阿膠中復(fù)合氨基酸最佳提取工藝的研

1、阿膠中復(fù)合氨基酸最佳提取工藝的研摘要：本試驗以阿膠為主要原材料，對阿膠中復(fù)合氨 基酸的硫酸水解法提取工藝進行研究，通過正交試驗確定出 最佳水解條件。結(jié)果表明，最佳水解條件是：硫酸用量為 25 毫升，硫酸濃度為 1.5摩爾/升，硫酸水解時間為 4 小時，硫 酸提取溫度為70 C。該工藝獲得的復(fù)合氨基酸得率為 13.26%，且穩(wěn)定可靠。關(guān)鍵詞：阿膠；硫酸水解法；復(fù)合氨基酸 基金項目：吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院大學(xué)生創(chuàng)新項目（吉農(nóng) 院合字 2013第 70 號）中圖分類號： TQ658.2 文獻標識碼： A 文章編號： 1674-0432（2014）-10-19-2阿膠系驢（Equusasinus L1）的皮

2、經(jīng)煎煮濃縮成的固體 膠。能補血滋陰、潤燥止血，用于貧血心悸、燥咳咯血、先 兆流產(chǎn)、產(chǎn)后血虛、肌痿無力，是中醫(yī)臨床常用補益藥。阿 膠多由蛋白及其降解產(chǎn)物、多糖類物質(zhì)及其他小分子物質(zhì)組 成，其中至少含有17種水解蛋白氨基酸?？偤吭?6.7382.03 之間，含量以丙氮酸、甘氨酸，脯氨酸，鉻氨酸和精 氨酸為主要氨基酸，均占總氨基酸含量的 7% 以上。隨著經(jīng)濟的迅速發(fā)展，人們的物質(zhì)生活水平逐漸提高， 工業(yè)文明使得環(huán)境日益惡劣，人們在享受的同時身體也受到侵襲，亞健康狀態(tài)成為十分嚴重的問題。然而每一個細胞的重要組成部分都有氨基酸的參與，沒有氨基酸就沒有生命， 所以適量補充氨基酸有益身體健康。阿膠中氨基酸

3、含量豐 富，因此從阿膠中提取氨基酸能夠獲得較高的得率，從而滿 足人們對氨基酸的需要。1 材料與步驟1.1 材料及設(shè)備1.1.1 阿膠 東阿百年堂東阿銷售有限公司阿膠。1.1.2 材料硫酸溶液，活性炭， 150 克/升的 Ca（OH） 2 混懸液。1.1.3 設(shè)備及用具 電子天平（ FA2004A 電子分析天平） ； 6202小型高速粉碎機； 抽濾機；圓底燒瓶； 三口燒瓶； 試管； 燒杯；量筒等。1.2 試驗步驟1.2.1 工藝技術(shù)路線阿膠研磨酸水解液離心水 層脫色吸附洗脫濃縮復(fù)合氨基酸1.2.2 阿膠中復(fù)合氨基酸含量檢測 復(fù)合氨基酸的溶液 與水合茚三酮共熱時，能產(chǎn)生紫色化合物，可用比色法進行

4、測定。氨基酸與茚三酮反應(yīng)，氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛、茚三酮被還原成還原型茚三酮；然后將所形成的還原 型茚三酮與另一個茚三酮分子和 NH3 縮合生成有色物質(zhì)。1.2.3 得率計算 阿膠復(fù)合氨基酸的得率為提取得到的阿膠復(fù)合氨基酸質(zhì)量占阿膠原料的質(zhì)量分數(shù)。2 結(jié)果與分析2.1 單因素試驗本試驗以氨基酸提取率為指標， 考查硫酸濃度 （0.5、1、 1.5、2、2.5、3、3.5 摩爾 /升），硫酸用量（ 10、15、20、25、 30、35、40、45、50 毫升），硫酸水解時間（ 3、3.5、4、4.5、 5、5.5、6、6.5、7 小時）,硫酸提取溫度 （50 C、55 C、60 C、

5、65C、70C、75C、80C、85C、），對阿膠中復(fù)合氨基酸提 取的影響。2.1.1 硫酸濃度的影響 在硫酸用量為 30 毫升，硫酸水解時間為4.5小時，硫酸提取溫度為 75C的條件下，分別改 變硫酸濃度，按 1.2 進行復(fù)合氨基酸的提取并計算得率。由 圖 1 可知，選擇 1.5 摩爾 /升為最佳硫酸濃度。2.1.2 硫酸用量的影響 在硫酸濃度 1.5 摩爾 /升，硫酸水 解時間為4.5小時，硫酸提取溫度為 75C的條件下，分別改 變硫酸用量，按 1.2 進行復(fù)合氨基酸的提取并計算得率。由圖 2 可知，選擇 25 毫升為最佳硫酸用量。2.1.3 硫酸水解時間的影響 在硫酸濃度 1.5 摩爾

6、/升，硫 酸用量為25毫升，硫酸提取溫度為 75C的條件下，分別改 變硫酸水解時間， 按 1.2 進行復(fù)合氨基酸的提取并計算得率。由圖 3 可知，選擇 4 小時為最佳硫酸水解時間2.1.4 硫酸提取溫度的影響 在硫酸濃度 1.5 摩爾 /升，硫 酸用量為 25 毫升，硫酸水解時間 4小時的條件下，分別改 變硫酸提取溫度， 按 1.2 進行復(fù)合氨基酸的提取并計算得率。 由圖4可知，選擇70 C為最佳硫酸提取溫度。2.2 提取工藝的優(yōu)化2.2.1 正交試驗 硫酸濃度、硫酸用量、硫酸提取時間、 硫酸提取溫度四個因素都能影響硫酸水解法提取復(fù)合氨基 酸的結(jié)果，本試驗采用正交設(shè)計的方法，對以上四個因素安

7、排 L9 （34） 正交試驗，找出它們的最優(yōu)工藝。具體因素和 水平見表一。2.2.2 驗證實驗 為使實驗結(jié)果更加精確，抽取四批阿膠 樣品，進行氨基酸提取，其得率分別為 13.176%， 13.329% ， 13.324% ， 13.222%，平均得率為 13.26% ，表明該工藝穩(wěn)定 可靠。3 結(jié)論 本試驗研究了阿膠硫酸水解法提取復(fù)合氨基酸的工 藝，通過單因素和正交實驗，確定了最佳優(yōu)化方案為硫酸用 量為 25毫升，硫酸濃度為 1.5摩爾 /升，硫酸水解時間為 4 小時，硫酸提取溫度為70C,所以在該條件下提取的復(fù)合氨 基酸得率最高，為進一步研究阿膠中氨基酸的提取方法奠定 了基礎(chǔ)。參考文獻1 劉

8、慧燕 ,德力格爾桑 ,方海田 .茚三酮比色法測定牛肉 中游離氨基酸的試驗研究 J. 保鮮與加工 .2006,(02):23-25.2 胡軍影 ,程顯隆 ,肖新月 ,林瑞超 .阿膠的化學(xué)成分及 質(zhì)量評價方法研究進展 J. 中國藥事 .2007,(03):193-195.3 戴紅,張宗才 ,張新申 .氨基酸分析的檢測方法評述 J. 皮革科學(xué)與工程 .2004,(03):39-43.4 尤金花 ,田守生 ,郭尚偉 ,段小波 .阿膠及其療效功能 的研究進展 J. 明膠科學(xué)與技術(shù) . 2009,(04):169-174.5 肖林 ,李玉梅 ,趙磊 . 硫酸水解法測定果膠中低聚木 糖含量及方法學(xué)驗證 A.

9、 第十二屆中國國際食品添加劑和配 料展覽會論文集 C.2008:178-180.6 陳定一 ,王靜竹 ,劉文林 . 阿膠及其炮制品中氨基酸 和微量元素分析研究 .中國中藥雜志 ,1991,16(2):83-84.7 劉培民 ,尤金花等 .阿膠及其療效功能的研究進展 就 .明膠科學(xué)與技術(shù) ,2009,29(4):169-174.Study on extraction process of compound amino acids ofdonkey hide gelatinThe first author ： GuoNanNan The second author： YangXiangBo(Jil

10、in institute of agricultural science and technology university students of science and technology innovationJilinJilin 132101)Abstract:In this experiment,donkey hide gelatin as main raw material, The sulfuric acid hydrolysis of compound amino acid intheextraction process of donkey hide gelatin, Thro

11、ugh orthogonal test to determine the optimum hydrolysis conditions. The results show that， The optimum conditions of acid hydrolysis is ： Sulfuric acid is 25mL ， The concentration of sulfuric acid is 1.5mol/L ， Time sulfuric acid hydrolysis of 4H ， Sulfuric acid, extracting temperature was 70 °C . The process of compound amino acid obtained was13.26% ，The stable and r