不同炮制方法對(duì)天麻中天麻素含量的影響

1、不同炮制方法對(duì)天麻中天麻素含量的影響         11-04-29 09:21:00     編輯：studa20              作者：尹珉,毛克臣,陳志峰,莊志紅,黃健,曹艷楠,何曉東【摘要】  目的 考察不同的炮制方法對(duì)天麻中主要化學(xué)成分天麻素含量的影響。方法 采用RP-HPLC法。色譜柱為Agilent Eclips

2、e XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5 ?m),流動(dòng)相為乙腈-0.05%磷酸水溶液(397),流速為1.0 mL/min,柱溫為25 ,檢測波長為230 nm。對(duì)不同產(chǎn)地經(jīng)過硫磺熏蒸與未經(jīng)過硫磺熏蒸的天麻進(jìn)行含量測定。結(jié)果 樣品平均回收率為100.29%,RSD1.82%(n6)。在天麻的炮制加工中,經(jīng)過硫磺熏蒸的天麻,天麻素含量分別為0.15%、0.19%、0.11%,未經(jīng)過硫磺熏蒸的天麻,天麻素含量分別為1.44%、0.44%、0.82%。結(jié)論 在天麻的炮制加工中經(jīng)過硫磺熏蒸對(duì)天麻素的含量影響較大。 【關(guān)鍵詞】  天麻；天麻素；炮制；硫磺；高效液相色譜法；含

3、量測定Abstract：Objective To investigate the effect of different processing methods on the main chemical constituents of Gastrodia-gastrodin. Methods RP-HPLC method was used with columns Agilent Eclipse XDB-C18 (150 mm×4.6 mm, 5 m), mobile phase of acetonitrile-0.05% phosphoric acid solution (397),

4、 flow rate of 1.0 mL/min, column temperature was 25 , detection wavelength was 230 nm. Gastrodia of three different areas were measured. Results The average recovery was 100.29%, RSD1.82% (n6). Gastrodin contents of Gastrodia processed with sulfur fumigation were 0.15%, 0.19%, 0.11% respectively. Ga

5、strodin contents of Gastrodia without sulfur fumigation were 1.44%, 0.44%, 0.82% respectively. Conclusion Sulfur fumigation has great impact on gastrodin content in processing of Gastrodia.Key words：Gastrodia；Gastrodin；processing；sulfur；HPLC；content determination天麻為蘭科植物天麻Gastrodia elata Bl.的干燥塊莖,又稱為

6、赤箭、木浦、明天麻,主產(chǎn)于貴州、四川、云南、湖北、陜西等地。冬、春二季采挖,冬季產(chǎn)者稱“冬麻”,春季產(chǎn)者稱為“春麻”。采挖后除去地上莖,洗凈,及時(shí)擦去環(huán)節(jié)上的鱗葉及粗皮,隨即用清水或礬水微浸,以防變黑,再蒸透取出,切薄片晾干或烘干。天麻的商品規(guī)格分野生、家種兩種,現(xiàn)在市場銷售的大多是家種的1。天麻性平、味甘,歸肝經(jīng),具有熄風(fēng)止痙、平肝潛陽的功能,主要用于治療頭痛、眩暈、肢體麻木、小兒驚風(fēng)、癲癇抽筋、破傷風(fēng)2。天麻的主要化學(xué)成分為天麻素(即對(duì)羥基苯甲醇-b-d-葡萄吡喃糖),并含對(duì)羥基苯甲醇、對(duì)羥基苯基甲醚4(4-羥苯氧基)-苯基甲醚、雙醚(4-羥苯基)、琥珀酸、赤箭、-谷甾醇等,其中天麻素是其

7、飲片質(zhì)量的標(biāo)定檢測成分。本試驗(yàn)采用反相高效液相色潽(RP-HPLC)法,選取貴州、大別山、陜西3種不同產(chǎn)地的天麻,考察天麻在炮制加工過程中經(jīng)過硫磺熏蒸與未經(jīng)過硫磺熏蒸天麻素的含量變化,以了解硫磺熏制對(duì)天麻中天麻素含量的影響。1  儀器與試藥    Agilent 1200高效液相色譜儀,包括Agilent G1311A四元泵(Quatpump)、Agilent G1322A真空在線脫氣機(jī)(Degasser)、Agilent G1329A自動(dòng)進(jìn)樣器(ALS)、Agilent G1315D DAD檢測器、Agilent 1200化學(xué)工作站、Agilent G

8、1316A(TCC)柱溫箱,色譜柱為Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5 ?m), AL204型電子天平(METTLER TOLEDO)。天麻素對(duì)照品購自中國藥品生物制品檢定所(批號(hào)110807-200205),天麻為陜西天麻、貴州天麻、大別山天麻,經(jīng)本院藥劑科鑒定為Gastrodia elata Bl。乙腈為色譜純,其余試劑為分析純。2  方法與結(jié)果2.1  色譜條件    色譜柱：Agilent Eclipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5 ?m)；流動(dòng)相：乙腈

9、-0.05%磷酸水溶液(397)；流速：1.0 mL/min；柱溫：25 ；檢測波長：230 nm；進(jìn)樣量為10 ?L。色譜柱的理論板數(shù)(n)按天麻素峰計(jì)算為5 000。在此色譜條件下,天麻素與其他組分均能達(dá)到基線分離。     11-04-29 09:21:00     編輯：studa202.2  對(duì)照品溶液的制備    精密稱取在80 減壓干燥1 h的天麻素對(duì)照品適量,加流動(dòng)相制成每1 mL含50 ?g的溶液即得。2.3  供試品溶液制備取本品,在80 減壓干

10、燥、粉碎,取粉末(過四號(hào)篩)約0.8 g,精密稱定重量,加熱回流提取3 h,放冷再稱定重量,用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量,濾過,取續(xù)濾液10 mL,濃縮至近干,殘?jiān)恿鲃?dòng)相,轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中,并用流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液即得。2.4  線性關(guān)系精密吸取天麻素對(duì)照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL,分別用稀乙醇稀釋。按上述色譜條件進(jìn)樣測定。以天麻素平均峰面積積分值為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,其線性方程為：Y20.368X101.42,相關(guān)系數(shù)r0.987 (n6)。結(jié)果表明,天麻素在20120 ?g/mL范圍內(nèi)進(jìn)樣量與峰面積積分值呈良好

11、的線性關(guān)系。2.5  回收率試驗(yàn)采用加樣回收法。精密稱取已測定含量的同一樣品6份,分別加入天麻素對(duì)照品,按供試品溶液的制備方法制備供試液,進(jìn)樣,記錄色譜圖,計(jì)算回收率。平均回收率為100.29%,RSD1.82,結(jié)果見表1。表1  加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(略)2.6  樣品測定分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品(樣品16)溶液各10 ?L,注入液相色譜儀,按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測定,樣品含量按干燥品計(jì)算,結(jié)果見表2。不同炮制方法HPLC測定結(jié)果見圖1。表2  天麻素含量測定結(jié)果(略)3  討論通過試驗(yàn)觀察,在天麻的炮制加工過程中,經(jīng)過硫磺熏蒸過的天麻中天麻素的含量分別為0.15%、0.19%、0.11%,未經(jīng)過硫磺熏蒸過的天麻中天麻素含量分別為1.44%、0.44%、0.82%。硫磺熏蒸對(duì)天麻中天麻素的含量影響較大。按照2005年版中華人民共和國藥典(一部)天麻中天麻素含量的規(guī)定,本品按干燥品計(jì)算,含天麻素不得少于0.20%3。經(jīng)過硫磺熏蒸后天麻中天麻素的含量普遍低于現(xiàn)行的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。在天麻的炮制加工過程中,使用硫磺熏蒸雖具有保鮮、防霉、防蟲的效果,加工切制出的飲片也整潔美觀,但由于硫磺熏蒸對(duì)天麻素的含量影響較大,且硫磺含有鈣、鋁、硅、砷、鐵、鎂、鈦、