肝病患者抗LKM-1和抗SLALP的檢測及其自身抗體特征分析(1)

1、    肝病患者抗LKM-1和抗SLA/LP的檢測及其自身抗體特征分析(1)     目的 回顧性研究在肝功能異?；颊咧懈文I微粒體抗體和可溶性肝抗原/肝胰抗體檢測的意義和免疫特征。方法 收集肝功能異?；颊弑彼岚被D移酶(ALT)40 u/L的患者血漿5500例，分別檢測肝腎微粒體抗體、可溶性肝抗原/肝胰抗體和相關自身抗體，查閱臨床資料。結果 5500例血漿中檢測出SLA/LP陽性8例，占1.45，LKM陽性者4例，占0.73。12例陽性病例中，有乙型和丙型病毒性肝炎現(xiàn)癥感染證據的分別有1例和2例。大多數(shù)患者同時還

2、伴有ANA、AMA、SMA和(或)LSP等抗體陽性。結論 抗LKM-1和抗SLA/LP在我國肝病患者中出現(xiàn)的比例較低，抗LKM-1和抗SLA/LP是自身免疫性肝病的特征性抗體，檢測此抗體對自身免疫性肝炎診斷具有重的意義。關鍵詞 LKM-1;SLA/LP;肝炎;自身免疫性Study on LKM-1 and SLA/LP in Chinese patients with liver diseases Abstract Objective To study the positive rates of LKM-1and SLA/LP in Chinese patients with liver di

3、seases and analyse its characteristics.Methods 5500 sera of liver diseases with ALT 40 u/L were collected in 5 years.LKM-1,SLA/LP and related autoantibodies were tested by immumofluorescence assay and euroassay.Results Of 5500 sera only 4 cases(0.73)were positive for both LKM and LKM-1 antibodies.8

4、cases were positive for SLA/LP(1.45 ).Of 12 patients above,1 case had liver cirrhosis with HBsAg-positive,but HBVDNA negative;2 cases had anti-HCV positive,but HCV RNA negative.The most cases were ANA, AMA,SMA and(or)LSP positive respectively.Conclusion The prevalence of LKM-1and SLA/LP were very lo

5、w in Chinese patients with liver diseases.LKM-1and SLA/LP were specific to AIH and it would be important to diagnosis of AIH.Key words LKM-1;SLA/LP;hepatitis;autoimmune抗肝腎微粒體抗體(liver kidney microsomal antibodies,LKM-1)和抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(anti-soluble liver antigen/liver-pancreas,SLA/LP)抗體被認為是自身免疫性肝炎的標志性抗體

6、1。但國外也有報道2，這兩種抗體不僅見于自身免疫性疾病,也出現(xiàn)于10%15%的病毒性肝炎或其他免疫介導的疾病中,這給臨床診斷帶來了很多困難。為探討這兩種抗體在我國肝病患者中的存在狀況和意義,本研究對收集到的肝功能異?；颊甙ú《拘愿窝?、酒精性肝病、自身免疫性肝病、不明原因的肝功能異常等血清5500例進行抗LKM和SLA/LP及相關抗體檢測，現(xiàn)將結果報告如下。1 資料與方法1.1 一般資料 1999年9月2004年6月，收集北京佑安醫(yī)院住院及門診就診的患者中丙氨酸氨基轉移酶(ALT)大于40 u/L的患者血清5500例，統(tǒng)一檢測。1.2 主檢測項目及方法1.2.1 間接免疫熒光法(IFA，德國E

7、UROIMMUN公司試劑) 對5500例肝功能異常的患者的血漿標本檢測了ANA、AMA、SMA、LSP和APCA。本方法采用HEp-2細胞和5種組織(猴肝臟和心肌組織、大鼠肝、腎和胃組織)的冰凍切片作為抗原，以生物薄片技術將帶有細胞和組織的6種切片組合成一個反應區(qū)。待檢血清自1100起始稀釋，與各種組織細胞共同孵育30 min；加入異硫氰酸熒光素(FITC)標記的抗體結合30 min；洗片、封片后熒光顯微鏡觀察結果。組織或細胞內出現(xiàn)特征性的綠色熒光，血清稀釋度1100為陽性3。1.2.2 M2、LKM-1和SLA/LP的檢測 將高度純化的各種抗原平行包被于檢測膜條上，固定后將膜條放置于溫育槽中

8、加入1.5 ml緩沖液振蕩孵育15 min，棄緩沖液加入稀釋待檢血清1.5 ml，振蕩孵育30 min。洗液清洗3次，每次5 min，加入堿性磷酸酶標記第二抗體再振蕩孵育30 min。清洗，顯色。檢測膜條上出現(xiàn)藍紫色條帶為陽性，以試劑公司(EUROIMMUN試劑)提供的陽性條帶位置標準圖判定結果。    1.2.3 其他檢測 甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒標志物檢測由我院臨床檢驗中心及肝病研究所統(tǒng)一完成。肝臟活體組織學由我院病理科采用統(tǒng)一標準閱片。1.3 診斷標準 AIH的診斷參照國際自身免疫性肝炎工作組制定的診斷標準;病毒性肝炎及肝硬化按2000年病毒性

9、肝炎防治方案診斷。2 結果5500例血清中檢測出SLA/LP陽性8例，占1.45，男女比例26，年齡3375歲，平均53歲。其中6例無甲、乙、丙、丁、戊型病毒性肝炎現(xiàn)癥感染證據，1例伴乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和抗HBe、抗HBc陽性，但檢測HBV DNA為陰性。另外1例抗丙型肝炎病毒(HCV)IgG陽性，但HCV-RNA陰性。5500例血清中檢測出LKM-1陽性者4例，占0.73，男女比例31，年齡1137歲，平均24.5歲。其中1例抗丙型肝炎病毒(HCV)IgG陽性，診斷為病毒性肝炎丙型，但HCV-RNA陰性。其他自身抗體檢測結果：SLA/LP陽性的8例患者中，ANA均為陽性(滴度13

10、20)，AMA(滴度1320)者3例，全部M2陽性()。SMA陽性者1例(滴度1320)。LSP、APCA和LKM-1未見陽性。LKM陽性的患者中ANA陽性1例(滴度1320)，APCA陽性者1例(滴度11000)。LSP、AMA、SMA和AMA以及M2未見陽性。3 討論自身抗體LKM-1是診斷AIH-型特異性較強的指標，SLA/LP是診斷AIH-型特異性較強的指標。歐洲國家報道的陽性率較高，日本報道較低。我國LKM-1和SLA/LP的陽性率還未見有報道。本研究中，在檢測的5500例肝功能異?；颊咧幸圆《拘愿窝诪橹?，包括肝炎肝硬化患者，LKM陽性者4例，僅占0.73?？筍LA/LP抗體陽性患者

11、8例，僅占0.15%，不像其他自身抗體在肝功能異?；颊咧写嬖谝欢ǖ谋壤１M管如此，其仍為診斷AIH的重自身抗體。有研究報道通過對2000例患者調查結果顯示，SLA/LP對AIH患者的特異性是100，敏感性為30。最初研究者認為SLA的靶抗原是8型和18型角蛋白，另有學者報道SLA是谷胱甘肽S轉移酶。但是WieS等4報道SLA的靶抗原既不是谷胱甘肽S轉移酶，也不是角蛋白抗體，而是一種未知蛋白，可能是一種酶。LKM-1的靶抗原為細胞色素P450 2D6。有報道認為其與HCV病毒基因序列有部分同源性，因此部分LKM-1抗體陽性者同時存在抗HCV抗體。本研究中，LKM-1陽性的患者中1例有丙型肝炎病毒

12、指標存在，SLA陽性的患者中2例分別有乙型肝炎病毒和甲型肝炎病毒指標存在，但均無現(xiàn)癥病毒感染證據，不排除在AIH基礎上合并感染肝炎病毒的可能。            作者：馮霞，閆惠平，劉艷敏，黃春，檀玉芬，劉妍，馬冬梅【關鍵詞】LKM-1;SLA/LP;肝炎;自身免疫性摘目的回顧性         本篇論文是由3COME文檔頻道的網友為您在網絡上收集整理餅投稿至本站的，論文版權屬原作者，請不用于

13、商業(yè)用途或者抄襲，僅供參考學習之用，否者后果自負，如果此文侵犯您的合法權益，請聯(lián)系我們?？筍LA/LP抗體陽性的患者，同時ANA也均為強陽性，故有部分學者將其歸入AIH-I型。部分患者伴SMA、AMA、M2陽性。有報道5，6AIH特異性抗體(抗-LKM-1，抗一SLA/LP)與抗AMA抗體同時出現(xiàn)時，幾乎都證明存在AIH/原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)重疊綜合征。此項研究表明有這種情況的存在。但目前如何依據臨床和實驗室指標對重疊綜合癥給予確切診斷和分型還需進一步研究。參考文獻1 Kanzler S, Weidemann C, Gerken G, et al. Clinical significa

14、nce autoantibodies to soluble liver antigen in autoimmune hepatitis. Hepatol,1999,31:635-6402.2 McFarlaneI G. Lesson about antibodies in autoimmunehepatitis. Lancet，2000,355:1475-1476.3 趙景濤,劉玉蘭.21世紀醫(yī)師叢書消化內科分冊.北京:中國協(xié)和醫(yī)科大學出版社,2000,235-240.4 Wies I, Brunner S, Henninger J, et al. Identification of target antigen for SLA/LP autoanlibodies in autoimmune hepatitis. Lancet,2000,355:1510-1515.5 Czaja J, Carpenter HA, Santrach PJ. Autoimmune cholangitis within the spectrum of autoimmune liver disease. Hepatology,2000,31(6):1231-1238.6 Lohse AW, Meyerzum Buschenfelde KH, Franz B, et al. Ch