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1、醫(yī)用臭氧對膝骨關(guān)節(jié)炎兔關(guān)節(jié)灌洗液SOD、MDA含量的影響 11-03-23 13:13:00 作者:謝榮 趙明 趙亮 編輯:studa20【摘要】 目的: 探討醫(yī)用臭氧對膝關(guān)節(jié)炎兔關(guān)節(jié)灌洗液超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的影響。方法: 30只新西蘭大白兔隨機分為3組:正常對照組(N)、模型對照組(M)、臭氧治療組(O),每組10只。M、O組分別于造模第1、4天經(jīng)右膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射1
2、.6% papain溶液0.3 ml制備骨性關(guān)節(jié)炎(OA)模型。造模成功后第3、5天向O組動物右膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射20 g/ml的醫(yī)用臭氧3 ml。末次注射1周后自右膝關(guān)節(jié)抽取關(guān)節(jié)灌洗液測定SOD、MDA的含量。結(jié)果: 與N組相比,M組關(guān)節(jié)灌洗液中SOD的含量降低,MDA的含量升高;與M組相比,O組關(guān)節(jié)灌洗液中SOD的含量升高,MDA的含量降低。差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論: 關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射20 g/ml的醫(yī)用臭氧治療兔膝骨關(guān)節(jié)炎的機制可能與增強機體清除自由基的能力有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】 臭氧; 骨關(guān)節(jié)炎; 超氧化物歧化酶; 丙二醛Abstract Objective: T
3、o observe the effect of medical ozone on superoxide dismutase (SOD) and malondialdehyde (MDA) in the douche fluid of osteoarthritic knee joint in rabbits. Method: Thirty adult NewZealand white rabbits were randomly divided into three group: group normal(N)、group model(M)、group ozone (O),each group h
4、ad ten rabbits. OA modle was produced by injecting 0.3 ml of 1.6% papain solusion into the right knee joint space twice three days apart. 3ml of O3 20 g/ml was injected into the right knee joint in group ozone on the 3rd and 5th day after OA modal was established successfully. One week later the las
5、t injection, douche fluid of the diseased joints were obtained for the measurements of superoxide dismutase(SOD)and malondialdehyde(MDA). Result: Compared with N group , in M group the activities of SOD in douche fluid of the diseased joints were decreased significantly , the contents of MDA were in
6、creased significantly . Compared with M group ,in O group the activities of SOD in douche fluid of the diseased joints were increased significantly, the contents of MDA were decreased significantly. The difference among the groups were statistically significant (P<0.05). Conclusion: The study ind
7、icated that ozone 20 g/ml has beneficial effect on osteoarthritis by improving the ability to clear free radical.Key words: ozone; degenerative arthritis; SOD; MDA骨性關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA),是一種以關(guān)節(jié)軟骨的變性、破壞及骨質(zhì)增生為特征的慢性關(guān)節(jié)病。據(jù)統(tǒng)計,OA是最常見的老年病之一,患病率和患病人數(shù)均居世界首位。近年來,關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射臭氧治療膝骨關(guān)節(jié)炎的報道很多,但其機制還有待于進一步探討。有研究顯示,生物自由基在
8、骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展中起了不可忽視的作用1。本研究擬評價醫(yī)用臭氧對膝骨關(guān)節(jié)炎兔關(guān)節(jié)灌洗液中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的影響,以探討其治療膝骨關(guān)節(jié)炎的機制。1 材料與方法1.1 實驗儀器及試劑550 nm分光光度計,37恒溫水浴鍋,臺式離心機,超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)測定試劑盒(由南京建成生物工程研究所提供),醫(yī)用臭氧發(fā)生器(CHY11B型)。1.2 實驗動物及分組健康新西蘭大白兔30只,體質(zhì)量22.5 kg,雌雄各半(由江蘇大學(xué)實驗動物中心提供)。動物隨機分為3組:正常對照組(N)、模型對照組(M)、臭氧治療組(O),每組10只。1.3 方 法1.3.1 動物
9、模型的復(fù)制 參照文獻2的方法建立OA模型,將M、O組實驗兔采用戊巴比妥1 ml/kg腹腔注射,右膝關(guān)節(jié)脫毛,常規(guī)消毒,向兔右膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射1.6% papain溶液0.3 ml,于造模第1、4天按以上方法共注射2次。造模成功后第3、5天,O組動物采用戊巴比妥1 ml/kg腹腔注射麻醉,右膝關(guān)節(jié)常規(guī)消毒,用TB針頭自骸骨上方刺入膝關(guān)節(jié)腔。臭氧作為一個強氧化劑,具有潛在的細胞毒性??紤]到本研究對象為小個體動物,故采用了低濃度醫(yī)用臭氧即用5 ml注射器收集醫(yī)用臭氧20 g/ml 3 ml,右膝注射,待實驗兔蘇醒,觀察無異常后,送回兔籠。1.3.2 檢測方法 末次注射1周后自右膝關(guān)節(jié)抽取關(guān)節(jié)灌洗液,每
10、份關(guān)節(jié)灌洗液稀釋后,分別采用黃嘌呤氧化酶法測定SOD、采用硫代巴比妥酸法(TBA法)測定分析MDA。1.4 統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS11. 5統(tǒng)計軟件,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x±s)表示, 多組間比較采用方差分析,兩兩比較采用SNKq檢驗。2 結(jié) 果關(guān)節(jié)液SOD含量:模型組較正常對照組明顯降低,差異有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義 (P<0.01);臭氧組較模型組明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),但仍低于正常組(P<0.05)。關(guān)節(jié)液MDA含量:模型組較正常對照組明顯升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);臭氧組較模型組明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),但仍高于正常組(P<0.05)。表1 關(guān)節(jié)灌洗液中SOD、MDA活性的變化組別動物只數(shù)SOD(U/mgprot)MDA(nmol/L)正常
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