丹參酮Ⅱ-A磺酸鈉對兔在體心室電生理及實(shí)驗(yàn)性心律失常的影響

1、丹參酮-A磺酸鈉對兔在體心室電生理及實(shí)驗(yàn)性心律失常的影響    【摘要】  目的：研究丹參酮-A磺酸鈉(TSN)對兔在體心室電生理及實(shí)驗(yàn)性心律失常的影響。方法：使用心室壁插入自制電極，觀察TSN(0.5，1，2，4mg/kg)對兔心室電生理影響；采用BaCl2、氯仿-腎上腺素等誘發(fā)心律失常模型研究TSN對心律失常的影響。結(jié)果：小劑量TSN對兔心室電生理無明顯影響，大劑量則能顯著延長心室的相對不應(yīng)期、有效不應(yīng)期、室顫閾；且能降低BaCl2、氯仿-腎上腺素等誘發(fā)心律失常。結(jié)論：TSN可能具有增加心電穩(wěn)定性并減少心律失常發(fā)生的作用。

2、0;【關(guān)鍵詞】  丹參酮-A磺酸鈉；兔；心室電生理；心律失常AbstractObjective: To study the influence of tashinonea-sulfoacid-natrum(TSN)on the electrophysiology of rabbits left ventricle in vivo and the experimental arrhythmia.&#

3、160;Methods: The electrode was inserted into rabbits ventricular wall to observe different doses(0.5，1，2，4 mg/kg)of the TSN on the influence of the rabbits ventricle electrophysiology.&

4、#160;The arrhythmic model induced by BaCl2 and chloroform-adnephrin was used to study the influence of experimental  arrhythmia. Results: Low-dose TSN had no obviously influence

5、60;on the electrophysiology of rabbits ventricle. Large-dose TSN could prolong rabbits ventricular relative refractory period、ventricular effective refractory period、ventricular fibrillation threshold,

6、0;and reduced the occurrence of arrhythmia induced by BaCl2 and chloroform-adnephrin. Conclusion: TSN may have the efficacy to increase electrical stability of the cardiac muscle&#

7、160;and reduce the occurrence of arrhythmia.Key Wordstashinonea-sulfoacid-natrum; rabbit; ventricular electrophysiology; arrhythmia    丹參是活血化瘀中藥，丹參酮-A是丹參根的乙醚或乙醇提取物中的一種成分1。研究表明，丹參酮具有清除自由基、天然抗氧化、抗動脈粥樣硬化、降低心肌耗氧量、保護(hù)缺血心肌、抑制血小板聚集、抗血栓、抑菌

8、和抗腫瘤等作用。近期的膜片鉗全細(xì)胞式記錄方法觀察到其磺化后的水溶性鈉鹽丹參酮-A磺酸鈉(TSN)對大鼠單個心室肌細(xì)胞的內(nèi)向整流鉀電流(Ik1)和瞬時外向電流(Ito)具有抑制作用2，對心肌L-型鈣通道也有阻滯作用3，但其在整體條件下對心臟的電生理作用的影響仍少見報道。本實(shí)驗(yàn)觀察了整體條件下TSN對兔心室有效不應(yīng)期(VERP)、心室相對不應(yīng)期(VRRP)、室顫閾(VFT)及其實(shí)驗(yàn)性心律失常的影響，旨在探討TSN在整體條件下對心臟電生理作用的特點(diǎn)及潛在的抗心律失常機(jī)制。1  材料與方法1.1  實(shí)驗(yàn)動物及分組    健

9、康成年新西蘭兔(南方醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供，清潔級)56只，體質(zhì)量(2.4±0.4)kg，雌雄不限。40只隨機(jī)分為TSN(0.5、1、2和4mg/kg)組及對照組GS(體積分?jǐn)?shù)5%)組，每組8只，余16只隨機(jī)分為TSN組和對照組(各8只)。SD大鼠南方醫(yī)科大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供，清潔級，體質(zhì)量(240.2±36.2)g，雌雄不限20只，分為TSN組和對照組，各10只。1.2  藥品及實(shí)驗(yàn)儀器    注射用TSN為紅色澄清液體(阿爾貝拉醫(yī)藥控股公司，中國。批號：060303，20mg/支)，用體積分?jǐn)?shù)5%的葡萄糖注射

10、液稀釋成0.5mg/mL，4冰箱保存；Powlab16導(dǎo)生理記錄儀(埃得公司，澳大利亞)；SEC-2102型心臟程控刺激器(光電公司，日本)；自制四極心肌插入電極；刺激電極(張家口教學(xué)儀器廠，中國)。1.3  實(shí)驗(yàn)方法4，51.3.1  心室電生理測定 各組用體積分?jǐn)?shù)3%的戊巴比妥鈉30mg/kg經(jīng)耳緣靜注麻醉，仰臥位固定，肝素1000U靜注，用針狀電極刺入兔四肢皮下記錄其體表導(dǎo)聯(lián)心電圖，信號輸入16導(dǎo)生理記錄儀，行全程心電監(jiān)護(hù)。胸骨左緣開胸，保持自主呼吸，維持竇性節(jié)律，剪開心包膜，縫制心包吊床，充分暴露心臟，將自制四極心肌插入電極插入左心耳右

11、下緣室間溝左室側(cè)心室壁內(nèi)，電極下緣位于左室心尖部，四極電極極間距離：第12極(，左室前壁)，第34極(b，左室心尖部)均為1.5mm，第23極5mm，四極電極的第12極作為刺激電極，連接心臟程控刺激器，第34極作為記錄電極，將生物電信號輸入16導(dǎo)生理記錄儀，測定電生理參數(shù)?；A(chǔ)刺激以高出竇律(1020)次/min的頻率起搏心室，脈寬2ms，首先測定心室起搏閾值(輸出電壓)，期前刺激S2脈寬和電壓與S1相同，在連續(xù)發(fā)放8個起搏刺激后發(fā)放早搏刺激S2，S1S2自短于S1S150100ms開始，步長5ms，至S2不能引起心室去極化即為VRRP；以起搏閾值的2倍作為輸出電壓，期前刺激S2脈寬和電壓與S

12、1相同，在連續(xù)發(fā)放8個起搏刺激后發(fā)放早搏刺激S2，S1S2自短于S1S150100ms開始，步長5ms，至S2不能引起心室去極化即為VERP。接著，以第23極作為刺激電極，連接，心臟程控刺激器，以第14極作為記錄電極,將生物電信號輸入16導(dǎo)生理記錄儀,記錄室顫閾。致顫參數(shù)：50次/s、脈寬30ms，刺激15s/次，每隔10min刺激1次，逐次提高刺激電壓0.5V，直至室顫出現(xiàn)，此電壓值(V)為電刺激兔心室室顫閾(VFT)。記錄上述指標(biāo)后穩(wěn)定30min，各組經(jīng)耳緣靜脈輸入相應(yīng)的藥物，30min后再次測量上述指標(biāo)。1.3.2  對實(shí)驗(yàn)性心律失常的影響 TSN對BaCl

13、2誘發(fā)大鼠心律失常的影響  SD大鼠以體積分?jǐn)?shù)10%的水合氯醛(300mg/kg)腹腔注射麻醉，頸外靜脈插管，監(jiān)視體表肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖。TSN組給予TSN1mg/kg，對照組等體積GS，經(jīng)頸外靜脈緩慢注入，15min后經(jīng)頸外靜注BaCl2(1mg/kg)誘發(fā)心律失常，觀察雙相性室速發(fā)生率。TSN對氯仿-腎上腺素誘發(fā)兔心律失常的影響  各組取平臥位固定，氯仿吸入麻醉至角膜反射遲鈍,TSN組由耳緣靜注TSN(2mg/kg)，對照組給予等量GS，15min后兩組均予體積分?jǐn)?shù)0.01%的腎上腺素(50g/kg)由耳緣靜脈快速注入，心電監(jiān)視，記錄心律失常持續(xù)時間。1

14、.4  統(tǒng)計學(xué)處理    實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用x±s表示，組內(nèi)數(shù)據(jù)分析采用配對t檢驗(yàn)(TSN對BaCl2誘發(fā)大鼠心律失常影響組數(shù)據(jù)采用2檢驗(yàn))，組間數(shù)據(jù)分析采用方差分析，由SPSS13.0 for windows軟件完成統(tǒng)計學(xué)處理。2  結(jié)果    實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表13：用藥后30min，0.5、1mg/kg組對兔心室的各項(xiàng)指標(biāo)均無統(tǒng)計學(xué)意義；2、4mg/kg組與對照組、0.5、1mg/kg組比，VRRP、VERP、VFT顯著延長(P<0.05，P<

15、;0.01)，TSN可明顯減少BaCl2致雙相性室速的發(fā)生(P<0.05)，且有對抗氯仿-腎上腺素誘發(fā)兔心律失常的作用(P<0.01)。表1  TSN對兔心室不應(yīng)期的影響（略）表2  TSN對BaCl2誘發(fā)大鼠心律失常的影響（略）表3  TSN對氯仿-腎上腺素誘發(fā)兔心律失常的影響（略）3  討論    心律失常不僅發(fā)生于慢性心力衰竭、心肌缺血、心肌肥厚等器質(zhì)性心臟病患者，還發(fā)生于心臟無明顯器質(zhì)性病變者，某些嚴(yán)重心律失常現(xiàn)已成為人類死亡的主要原因。目前臨床上抗心律失

16、常藥物仍是治療心律失常的首選?？剐穆墒СＫ幍淖饔脵C(jī)制包括降低自律性，減少后除極和觸發(fā)活動、改變膜反應(yīng)性(加快或減慢傳導(dǎo))、以及延長心肌細(xì)胞有效不應(yīng)期等。本研究結(jié)果顯示，TSN能延長心室的RRP及ERP，其機(jī)制可能是TSN能抑制心室肌細(xì)胞的Ik1和Ito2，這兩種電流的抑制會使動作電位時程延長，同時也使RRP及ERP延長，從而能減少折返形成。VFT是心電穩(wěn)定性的重要指標(biāo)，直接反映心律失常發(fā)生的可能性。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，TSN能增加室顫閾，2mg/kg時作用達(dá)到最大(與4mg/kg組比無統(tǒng)計學(xué)意義),提示TSN具有增加心肌電穩(wěn)定性的作用6。這提示TSN可能具有一定抗心律失常的作用，且其作用并不與劑量成正

17、比。    在實(shí)驗(yàn)性心律失常模型中，本研究發(fā)現(xiàn)TSN能降低BaCl2誘發(fā)大鼠雙相性室速的發(fā)生率(P<0.05)，縮短由氯仿-腎上腺素誘發(fā)的兔心律失常持續(xù)時間(P<0.01)。BaCl2誘發(fā)心律失常的機(jī)制與Ca2+相似,與心肌細(xì)胞膜上Ca2+的內(nèi)流有關(guān)7;氯仿誘發(fā)兔室顫的機(jī)制可能是由于氯仿可促使植物神經(jīng)或腎上腺髓質(zhì)釋放腎上腺素，大量腎上腺素興奮-受體，引起腎上腺素受體依賴性Ca2+內(nèi)流，以及氯仿對心肌的直接作用5。TSN能明顯抑制BaCl2誘發(fā)的大鼠雙向性室性心律失常,縮短由氯仿-腎上腺素誘發(fā)的兔心律失常持續(xù)時間,提示TSN的抗心律失常機(jī)制可能

18、與抑制K+及Ca2+的內(nèi)流,減輕細(xì)胞內(nèi)鈣超載,降低心臟的自律性,阻斷-腎上腺素能受體等有關(guān)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1梁勇, 羊裔明, 袁淑蘭. 丹參酮藥理作用及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展J. 中草藥, 2000, 4(31): 30.2于海波, 徐長慶, 單宏麗. 丹參酮-2A對大鼠心室肌細(xì)胞膜鉀電流的影響J. 哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2002, 36(2)：112-114.3徐長慶, 婁延平, 楊保峰. 丹參酮-A抑制豚鼠單個心肌細(xì)胞L型鈣電流和縮短動作電位時程效應(yīng)的相關(guān)性分析J. 中國藥理學(xué)通報, 1998, 14(5): 428-431.4邱漢嬰, 魏太星, 張延榮，等. 雷尼替丁對兔正常心室和缺血心室不應(yīng)期及室顫閾的影響J. 中國藥理學(xué)報, 1993, 14(3): 433.5馬傳庚， 張寶恒. 抗心律失常藥實(shí)驗(yàn)法M. 徐叔云, 卞如濂, 陳修主編. 藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué).