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1、1、 檸檬酸發(fā)酵過程中有哪幾個控制要點,如何控制? 答:(1)EMP暢通無阻:控制Mn2+、NH4+濃度,解除檸檬酸對PFK的抑制;控制溶氧,防止側(cè)系呼吸鏈失活。(2)通過CO2固定反應(yīng)生產(chǎn)C4二羧酸,強化這一反應(yīng)的方法:適量的生物素。(3)控制培養(yǎng)基中的Fe2+ 的濃度,使順烏頭酸水合酶失活。2、 說明檸檬酸發(fā)酵過程中氧的重要性。答: 乙酰CoA和草酰乙酸結(jié)合生成檸檬酸過程中要引進一個氧原子,因此氧也可以看作為檸檬酸生物合成底物。它對檸檬酸發(fā)酵的作用為:(1)氧是發(fā)酵過程生成的NADH2重新氧化的氫受體。(2)近來的研究發(fā)現(xiàn),黑曲霉中除了具有一條標準呼吸鏈以外,還有一條側(cè)系呼吸鏈。 當缺氧時
2、,只要很短時間中斷供氧,就會導(dǎo)致此側(cè)系呼吸鏈的不可逆失活,而導(dǎo)致檸檬酸產(chǎn)酸急劇下降。 3、 簡述CO2固定反應(yīng)對提高檸檬酸產(chǎn)率的意義?答:(1)無CO2固定反應(yīng)的產(chǎn)率 合成1分子檸檬酸需要3分子乙酰 輔酶A,也就是需要1.5分子的葡萄 糖。 理論產(chǎn)率為: 192 /( 180×1.5) = 71.1%(2)通過CO2固定反應(yīng)提供C4二羧酸葡萄糖生成檸檬酸的全過程中,在碳平衡方面沒有碳原子的損失,在乙酰COA和草酰乙酸縮合時還從水中引進一個氧原子,總反應(yīng)式為:C6H12O6+1.5O2C6H8O7+2H2O可見檸檬酸發(fā)酵對糖的理論轉(zhuǎn)化率為106.7,以含一個結(jié)晶水的檸檬酸計
3、為116.74、 簡述黑曲霉檸檬酸高產(chǎn)菌的生理特征?答:(1)能耐高濃度的檸檬酸(15%以上)而不利用和分解檸檬酸。 (2)耐高濃度葡萄糖,能產(chǎn)生和分泌大量的酸性淀粉酶和酸性糖化酶 (3)能抗微量金屬離子,尤其能抗較高濃度的錳、Mn2+、Cu2+。 (4)在深層液體發(fā)酵培養(yǎng)時,能形成大量的細小球體,球體直徑為0.1mm。 (5)在以葡萄糖為唯一碳源的合成培養(yǎng)基上。生長不好,生成小菌落,包子形成能力弱。(6)在生長、繁殖期,細胞內(nèi)具有較高水平的氨基酸,NH4+,水平高 (7)菌絲體中含有底水平的甘油三酯和磷酸酯。 (8)細胞壁幾丁質(zhì)含量高,但-葡聚糖和聚半乳糖含量低。 (9)在生長和產(chǎn)酸期,細胞內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸水平低。 (10)具有很強的側(cè)
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