抗核抗體譜檢測的臨床意義

1、抗核抗體譜檢測的臨床意義（1）自身抗體：是指抗自身細胞內(nèi)、細胞表面和細胞外抗原的免疫球蛋白。抗細胞內(nèi)抗原的抗體包括：1、抗細胞核成分的抗體（抗核抗體）。2、抗細胞漿內(nèi)成分的抗體（抗中性粒細胞及其他細胞胞漿抗體、抗線粒體抗體、抗核糖體抗體等）。3、抗細胞表面抗原的抗體?？辜毎饪乖目贵w包括：類風濕因子、抗甲狀腺球蛋白抗體等。抗核抗體（antinuclear antibody，ANA）:又稱抗核酸抗原抗體，是一組將自身真核細胞的各種成分脫氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等作為靶抗原的自身抗體的總稱，能與所有動物的細胞核發(fā)生反應，主要存在于血清中，也可存在于胸水、關(guān)

2、節(jié)滑膜液和尿液中?？购丝贵w是一組對細胞核內(nèi)的DNA，RNA，蛋白或這些物質(zhì)的分子復合物的自身抗體。按其核內(nèi)各個分子的性能不同可將各ANA區(qū)分開來，如(一)抗DNA抗體，（二）抗組蛋白抗體，（三）抗非組蛋白抗體，（四）抗核仁抗體等。每一大類又因不同抗原特性而再分為許多種類。因此ANA在廣義上是一組各有不同臨床意義的自身抗體，更確切的名稱應為抗核抗體譜。ANA 主要存在于IgG，也見于IgM、IgA，甚至LgD及LgE中。常見的核免疫熒光杭核抗體試驗有以下幾種圖形：（1）均質(zhì)型：核質(zhì)染色均勻一致，這種染色型常與抗組蛋白和抗DNA抗體有關(guān)；（2）斑點型：核質(zhì)染色呈斑點狀，抗可提取性核抗原（ENA）抗

3、體常呈這種染色型；（3）周邊型：熒光染色圍繞在核膜周圍，它與抗DNA抗體有關(guān)；（4）核仁型：僅有核仁染色，具有抗4-6sRNA抗體呈現(xiàn)這種染色型；（5）著絲點型：在體外培養(yǎng)的細胞株（喉癌細胞）在核分裂相期時，可見到熒光染色的著絲點排列成特殊圖型，而在鼠肝做底物中看不到此類圖型，而被遺漏。抗核抗體在多種自身免疫病中均呈不同程度的陽性率，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE，95%100%）、類風濕性關(guān)節(jié)炎（RA，10%20%）、混合性結(jié)締組織?。∕CTD，80%100%）、干燥綜合癥（SjS,10%40%）、全身性硬皮?。?5%90%）、狼瘡性肝炎（95%100%）、原發(fā)性膽汁性肝硬化（95%100%）等，

4、但經(jīng)皮質(zhì)激素治療后，陽性率可降低?？购丝贵w在類風濕病人中約有2050IgG型ANA呈陽性，小兒類風濕ANA的陽性率約1935，伴發(fā)虹膜睫狀體炎者陽性率高（50590%），故ANA陽性預示類風濕有發(fā)生慢性睫狀體炎的可能。已發(fā)現(xiàn)75類風濕病人有多形核白細胞的特異性ANA或抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）可使白細胞核受到破壞。 抗核抗體譜（ANAs） ANA根據(jù)細胞內(nèi)各分子的理化特性和分布部位主要分四大類：抗核抗體抗DNA抗體抗雙鏈DNA(ds-DNA)、抗單鏈DNA(ss-DNA)抗組蛋白抗體Histone：H1,H2A,H2B,H3,H4,H2A-H2B復合物 抗非組蛋白抗體抗ENA抗體：nRN

5、P、Sm、SS-A、Ro-52、SS-B、Scl-70、Jo-1、核糖體P蛋白、PCNA等抗體抗著絲點抗體（抗CENP-A、B、C、D、E、F抗體）抗核仁抗體抗RNA多聚酶-1、PM-Scl、NOR-90等抗體抗其他細胞成分抗體高爾基體、中心體紡錘體、線粒體、溶酶體抗體 (一).抗DNA抗體又可分為單鏈和雙鏈DNA抗體：1. 抗雙鏈DNA（double stranded DNA,ds-DNA抗體）：又稱為天然DNA抗體,其靶抗原為雙螺旋dNA.對診斷SLE有較高的特異性，30%-90%的活動期SLE患者此抗體陽性,且抗體滴度的消長與SLE的活動程度相關(guān)，隨著疾病活動的控制，抗dsDNA抗體滴度

6、可以下降或消失,可作為治療監(jiān)測和預后評價的指標?？筪sDNA抗體與DNA結(jié)合成為免疫復合物在腎小球基底膜沉積，或抗dsDNA抗體直接作用于腎小球抗原造成SLE患者的腎損害?？筪sDNA抗體陽性的患者較陰性患者發(fā)生腎炎的危險性高12倍。2. 抗單鏈DNA（single strand DNA,ss-DNA）抗體:又稱為變性DNA抗體, 其靶抗原為核搪或脫氧核糖.在SLE患者有較高的檢出率(50%-60%)，但結(jié)果缺乏疾病特異性,在其他風濕病如混合性結(jié)締組織病,藥物誘導的狼瘡,硬皮病,皮肌炎,干燥綜合征,類風濕性關(guān)節(jié)炎等也有10%-70%的檢出率.有些正常老年人也存在。(二).抗組蛋白抗體：具有H1

7、、H2A、H2B、H3和H4四個亞單位，常以四聚體形式存在,與DNA構(gòu)成的復合物稱為染色質(zhì),染色質(zhì)最基本的單位是核小體(nucleosome).所有組蛋白各成分均可能成為自身抗體的靶抗原.1.SLE的陽性率約30%-80%,并常伴有抗dsDNA抗體陽性,主要以抗H2A、 H2A-H2B復合物和抗H1的IgG型抗體為主.2.藥物性狼瘡的陽性率達95以上，但不伴有抗dsDNA抗體陽性,主要以抗H2A-H2B為主.常見的藥物有肼苯達嗪、異煙肼及氯丙嗪.(三).抗非組蛋白抗體：1.抗可提取性核抗原抗體（Extractable Nuclear Antigen,ENA）：此類抗蛋白可以溶于鹽水而被提取，故

8、稱為可提取性核抗原.對彌漫性結(jié)締組織病的診斷尤為重要，但與疾病的嚴重程度及其活動度無明顯關(guān)系。(1).抗Sm抗體:以患者Smith名字命名,Sm抗原是U族小分子細胞核核糖核蛋白（UsnRNP），具有抗原性的蛋白的分子量是29KD、28KD、13.5KD。Sm抗體和SnRNP是同一分子復合物中的不同抗原位點，故抗Sm抗體很少單獨出現(xiàn)，它常于U1RNP抗體相伴，約60抗U1RNP抗體與抗Sm抗體中的28/29KD有交叉反應。抗Sm抗體陽性均伴有抗U1RNP抗體，而抗U1RNP抗體可以單獨存在。.在SLE中陽性率為30.2%。雖然敏感性較低，但特異性較高。在全部抗Sm陽性的病例中，92.2%為SLE

9、。因此，抗Sm抗體為SLE的標記抗體。.另外，有人還發(fā)現(xiàn)SLE病人由活動期轉(zhuǎn)為緩解期后，狼瘡細胞可轉(zhuǎn)陰，ANA、抗DNA抗體效價可降低，但Sm抗體依然存在。因此，對早期、不典型的SLE或經(jīng)治療緩解后的回顧性診斷有一定意義(2).抗nRNP抗體（nuclear RNP）：臨床上應用較多為U1RNP抗體，U1snRNP由U1RNP和9種不同的蛋白質(zhì)組成。具有抗原性的分子量有70KD、32KD和22KD。因為以抗核內(nèi)的核糖核蛋白得名，所作用的抗原是U1小分子細胞核核糖核蛋白（U1snRNP），所以又稱抗U1RNP抗體。.混合性結(jié)締組織病(MCTD)：幾乎均為陽性，且滴度很高，對確立MCTD的診斷很有

10、幫助。高滴度的抗RNP，尤其在沒有其他自身抗體存在的情況下，一般認為是混合性結(jié)締組織病（MCTD）的診斷標志。MCTD的抗RNP陽性率>95%。此種抗體陽性的患者，常有雙手腫脹、雷諾現(xiàn)象、肌炎和指（趾）端硬化。.系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）：抗RNP抗體在SLE中的陽性率為40%左右，僅產(chǎn)生抗RNP抗體的SLE病人，常常抗DNA抗體陰性，腎臟受累較少，一般來說皮質(zhì)激素類藥物有很好的治療效果，預后理想，定期監(jiān)測抗RNP對療效觀察及預后判斷有實際意義?？筊NP抗體如和抗ds-DNA抗體、抗Sm抗體同時存在，則發(fā)生狼瘡腎炎的可能性較大。.其他結(jié)締組織病：抗RNP抗體在其他結(jié)締組織病陽性率較低且滴度

11、低。（3）抗SSA抗體：又稱為抗Ro抗體或抗干燥綜合征抗原A抗體,SSARo是小分子細胞漿核糖核蛋白（scRNPs），由一個RNA分子(Y1-, Y2-, Y3-, Y4-, Y5-RNA)和兩種不同的蛋白形成的復合物?？乖呛衁YRNA的蛋白質(zhì)，它更多的存在于胞漿中，其分子量有52KD及60KD.抗SSA抗體主要見于原發(fā)性干燥綜合征，陽性率高達6075。此外，抗SSA抗體常與亞急性皮膚性紅斑狼瘡、抗核抗體陰性狼瘡、新生兒狼瘡等相關(guān)（SSA抗體可通過胎盤進入胎兒引起新生兒兒狼瘡綜合癥 ）。SSA抗體與廣泛光過敏性皮炎癥狀相關(guān)。.52KD的多肽條帶(Ro-52)與干燥綜合征（SS）相關(guān)，而60

12、KD的多肽條帶則更多存在于SLE患者(30%)中。（4）抗SSB抗體：又稱為抗La抗體或抗干燥綜合征抗原B抗體,是抗小分子細胞核核糖核蛋白（snRNP）。抗原是RNA多聚酶轉(zhuǎn)錄中的小RNA磷酸蛋白質(zhì)。其分子量為48KD、47KD、45KD，其中48KD更具特異性。.抗SSB陽性幾乎總伴有抗SSA抗體陽性，抗SSB抗體較抗SSA抗體診斷干燥綜合征更特異，是干燥綜合征血清特異性抗體。原發(fā)性干燥綜合征陽性率達40左右。其他自身免疫性疾病中如有抗SSB抗體，常伴有繼發(fā)性干燥綜合征。唾液腺、唇腺活檢可見大量淋巴細胞浸潤。.在原發(fā)性干燥綜合征中，抗SSA和抗SSB的陽性率分別是60和40，但在其它結(jié)締組織

13、病中，該兩種抗體也可出現(xiàn)，且常提示繼發(fā)性干燥綜合征的存在?？筍SB和抗SSA抗體相伴出現(xiàn)，有單獨的SSA出現(xiàn)，但單獨的SSB出現(xiàn)的少。抗SSA和抗SSB抗體陽性，可造成新生兒狼瘡及先天性房室傳導阻滯。且常與血管炎、淋巴結(jié)腫大、白細胞減少、光過敏、皮損、紫癜等臨床癥狀相關(guān)。(5)抗Scl-70抗體：是分子量為100KD的DNA拓樸異構(gòu)酶I的降解產(chǎn)物，首先在皮膚彌漫型多發(fā)性系統(tǒng)性硬化癥（PSS）患者血清中發(fā)現(xiàn)抗Scl-70抗體。因其主要見于硬皮病，且其相應抗原分子量為70KD，故取名為抗Scl-70抗體。PSS病人陽性率達30%40%。雖然陽性率不高，但對PSS（SSC）有較高特異性（特異性達10

14、0%）。有抗Scl-70抗體陽性表示病性進展較迅速，皮膚病變往往彌散廣泛，易發(fā)生肺間質(zhì)纖維化和指骨末端吸收。重癥彌漫性PSS（SSc）中抗Scl-70抗體陽性率高達75。有雷諾現(xiàn)象的患者存在抗Scl-70抗體，提示可能發(fā)展為PSS?？筍cl-70抗體與惡性腫瘤有明顯相關(guān)。(6)抗JO-1抗體：抗組氨酰tRNA合成酶抗體(抗JO-1抗體)又稱為抗PL-1抗體或抗合成酶抗體,抗原是組氨酰tRNA合成酶在胞漿中以小分子核糖核蛋白（scRNPs）形式出現(xiàn)，分子量為55KD，它是氨酰tRNA合成酶之一。Jo-1抗體對多發(fā)性肌炎的診斷具有較強的特異性，是目前公認的多發(fā)性肌炎（PM）的血清標記抗體。在多發(fā)性

15、肌炎（PM）中陽性率達25左右。在皮肌炎（DM）中陽性率為7.1%。合并肺間質(zhì)病變的PMDM患者，陽性率高達60。67抗Jo-1抗體陽性的患者有HLADR3抗原。其他結(jié)締組織病為陰性。在抗JO-1和抗SSA二項陽性，約80%的多發(fā)性肌炎和皮肝炎患者合并有干燥綜合征。而抗JO-1與抗RNP兩項陽性者臨床上都發(fā)現(xiàn)有雷諾氏現(xiàn)象。抗Jo-1抗體綜合征：抗Jo-1抗體陽性、急性發(fā)熱、對稱性關(guān)節(jié)炎、“技工手”、雷諾現(xiàn)象、肌炎、肺間質(zhì)病變。(7)抗rRNP（ribosome）抗體 ：全稱抗核糖體P蛋白抗體,抗rRNP抗體的靶抗原是核糖體大亞基上磷酸蛋白。為胞漿抗原（抗原是主要存在于胞漿中的一種磷酸蛋白）。免疫印跡法測得抗rRNP主要有38KD、16KD、15KD三條蛋白多肽。抗rRNP抗體主要見于SLE，常在SLE活動期中存在，陽性率在10%20%左右，是診斷SLE的特異性抗體。如僅有抗rRNP抗體陽性的SLE患者，ANA常為陰性?？箁RNP抗體陽性患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變發(fā)生率高