疫苗工程2015

1、復(fù)旦大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)系高波13號樓10樓1019Edward Jenner(1749-1823)Louis Pastuer(1822-1895)凡具有抗原性接種于機體可產(chǎn)生特異的凡具有抗原性接種于機體可產(chǎn)生特異的自動免疫力，可抵御感染病的發(fā)生或流自動免疫力，可抵御感染病的發(fā)生或流行，統(tǒng)稱為行，統(tǒng)稱為疫苗疫苗細菌菌苗細菌菌苗病毒、立克次體疫苗病毒、立克次體疫苗毒素類毒素毒素類毒素1、減毒活疫苗、減毒活疫苗麻疹、風(fēng)疹、腮腺炎疫苗等麻疹、風(fēng)疹、腮腺炎疫苗等2、細菌或病毒滅活疫苗、細菌或病毒滅活疫苗甲肝疫苗等甲肝疫苗等3、多糖疫苗、多糖疫苗細菌的多糖莢膜細菌的多糖莢膜4、組分疫苗（亞單位疫苗）、組分疫

2、苗（亞單位疫苗）流感疫苗流感疫苗5、基因工程疫苗、基因工程疫苗病毒載體疫苗、基因缺失疫苗等病毒載體疫苗、基因缺失疫苗等6、合成肽疫苗、合成肽疫苗實驗室研究階段實驗室研究階段7、抗獨特型抗體疫苗、抗獨特型抗體疫苗8、核酸疫苗、核酸疫苗1.1 疫苗防病的歷史淵源疫苗防病的歷史淵源以毒攻毒以毒攻毒天花人痘接種法天花人痘接種法牛痘苗牛痘苗天花的消滅天花的消滅1.2 微生物學(xué)的黃金時代和微生物學(xué)的黃金時代和第一次疫苗革命第一次疫苗革命Leeuwenoek 1676年年 顯微鏡顯微鏡Pasteur 發(fā)酵、霍亂、炭疽、狂犬病發(fā)酵、霍亂、炭疽、狂犬病Koch 染色、固體培養(yǎng)基染色、固體培養(yǎng)基Calmette、

3、Guerin 卡介苗卡介苗 德國細菌學(xué)家貝林（德國細菌學(xué)家貝林（Emil Adolf von Behring，18541917） 法國微生物學(xué)家巴斯德法國微生物學(xué)家巴斯德(Louis Pasteur,1822-1893） 1.3 歷史上的重大疫苗事故歷史上的重大疫苗事故和災(zāi)難和災(zāi)難1.4 以重組以重組DNA技術(shù)為代表技術(shù)為代表的第二次疫苗革命的第二次疫苗革命化學(xué)化學(xué)生物化學(xué)生物化學(xué)遺傳學(xué)遺傳學(xué)免疫學(xué)免疫學(xué)1986年用基因工程制備的乙年用基因工程制備的乙型肝炎表面抗原獲得成功并型肝炎表面抗原獲得成功并正式作為肝炎疫苗用于臨床正式作為肝炎疫苗用于臨床1.4.2 化學(xué)和蛋白質(zhì)化學(xué)技術(shù)化學(xué)和蛋白質(zhì)化學(xué)

4、技術(shù)1.4.3 免疫學(xué)的貢獻免疫學(xué)的貢獻1.4.1 重組重組DNA技術(shù)技術(shù)1.5 疫苗對消滅和控制傳染疫苗對消滅和控制傳染病的不朽功績病的不朽功績 改善衛(wèi)生條件改善衛(wèi)生條件 使用特異的治療使用特異的治療 有效的疫苗接種有效的疫苗接種下呼吸道感染下呼吸道感染1(7發(fā)達國家發(fā)達國家)腹瀉腹瀉2麻疹麻疹4結(jié)核結(jié)核5瘧疾瘧疾6發(fā)展中國家十大致死性疾病發(fā)展中國家十大致死性疾病啟用年份啟用年份疾病名稱疾病名稱疫苗型別疫苗型別1721天花天花“人痘人痘”活天花病毒活天花病毒1798天花天花“天然減毒天然減毒”痘苗病毒痘苗病毒1885狂犬病狂犬病“不同程度不同程度”減毒和滅活疫苗減毒和滅活疫苗1896傷寒、霍

5、亂傷寒、霍亂滅活全菌滅活全菌1897鼠疫鼠疫滅活全菌滅活全菌1923白喉白喉部分純化的甲醛脫毒類毒素部分純化的甲醛脫毒類毒素1926百日咳百日咳滅活全菌滅活全菌1926破傷風(fēng)破傷風(fēng)部分純化的甲醛脫毒類毒素部分純化的甲醛脫毒類毒素1927結(jié)核結(jié)核活減毒活減毒BCG株株1936黃熱病黃熱病活減毒病毒活減毒病毒1936流感流感滅活全病毒滅活全病毒1938斑疹傷寒斑疹傷寒滅活全普氏立克次體滅活全普氏立克次體啟用年份啟用年份疾病名稱疾病名稱疫苗型別疫苗型別1943流感流感滅活完整（滅活完整（whole）病毒）病毒1946肺炎肺炎六價多糖疫苗六價多糖疫苗1955小兒麻痹小兒麻痹滅活病毒滅活病毒1957狂犬

6、病狂犬病滅活病毒、鴨胚培養(yǎng)滅活病毒、鴨胚培養(yǎng)1961小兒麻痹小兒麻痹活減毒病毒活減毒病毒1963麻疹麻疹滅活病毒和活減毒病毒滅活病毒和活減毒病毒1967腮腺炎腮腺炎活減毒病毒活減毒病毒1969風(fēng)疹風(fēng)疹活減毒病毒活減毒病毒1972流腦流腦純化多糖純化多糖A和和C型型1974乙腦乙腦滅活病毒滅活病毒1976狂犬病狂犬病滅活病毒、人二倍體細胞培養(yǎng)滅活病毒、人二倍體細胞培養(yǎng)1977肺炎球菌肺炎肺炎球菌肺炎14價純化多糖價純化多糖啟用年份啟用年份疾病名稱疾病名稱疫苗型別疫苗型別1980腺病毒肺炎、傷寒腺病毒肺炎、傷寒活減毒病毒活減毒病毒1981乙型肝炎乙型肝炎滅活、血源苗滅活、血源苗1982腦膜炎球菌腦

7、膜炎腦膜炎球菌腦膜炎純化純化A、C、Y、W135型多糖型多糖1983乙腦、水痘乙腦、水痘減毒活疫苗減毒活疫苗1984肺炎球菌肺炎肺炎球菌肺炎23價純化多糖價純化多糖1984B型流感嗜血桿菌型流感嗜血桿菌純化多糖疫苗純化多糖疫苗1986乙型肝炎乙型肝炎基因重組蛋白質(zhì)疫苗基因重組蛋白質(zhì)疫苗1987B型流感嗜血桿菌型流感嗜血桿菌多糖多糖-白喉類毒素結(jié)合苗白喉類毒素結(jié)合苗1991甲型肝炎甲型肝炎減毒活疫苗和死疫苗減毒活疫苗和死疫苗1996百日咳百日咳無細胞百日咳蛋白質(zhì)疫苗無細胞百日咳蛋白質(zhì)疫苗1998輪狀病毒腹瀉輪狀病毒腹瀉減毒活疫苗減毒活疫苗1998回歸熱回歸熱純化蛋白質(zhì)疫苗純化蛋白質(zhì)疫苗1.5.1

8、 疫苗對控制傳染病及疫苗對控制傳染病及降低其死亡數(shù)的巨大作用降低其死亡數(shù)的巨大作用1.5.2 世界衛(wèi)生組織的擴大世界衛(wèi)生組織的擴大計劃免疫措施（計劃免疫措施（EPI）l 疫苗的冷藏和低溫運輸問題疫苗的冷藏和低溫運輸問題l 注射器的消毒和重復(fù)使用注射器的消毒和重復(fù)使用l 專業(yè)人員的訓(xùn)練和培養(yǎng)專業(yè)人員的訓(xùn)練和培養(yǎng)l EPI計劃的監(jiān)控、評估和反饋計劃的監(jiān)控、評估和反饋1.5.3 使用疫苗消滅傳染病使用疫苗消滅傳染病的可能性的可能性1.5.3.1 天花的消滅天花的消滅1977年年10月月26日日1979年年10月月26日日1.5.3.2 小兒麻痹癥的消滅小兒麻痹癥的消滅中國中國2000年年世界世界20

9、05年前年前1.5.4 21世紀(jì)面臨的新挑戰(zhàn)世紀(jì)面臨的新挑戰(zhàn)1.5.4.1 傳染病仍然是導(dǎo)致死亡的主要病因傳染病仍然是導(dǎo)致死亡的主要病因白喉、脊髓灰質(zhì)炎、百日咳、乙型肝炎、破傷白喉、脊髓灰質(zhì)炎、百日咳、乙型肝炎、破傷風(fēng)、麻疹、結(jié)核風(fēng)、麻疹、結(jié)核1.5.4.2 新發(fā)現(xiàn)的傳染病新發(fā)現(xiàn)的傳染病1973年年輪狀病毒輪狀病毒1977年年埃伯拉病毒、肺炎軍團菌埃伯拉病毒、肺炎軍團菌1981年年金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌1982年年O157：H7大腸桿菌大腸桿菌1983年年幽門螺桿菌、幽門螺桿菌、HIV1988年年丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒1.5.4.3 新回潮的傳染病新回潮的傳染病結(jié)核病結(jié)核病每年新發(fā)病人

10、每年新發(fā)病人1000多萬，死亡多萬，死亡300萬萬HIV感染并發(fā)、耐藥性產(chǎn)生感染并發(fā)、耐藥性產(chǎn)生1.5.4.4 與傳染病有關(guān)的腫瘤與傳染病有關(guān)的腫瘤肝癌肝癌乙肝病毒、丙肝病毒乙肝病毒、丙肝病毒胃癌胃癌幽門螺桿菌幽門螺桿菌子宮頸癌子宮頸癌HPV16、181.6 引發(fā)第三次疫苗革命的引發(fā)第三次疫苗革命的DNA疫苗疫苗流感病毒流感病毒DNA疫苗疫苗乙型肝炎乙型肝炎DNA疫苗疫苗艾滋病、流感、乙型肝炎、艾滋病、流感、乙型肝炎、單純皰疹病毒、瘧疾、癌單純皰疹病毒、瘧疾、癌胚抗原胚抗原DNA疫苗疫苗其中瘧疾其中瘧疾DNA疫苗進入疫苗進入III期臨床試驗期臨床試驗2.1 免疫系統(tǒng)免疫系統(tǒng)2.1.1 先天性免

11、疫系統(tǒng)先天性免疫系統(tǒng)2.1.2 獲得性免疫系統(tǒng)獲得性免疫系統(tǒng)2.2 免疫活性細胞免疫活性細胞2.2.1 B淋巴細胞淋巴細胞2.2.2 T淋巴細胞淋巴細胞2.2.3 抗原遞呈細胞抗原遞呈細胞2.3 疫苗和免疫反應(yīng)疫苗和免疫反應(yīng)2.3.1 感染和免疫反應(yīng)感染和免疫反應(yīng)2.3.2 死疫苗和體液免疫反應(yīng)死疫苗和體液免疫反應(yīng)2.3.3 減毒活疫苗和細胞免疫反應(yīng)減毒活疫苗和細胞免疫反應(yīng)2.3.4 口服疫苗和粘膜免疫反應(yīng)口服疫苗和粘膜免疫反應(yīng)2.3.5 多糖疫苗的非胸腺依賴性反應(yīng)多糖疫苗的非胸腺依賴性反應(yīng)2.3.6 DNA疫苗的細胞和體液免疫反應(yīng)疫苗的細胞和體液免疫反應(yīng)2.4 疫苗有效免疫反應(yīng)的基疫苗有效免

12、疫反應(yīng)的基本要素本要素2.4.1 疫苗的免疫原性疫苗的免疫原性 化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)不同的抗原能引起化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)不同的抗原能引起不同類型的免疫反應(yīng)不同類型的免疫反應(yīng) 抗原的劑量也對免疫反應(yīng)的形成有抗原的劑量也對免疫反應(yīng)的形成有重要影響重要影響 感染源入侵的途徑也決定了人體相感染源入侵的途徑也決定了人體相應(yīng)的免疫反應(yīng)類型應(yīng)的免疫反應(yīng)類型 疫苗的免疫原性還和佐劑的使用密疫苗的免疫原性還和佐劑的使用密切相關(guān)切相關(guān)2.4.2 疫苗的免疫記憶性疫苗的免疫記憶性 記憶性記憶性B細胞細胞 記憶性記憶性T細胞細胞優(yōu)質(zhì)制造規(guī)范優(yōu)質(zhì)制造規(guī)范 (good manufacture pratice, GMP)優(yōu)質(zhì)實驗室規(guī)范

13、優(yōu)質(zhì)實驗室規(guī)范 (good laboratory pratice, GLP)優(yōu)質(zhì)臨床試驗規(guī)范優(yōu)質(zhì)臨床試驗規(guī)范 (good clinical pratice, GCP)3.1 疫苗研制的法規(guī)疫苗研制的法規(guī)3.1.1 生產(chǎn)疫苗的廠房、車間和設(shè)備生產(chǎn)疫苗的廠房、車間和設(shè)備3.1.2 原材料原材料3.1.3 文件制度文件制度3.1.4 質(zhì)量控制（質(zhì)量控制（QC）3.2 微生物和細胞的培養(yǎng)微生物和細胞的培養(yǎng)3.2.1 菌種和種子細胞的制備菌種和種子細胞的制備3.2.2 細菌的發(fā)酵培養(yǎng)細菌的發(fā)酵培養(yǎng)3.2.3 酵母培養(yǎng)酵母培養(yǎng)3.2.4 細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)3.3 培養(yǎng)物固、液相分離和培養(yǎng)物固、液相分離和細胞

14、的破碎細胞的破碎3.3.1 離心技術(shù)離心技術(shù)3.3.2 過濾過濾3.3.3 細胞的破碎細胞的破碎3.4 疫苗抗原成分的純化疫苗抗原成分的純化3.4.1 層析技術(shù)層析技術(shù)l離子交換層析離子交換層析l疏水性樹脂層析疏水性樹脂層析l分子篩分子篩l親和層析親和層析l聚焦層析聚焦層析l堿性磷酸鈣層析堿性磷酸鈣層析3.4.2 生物大分子提純方案的設(shè)計生物大分子提純方案的設(shè)計3.4.3 疫苗蛋白質(zhì)抗原的提純疫苗蛋白質(zhì)抗原的提純3.4.4 多糖抗原的提純多糖抗原的提純3.4.5 內(nèi)毒素的清除內(nèi)毒素的清除完全福氏佐劑（完全福氏佐劑（CFA）：密度較小的礦物）：密度較小的礦物油、干的死分枝桿菌常用死結(jié)核桿菌以及油

15、、干的死分枝桿菌常用死結(jié)核桿菌以及乳化劑如乳化劑如Arlacel A組成組成不完全福氏佐劑（不完全福氏佐劑（IFA）：不含分枝桿菌）：不含分枝桿菌4.1 植物佐劑植物佐劑 加強細胞的吞噬作用加強細胞的吞噬作用 刺激免疫細胞產(chǎn)生各種細胞因子刺激免疫細胞產(chǎn)生各種細胞因子 刺激抗體產(chǎn)生刺激抗體產(chǎn)生皂角素成分：皂角素成分：Quil A、QS-214.2 細菌佐劑細菌佐劑4.2.1 霍亂毒素（霍亂毒素（CT）和大腸桿菌不耐熱）和大腸桿菌不耐熱毒素（毒素（LT）4.2.2 重組百日咳毒素（重組百日咳毒素（PT）4.2.3 B群流腦桿菌的外膜小體（群流腦桿菌的外膜小體（OMV）4.2.4 卡介苗（卡介苗（B

16、CG）4.2.5 細菌脂多糖（細菌脂多糖（LPS）4.3 人工合成佐劑人工合成佐劑4.3.1 脂質(zhì)體脂質(zhì)體4.3.2 MF59佐劑佐劑4.3.3 免疫刺激復(fù)合物佐劑免疫刺激復(fù)合物佐劑4.4 鋁佐劑及其它無機成分佐劑鋁佐劑及其它無機成分佐劑4.4.1 鋁佐劑（鋁佐劑（alum）十二水和硫酸鋁鉀十二水和硫酸鋁鉀部分純化的蛋白抗原、破傷風(fēng)類毒素或白部分純化的蛋白抗原、破傷風(fēng)類毒素或白喉類毒素在磷酸根和碳酸氫根存在下沉淀喉類毒素在磷酸根和碳酸氫根存在下沉淀出的含磷酸鋁的出的含磷酸鋁的混合物混合物4.4.2 磷酸鈣佐劑磷酸鈣佐劑抗原在抗原在0.07M的的Na2HPO4 H2O的溶液中透的溶液中透析后，快

17、速加入析后，快速加入0.07M的的CaCl2 H2O溶液，溶液，調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)pH至至6.87.0，形成的凝膠用生理鹽，形成的凝膠用生理鹽水洗后，再重懸于生理鹽水中水洗后，再重懸于生理鹽水中4.5 細胞因子佐劑細胞因子佐劑4.5.1 細胞因子調(diào)節(jié)免疫功能的機理細胞因子調(diào)節(jié)免疫功能的機理4.5.2 細胞因子的佐劑作用細胞因子的佐劑作用4.6 核酸佐劑核酸佐劑4.6.1 CpG基序：基序：5-X1X2CGYY-34.6.2 使用能表達與免疫相關(guān)的細胞因子的使用能表達與免疫相關(guān)的細胞因子的核酸載體作為佐劑核酸載體作為佐劑4.6.3 雙鏈雙鏈RNA長期以來被認(rèn)為是非常良長期以來被認(rèn)為是非常良好的干擾素誘生劑

18、好的干擾素誘生劑4.7 投遞系統(tǒng)投遞系統(tǒng)減毒的細菌或病毒與抗原的重組減毒的細菌或病毒與抗原的重組DNA投投遞系統(tǒng)遞系統(tǒng)某些化學(xué)物質(zhì)某些化學(xué)物質(zhì) 能在體內(nèi)共存的可生物能在體內(nèi)共存的可生物降解的聚合物（降解的聚合物（BBP），例如），例如PLGA、PLG、脂質(zhì)體、葡聚糖、淀粉等、脂質(zhì)體、葡聚糖、淀粉等4.8 新佐劑的選擇和研究方向新佐劑的選擇和研究方向疫苗的成分疫苗的成分免疫途徑免疫途徑5.1 實驗動物的管理實驗動物的管理5.1.1 實驗動物管理的人事實驗動物管理的人事5.1.2 實驗動物的飼養(yǎng)和管理實驗動物的飼養(yǎng)和管理5.1.3 感染動物室的分級及要求感染動物室的分級及要求5.2 實驗動物模型實

19、驗動物模型u 天然的動物模型天然的動物模型u 誘導(dǎo)的動物模型誘導(dǎo)的動物模型u 陰性模型陰性模型u 孤寡模型孤寡模型5.3 實驗動物在疫苗實驗動物在疫苗研制中的應(yīng)用研制中的應(yīng)用5.3.1 一般毒性試驗一般毒性試驗5.3.2 特殊毒性試驗特殊毒性試驗5.3.3 毒力實驗毒力實驗5.3.4 疫苗的效力實驗疫苗的效力實驗5.3.5 多克隆和單克隆抗體的制造多克隆和單克隆抗體的制造5.3.6 轉(zhuǎn)基因動物的應(yīng)用轉(zhuǎn)基因動物的應(yīng)用5.3.7 基因敲除動物的應(yīng)用基因敲除動物的應(yīng)用以往疫苗成功的原因在于它能有效地誘導(dǎo)機以往疫苗成功的原因在于它能有效地誘導(dǎo)機體產(chǎn)生保護性抗體體產(chǎn)生保護性抗體然而對胞內(nèi)菌如結(jié)核桿菌、利

20、什曼原蟲及寄然而對胞內(nèi)菌如結(jié)核桿菌、利什曼原蟲及寄生蟲等這些抗體幾乎不起作用生蟲等這些抗體幾乎不起作用對對HBV、HCV、HIV、瘧原蟲等感染需要細、瘧原蟲等感染需要細胞和體液免疫的雙重介導(dǎo)胞和體液免疫的雙重介導(dǎo)傳統(tǒng)疫苗傳統(tǒng)疫苗新型疫苗新型疫苗成分成分死疫苗死疫苗/減毒活疫苗或減毒活疫苗或重組亞單位免疫重組亞單位免疫編碼抗原的核酸或細編碼抗原的核酸或細胞疫苗胞疫苗機制機制抗原蛋白刺激機體產(chǎn)生抗原蛋白刺激機體產(chǎn)生中和性保護抗體中和性保護抗體不僅產(chǎn)生保護性抗體不僅產(chǎn)生保護性抗體還激發(fā)特異細胞免疫還激發(fā)特異細胞免疫作用作用起一定預(yù)防作用起一定預(yù)防作用不僅預(yù)防更起特異性不僅預(yù)防更起特異性治療作用治療作

21、用所謂核酸疫苗（所謂核酸疫苗（nucleic acid vaccine），是），是將含編碼外源蛋白基因的質(zhì)粒將含編碼外源蛋白基因的質(zhì)粒DNA直接導(dǎo)入直接導(dǎo)入動物組織，外源基因在體細胞表達后，產(chǎn)物動物組織，外源基因在體細胞表達后，產(chǎn)物被遞呈，與被遞呈，與MHC結(jié)合，刺激機體產(chǎn)生體液結(jié)合，刺激機體產(chǎn)生體液和細胞免疫應(yīng)答，又稱裸和細胞免疫應(yīng)答，又稱裸DNA疫苗疫苗 接種后，蛋白抗原在宿主細胞內(nèi)表達，與病接種后，蛋白抗原在宿主細胞內(nèi)表達，與病原的自然感染相似，可以誘導(dǎo)細胞和體液免疫原的自然感染相似，可以誘導(dǎo)細胞和體液免疫 外源基因在體內(nèi)存在較長時間，不斷表達外外源基因在體內(nèi)存在較長時間，不斷表達外源蛋

22、白，持續(xù)刺激產(chǎn)生較強和較持久的免疫應(yīng)源蛋白，持續(xù)刺激產(chǎn)生較強和較持久的免疫應(yīng)答答 具有共同的理化特性，可將含不同抗原基因具有共同的理化特性，可將含不同抗原基因的質(zhì)粒混合進行聯(lián)合免疫的質(zhì)?；旌线M行聯(lián)合免疫 質(zhì)粒載體沒有免疫原性，可以反復(fù)使用質(zhì)粒載體沒有免疫原性，可以反復(fù)使用T細胞疫苗是指將細胞疫苗是指將T細胞或體外細胞或體外T細胞表位多細胞表位多肽刺激產(chǎn)生的肽刺激產(chǎn)生的T細胞作為疫苗接種，用于治細胞作為疫苗接種，用于治療某些自身免疫性疾病療某些自身免疫性疾病治療某些自身免疫性疾病治療某些自身免疫性疾病T細胞引起的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)可能是某些自身細胞引起的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)可能是某些自身免疫病的病因免疫病

23、的病因動物實驗中，把動物體內(nèi)引起疾病的動物實驗中，把動物體內(nèi)引起疾病的T細胞移細胞移入其它健康動物體內(nèi)，也能引起疾病入其它健康動物體內(nèi)，也能引起疾病如果把致病的如果把致病的T細胞滅活后注入體內(nèi)，即使致細胞滅活后注入體內(nèi)，即使致病病T細胞再移入體內(nèi)，也不再引起疾病細胞再移入體內(nèi)，也不再引起疾病小鼠小鼠EAE中已成功，還用于人類中已成功，還用于人類MS治療某些病毒性疾病治療某些病毒性疾病用多肽在體外誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性用多肽在體外誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性CTL，經(jīng)克隆、擴，經(jīng)克隆、擴增、篩選和鑒定后，僅將增、篩選和鑒定后，僅將MHC-I類限制的類限制的CD8T細胞輸入機體，誘導(dǎo)細胞免疫應(yīng)答產(chǎn)生細胞輸入機體，誘導(dǎo)細

24、胞免疫應(yīng)答產(chǎn)生轉(zhuǎn)染了轉(zhuǎn)染了HCV基因的小鼠骨髓瘤基因的小鼠骨髓瘤SP2/0細胞皮下注細胞皮下注射，發(fā)現(xiàn)射，發(fā)現(xiàn)MHC-I限制的限制的CTL表位多肽體外誘導(dǎo)的表位多肽體外誘導(dǎo)的特異性特異性CTL，在體內(nèi)外對，在體內(nèi)外對HCV感染細胞均具有感染細胞均具有殺傷作用殺傷作用DC是目前發(fā)現(xiàn)的功能最強的是目前發(fā)現(xiàn)的功能最強的APC，也是唯一能激活初始，也是唯一能激活初始T細胞的細胞的APC應(yīng)用抗原或抗原多肽體外沖擊致敏應(yīng)用抗原或抗原多肽體外沖擊致敏DC，然后回輸或免疫接，然后回輸或免疫接種荷瘤宿主或帶病毒特異性抗原的宿主，進行免疫治療種荷瘤宿主或帶病毒特異性抗原的宿主，進行免疫治療利用利用DC與腫瘤細胞融

25、合成為新型帶有與腫瘤細胞融合成為新型帶有DC功能及腫瘤特異抗功能及腫瘤特異抗原的融合細胞瘤苗原的融合細胞瘤苗利用病毒載體將帶有腫瘤或病毒抗原的編碼基因轉(zhuǎn)染利用病毒載體將帶有腫瘤或病毒抗原的編碼基因轉(zhuǎn)染DC，使之在使之在DC內(nèi)持續(xù)表達相應(yīng)特異性抗原，誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性抗內(nèi)持續(xù)表達相應(yīng)特異性抗原，誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性抗腫瘤或抗病毒免疫腫瘤或抗病毒免疫1、核酸疫苗的發(fā)展、核酸疫苗的發(fā)展用感染機體組織中提取出的用感染機體組織中提取出的DNA序列，序列，經(jīng)調(diào)整后局部注射誘導(dǎo)保護性免疫反應(yīng)經(jīng)調(diào)整后局部注射誘導(dǎo)保護性免疫反應(yīng)DNA免疫在動物模型中是有效的，但在人體免疫在動物模型中是有效的，但在人體肌注肌注DNA卻不一

26、定能產(chǎn)生活躍的免疫反應(yīng)卻不一定能產(chǎn)生活躍的免疫反應(yīng)只有針對乙型肝炎和瘧疾的核酸疫苗在人體只有針對乙型肝炎和瘧疾的核酸疫苗在人體中誘導(dǎo)了保護性的免疫反應(yīng)中誘導(dǎo)了保護性的免疫反應(yīng)2、治療性疫苗的發(fā)展、治療性疫苗的發(fā)展HIV、HBV、螺旋桿菌、粘膜念珠菌、螺旋桿菌、粘膜念珠菌、皰疹病毒、人乳頭瘤病毒等皰疹病毒、人乳頭瘤病毒等3、當(dāng)今疫苗的進步、當(dāng)今疫苗的進步肺炎鏈球菌的多價多糖疫苗自從肺炎鏈球菌的多價多糖疫苗自從1977年年在美國就已經(jīng)通用，但在兒童中產(chǎn)生了在美國就已經(jīng)通用，但在兒童中產(chǎn)生了一種不協(xié)調(diào)的免疫反應(yīng)一種不協(xié)調(diào)的免疫反應(yīng)七價肺炎鏈七價肺炎鏈球菌復(fù)合性多糖疫苗球菌復(fù)合性多糖疫苗流感疫苗是從雞

27、胚中培養(yǎng)的注射用無活流感疫苗是從雞胚中培養(yǎng)的注射用無活力流感病毒力流感病毒鼻內(nèi)噴劑鼻內(nèi)噴劑1、癌癥、癌癥小鼠胸腺腫瘤細胞傳遞到膜上表達的小鼠胸腺腫瘤細胞傳遞到膜上表達的GPI-B7-1蛋白，可保護小鼠對抗此種腫瘤蛋白，可保護小鼠對抗此種腫瘤黑色素瘤黑色素瘤ALVAC gp100基因、結(jié)直腸癌基因、結(jié)直腸癌ALVAC CEA-B7.1基因、乳腺癌基因、乳腺癌HER2/Neu等等2、自身免疫性疾病、自身免疫性疾病類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）多發(fā)性硬化（多發(fā)性硬化（MS）重癥肌無力重癥肌無力食物性過敏食物性過敏I型糖尿病型糖尿病吸毒、吸煙吸毒、吸煙動脈粥樣硬化動脈粥樣硬化避孕避孕3、針對大規(guī)模殺傷性、針對大規(guī)模殺傷性生物武器的疫苗生物武器的疫苗炭疽炭疽天花天花鼠疫鼠疫脊髓灰質(zhì)炎脊髓灰質(zhì)炎腸外給藥，許多需要注射腸外給藥，許多需要注射增大粘膜免疫和全身免疫增大粘膜免疫和全身免疫1、透皮性免疫預(yù)防、透皮性免疫預(yù)防動物研究已顯示在局部應(yīng)用疫苗后，有全身性和粘膜動物研究已顯示在局部應(yīng)用疫苗