Agilent型高效液相色譜儀再驗證報告

1、Agilent1260型高效液相色譜儀驗證報告文件編號VR-SB-3020版本00起草人/修訂人日期 年 月 日審核人日期 年 月 日審核人日期 年 月 日批準人日期 年 月 日執(zhí)行日期 年 月 日印刷份數(shù) 份發(fā)出份數(shù) 份 分發(fā)部門： 質(zhì)量管理部： 供 應(yīng) 部： 生產(chǎn)技術(shù)部： 行 政 部： 倉 庫： 備注：請在需要使用本文件的部門后 里打“”，不需使用的打“”。目 錄 1.概述 2.驗證目的 3.驗證時間計劃 4.驗證培訓(xùn) 5.驗證人員及職責(zé) 6.驗證所需文件 7.驗證內(nèi)容 8.偏差處理 9.方案修改記錄 10.風(fēng)險的接受與評價 11.驗證結(jié)果及評價12.驗證周期13.最終批準14.附件1.

2、概述1260型高效液相色譜儀安捷倫公司生產(chǎn)，用于本公司成品，原料，中間品定性或定分析檢測。由輸液泵，自動進樣器，柱溫箱，紫外檢測器，色譜工作站組成由高壓輸液泵將規(guī)定的流動相泵入色譜柱，自動進樣器注入供試品，由流動相帶入色譜柱內(nèi)，各組分在柱內(nèi)被分離，并依次進入檢測器，由色譜工作站軟件記錄和處理色譜信號。1.1 設(shè)備原理二元泵基于雙通道、雙活塞桿串聯(lián)設(shè)計，包括了溶劑傳輸系統(tǒng)必輸實現(xiàn)的所有基本功能。 才通過兩個可產(chǎn)生最高為600bar壓力泵組件，可對溶劑進行計量并將溶劑傳輸至高壓位置。每個通道由一套泵組件組成，包括泵驅(qū)動器、泵頭、帶有可更換濾芯的主動輸入閥和出口球閥，兩個通道在一個低容積混合腔中連接

3、，混合腔通過限毛細管連接到緩沖單元和混合器上。壓力傳感器會檢測泵壓力，集成有PTFE過濾芯的沖洗閥裝在泵的出口處，便于向泵頭灌注流體。1.2 設(shè)備組成本儀器主要由二元泵(G1312B)、變波長紫外檢測器(G1314F)、自動進樣器(G1329B)、柱溫箱(G1316A)等模塊組成，可進行高效液相色譜的分析。1.3 技術(shù)參數(shù)設(shè)備名稱高效液相色譜儀設(shè)備型號Agilent1260型進樣瓶數(shù)100個進樣量0.1ul50ul輸液系統(tǒng)連個活塞串聯(lián)泵可設(shè)置的流速范圍0.001ml/min5ml/min流量準確度1%操作壓力范圍0 bar600bar梯度形成高壓二元混合電壓220V2. 驗證目的為確認高效液相

4、色譜儀測試數(shù)據(jù)準確可靠，性能穩(wěn)定，特制訂本驗證方案，對高效液相色譜儀進行驗證。驗證過程應(yīng)嚴格按照本方案規(guī)定的內(nèi)容進行，若因特殊原因確需變更時，應(yīng)填寫驗證方案變更申請及批準書，報驗證委員會批準。2.1通過對設(shè)備技術(shù)指標適用性的審查，確認Agilent1260型高效液相色譜儀的設(shè)計選型符合檢驗要求及GMP管理要求。2.2 檢查并確認Agilent1260型高效液相色譜儀安裝符合設(shè)計要求，技術(shù)文件符合GMP管理規(guī)范。2.3 檢查并確認Agilent1260型高效液相色譜儀的運行符合設(shè)計技術(shù)參數(shù)要求。2.4 檢查并確認Agilent1260型高效液相色譜儀在正常運行下，性能條件能夠持續(xù)符合設(shè)計和檢驗要

5、求。3 驗證時間計劃驗證時間安排： 年 月 日至 年 月 日4 驗證培訓(xùn)（培訓(xùn)人員簽到表見附件1）培訓(xùn)內(nèi)容Agilent1260型高效液相色譜儀驗證培訓(xùn)對象參與驗證的檢驗人員培訓(xùn)時間2015年10月09日培訓(xùn)講師李敏 吳華 評估方式討論并回答問題培訓(xùn)效果評價：評價人： 日期：5. 驗證人員及職責(zé)姓名職務(wù)職責(zé)簽名周事農(nóng)質(zhì)量管理負責(zé)人兼質(zhì)量受權(quán)人負責(zé)驗證方案和報告的最終批準李敏質(zhì)量管理部部長負責(zé)驗證方案和報告的審核及評價朱長富QC主管負責(zé)驗證方案和報告的審核及評價陳亞玲QA主管負責(zé)全面協(xié)調(diào)各項驗證試驗吳華QC負責(zé)驗證方案的具體操作、檢驗和記錄寧遵紅QC負責(zé)驗證方案的具體操作、檢驗和記錄6. 驗證所

6、需文件文件名稱文件編號生效日期存放處高效液相色譜法標準操作規(guī)程SOP-QCTY-0052015年9月1日檔案室Agilent1260型高效液相色譜儀使用、維護、保養(yǎng)標準操作規(guī)程SOP-SB/SY-3632015年9月1日檔案室質(zhì)量風(fēng)險管理規(guī)程SMP-Z7-0022015年9月1日檔案室偏差處理管理規(guī)程SMP-QA-0112015年9月1日檔案室確認與驗證管理規(guī)程SMP-YZ-0012015年9月1日檔案室7. 驗證內(nèi)容7.1 設(shè)計確認7.1.1 設(shè)計確認的目的確認質(zhì)量管理部新購AGILENT1260型高效液相色譜儀是否按照我公司URS進行設(shè)計，并符合GMP、安全、環(huán)保等方面標準。7.1.2 設(shè)

7、計確認的范圍本設(shè)計確認的范圍包含質(zhì)量管理部AGILENT1260型高效液相色譜儀及其附屬設(shè)備，并包括相配套的公用工程。7.1.3 設(shè)計確認的內(nèi)容7.1.3.1 URS符合性評估將該設(shè)備的文件及圖紙與公司提出的URS進行比較，確認該設(shè)備已符合用戶需求規(guī)范，檢查及確認結(jié)果記入（附表2URS符合性評估表）。7.1.3.2 GMP符合性評估將該設(shè)備的文件及圖紙對照GMP有關(guān)設(shè)備功能和設(shè)計的規(guī)定，作出符合性判定，檢查及確認結(jié)果記入（附表3GMP符合性評估表）。7.1.3.3 職業(yè)健康、安全與環(huán)保符合性評估將設(shè)備的文件及圖紙與公司提出的URS進行比較，確認該設(shè)備已符合用戶需求規(guī)范中有關(guān)職業(yè)健康、安全與環(huán)保

8、內(nèi)容，檢查及確認結(jié)果記入（附表4職業(yè)健康、安全與環(huán)保符合性評估表）。7.1.4 設(shè)計確認的結(jié)論評價人： 日期： 年 月 日7.2 安裝確認7.2.1 安裝確認的目的檢查并確認Agilent1260型高效液相色譜儀的隨機文件以及附件應(yīng)符合使用和管理要求；同時，檢查并確認Agilent1260型高效液相色譜儀的安裝符合設(shè)計要求。7.2.2 開箱檢查和資料附件的確認7.2.2.1 依據(jù)Agilent1260型高效液相色譜儀的裝箱單，確認高效液相色譜儀的規(guī)格型號、隨機附件及文件資料。7.2.2.2 根據(jù)產(chǎn)品使用說明書、確認高效液相色譜儀的使用范圍是否符合設(shè)計要求。7.2.2.3 對文件資料進行清點、收

9、集和保管。7.2.3 確認檢查結(jié)果計入下表，并作出評價。Agilent1260型高效液相色譜儀編號序號確認項目確認內(nèi)容及要求是否符合標準1高效液相色譜儀型號Agilent1260型是 否2高效液相色譜儀名稱高效液相色譜儀是 否3出廠編號有是 否4適用范圍有是 否5數(shù)量1臺是 否6裝箱單有是 否7設(shè)備說明書有是 否8設(shè)備合格證有是 否9設(shè)備安裝圖有是 否10儀器儀表合格證有是 否11主配套件的說明書、質(zhì)保書有是 否12備品清單及數(shù)量有是 否檢查人日期年 月 日結(jié)果分析與評價：評價人： 日期： 年 月 日7.2.4 安裝確認的內(nèi)容7.2.4.1 依據(jù)Agilent1260型高效液相色譜儀安裝圖的設(shè)

10、計要求，檢查高效液相色譜儀的安裝位置和空間能否滿足檢驗和方便維修的需求；7.2.4.2 依據(jù)Agilent1260型高效液相色譜儀安裝圖要求，檢查外接管道是否符合要求；7.2.4.3 依據(jù)Agilent1260型高效液相色譜儀的技術(shù)要求，檢查外接電源；7.2.4.4 依據(jù)Agilent1260型高效液相色譜儀的技術(shù)要求，檢查主要精密組件的安裝；7.2.4.5 依據(jù)Agilent1260型高效液相色譜儀機器外觀，檢查機器的完整性和其它問題；7.2.4.6 所有儀器儀表經(jīng)過檢定或校準，且全部在有效期內(nèi)，檢查及確認結(jié)果記入（附表5儀器儀表檢定或校準檢查記錄）。7.2.4.7 安裝確認檢查結(jié)果記入下表

11、，并作出評價。Agilent1260型高效液相色譜儀編號序號項目名稱可接受標準確認方法是否符合標準1檢驗維修空間有適當(dāng)?shù)臋z驗維修空間對照設(shè)計圖紙檢查是 否2儀器儀表有計量合格證，并在有效期內(nèi)檢查計量合格證是 否3安裝地點質(zhì)量管理部與圖紙相符是 否4電壓、頻率220V檢查是 否5外觀無劃傷及凹凸現(xiàn)象、表面整潔目測是 否6電腦完好目測是 否7檢測器完好目測是 否8泵完好目測是 否9柱溫箱完好目測是 否10進樣閥完好目測是 否11在線混合器完好目測是 否12打印裝置完好目測是 否13環(huán)境通風(fēng)目測是 否14環(huán)境溫度1030測量是 否15環(huán)境相對濕度小于65%測量是 否16安裝位置儀器應(yīng)平穩(wěn)而牢固地安置

12、在工作臺上目測是 否17接地接地良好目測是 否18電源線與插孔吻合目測是 否19其它條件工作臺不受陽光直射。室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體或其它影響測定的氣體干擾。周圍應(yīng)無影響測定的強電場、磁場和強烈震動。目測是 否檢查人日期年 月 日結(jié)果分析與評價：評價人： 日期： 年 月 日只有安裝確認符合要求后，才能進行下一步的運行確認。7.3 運行確認7.3.1 運行確認的目的檢查和測試設(shè)備運行技術(shù)參數(shù)，確定Agilent1260型高效液相色譜儀符合藥典檢驗參數(shù)要求和品種項目要求。7.3.2 運行前檢查運行前根據(jù)下表檢查，并把檢查結(jié)果記入下表，并作出評價。Agilent1260型高效液相色譜儀編號序號運行前的檢查

13、項目是否符合標準1檢查電源電壓是否正常，通電前檢查電源開關(guān)位置是 否2檢查安全接地線的外連接線是否正常，接觸是否良好是 否3檢查色譜柱是否連接好是 否檢查人日期年 月 日結(jié)果分析與評價：評價人： 日期： 年 月 日7.3.3 驗證用測試儀器儀表的確認所有用于驗證測試儀器儀表均應(yīng)有確認，并把確認結(jié)果記入下表，并作出評價。序號檢測設(shè)備名稱規(guī)格型號測量范圍校正單位有效期至1234檢查人日期 年 月 日結(jié)果分析與評價：評價人： 日期： 年 月 日7.3.4 運行項目確認7.3.4.1 設(shè)備安全性能確認依據(jù)Agilent1260型高效液相色譜儀使用說明書，對設(shè)備安全性能檢查結(jié)果記入下表，并作出評價。Ag

14、ilent1260型高效液相色譜儀編號序號控制程序確認項目是否符合標準1有安全保護接地，電器安全可靠，無裸露電線是 否檢查人日期年 月 日結(jié)果分析與評價：評價人： 日期： 年 月 日7.3.4.2 泵的驗證n 檢測泵的流速通過測量一定時間進入泵的體積檢測泵的實際流速。a 試劑與設(shè)備項目備注容量瓶（25mL）收集出液管流出的水天平稱量容量瓶和收集的水的重量秒表出口管接在泵出口b 檢查過程項目1、設(shè)置流速為0.500mL/min, 1.000mL/min，1.500mL/min2、將出液管放在25mL預(yù)先稱定的容量瓶內(nèi)3、開啟泵，同時開啟秒表。4、收集了25min,15min,10min超純水的時

15、候，同時關(guān)閉泵，停止秒表。5、利用公式SR =（Fmax-Fmin）/Fm100%，計算得穩(wěn)定性誤差。n 泵流量設(shè)定值誤差SS和流量穩(wěn)定性誤差SR的確認測試標準及結(jié)果： 儀器名稱：型號：流量設(shè)定值（ml/min）0.5ml/min1.0ml/min1.5ml/min測量次數(shù)333收集流動相時間t（min）25151025ml容量瓶的重量W1（g）容量瓶+流動相的重量W2（g）流量實測值F（ml/min）流量實測值平均值F（ml/min）允許誤差SS5%3%3%SR3%2%2%實測誤差SSSR結(jié)果分析與評價：評價人： 日期： 年 月 日測試條件：流動相：經(jīng)0.45m微孔濾膜過濾的純化水； 色譜柱

16、：4.6mm250mm； 室 溫： (水的相對密度為： )。測試方法： 啟動儀器，以水作為流動相，待壓力穩(wěn)定后，在流動相出口處用稱重過的25ml容量瓶收集流動相，同時用秒表計時，按各流量規(guī)定的時間收集流出的流動相，精密稱定，每個流量測定三次，記錄測試溫度，按下列計算流量設(shè)定值誤差S1和穩(wěn)定性誤差S2 SS = (F -Fs) / Fs100%SR =（Fmax-Fmin）/Fm100%式中：SS為泵流量設(shè)定值誤差（%）； SR為流量穩(wěn)定性誤差（%）；F=（W2-W1）/(t),為流量實測值（ml/min）；式中：W2容量瓶+流動相的重量（g）； W1容量瓶的重量（g）； 實驗溫度時水的密度（g

17、/cm3 ）； t收集流動相的時間（min）；Fs流量設(shè)定值 Fm同一組測量值的算術(shù)平均值（ml/min）； Fmax同一組測量中流量最大值（ml/min）； Fmin同一組測量中流量最小值（ml/min）。7.3.4.3 柱溫箱的驗證 檢查柱溫箱的準確度及精密度。檢查過程項目1、設(shè)定柱溫箱溫度為25，等待溫度平穩(wěn)。2、將校正過的溫度計放入柱溫箱，等待10分鐘。開始計時3、每隔30min讀取溫度計顯示溫度及柱溫箱顯示溫度一次。共讀取6次。4、依次設(shè)置柱溫為30，40重復(fù)2-3的過程5、最大偏差不超過3.0，最大波動不超過1.0驗證結(jié)果見（附件6柱溫箱驗證表）7.3.4.4 紫外檢測器基線漂移和

18、基線噪聲的測定：檢查漂移和噪聲不超過規(guī)定忽略的水平。a 檢查之前的準備項目使用檢測器與計算機工作站相連。以1.0mL/min的流速輸送甲醇。b 檢測過程項目打開各模塊的電源開關(guān),儀器應(yīng)能通過初始化。當(dāng)狀態(tài)指示燈為關(guān)（而電源指示燈亮?xí)r），模塊處于預(yù)運行狀態(tài)，做好開始分析的準備。開啟工作站，設(shè)定波長為254nm。流速1.0mL/min使其走基線2小時。在走基線的第二個小時期間測量基線的最大波動，以此值作為基線漂移值。使其走基線10分鐘。使用此結(jié)果數(shù)據(jù)測量最大噪聲值，并且以此值作為噪聲值。在測量噪聲時，不考慮所有基線漂移數(shù)據(jù)。7.3.4.5 自動進樣器進樣精密度控制檢查a 檢查之前的準備項目使用自動

19、進樣器與計算機工作站相連。以1.0mL/min的流速輸送甲醇。準備好萘+甲醇溶液b參數(shù)設(shè)定設(shè)備參數(shù)泵單元流速：1.0mL/min、最大壓強:20.0MPa柱溫箱柱箱溫度：40時間程序5.00min停止UV檢測器波長：273nm、靈敏度：2（1V/AU）流動相甲醇計算機工作站設(shè)定停止時間為5.00min、進樣為6次驗證結(jié)果見（附件7高效液相色譜儀運行確認記錄）只有運行確認符合要求后，才能進行下一步的性能確認7.4 性能確認7.4.1 性能確認的目的確認Agilent1260型高效液相色譜儀是否符合檢驗和GMP管理的要求。7.4.2 所需設(shè)備項目備注流動相乙腈：水=4:1（體積比）乙腈溶劑為HPL

20、C級色譜柱 4.6mm長150mm的色譜柱樣品準備：稱量10mg吡啶，置于100mL容量瓶中，加入乙腈溶液至刻度。取上述溶液1mL至10mL容量瓶中，用乙腈溶液定容。水HPLC級異丙醇HPLC級7.4.3 驗證過程7.4.3.1系統(tǒng)準備項目檢查LC系統(tǒng)的所有連接。檢查LC系統(tǒng)的管路。清洗系統(tǒng)管路。方法如下：在管路清洗之前，務(wù)必從系統(tǒng)中卸下色譜柱，并且在原色譜柱的位置安裝一個1.6C螺絲-螺絲單元。首先使用異丙醇清洗管路，然后使用水清洗。每種溶劑以2mL/min的流速清洗10min。清洗完成后，向儲液瓶中加入流動相（乙腈：水=4:1(v/v),重新將色譜柱安裝在系統(tǒng)中。 驗證過程中設(shè)備的參數(shù)設(shè)備

21、參數(shù)泵單元流速：1mL/min、最大壓力:20.0MPa柱溫箱柱箱溫度：40時間程序7.00min停止UV檢測器波長：254nm、靈敏度：2（1V/AU）計算機工作站停止時間：7min、進樣次數(shù)：5次7.4.3.3 驗證方法項目打開泵開關(guān)及檢測器開關(guān)，通過自檢。打開計算機工作站，設(shè)定參數(shù)值。在泵單元模塊上設(shè)定流速為1.00mL/min。在柱箱單元模塊上設(shè)定柱箱溫度為40。按泵單元模塊上的開始鍵，柱溫箱單元模塊上的開始鍵，泵單元模塊上的開始鍵運行，柱箱溫度開始上升。此時觀察檢測器池出口管是否有液體流出，并且檢查所有管路連接處是否有漏液。設(shè)定檢測器參數(shù)。監(jiān)測基線。當(dāng)基線平穩(wěn)后，在進樣器單元模塊上設(shè)

22、置20ul的進樣體積，然后啟動進樣程序，進入流動相，觀察是否有色譜峰出現(xiàn)。進試驗樣品，進行分析。至少重復(fù)該操作5次。根據(jù)5次成功分析結(jié)果，計算保留時間，峰面積和峰高的變異系數(shù)（C.V.s）7.4.3.4 可接受標準保留時間峰面積峰高標準0.5%1.0%1.0%7.4.3.5 計算公式RSD(C.V.)=(SD/X)100X=(X1+X2+Xn-1+Xn)/n式中：n：分析次數(shù)；X1Xn：各個峰的保留時間（面積/峰高）；：平均值；SD：標準偏差；C.V.：變異系數(shù)。 驗證結(jié)果見（附件8高效液相色譜儀性能確認記錄）：高效液相色譜儀性能確認記錄。8. 偏差處理： 偏差處理情況是否有偏差： 有(記錄見

23、附表9) 無備注：在相應(yīng)的“”內(nèi)“P”9. 方案修改記錄： 方案修改記錄是否有修改： 有(記錄見附表10) 無備注：在相應(yīng)的“”內(nèi)“P”10. 風(fēng)險的接受與評價驗證小組按驗證方案中風(fēng)險評定的內(nèi)容進行驗證，對存在的質(zhì)量風(fēng)險按提出的措施進行預(yù)防和糾正。經(jīng)驗證小組確認，對判斷為高級別的風(fēng)險采取的控制措施經(jīng)檢查確認符合要求，則其相應(yīng)的風(fēng)險可降至為可接受風(fēng)險。序號風(fēng)險因素風(fēng)險可能影響效應(yīng)現(xiàn)有控制措施SPDRPN風(fēng)險級別是否符合標準1泵流速準確度和精密度不符合要求1.保留時間漂移2.峰面積不準確導(dǎo)致檢測結(jié)果不準確定期校驗流速（1.0ml/min）23318低是 否2梯度不準確檢測結(jié)果不準確，保留時間漂移定

24、期校驗梯度準確度和線性32318低是 否3柱溫箱溫度不準確檢測結(jié)果不準確定期校驗柱溫箱溫度23212低是 否4進樣器進樣體積不準確檢測結(jié)果不準確1定期檢定進樣器準確度2.每月清潔一次儀器管路33218低是 否5基線噪音和基線漂移基線噪音大，基線漂移1.平衡時間延長2.檢測限降低導(dǎo)致小的雜質(zhì)不能被檢出，檢測結(jié)果不準確3.錯把基線波動當(dāng)雜質(zhì)，或雜質(zhì)當(dāng)基線波動1.每月清洗一次儀器2.安裝流動相在線過濾器3.流動相離線脫氣3319低是 否6進樣精密度進樣精密度不夠檢測結(jié)果不準確定期進行進樣精密度測試32212低是 否11. 驗證結(jié)果及評價評價人： 日期： 年 月 日12. 驗證周期12.1 設(shè)備重大維

25、修后，必須驗證；12.2 設(shè)備性能達不到檢驗要求時，必須驗證；12.3 正常情況每兩年驗證一次。13. 最終批準批準人： 日期： 年 月 日14. 附件14.1 附件1：人員培訓(xùn)簽到表14.2 附件2：URS符合性評估表14.3 附件3：GMP符合性評估表14.4 附件4：職業(yè)健康、安全與環(huán)保符合性評估表14.5 附件5：儀器儀表檢定或校準檢查記錄 14.6 附件6：柱溫箱驗證表14.7 附件7：高效液相色譜儀運行確認記錄14.8 附件8：高效液相色譜儀性能確認記錄14.9 附件9：偏差調(diào)查處理報告14.10 附件10：方案修改記錄附件1人員培訓(xùn)簽到表培訓(xùn)內(nèi)容培訓(xùn)對象培訓(xùn)時間培訓(xùn)地點授課人職位

26、參訓(xùn)人員簽名序號簽名備注序號簽名備注12122232342452562672782892910301131123213331434153516361737183819392040附表2URS符合性評估表URS編號URS名稱結(jié)果（參考文件或圖紙）URS01設(shè)備工藝或性能要求URS03安裝區(qū)域及位置要求URS04安裝環(huán)境要求URS06設(shè)施、公用系統(tǒng)要求URS07外觀及材質(zhì)要求URS08技術(shù)要求URS09控制系統(tǒng)要求URS10儀表要求URS11清潔要求URS12潤滑劑要求URS13文件要求URS14設(shè)備轉(zhuǎn)運要求URS15驗證、確認要求URS16服務(wù)與維修要求評估結(jié)論：評估人： 日期： 年 月 日附表

27、3GMP符合性評估表GMP要求設(shè)計符合性描述是否符合設(shè)備的設(shè)計、選型、安裝是否符合生產(chǎn)要求，易于清洗、消毒或滅菌，是否便于生產(chǎn)操作和維修、保養(yǎng)，是否能防止差錯和減少污染設(shè)備的設(shè)計、選型是否符合生產(chǎn)要求描述：是 否設(shè)備是否易于清洗、消毒描述：是 否是否便于生產(chǎn)操作和維修、保養(yǎng)描述：是 否是否能防止差錯和減少污染描述：是 否評估結(jié)論：評估人： 日期： 年 月 日附表4職業(yè)健康、安全與環(huán)保符合性評估URS編號URS名稱結(jié)果（參考文件或圖紙）URS02安全要求URS05電力要求評估結(jié)論：評估人： 日期： 年 月 日附表5儀器儀表檢定或校準檢查記錄計量器具編號計量器具名稱安裝地點檢定證書編號有效期至檢查人日期年 月 日結(jié)果分析與評價：評價