中醫(yī)藥治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

1、中醫(yī)藥治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展         【關(guān)鍵詞】  關(guān)節(jié)炎,類風(fēng)濕;疾病模型,動(dòng)物;綜述文獻(xiàn)   類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以對稱性多關(guān)節(jié)炎為主要臨床表現(xiàn)的全身性自身免疫性疾病，基本病理改變?yōu)榛ぱ?，以滑膜?xì)胞的大量增殖，炎性細(xì)胞的大量浸潤，血管翳形成以及軟骨和骨的進(jìn)行性破壞為特征，屬一難治性疾病。因西醫(yī)對RA的發(fā)病機(jī)制尚未完全認(rèn)識(shí)，因此也無良藥，只能針對已知的某一環(huán)節(jié)來緩解病情。中醫(yī)在這方面具有一定的優(yōu)勢?，F(xiàn)將近幾年來中醫(yī)中藥

2、治療RA的實(shí)驗(yàn)研究成果從抗炎鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)免疫、細(xì)胞因子、細(xì)胞凋亡、清除自由基和血液流變學(xué)等方面的影響作一綜述。1  抗炎鎮(zhèn)痛作用   RA的一個(gè)基本病理改變?yōu)榛ぱ?，疼痛為其主要癥狀之一。王德儉等1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究祛濕止痹丸（羌活、獨(dú)活、藏紅花等）的抗炎鎮(zhèn)痛效應(yīng)時(shí)發(fā)現(xiàn)祛濕止痹丸能明顯抑制大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎（AA）致炎足和非致炎足的足跖腫脹，而且能抑制大鼠蛋清性關(guān)節(jié)炎的足跖腫脹；延長小鼠的扭體潛伏期，減少小鼠扭體次數(shù)，表明該丸有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛作用。李亞平等2研究發(fā)現(xiàn)芪地通痹湯（黃芪、地黃、漢防己、秦艽、炒補(bǔ)骨脂、醋制延胡索、川芎、人參葉、尋骨風(fēng)、鹿角片、蘄蛇、甘草等）能明顯

3、抑制弗氏完全佐劑（FCA）所致的原發(fā)性和繼發(fā)性的腫脹和角叉菜膠致炎后引起的大鼠足跖腫脹；明顯減少醋酸引起的小鼠扭體次數(shù)。前列腺素E2（PGE2）是一種重要的炎癥介質(zhì)，白介素1（IL-1）也能誘導(dǎo)其產(chǎn)生。周學(xué)平等3觀察舒關(guān)清絡(luò)沖劑（生地黃、制何首烏、石楠藤、秦艽、鬼箭羽、膽南星、蜂房、地龍）對AA大鼠的治療作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，與模型組相比舒關(guān)清絡(luò)沖劑能明顯降低AA大鼠血漿PGE2值和IL-1值，并且隨著劑量的增加作用也增加，說明舒關(guān)清絡(luò)沖劑能抑制巨噬細(xì)胞產(chǎn)生PGE2，并與抑制IL-1異常產(chǎn)生，減少IL-1誘導(dǎo)關(guān)節(jié)和肌肉PGE2的合成有關(guān)。2  免疫調(diào)節(jié)作用   RA是一種病

4、因復(fù)雜的自身免疫性疾病，T淋巴細(xì)胞亞群比率異常在RA 發(fā)病機(jī)制中具有非常重要的作用。梁清華等4觀察痹腫消湯（白花蛇舌草、藤梨根、薏苡仁）對免疫功能的影響。將RA活動(dòng)期患者隨機(jī)分為痹腫消組和西藥組（環(huán)磷酰胺與普威）治療組，并設(shè)20名健康人為正常對照組，于治療前及治療3個(gè)月后分別檢測CD4、CD8細(xì)胞，并計(jì)算CD4/CD8比值。結(jié)果顯示，治療前與正常人對照組比較，RA患者外周血CD4增高（P0.01），CD8降低（P0.01），CD4/CD8比值升高（P0.01）；治療3個(gè)月后，治療2組CD4下降，CD8升高，CD4/CD8值降低，均接近正常，2組指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），表明RA患

5、者體內(nèi)存在著免疫調(diào)節(jié)紊亂，痹腫消湯能調(diào)節(jié)T細(xì)胞分布紊亂，有助于機(jī)體恢復(fù)免疫穩(wěn)定狀態(tài)，具有類似環(huán)磷酰胺聯(lián)合用藥的免疫抑制效應(yīng)。盧建華等5采用AA大鼠模型來研究五藤祛風(fēng)合劑（青風(fēng)藤、雷公藤、忍冬藤、海風(fēng)藤、絡(luò)石藤、蘄蛇、蜈蚣、淫羊藿、當(dāng)歸、白芥子、雞血藤、生黃芪）治療RA的機(jī)理，結(jié)果表明其作用機(jī)理是抑制T淋巴細(xì)胞亞群CD4細(xì)胞，提高CD8細(xì)胞的數(shù)量和功能，從而調(diào)節(jié)人體的細(xì)胞免疫，抑制B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生自身抗體和免疫球蛋白（Ig），逐步減輕免疫復(fù)合物在關(guān)節(jié)局部的沉積，控制滑膜炎。3  細(xì)胞因子   細(xì)胞因子在RA的病理過程中起著極為重要的作用，研究發(fā)現(xiàn)RA患者滑膜組織有大量

6、的細(xì)胞因子存在，RA不同時(shí)期的病理過程中所參與的細(xì)胞因子不盡相同，所涉及的細(xì)胞因子甚為廣泛。3.1  白介素1（IL-1）和腫瘤壞死因子（TNF-） 研究已表明IL-1和TNF-在RA的發(fā)病中起著關(guān)鍵的作用。張荒生等6觀察痹痛定膠囊（黃芪、青風(fēng)藤、全蝎）對AA大鼠的治療作用及對細(xì)胞因子IL-1和TNF-的影響，結(jié)果顯示與模型對照組相比，痹痛定膠囊治療組的IL-1和TNF-顯著降低(P0.01)，并與正清風(fēng)痛寧治療組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。說明痹痛定膠囊與正清風(fēng)痛寧對AA大鼠均有治療作用；痹痛定膠囊可能通過下調(diào)致炎因子(IL-1和TNF-),抑制致炎效應(yīng)，增強(qiáng)抗炎效應(yīng)

7、,從而達(dá)到治療RA的作用。周學(xué)平等7用清絡(luò)通痹顆粒（生地黃、青風(fēng)藤、桑寄生、薟草、三七、炙白僵蠶、蜂房、絡(luò)石藤）治療AA大鼠的研究中發(fā)現(xiàn)，清絡(luò)通痹顆粒能明顯降低AA大鼠腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1水平，減少AA大鼠血漿TNF-，抑制滑膜細(xì)胞分泌TNF-，并且還能減輕關(guān)節(jié)組織和細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的病理損傷，為臨床應(yīng)用該藥提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。張國恩等8用痹康飲合劑（雷公藤、青風(fēng)藤、黃芪、骨碎補(bǔ)、雞血藤、延胡索、紅花、防己、秦艽、羌活、獨(dú)活）治療AA大鼠，并與甲氨喋呤(MTX)組、模型組相比較，結(jié)果顯示痹康飲合劑與MTX均能明顯抑制大鼠異常升高IL-1和TNF-并使之趨于正常，和模型組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

8、0.05），痹康飲合劑組和MTX組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；從病理改變程度方面,痹康飲組與MTX組均能有效控制大鼠炎細(xì)胞浸潤、關(guān)節(jié)狹窄、軟骨和骨的侵蝕破壞,且痹康飲組更明顯。張厚利等9用痹癥停合劑(雷公藤、赤芍藥、防風(fēng)等)治療AA大鼠， 檢測藥物對腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-1和TNF-的影響。結(jié)果顯示痹癥停合劑可以將AA大鼠過高的IL-1和TNF-降低到正常水平,表明痹癥停合劑是通過抑制IL-1和TNF-病理性的升高而產(chǎn)生治療效果的。3.2  白介素2 (IL-2) IL-2是由活化的T細(xì)胞分泌的一種促炎性細(xì)胞因子，IL-2的表達(dá)增加與疾病的嚴(yán)重性相關(guān)。王從品等10研究克

9、濕靈（川牛膝、丹參、黃連、木瓜、蜈蚣、螞蟻）對AA大鼠動(dòng)物模型的作用機(jī)制，用活化的小鼠脾淋巴細(xì)胞MTT比色法檢測胸腺淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的IL-2的活性?？藵耢`高(540 mg/kg)、中(270 mg/kg)2個(gè)劑量組可明顯抑制刀豆蛋白A(ConA)誘導(dǎo)的T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和IL-2的生成，體內(nèi)給藥對T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的抑制率分別為32.11%、31.10%，對IL-2生成的抑制率分別為17.15%、14.10%；體外給藥對T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的抑制率分別為39.10%、22.11%，對IL-2生成的抑制率分別為27.13%、18.12%。提示克濕靈可能通過抑制T淋巴細(xì)胞的增殖，減少IL-2的釋放來改

10、善異常的免疫功能狀態(tài)，這可能是其減輕關(guān)節(jié)炎形成的機(jī)制之一。陳光星等11從體內(nèi)、體外2個(gè)方面研究通痹靈（桂枝、知母、白芍藥、防風(fēng)、水牛角、制馬錢子、制川烏頭、乳香、沒藥等）對于膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（CIA）大鼠關(guān)節(jié)滑膜原代細(xì)胞分泌IL-2，以及通痹靈總堿對于IL-2受體鏈CD25表達(dá)的影響。結(jié)果體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，通痹靈高、低劑量明顯抑制CIA大鼠滑膜內(nèi)IL-2的合成（P0.01）；體外實(shí)驗(yàn)，通痹靈總堿顯著抑制ConA刺激下CD3、CD25的表達(dá)，提示通痹靈可以通過抑制IL-2合成及ConA激活的IL-2受體鏈CD25信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，減輕局部關(guān)節(jié)的炎癥，為其用于RA的治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。3.3  血

11、管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor,VAGF） RA與其他炎性關(guān)節(jié)炎不同之處在于關(guān)節(jié)滑膜血管翳的形成,而VEGF在這形成過程中起著關(guān)鍵的作用。梁清華等12觀察痹腫消湯（白花蛇舌草、腫節(jié)風(fēng)、丹參、薏苡仁）對實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜組織VEGF表達(dá)水平的影響，探討痹腫消湯治療RA的作用機(jī)制。結(jié)果顯示免疫大鼠88.57%出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥狀；正常組滑膜組織未見明顯VEGF表達(dá)，模型組VEGF表達(dá)明顯高于痹腫消湯組和MTX組(P0.01)；隨著時(shí)間的延長,模型組VEGF表達(dá)逐漸升高,痹腫消湯組和MTX組的VEGF表達(dá)明顯低于模型組(P0.01)，且痹腫

12、消湯組又低于MTX組(P0.05)。說明VEGF參與了RA疾病滑膜炎的形成和發(fā)展過程，其表達(dá)的高低與關(guān)節(jié)炎癥狀的輕重有關(guān)；痹腫消湯和MTX均能阻斷關(guān)節(jié)炎滑膜組織VEGF表達(dá),且痹腫消湯阻斷作用優(yōu)于MTX；提示痹腫消湯可能通過阻斷VEGF的表達(dá)來阻抑關(guān)節(jié)炎滑膜血管翳的形成或骨質(zhì)侵蝕。陳紀(jì)藩等13觀察通痹靈（桂枝、白芍藥、知母、麻黃等）對CIA大鼠模型VEFG的影響，并和雷公藤多甙、MTX相比較。結(jié)果顯示，通痹靈高劑量組和雷公藤高劑量組能降低VEGF表達(dá)水平，與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P0.05）,而通痹靈低劑量組、MTX高劑量組、MTX低劑量組、雷公藤低劑量組與模型組比較，均未見明顯差異（

13、均P0.05）。         4  細(xì)胞凋亡   滑膜過度增生增厚是造成關(guān)節(jié)損害的主要病理基礎(chǔ)之一。滑膜過度增生增厚既與滑膜細(xì)胞的過度增生有關(guān)，也與滑膜細(xì)胞凋亡抑制相關(guān)。孟明等14觀察復(fù)方木防己湯（木防己、桂枝、石膏、紅人參、杏仁、薏苡仁、忍冬藤、玄參）對AA大鼠滑膜增生作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，用復(fù)方木防己湯治療后，AA大鼠滑膜細(xì)胞的類腫瘤樣增生受到了明顯抑制，且滑膜組織中c-myc和鳥氨酸脫羧酶(ODC)基因的mRNA表達(dá)水平均顯著下降（與模型組比較，均P0.01），提示復(fù)方木防己湯可能通過

14、抑制c-myc活化，介導(dǎo)細(xì)胞凋亡，下調(diào)ODC基因的mRNA表達(dá)，減少多胺生成等多個(gè)環(huán)節(jié)，抑制AA大鼠滑膜的類腫瘤樣增生。劉健等15用新風(fēng)膠囊（黃芪、薏苡仁、蜈蚣、雷公藤等）治療AA大鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)新風(fēng)膠囊組大鼠fas、fasL基因表達(dá)增加，bcl-2基因表達(dá)減少，從而促進(jìn)其滑膜細(xì)胞凋亡，抑制滑膜增生。5  清除自由基   研究認(rèn)為自由基參與了RA的病理過程，且與RA的炎癥程度密切相關(guān)。超氧化物歧化酶（SOD）能清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷，因此SOD活力的高低與RA有較密切的關(guān)系。曹露華等16用通痹止痛膠囊（川附子、制川烏頭、桂枝、桑枝、姜黃等）觀察對AA

15、大鼠的清除自由基能力的影響。研究發(fā)現(xiàn)，通痹止痛膠囊可降低體內(nèi)氧自由基水平及過氧化脂質(zhì)水平；高劑量組（11.4 g/kg）可使下降的血漿SOD及全血谷胱甘肽過氧化物酶（GSM-Px）水平恢復(fù)，增強(qiáng)機(jī)體清除氧自由基及過氧化脂質(zhì)的能力。黃清春等17用復(fù)方丹參注射液治療CIA大鼠，并另設(shè)地塞米松組、鹽水組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)丹參組與地塞米松組均比鹽水組SOD含量明顯增多（P0.05），提示丹參與激素對SOD活性有較強(qiáng)的影響，通過激活SOD，加快組織骨自由基的清除，起到保護(hù)關(guān)節(jié)滑膜組織免受損害的作用。6  改善血液流變學(xué)   中醫(yī)學(xué)認(rèn)為在RA病變過程中瘀血既是病理產(chǎn)物，又是致病因素。

16、現(xiàn)代研究也認(rèn)為RA存在著微循環(huán)障礙，而血液流變學(xué)的改變是血液循環(huán)和微循環(huán)障礙的發(fā)生原因和基礎(chǔ)。張立軍等18研究發(fā)現(xiàn)歷節(jié)合劑（黃芪、銀花藤、生地黃、當(dāng)歸、防風(fēng)、蒼術(shù)、赤芍藥、知母、黃柏、甘草、白芷等）治療AA大鼠后，大鼠的全血黏度、高切還原黏度、低切還原黏度、紅細(xì)胞剛性指數(shù)、聚集指數(shù)與模型組比均有明顯下降，說明歷節(jié)合劑能改善AA大鼠血液流變學(xué)的濃、黏、凝、聚狀態(tài)。樊冰等19觀察消痹靈袋泡劑（金銀花、土茯苓、黃柏、貝母、雷公藤、牡丹皮、赤芍藥、白芍藥、細(xì)辛）對AA大鼠血流變的影響，結(jié)果表明，該藥可使AA大鼠全血低切黏度、全血還原低切及中切黏度、血漿黏度明顯降低。7  存在的問題與展望&#

17、160;  綜上所述，中醫(yī)藥對RA的作用是多方面、多靶位的，體現(xiàn)了中醫(yī)藥在RA治療上的優(yōu)勢，更體現(xiàn)了中醫(yī)的整體觀念，但是也存在著一些不足之處：第一，目前的動(dòng)物模型多采用AA、CIA動(dòng)物模型，雖然在病理上符合RA的研究要求，但是并不能符合中醫(yī)對RA的辨證論治；第二，目前的實(shí)驗(yàn)研究多針對RA急性炎癥期，但實(shí)際上RA是一個(gè)慢性疾病，既有急性炎癥期，又有相對緩解期；第三，目前對RA的研究多集中在抗炎鎮(zhèn)痛、免疫等方面，但對具體的骨質(zhì)破壞、吸收方面的研究較少，特別是對破骨細(xì)胞分化因子/破骨細(xì)胞分化因子受體/護(hù)骨素（RANKL/RANK/OPG）系統(tǒng)方面的研究。因此，今后可以深入開展的工作為：模擬

18、各種證型生成的條件，統(tǒng)一造模方法和造模效果判斷的標(biāo)準(zhǔn)，建立病證結(jié)合的RA模型；應(yīng)對RA進(jìn)行長期、大樣本的研究，既要考慮急性炎癥期，也要考慮相對緩解期；加強(qiáng)對骨質(zhì)破壞吸收方面的研究，特別是對RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)的影響，以冀提高療效，改善患者的生活質(zhì)量。   （南京中醫(yī)藥大學(xué)科研處周學(xué)平指導(dǎo)）【參考文獻(xiàn)】  1王德儉，曹永孝，劉啟斌，等.祛濕止痹丸的抗炎、抑制免疫、鎮(zhèn)痛作用研究J中成藥，2003,25(4):334-3352李亞平，張文娟，徐寶林，等.芪地逐痹方抗炎鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究J浙江中醫(yī)雜志，2004,39(10):455-457 3周學(xué)平，方泰惠，

19、許慧琴，等舒關(guān)清絡(luò)沖劑對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠的作用J中藥藥理與臨床，2000,16(4):30-324梁清華，張花先，唐濤，等痹腫消湯對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者T細(xì)胞亞群的影響J湖南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2001,26(6):534-5365盧建華，王維佳，蔡永年，等.五藤祛風(fēng)合劑對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎T淋巴細(xì)胞亞群的影響J中醫(yī)正骨，2000,12(11):7-86張荒生，楊照華，王進(jìn)軍痹痛定膠囊對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠血清IL-1 TNF-的影響J中醫(yī)藥學(xué)刊，2005,23(12):2214-22157周學(xué)平，方泰惠，周玲玲，等清絡(luò)通痹顆粒治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的分子作用機(jī)理研究J中藥藥理與臨床，2003,19(1):35-378張國恩，楊德華，錢玉中，等痹康飲合劑對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠的實(shí)驗(yàn)研究J北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006,29(2):104-107，插39張厚利，齊艷，楊彤，等痹癥停合劑對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的防治作用及其機(jī)制研究J中成藥，2004,26(1)