HBVDNA HBVPreS及HBeAg聯(lián)合檢測(cè)對(duì)慢性乙型肝炎的臨床價(jià)值

1、HBV?DNA HBV?PreS及HBeAg聯(lián)合檢測(cè)對(duì)慢性乙型肝炎的臨床價(jià)值    摘 要 目的：了解HBV?DNA、HBV?PreS1及HBeAg與乙肝病毒復(fù)制的關(guān)系，分析其在慢性乙型肝炎(CHB)診斷與治療中的臨床價(jià)值。方法：采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISa)法和熒光定量PCR法對(duì)300例CHB患者血清進(jìn)行HBV?DNA、HBV?PreS1、HBeAg及肝功能檢測(cè)，分析其相互關(guān)系，評(píng)價(jià)其聯(lián)合檢測(cè)的價(jià)值。結(jié)果：HBV?DNA及HBV?PreS1陽(yáng)性率分別為76%和73%，P>0.05，HBeAg陽(yáng)性率為67%，三者一致性較好。同時(shí)HBeAg陽(yáng)性組

2、及陰性組差異均無(wú)顯著性，P>0.05，ALT測(cè)定結(jié)果顯示，ALT正常組中PreS1及HBV?DNA陽(yáng)性檢出率分別為30%和85%，P<0.01。結(jié)論：HBV?DNA、HBV?PreS1、HBeAg均能反映CHB患者病毒復(fù)制情況。HBV?PreS1與肝臟功能損害密切相關(guān)，上述各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)合ALT聯(lián)合檢測(cè)可以更好的反映病毒復(fù)制的真實(shí)情況，對(duì)感染狀態(tài)及病變活動(dòng)性做出準(zhǔn)確的分析，為臨床提供更高的參考價(jià)值。 關(guān)鍵詞 DNA；PreS1；乙型肝炎；病毒復(fù)制HBV感染時(shí)，宿主對(duì)HBV的免疫應(yīng)答與病毒清除和發(fā)病機(jī)制有關(guān)。主要是通過(guò)CTL、Th、巨噬細(xì)胞、NK及其他細(xì)胞因子的活化，導(dǎo)致免疫病理?yè)p害，并

3、清除病毒而肝功能出現(xiàn)反復(fù)異常。對(duì)于慢性乙型肝炎(CHB)，其預(yù)后主要取決于病變活動(dòng)性的程度和持續(xù)時(shí)間。抗病毒治療的基礎(chǔ)是抑制嗜肝DNA病毒復(fù)制，同時(shí)抑制感染細(xì)胞中靶抗原的表達(dá)，以緩解炎癥應(yīng)答，但HBV運(yùn)行的是保守復(fù)制，在停藥后又可能恢復(fù)復(fù)制1，因此，判定病毒的復(fù)制情況，對(duì)感染狀態(tài)和病變活動(dòng)性做出分析，在CHB的診斷與臨床治療中乃預(yù)后都具有重大意義。1 對(duì)象和方法1.1 標(biāo)本來(lái)源 300份CHB患者血清均選自我院傳染科肝病門診及住院患者，其診斷均符合乙型病毒性肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則(衛(wèi)生部GB15990?1995)的診斷標(biāo)準(zhǔn)。1.2 試劑和儀器 HBV?DNA采用熒光定量PCR法，試劑盒由上海

4、復(fù)星公司提供，儀器：上海復(fù)星公司SLAN自動(dòng)熒光PCR儀，PreS1和HBeAg采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法雙抗體夾心法，試劑分別由上海阿爾法生物技術(shù)有限公司和北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)有限公司提供，ALT采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，試劑由上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供，儀器：日本奧林巴斯Au?640。1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用2檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有顯著性意義。2 結(jié)果2.1 HBV?DNA PCR定量分析及HBVPreS1?AgELISA法定性測(cè)定結(jié)果 HBV?DNA檢測(cè)下限為1×103copies/ml，結(jié)果顯示，在300例血清中HBV?DNA陽(yáng)性者228例，HB

5、V PreS1?Ag陽(yáng)性者219例。同時(shí)HBV?DNA( )/HBVPreS1?Ag(?)者24例，HBV?DNA(?)/HBV PreS1?Ag( )者6例，二者陽(yáng)性檢出率分別為76%和73%，差異無(wú)顯著性，P>0.05。2.2 HBeAg檢測(cè)結(jié)果 顯示陽(yáng)性者201例，陰性者99例，陽(yáng)性檢出率為67%，HBeAg、HBV?DNA、HBVPrS1?Ag三者檢測(cè)結(jié)果關(guān)系見(jiàn)表1。HBeAg( )與HBeAg(?)組差異均無(wú)顯著性，P0.05。表1 CHB患者血清HBeAg、HBV?DNA、HBVPreS1?Ag三者檢測(cè)結(jié)果關(guān)系（略）2.3 300份血清ALT測(cè)定結(jié)果與HBV?DNA及HBVP

6、reS1關(guān)系 其中ALT(?)組HBV?DNA( )與PreS1( )間差異顯著，P<0.05，見(jiàn)表2。表2 300份血清ALT測(cè)定結(jié)果與HBV?DNA及HBVPreS1關(guān)系（略）3 討論HBV?DNA通常被認(rèn)為是診斷乙肝、提示病毒復(fù)制的金標(biāo)準(zhǔn)2，基于PCR的高靈敏性，可以檢測(cè)出極低水平的病毒復(fù)制。PreS1蛋白是因HBV基因組開(kāi)放讀碼框S區(qū)編碼合成的病毒蛋白，是構(gòu)成HBV的外膜蛋白成分，它具有很高的免疫原性，不僅與病毒復(fù)制密切相關(guān)，而且在感染宿主細(xì)胞過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。在急性HBV感染時(shí)，PreS1抗原及其抗體同時(shí)反映病變的活動(dòng)和對(duì)病毒的清除，若HBV?PreS1?Ag持續(xù)存在將發(fā)展至

7、慢性并可能導(dǎo)致肝功能損害3。本研究對(duì)300例CHB患者血清同時(shí)做HBV?DNAPCR定量分析及HBVPreS1?AgELISA法定性分析。二者陽(yáng)性檢出率分別為76%和73.7%，無(wú)差異有顯著性(P>0.05),兩種檢測(cè)方法有較好的一致性，同時(shí)，也發(fā)現(xiàn)二者存在一定的交叉性和交叉陽(yáng)性現(xiàn)象。因此，二者可協(xié)同檢測(cè)相互補(bǔ)充。HBeAg是HBV核心成分，是臨床上判斷病毒復(fù)制及傳染性的重要血清標(biāo)志物。本研究中，HBeAg( )組中HBV?DNA及HBVPreS1?Ag陽(yáng)性率分別為88%及85%，三者具有較好的一致性。在HBeAg(?)組中，DNA及PreS1陽(yáng)性檢出率分別為42%及37%，提示單以HB

8、eAg判斷HBV的復(fù)制情況并不全面。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，即使在抗HBe( )的慢性活動(dòng)性肝病，多數(shù)仍有低水平復(fù)制，且常是病變持續(xù)活動(dòng)的原因3。血清轉(zhuǎn)氨酶ALT對(duì)肝細(xì)胞損害極為敏感，可以反映病變的活動(dòng)性。在本研究中ALT異常組中HBV?DNA與PreS1陽(yáng)性檢出率分別為85%、82%，二者差異無(wú)顯著性(P>0.05)。在ALT正常組中，二者陽(yáng)性率分別為38%、32%，結(jié)果差異有顯著性(P<0.05)，提示PreS1與肝臟功能損害的相關(guān)性優(yōu)于HBV?DNA。但是，在慢性乙肝患者中，PreS1的陽(yáng)性檢出率隨病變的發(fā)展而降低3，同時(shí)，在反映肝臟功能損害時(shí)，ALT盡管靈敏性高，但特異性不高，檢測(cè)慢性病變不如急性病變3，因此，在判斷CHB患者的病變活動(dòng)性時(shí)，應(yīng)結(jié)合多種檢查及臨床表現(xiàn)，對(duì)病毒復(fù)制情況及病變活動(dòng)性做出全面分析，為治療評(píng)估預(yù)后提供正確的信息。本組研究顯示，在CHB患者對(duì)HBV?DNA、PreS1蛋白、HBeAg及肝功能檢查中各有優(yōu)勢(shì)。在實(shí)際工作中應(yīng)聯(lián)合檢測(cè)，互相補(bǔ)充，這樣對(duì)CHB的診斷與治療會(huì)有更高的臨床價(jià)值。參考文獻(xiàn):1 駱抗先.乙型