酸性染料比色法測(cè)定硫酸阿托品片的含量

1、酸性染料比色法測(cè)定硫酸阿托品片的含量一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?.掌握酸性染料比色法的基本原理。2.掌握酸性染料比色法的操作。二、儀器與試藥1.儀器Mettler AL204電子天平 752型紫外可見(jiàn)分光光度儀分液漏斗 規(guī)格：125mL 容量瓶 規(guī)格：25mL、50mL 、100mL刻度移液管規(guī)格：5mL、10mL 濾紙 規(guī)格：直徑10cm研缽2.試藥硫酸阿托品片 規(guī)格：0.3mg/片硫酸阿托品對(duì)照品 溴甲酚綠 鄰苯二甲酸氫鉀 氫氧化鈉 二氯甲烷 蒸餾水三、實(shí)驗(yàn)原理：硫酸阿托品屬托烷生物堿類藥物，含有堿性N原子，在適宜pH條件下，硫酸阿托品可生成陽(yáng)離子，而酸性染料則解離成陰離子，生物堿陽(yáng)離子與酸性染料陰離

2、子生成有色離子對(duì)，用二氯甲烷將離子對(duì)提取出來(lái)進(jìn)行比色測(cè)定。 在適宜pH條件下四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容本品含硫酸阿托品（C17H23NO3）2H2SO4H2O應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%110.0%。含量測(cè)定 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取120干燥至恒重的硫酸阿托品對(duì)照品25mg，置25mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5mL，置100mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL中含無(wú)水硫酸阿托品50g）。供試品溶液的制備 取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于硫酸阿托品2.5mg），置50mL容量瓶中，加水振搖使硫酸阿托品溶解并稀釋至刻度，用干燥的濾紙過(guò)濾，收集續(xù)濾液，即

3、得。測(cè)定方法 精密量取對(duì)照品溶液和供試品溶液各2mL，分別置預(yù)先精密加入二氯甲烷10mL的分液漏斗中，各加溴甲酚綠溶液（取溴甲酚綠50mg與鄰苯二甲酸氫鉀1.021g，加0.2mol/L氫氧化鈉液6mL使溶解，再加水稀釋至100mL，搖勻，必要時(shí)過(guò)濾）2mL，振搖提取2分鐘后，靜置使其分層，分取澄清的二氯甲烷液，照分光光度法（見(jiàn)附），在420nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度，計(jì)算，并將結(jié)果與1.027相乘，即得供試品量中含有（C17H23NO3）2H2SO4H2O的重量。計(jì)算：硫酸阿托品標(biāo)示量%=Cr: 硫酸阿托品對(duì)照品溶液濃度（g/ mL）；D:稀釋倍數(shù)Ax: 供試品溶液吸收度； Ar: 對(duì)照品溶

4、液吸收度；:平均片重（g）； W:供試品片粉取樣量（g）。注意事項(xiàng):1.實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)嚴(yán)格控制水相pH并保證離子對(duì)化合物能定量提取進(jìn)入二氯甲烷層，因此，加入二氯甲烷的體積和溴甲酚綠溶液的體積都應(yīng)該準(zhǔn)確。2.分液漏斗活塞處宜涂甘油淀粉糊作潤(rùn)滑劑，其配制方法是：可溶性淀粉9g，加甘油22g混勻加熱至140保持30分鐘，并不斷攪拌至透明，放冷，即得。3.振搖提取時(shí)既要能定量地將離子對(duì)化合物提入二氯甲烷層，又要防止乳化和少量水混入二氯甲烷層，因此，需小心充分振搖 ，并使靜置分層后再分取二氯甲烷，同時(shí)可在分液漏斗頸部放置少許脫脂棉以吸附二氯甲烷中少量水分。思考題1.試述酸性染料比色法的原理。2.酸性染料比色

5、法的主要條件有哪些？ 4.哪些試劑加入時(shí)必須精密稱取或量??？附：紫外分光光度法1.儀器的校正和檢定由于溫度變化對(duì)機(jī)械部分的影響，儀器的波長(zhǎng)經(jīng)常會(huì)略有變動(dòng)，因此除應(yīng)定期對(duì)所用的儀器進(jìn)行全面校正檢定外，還應(yīng)于測(cè)定前校正測(cè)定波長(zhǎng)。 吸收度的準(zhǔn)確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀約60mg，精密稱定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋至1000mL，在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定并計(jì)算其吸收系數(shù)，并與規(guī)定的吸收系數(shù)比較，如下表，相對(duì)偏差可在±1以內(nèi)。波 長(zhǎng)/nm235(最小)257(最大)313(最小)350(最大)吸收系數(shù)124.5144.048.62106.6雜散

6、光的檢查可按下頁(yè)表的試劑和濃度，配制成水溶液，置1cm石英吸收池中,在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定透光率，應(yīng)符合表中的規(guī)定。 試 劑濃度 (g/mL)測(cè)定用波長(zhǎng)(nm)透光率 碘 化 鈉1.002200.8亞 硝 酸 鈉5.003400.82.對(duì)溶劑的要求測(cè)定供試品前，應(yīng)先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長(zhǎng)附近是否符合要求，即用1cm石英吸收池盛溶劑,以空氣為空白(即空白光路中不置任何物質(zhì))測(cè)定其吸收度。溶劑和吸收池的吸收度，在220240nm范圍內(nèi)不得超過(guò)0.40，在241250nm范圍內(nèi)不得超過(guò)0.20，在251300nm范圍內(nèi)不得超過(guò)0.10，在300nm以上時(shí)不得超過(guò) 0.05。3.測(cè)定法 用于含量

7、測(cè)定的方法一般有以下幾種。 (1) 對(duì)照品比較法 按各品種項(xiàng)下的方法，分別配制供試品溶液和對(duì)照品溶液，對(duì)照品溶液中所含被測(cè)成分的量應(yīng)為供試品溶液中被測(cè)成分標(biāo)示量的100±10,所用溶劑也應(yīng)完全一致，在規(guī)定的波長(zhǎng)測(cè)定供試品溶液和對(duì)照品溶液的吸收度后，按下式計(jì)算供試品中被測(cè)溶液的濃度：CxCr(Ax/Ar) 式中 Cx為供試品溶液的濃度； Ax為供試品溶液的吸收度； Cr為對(duì)照品溶液的濃度； Ar為對(duì)照品溶液的吸收度。 (2) 吸收系數(shù)法 按各品種項(xiàng)下的方法配制供試品溶液，在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定其吸收度，再以該品種在規(guī)定條件下的吸收系數(shù)計(jì)算含量。用本法測(cè)定時(shí)，應(yīng)注意儀器的校正和檢定。 (3) 計(jì)算分光光度法 采用計(jì)算分光光度法應(yīng)慎重。本法有多種，使用時(shí)均應(yīng)按各品種項(xiàng)