人參皂苷Rg1對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響

1、人參皂苷Rg1對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響(1)【摘要】  目的 觀察人參皂苷Rg1對(duì)阿爾茨海默病(AD)模型大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響。方法 應(yīng)用喹啉酸損毀老年大鼠雙側(cè)Meynert基底核，制備AD模型，通過(guò)被動(dòng)回避跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)和水迷宮空間分辨能力測(cè)試，研究人參皂苷Rg1對(duì)AD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。結(jié)果 高、低劑量人參皂苷Rg1使AD大鼠在跳臺(tái)中出現(xiàn)的錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)(13 d)和學(xué)會(huì)迷宮所需的訓(xùn)練次數(shù)(16 d)顯著減少，其作用與1，2，3，4四氫吖啶(THA)無(wú)明顯差異，另外高劑量人參皂苷Rg1作用的大鼠學(xué)會(huì)迷宮所需的訓(xùn)練次數(shù)比THA顯著減少。結(jié)論 人參皂苷Rg1有明顯改善AD學(xué)習(xí)記

2、憶障礙的作用。  【關(guān)鍵詞】  人參皂苷Rg1阿爾茨海默病基底神經(jīng)節(jié)喹啉酸 【Abstract】  Objective  To observe the effect of ginsenoside Rg1 on rat  of Alzheimers disease (AD) model.Methods  Bilateral NBM of elderly rats were damaged by quinolinic acid,and the AD  model was established.The single passiv

3、e aviodance stepdown training and watermaze spatial localization test were used to study the effects of Ginsenoside Rg1 on learning and memory of  AD rats. Results  Treated with low and high dosages of ginsenoside Rg1,AD rat models decreased significantly in the number of errors in stepdow

4、n (13 days) and the times training to reach the criterion in water maze task (16 days) .Except for the fact that the times of training to reach the criterion with high dosage of ginsenoside Rg1 were those than that with 1,2,3,4 tetrahydroacridine, there was no obvious diffence in the effects of low,

5、 high dosage of GMC and THA.Conclusion  Ginsenoside Rg1 can improve the abilily of learning and memory of AD model rat. 【Key words】  ginsenoside Rg1，Alzheimers disease，basal ganglia，nucleus basalis，quinolinic acid 阿爾茨海默?。ˋlzheimers disease，AD）又稱原發(fā)性老年癡呆（senile dementia），是發(fā)生在早老及老年期、不可逆轉(zhuǎn)的、漸進(jìn)性

6、的、精神行為異常的老年人神經(jīng)退行性疾病，其發(fā)病率隨年齡的增加而增高1；其在世界范圍內(nèi)已成為繼腫瘤、心血管疾病之后的第三位致死性疾病，預(yù)防和治療AD已成為世界各國(guó)關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題。人參作為傳統(tǒng)中藥，含有多種有效成分，具有抗衰老和改善學(xué)習(xí)記憶功能的作用。藥理學(xué)研究表明，人參皂苷Rg1（ginsenoside Rg1）具有抗衰老、增強(qiáng)記憶力等作用，能改善腦缺血、乙醇、淀粉樣多肽和東莨菪堿等引起的學(xué)習(xí)記憶損傷24。本實(shí)驗(yàn)采用喹啉酸（quinolinic acid）損毀老年大鼠Meynert基底核（nucleus basalis of Meynert，NBM）制備AD動(dòng)物模型5，旨在此基礎(chǔ)上觀察人參皂苷R

7、g1對(duì)AD學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用。 1  材料與方法 1.1  動(dòng)物與材料  健康Wistar大鼠，平均體重450 g，月齡2022個(gè)月，人參皂苷Rg1購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所；喹啉酸為Sigma產(chǎn)品；1、2、3、4四氫吖啶（1,2,3,4 tetrahydroacridine，THA）為RBI公司產(chǎn)品；其他試劑為國(guó)產(chǎn)分析純級(jí)產(chǎn)品；所用蒸餾水為重餾水。      大鼠跳臺(tái)系中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所研制，迷宮設(shè)計(jì)參照宿寶貴6的方法；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腦立體定位儀（SN23型），為日本成茂公司產(chǎn)品。 1.2  方法 

8、 50只大鼠隨機(jī)分為假損傷、模型、模型+低劑量人參皂苷Rg1（灌胃劑量20 mg/kg）、模型+高劑量人參皂苷Rg1(灌胃劑量40 mg/kg)、模型+THA（10 mg/kg）五組，n=10。于損傷術(shù)前2 d開始給藥。灌胃體積為20 ml/kg，假損傷、模型組等體積蒸餾水，每天上午給藥1次，連續(xù)16 d。      手術(shù)日腹腔注射10%水合氯醛（400 mg/kg）麻醉，固定在腦立體定位儀上,常規(guī)消毒后，顱頂正中切口，按AP 1.4 mm，ML 2.4 mm，DV 7.5 mm定位雙側(cè)NBM。模型組和給藥組大鼠雙側(cè)NBM各注入用0.01 mol/L磷酸

9、鹽緩沖液（pH7.4）溶解的喹啉酸2 l（150 nmol），假損傷組注入等容量溶劑，每側(cè)注入時(shí)間為5 min，注完后留針5 min，縫合皮膚，常規(guī)飼養(yǎng)，分別于術(shù)后10、11 d灌胃后1 h行跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)，12、13、14 d灌胃后1 h行水迷宮測(cè)試，所有測(cè)試均在早七點(diǎn)至下午三點(diǎn)之間進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)后用蘇木精伊紅染色觀察NBM定位是否準(zhǔn)確，定位有誤的動(dòng)物棄之不用。 1.2.1  大鼠被動(dòng)回避性跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)：裝置為80 cm×16 cm×40 cm的茶色有機(jī)玻璃箱，箱底鋪有銅柵作為刺激電極，內(nèi)設(shè)高4.5 cm，直徑6.5 cm的橡皮墊作為大鼠回避電擊的安全平臺(tái)。先放入大鼠適應(yīng)5

10、min，隨后通以36 V交流電，大鼠遭到電擊后跳上安全平臺(tái)，如從臺(tái)上跳下，雙足接觸銅柵為錯(cuò)誤反應(yīng)，記錄3 min內(nèi)出現(xiàn)的錯(cuò)誤反應(yīng)數(shù)，24 h后重測(cè)驗(yàn)1次，以大鼠學(xué)習(xí)和次日重測(cè)驗(yàn)（記憶）過(guò)程中出現(xiàn)的錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)學(xué)習(xí)記憶能力。 1.2.2  水迷宮空間分辨能力測(cè)試實(shí)驗(yàn)：水迷宮試驗(yàn)裝置設(shè)計(jì)，長(zhǎng)寬各100 cm，高35 cm，泳路寬12 cm，泳路長(zhǎng)220 cm，水深25 cm，水溫(23±1)。讓大鼠在水中自由游泳2 min，讓其熟悉環(huán)境。第2天開始測(cè)定，每只大鼠每天上、下午各連續(xù)進(jìn)行4次測(cè)定，中間休息2 min，連測(cè)5 d。以大鼠自水迷宮起點(diǎn)游至終點(diǎn)所需時(shí)間和途中進(jìn)入盲端

11、的錯(cuò)誤次數(shù)作為衡量學(xué)習(xí)獲得及記憶鞏固能力的指標(biāo)。每次訓(xùn)練結(jié)束后清洗泳路側(cè)壁以消除嗅覺提示。 1.3  統(tǒng)計(jì)學(xué)處理  實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示，用INSTAT軟件進(jìn)行單因素方差分析，比較組間差異用q檢驗(yàn)。 2  結(jié)果 2.1  人參皂苷Rg1對(duì)被動(dòng)回避反應(yīng)能力的影響  在跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)和重測(cè)驗(yàn)中，模型組出現(xiàn)的錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)比假損傷組明顯增多（P<0.001），表明喹啉酸注入NBM明顯破壞大鼠的被動(dòng)回避反應(yīng)能力；與模型組相比，模型+低劑量組、模型+高劑量組出現(xiàn)的錯(cuò)誤反應(yīng)次數(shù)明顯減少（P<0.001或P<0.01），且與模型+TH

12、A組無(wú)差異（見表1）。 表1  大鼠在跳臺(tái)上的錯(cuò)誤次數(shù)（略） 注：a與假損傷組比較，P<0.001；b與模型組比較，P<0.001 2.2  人參皂苷Rg1對(duì)空間分辨能力的影響  在水迷宮實(shí)驗(yàn)中,模型組游完迷宮所需的時(shí)間明顯增多，與假損傷組比較，P<0.01，表明喹啉酸注入NBM可明顯破壞大鼠的空間分辨能力；與模型組相比，模型+低劑量人參皂苷Rg1組、模型+高劑量人參皂苷Rg1組和模型+THA組游完迷宮所需的時(shí)間顯著減少（均P0.01），而后面三組之間無(wú)差異（見表2）。 本篇論文由網(wǎng)友投稿，讀書人只給大家提供一個(gè)交流平臺(tái)，請(qǐng)大家參考，如有版權(quán)問(wèn)題

13、請(qǐng)聯(lián)系我們盡快處理。這篇人參皂苷Rg1對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響論文是程序自動(dòng)抓取于互聯(lián)網(wǎng)上，查看更多請(qǐng)點(diǎn)擊：讀書人網(wǎng)論文頻道： 表2  大鼠游完水迷宮全程所需時(shí)間和錯(cuò)誤次數(shù)（略） 注：a與假損傷組比較P<0.01；b與模型組比較P<0.01 3  討論      學(xué)習(xí)和記憶是人腦神經(jīng)系統(tǒng)的高級(jí)思維活動(dòng)，與多種神經(jīng)遞質(zhì)有關(guān)。阿爾茨海默病（AD）是一種進(jìn)行性記憶和認(rèn)知功能損傷為特征的退行性神經(jīng)系統(tǒng)疾病，它的確切病因尚不明確，被認(rèn)為是一種多病因機(jī)制介導(dǎo)的疾病。如中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)缺損、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、雌激素缺失、

14、膽固醇代謝異常、基因突變等多個(gè)環(huán)節(jié)參與其發(fā)病1。研究表明，大腦膽堿能神經(jīng)功能與學(xué)習(xí)記憶關(guān)系密切7，大腦膽堿能神經(jīng)功能的增強(qiáng)與降低，和學(xué)習(xí)記憶能力的改變相平行，因而形成了學(xué)習(xí)記憶的中樞膽堿能學(xué)說(shuō)。多年來(lái)，提高中樞膽堿能神經(jīng)功能一直是尋找AD有效治療藥物的重要指標(biāo)8，F(xiàn)DA批準(zhǔn)第一個(gè)用于治療AD的藥物THA，即是通過(guò)增強(qiáng)中樞膽堿能神經(jīng)功能實(shí)現(xiàn)的。      喹啉酸具有興奮毒作用8，能引起神經(jīng)元損傷，本實(shí)驗(yàn)用喹啉酸注入老年大鼠雙側(cè)NBM，使大鼠在跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)和水迷宮測(cè)試中表現(xiàn)出學(xué)習(xí)記憶能力的顯著下降，表明AD模型制備較成功。其原理為NBM是膽堿能神經(jīng)元，由它發(fā)出的

15、膽堿能神經(jīng)纖維是大腦膽堿能神經(jīng)的主要來(lái)源，NBM膽堿能神經(jīng)原損傷，可引起大腦膽堿能神經(jīng)功能的明顯降低。從而誘發(fā)大鼠表現(xiàn)出學(xué)習(xí)記憶能力的顯著下降。      人參皂苷Rg1是從人參中提取出來(lái)的有效成分，有研究4表明人參皂苷Rg1可以促進(jìn)小鼠腦神經(jīng)發(fā)育,增加突觸數(shù)目;增加腦內(nèi)M2膽堿受體密度,促進(jìn)腦內(nèi)蛋白質(zhì)合成,促進(jìn)大鼠腦中cfos基因表達(dá),提高cAMP水平；提高小鼠大腦內(nèi)乙酰膽堿水平，抑制AChE活性；對(duì)培養(yǎng)的大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞凋亡有抑制作用。人參皂苷Rg1通過(guò)抑制大腦皮質(zhì)中AChE活性來(lái)提高乙酰膽堿濃度而發(fā)揮對(duì)學(xué)習(xí)和記憶的改善作用。因此，調(diào)節(jié)膽堿能神經(jīng)系

16、統(tǒng)功能是人參皂苷Rg1抗AD的重要物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制之一。本實(shí)驗(yàn)中，人參皂苷Rg1能顯著提高AD模型大鼠被動(dòng)回避反應(yīng)能力和空間分辨能力，明顯改善AD學(xué)習(xí)記憶障礙，其作用與THA相似或較強(qiáng)，表明人參皂苷Rg1可能是治療AD的有效藥物。其作用可能與藥物明顯增強(qiáng)中樞膽堿能神經(jīng)功能，從而明顯增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶能力有關(guān)。此外，有研究表明人參皂苷Rg1對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的保護(hù)作用還與NMDA受體及iNOS有關(guān)9，10，詳細(xì)機(jī)制需進(jìn)一步研究。 【參考文獻(xiàn)】   1梁妍琦，黃霄天，唐希燦. 阿爾采末病發(fā)病機(jī)制及治療藥物研究進(jìn)展J. 中國(guó)新藥與臨床雜志，2006， 25（9）：641648. 2曉英，陳霽，張均田.

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