高效液相色譜法測定果汁飲料中的維生素C含量_張杰

1、 文章編號:1004-1656(201208-1306-03高效液相色譜法測定果汁飲料中的維生素C含量張杰,許家勝*,劉連利(渤海大學科技實驗中心,化學化工與食品安全學院,遼寧錦州121013摘要:建立飲料中維生素C含量的高效液相色譜檢測方法。采用ODS C18(4.6mm250mm,5m反相色譜柱,以0.1%草酸溶液為流動相,光電二級管陣列檢測器,檢測波長為267nm。線性范圍為20 160g/mL,相關(guān)系數(shù)為0.9983,方法的回收率為96.4% 100.2%,相對標準偏差為0.61%。該方法簡便、分析速度快,能夠滿足果汁飲料中維生素C的檢測要求。關(guān)鍵詞:維生素C;高效液相色譜;飲料中圖分

2、類號:O657.72文獻標識碼:ADetermination of content of Vitamin C in beverage by HPLCZHANG Jie,XU Jia-sheng*,LIU Lian-li(Center of Science and Technology Experiment,College of Chemistry,Chemical Engineering andFood Safety,Bohai University,Jinzhou121013,ChinaAbstract:In this work,HPLC has been used to determine

3、 the content of Vitamin C in beverage.ODS C18(4.6mm250mm,5m is used as reversed phase column.The0.1%oxalic acid solution is mobile phase.The wavelength of photodiode array detector is 267nm.Its recovery-ratio is96.4% 100.2%,the correlation coefficient is0.9963.The relative standard deviation was0.61

4、% .This HPLC method is simple and convenient,and is easy to control.This analysis method is fast-speed,high sensitivity,and be a-ble to meet requirements of the Vitamin C in beverage industry.Key words:Vitamin C;high performance liquid chromatography(HPLC;beverage維生素C又稱抗壞血酸,是水溶性維生素,是知名度最高的營養(yǎng)素,不但是美容靈

5、藥,更是抗氧化,保護細胞,甚至有效抗癌的維生素,它普遍存在于蔬菜水果中,但容易因外在環(huán)境改變而遭到破壞,人體自身無法合成維生素C,必須額外從食物中獲取。目前常規(guī)的維生素C含量測定方法有紫外分光光度法1、碘量法2、比色法3、熒光法4等,這些方法操作步驟復雜,具有試劑和試樣溶液不穩(wěn)定、靈敏度低、費時等缺點。近年來發(fā)展用高效液相色譜法測定維生素C5-7。本文采用高效液相色譜法,結(jié)果表明該方法對飲料中維生素C能夠快速、準確的分離分析。1實驗部分1.1儀器與試劑LC-1100高效液相色譜儀(配有二極管陣列檢測器,Agilent公司;色譜柱:ODS C18(4.6mm250mm,5m。流動相:0.1%的草

6、酸溶液;柱溫: 40;流速1.0mL/min;檢測器:DAD檢測器;檢測收稿日期:2011-09-12;修回日期:2011-10-19基金項目:遼寧省教育廳省級工程技術(shù)研究中心建設計劃(2009402007資助聯(lián)系人簡介:許家勝(1977-,男,博士,副教授,主要從事新材料和食品科學研究。E-mail:jiashengxu第8期張杰等:高效液相色譜法測定果汁飲料中的維生素C 含量波長:267nm 。維生素C 標準對照品:含量100%,約100mg (中國藥品生物制品檢定所;草酸(純度99.5%,分析純,沈陽市新化試劑廠;甲醇(HPLC 級,美國Tcdia 公司;超純水:實驗室自制。果汁飲料:市

7、售。1.2色譜流動相的配制準確稱取1.005g 的草酸于小燒杯中,用超純水溶解后轉(zhuǎn)移至1000mL 容量瓶中,用超純水定容,搖勻備用。1.3標準溶液的配制用電子天平準確稱量0.0500g 維生素C 標準品于干凈干燥的小燒杯中,用0.1%的草酸溶液溶解,轉(zhuǎn)移到50mL 棕色容量瓶中,稀釋至刻度,搖勻。得到維生素C 的標準儲備液,密封貯存。1.4樣品前處理將果汁飲料用布氏漏斗過濾,稱取1.0g 樣品于25mL 的容量瓶中,用0.1%的草酸溶液定容,搖勻,使用前用0.45m 濾膜過濾。2結(jié)果與討論2.1檢測波長的選擇取維生素C 標準樣品,在150nm 375nm 波長范圍內(nèi)進行波長掃描,得到光譜掃描

8、圖,如圖1。結(jié)果顯示在267nm 處有最大吸收,維生素C 也能達到基線分離,因此本次實驗選擇267nm 作為檢測波長 。圖1維生素C 波長掃描圖Fig.1Scan image of wavelength of Vitamin C2.2標準曲線用流動相將維生素C 標準儲備液逐級稀釋得到濃度為20.0、40.0、80.0、100.0、160.0g /mL 的標準工作液,在優(yōu)化的條件下濃度由低到高進樣檢測,以濃度為橫坐標,色譜峰面積為縱坐標,繪制標準曲線。表1為維生素C 標準溶液的濃度及測定的結(jié)果,圖2為標準曲線。由圖2可見,標準工作曲線的線性方程為:y =45.743x +125.63,R 2=0

9、.9985。以2倍基線噪聲所對應的濃度計本方法的檢出限,維生素C 的檢出限為0.006g /mL 。圖2維生素C 的標準曲線Fig.2Standard curve of Vitamin C2.3樣品重復性實驗取同一樣品8份,分別按1.4處理并進行測定,結(jié)果見表2,其RSD =0.61%。果汁的色譜圖見圖3。表1重復性實驗結(jié)果Table 1Repetition of experiment results測定結(jié)果(g /mL 平均值(g /mL RSD (%86.9,87.4,87.8,86.1,87.3,86.5,86.8,87.086.90. 61圖3果汁樣品的色譜圖Fig.3Chromato

10、gram of beverage sample2.4回收率實驗在5個維生素C 含量均為118g 的果珍樣品,分別加入40g ,80g ,160g ,240g ,320g 維生素C 標準品,測定其回收率,其結(jié)果見表2。7031化學研究與應用第24卷表2回收實驗結(jié)果Table2Experiment results of recovery experiments本底值(g添加量(g測得量(g回收率(% 11840155.898.611880190.896.4118160276.199.3118240358.7100.2118320425.797.2由表2數(shù)據(jù)可知,該方法回收率在96.4% 100.2

11、%之間,說明本方法測定結(jié)果準確可靠。2.5樣品的測定按照1.5色譜條件,將市售的飲料樣品溶液按1.4處理后上機進行液相色譜分析,測定維生素C的含量,結(jié)果見表3。表3不同果汁飲料的維生素C含量(n=3Table3Content of Vc in different Beverages名稱維生素C(g/mL每日C橙汁飲品128.5美汁源果粒橙73.8純果樂72.83結(jié)論以0.1%的草酸為流動相和提取液,紫外檢測波長267nm的條件下分析飲料中維生素C含量的研究,具有良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.9983,方法的平均回收率為96.4% 100.2%,測定結(jié)果的RSD為0.61%。該方法能夠?qū)︼嬃现械木S生素C含量進行快速、準確檢測。參考文獻:1鄭京平水果、蔬菜中維生素C含量的測定紫外分光光度快速測定方法探討J光譜實驗室,2006,11(4:731-7352庫爾班江,賽麗曼碘量法測水果蔬菜中維生素C的含量J伊犁師范學院學報(自然科學版,2007,65(3:28-323李玉紅鉬藍比色法測定水果中還原型維生素CJ天津化工,2002,1(1:31-324鮑所言,李書存,胡漢芳,等動力學熒光法測定抗壞血酸J分析實驗室,2001,2