要從事腫瘤生物治療的基礎(chǔ)與臨床研究工作.CIK 細(xì)胞免疫治療對(duì)術(shù)后腎癌患者免疫功能的影響李莉1,宋鑫1,葉聯(lián)華2(1昆明醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院,云南省腫瘤醫(yī)院腫瘤生物治療中心;2胸外科,云南昆明650118摘要目的探討CIK 細(xì)胞免疫治療對(duì)術(shù)后腎癌患者免疫功能的影響.方法選取期、期腎癌患者CIK 細(xì)胞治療組于CIK 細(xì)胞治療后2周,外周血CD3+、CD4+T 細(xì)胞、NK 細(xì)胞及CD4+/CD8+的比值、IL -2、INF-r 水平較治療前升高(P <0.01,于治療后4周達(dá)高峰,此后逐漸回落(P <0.05;而CIK 細(xì)

2、胞治療組T h2細(xì)胞因子(IL -4、IL -10于CIK 細(xì)胞治療后2周下降,治療后4周降至低谷.CIK 細(xì)胞治療組于CIK 細(xì)胞治療后2、4、8周CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK 細(xì)胞、IL -2、INF-r 、IL -4和IL -10與常規(guī)治療組各時(shí)點(diǎn)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05.結(jié)論CIK 細(xì)胞免疫治療能增強(qiáng)術(shù)后腎癌患者的免疫功能.關(guān)鍵詞CIK 細(xì)胞;腎癌;免疫功能;細(xì)胞因子中圖分類(lèi)號(hào)R737.11文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A 文章編號(hào)1003-4706(201011-0092-05Effect of CIK Cells Immunotherapy on Immunity F

3、unction ofPatients with Renal Cancer after OperationLI Li 1,SONG Xin 1,YE L ian -hua 2(1Biotherapy Center ;2Dept.of Thoracic Surgery ,The 3rd Affiliated Hospital of Kunming MedicalUniversity ,Tumor Hospital of Yunnan Province ,Kunming Yunnan 650118,China Abstract Obj ective To study the effect of cy

4、tokine-induced killer (CIK cells im m unotherapy onimm unity function of renal cancer patients after operation .Methods 70patients with histologically or cytologically confirm ed renal cancer in I and II stage of T NM were randomly divided into 2groups :CIK cells therapy group and conventional thera

5、py group ,35cases each group .W e detected the im unity function of NSCLC cases ,including the levels of CD3+,CD4+T cells ,ratio of CD4+/CD8+,NK cells ,and the levels of Th1/Th2cytokine ,before therapy of CIK cells and on 2nd ,4th ,8th week after therapy .Results On the second week after CIK cells t

6、herapy ,the levels of CD3+,CD4+T cells ,NK cells ,ratio of CD4+/CD8+,IL-2,INF-r in peripheral blood of patients with renal cancer in CIK cells therapy group were m ore higher than those before therapy (P <0.01,their levels reached at the peak on 4th week ,from then on ,their levels began to decre

7、ase (P <0.05.M eanwhile ,on 2nd week after treated by CIK cells ,the levels of Th2(IL-4,IL-10in CIK cells therapy group began to decrease ,and reached at a low ebb on 4th week .There was a statistically significant difference in the levels of CD3+,CD4+T cells ,NK cells ,ratio of CD4+/CD8+,IL-2,IN

8、F-r ,IL-4,IL-10of peripheral blood of patients with renal cancer on 2nd ,4th ,8th week after treatm ent between CIK cells therapy昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2010,(11:9296Journal of Kunming Medical UniversityCN 53-1049/Rgroup and conventional therapy group (P <0.05.Conclusion CIK cells im m unotherapy can enhance the

9、imm une function of patients with renal cancer after operation.Key words CIK cells ;Renal cancer ;Immunity function ;Cytokine 表1兩組患者臨床資料比較n ,(x ±s Tab.1Comparison of the clinical data between two groups n ,(x ±s 常規(guī)治療組3527846.3±8.51619CIK 細(xì)胞治療組3523121817組別n 男女年齡(歲腫瘤部位左腎右腎352015352312透明

10、細(xì)胞癌儀器與主要試劑1.3.1常規(guī)治療組手術(shù)后不進(jìn)行任何治療,只給予與CIK 細(xì)胞輸注類(lèi)似的安慰劑治療.1.3.2CIK 細(xì)胞治療組手術(shù)后進(jìn)行自體免疫細(xì)胞體外擴(kuò)增與輸注.用血細(xì)胞分離機(jī)采集患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell ,PBM C ,懸浮于無(wú)血清培養(yǎng)基中,調(diào)整細(xì)胞密度為5×105/m L ,加入細(xì)胞因子INF-r 、M AbCD3、IL-2繼續(xù)培養(yǎng).計(jì)細(xì)胞數(shù),調(diào)整細(xì)胞CIK 細(xì)胞治療組分別于治療前、治療后2周、4周和8周,常規(guī)治療組分別于安慰劑治療前、治療后2周、4周、8周,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)患者外周血淋巴細(xì)胞免疫功能指標(biāo)C

11、D3+、CD4+、CD4+/CD8+比值、NK 細(xì)胞比例及Th1(IL-2、IFN-、T h2(IL-4、IL-10細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)變化.采用SPSS 統(tǒng)計(jì)軟件包,各項(xiàng)參數(shù)用(x ±s 表示,兩兩比較采用q 檢驗(yàn),組間整體差異采用重復(fù)測(cè)量方差分析.a =0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn),P <0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.機(jī)體免疫功能低下或異常,不能進(jìn)行有效的免疫防御反應(yīng),是導(dǎo)致腎癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的主要原因之一1,2.目前國(guó)內(nèi)外對(duì)細(xì)胞免疫治療中細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷(cytokine-induced killer ,CIK 細(xì)胞治療對(duì)象、治療時(shí)機(jī)以及維持機(jī)體抗腫瘤免疫的時(shí)間尚無(wú)統(tǒng)一定論3,4.本研

12、究采用CIK 細(xì)胞免疫聯(lián)合化療治療術(shù)后腎癌患者,通過(guò)監(jiān)測(cè)治療前后患者免疫功能指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化,探討CIK 細(xì)胞免疫治療對(duì)術(shù)后腎癌患者免疫功能的影響.1材料與方法臨床資料選取昆明醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院2008年1月至2010年5月經(jīng)手術(shù)治療的期、期(pTNM 分期腎癌患者70例,均有明確的病理學(xué)診斷,術(shù)前未經(jīng)抗腫瘤治療,無(wú)自身免疫性疾病,其中男性57例,女性13例;年齡3371歲,平均(47.3±8.5歲.70例術(shù)后腎癌患者按隨機(jī)數(shù)字表法分為常規(guī)治療組及CIK 細(xì)胞治療組,每組35例.兩組患者臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05,見(jiàn)表1.該試驗(yàn)經(jīng)昆明醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)

13、批準(zhǔn),患者均簽署知情同意書(shū).李莉,等.CIK 細(xì)胞免疫治療對(duì)術(shù)后腎癌患者免疫功能的影響93第11期2結(jié)果治療前后患者淋巴細(xì)胞免疫功能指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化CIK 細(xì)胞治療組于CIK 細(xì)胞治療后2周,外周血CD3+、CD4+T 細(xì)胞、NK 細(xì)胞及CD4+/CD8+的比值較治療前升高(P <0.01,并隨時(shí)間推移繼續(xù)升高,高峰時(shí)間段主要在治療后24周,此后,患者免疫功能逐漸回落,于CIK 細(xì)胞治療后8周,外周血CD3+、CD4+T 細(xì)胞、NK 細(xì)胞及CD4+/CD8+的比值回落至較低水平,但其指標(biāo)仍高于常規(guī)治療組(P <0.05.CIK 細(xì)胞治療組與常規(guī)治療組患者外周血CD3+、CD +4、N

14、K 細(xì)胞及CD4+/CD8+的比值組間總體差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.01,見(jiàn)表2.與常規(guī)治療組比較,*P <0.05,*P <0.01.組別治療前治療后63.10±7.60*71.50±6.70*58.30±7.60*CD4+(%常規(guī)治療組22.70±4.7022.10±6.9022.90±4.5019.70±6.30CIK 細(xì)胞治療組23.10±5.3029.50±5.80*38.20±6.90*28.30±7.10*CD4+/CD8+(%常規(guī)治療組 1.03&#

15、177;0.17 1.06±0.22 1.09±0.25 1.06±0.31CIK 細(xì)胞治療組 1.17±0.35 1.39±0.42* 1.88±0.51* 1.24±0.37*NK (%常規(guī)治療組CIK 細(xì)胞治療組10.40±2.9010.70±3.5010.90±1.8013.10±2.90*10.30±1.5016.10±4.80*10.20±2.1012.50±2.50*表2治療前后淋巴細(xì)胞免疫功能指的動(dòng)態(tài)變化(x ±s 治療

16、前后Th1/Th2細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)變化腎癌患者本身免疫功能低下,手術(shù)創(chuàng)傷進(jìn)一步加重了其免疫功能的破壞.腎癌患者的免疫抑制是嚴(yán)重影響臨床療效及生活質(zhì)量的重要因素之一.因此,如何有效提高機(jī)體免疫功能是腎癌臨床治療中亟待解決的問(wèn)題.3.1CIK 細(xì)胞治療的特點(diǎn)CIK 細(xì)胞治療屬于腫瘤生物治療中細(xì)胞治療的一種.CIK 細(xì)胞是細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞,它是由血液或骨髓的單個(gè)核細(xì)胞在體外經(jīng)與多種細(xì)胞因子共同培養(yǎng)獲得.CIK 細(xì)胞是一類(lèi)非主要組織相容性復(fù)合物和非T 細(xì)胞受體限制性的免疫第31卷昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)94組別治療前治療后31.20±11.60*35.60±10.60*27.30

17、7;7.30*IFN-(pg/mL 常規(guī)治療組31.60±11.6030.90±9.3031.50±9.7029.50±12.50CIK 細(xì)胞治療組31.60±12.10053.10±20.3*65.40±22.80*40.60±13.90*IL -4(pg/mL 常規(guī)治療組22.70±5.4024.10±5.8024.80±5.3027.30±6.90CIK 細(xì)胞治療組23.50±7.6015.90±6.30*10.20±7.90*18.30&

18、#177;6.40*IL -10(pg/mL 常規(guī)治療組18.60±6.5020.10±6.1020.40±7.3021.70±4.90CIK 細(xì)胞治療組18.90±5.8013.70±4.60*10.60±2.60*16.10±5.10*表3治療前后Th1/Th2細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)變化(x ±s Tab.3The dynamic change of Th1/Th2cytokines before and after treatment (x ±s 與常規(guī)治療組比較,*P <0.05,*P &

19、lt;0.01.活性細(xì)胞,其主要效應(yīng)細(xì)胞為CD3+、CD56+T 淋巴細(xì)胞,由于多種細(xì)胞因子之間的協(xié)同作用,使激活的殺傷細(xì)胞出現(xiàn)更好的增殖及殺傷活性4,5.CIK 細(xì)胞內(nèi)含有大量的分泌顆粒,當(dāng)與靶細(xì)胞結(jié)合后,CIK 細(xì)胞脫顆粒,釋放其中的穿孔素和顆粒酶,前者在靶細(xì)胞膜上形成穿膜樣結(jié)構(gòu),從而改變細(xì)胞的滲透壓;后者具有胰蛋白酶等絲氨酸蛋白酶的特性,同時(shí)表達(dá)酯酶活性破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu);以上兩者的共同作用可導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的壞死3,6.CIK 細(xì)胞具有以下優(yōu)點(diǎn):增殖速度快;殺瘤活性高;殺瘤譜廣;對(duì)多重耐藥腫瘤細(xì)胞同樣敏感,能抵御腫瘤細(xì)胞引發(fā)的效應(yīng)細(xì)胞Fas-FasL 凋亡;對(duì)正常骨髓造血影響輕微2,3.因此,

20、CIK 細(xì)胞在腎癌的生物免疫治療中具有廣闊的應(yīng)用前景.3.2CIK 細(xì)胞的治療對(duì)象目前國(guó)內(nèi)外在腫瘤CIK 細(xì)胞免疫治療中,大多數(shù)以晚期腫瘤患者為治療對(duì)象,雖然取得了一些效果,但大多數(shù)效果不理想3,5.主要原因就在于這些患者已喪失基本的免疫功能或自體免疫功能已極其低下,而擁有相對(duì)健全免疫系統(tǒng)的患者更容易從免疫治療中獲益7,8.因此,本研究中,所有接受CIK 細(xì)胞治療的患者均為早期患者即術(shù)后腎癌患者,其免疫能力還未出現(xiàn)明顯的下降,在這一時(shí)期進(jìn)行CIK 細(xì)胞治療,殺滅微轉(zhuǎn)移灶的同時(shí)又提高了機(jī)體的免疫功能,預(yù)防復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移具有重要作用.3.3CIK 細(xì)胞對(duì)機(jī)體T 淋巴細(xì)胞免疫功能的影響腎癌患者免疫功能低下

21、,機(jī)體不能有效進(jìn)行免疫防御反應(yīng),是導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞免疫逃逸及術(shù)后轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的重要因素4,9.本研究表明:肺癌患者的外周血T 細(xì)胞亞群的紊亂,表現(xiàn)為CD4+T 細(xì)胞減少,CD4+/CD8+比值下降或倒置;CIK 細(xì)胞治療后,腎癌患者外周血CD3+、CD4+T 細(xì)胞、NK 細(xì)胞及CD4+/CD8+的比值均有不同程度升高.提示術(shù)后腎癌患者經(jīng)CIK 細(xì)胞治療后,可改善其細(xì)胞免疫功能,有利于增強(qiáng)T 淋巴細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別,誘導(dǎo)特異性免疫應(yīng)答,殺滅殘留癌細(xì)胞,抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā).維持并盡量延長(zhǎng)機(jī)體抗腫瘤免疫的時(shí)間和激發(fā)機(jī)體的抗腫瘤免疫能力同樣重要7,8.目前,在CIK 細(xì)胞治療時(shí),需要輸注多大的細(xì)胞數(shù)量以及輸

22、注后機(jī)體抗腫瘤免疫功能能夠維持多長(zhǎng)時(shí)間等問(wèn)題存在較多的爭(zhēng)論.本研究中,經(jīng)患者免疫功能動(dòng)態(tài)檢測(cè)結(jié)果顯示:CIK 細(xì)胞輸注后2周患者的細(xì)胞免疫功能明顯提高,至第4周達(dá)高峰,8周后下降.提示術(shù)后腎癌者行CIK 細(xì)胞治療1個(gè)療程,細(xì)胞總數(shù)約為1.0×109,其抗腫瘤免疫能力可維持8周左右.如果在第一次治療后8周左右再追加一個(gè)療程,可使患者保持較高的抗腫瘤免疫功能,可能會(huì)取得更好的療效.3.4CIK 細(xì)胞在維持Th1/Th2平衡中的作用李莉,等.CIK 細(xì)胞免疫治療對(duì)術(shù)后腎癌患者免疫功能的影響95第11期細(xì)胞因子是機(jī)體抗腫瘤效應(yīng)機(jī)制的重要組成部分,它們可以通過(guò)直接殺傷腫瘤細(xì)胞、激活有抗腫瘤活性

23、的效應(yīng)細(xì)胞或通過(guò)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)影響其他相關(guān)因子的抗腫瘤作用.根據(jù)分泌細(xì)胞因子的不同,T輔助細(xì)胞可分為T(mén)h1和Th2類(lèi)細(xì)胞, T h1類(lèi)細(xì)胞因子的主要作用為增強(qiáng)機(jī)體的細(xì)胞免疫功能,包括IL-2、TNF-、IFN-;Th2類(lèi)細(xì)胞因子則主要對(duì)體液免疫起作用,包括IL-4、IL-5、IL-10.對(duì)于腫瘤患者而言,要使機(jī)體保持良好的抗腫瘤免疫狀態(tài),其抗腫瘤免疫必須以T h1型為主,一旦發(fā)生漂移形成Th2型,腫瘤細(xì)胞就有可能發(fā)生免疫逃逸,導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生或轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)7,8,10.因此,恢復(fù)Th1和Th2的平衡一直是腫瘤治療的策略之一.本研究通過(guò)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)腎癌患者T h1/Th2細(xì)胞因子.提示CIK細(xì)胞治療能提高術(shù)

24、后腎患者外周血T h1類(lèi)細(xì)胞因子水平,而降低T h2類(lèi)細(xì)胞因子水平.因此,CIK細(xì)胞治療在抑制機(jī)體免疫T h1Th2的漂移以及恢復(fù)Th1/Th2的平衡中具有重要作用,從而使機(jī)體保持良好的抗腫瘤免疫狀態(tài).本研究表明:CIK細(xì)胞治療能有效地提高術(shù)后腎癌患者的T淋巴細(xì)胞免疫功能以及在維持T h1/T h2的平衡中具有重要作用.但是,腫瘤免疫逃逸的機(jī)制是多因素、多層次、多環(huán)節(jié)的.本的研究只是改善或加強(qiáng)了其中的某些因素,而這些因素在整個(gè)免疫網(wǎng)絡(luò)中的作用及其與其他因子之間的關(guān)系還有待進(jìn)一步的研究.參考文獻(xiàn)1SU X,Z HANG L.Immunotherapy with cytokine-inducedk

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