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1、.高中生物植物體細(xì)胞雜交技術(shù)知識(shí)點(diǎn) 高中生物植物體細(xì)胞雜交技術(shù)根底知識(shí)點(diǎn)1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù):就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下交融成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成完好植物體的技術(shù)。2、過(guò)程:1誘導(dǎo)交融的方法:物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?;瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇PEG作為誘導(dǎo)劑。2細(xì)胞交融完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。3植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株,而不是形成雜種細(xì)胞就完畢。4雜種植株的特征:具備兩種植物的遺傳特征,原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。3、意義:抑制了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。高中生物植物體細(xì)胞雜交技術(shù)重要進(jìn)展1960年,Kocking用酶法制備高等植物原生
2、質(zhì)體首次獲得成功;1970年,Power首次用硝酸鈉進(jìn)展為誘導(dǎo)劑進(jìn)展了較大規(guī)模的原生質(zhì)體誘導(dǎo)交融;1971年,Takebe首次從離體煙草原生質(zhì)體培養(yǎng)中獲得再生完好植株;1972年,Carlson首次獲得粉藍(lán)煙草和郎氏煙草的細(xì)胞雜種,這也是第一個(gè)植物細(xì)胞雜種;1974年,Kao將聚乙二醇誘導(dǎo)交融法應(yīng)用于植物細(xì)胞交融并建立了相應(yīng)的交融技術(shù);1978年,Melchers獲得了第一個(gè)屬間細(xì)胞雜種番茄+馬鈴薯;1981年,Zimmerman創(chuàng)造了電交融儀,并首次提出了電交融概念;1987年,Schweiger建立了單對(duì)原生質(zhì)體電交融技術(shù)程序。高中生物植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1.PEG誘導(dǎo)交融法PEG誘導(dǎo)交融的
3、特點(diǎn):其優(yōu)點(diǎn)是交融本錢(qián)低,勿需特殊設(shè)備;交融子產(chǎn)生的異核率較高;交融過(guò)程不受物種限制。其缺點(diǎn)是交融過(guò)程繁瑣,PEG可能對(duì)細(xì)胞有毒害。PEG的作用機(jī)理: Kao等認(rèn)為,由于PEG分子具有細(xì)微的負(fù)極性,故可以與具有正極性基團(tuán)的水、蛋白質(zhì)和碳水化合物等形成H鍵,從而在在原生質(zhì)體之間形成分子橋,其華中農(nóng)業(yè)大學(xué)創(chuàng)立國(guó)家精品課程細(xì)胞工程學(xué) 文本教案第七章 主講老師:柳俊博士、教授結(jié)果是使原生質(zhì)體發(fā)生粘連進(jìn)而促使原生質(zhì)體的交融;另外,PEG能增加類脂膜的流動(dòng)性,也使原生質(zhì)體的核、細(xì)胞器發(fā)生交融成為可能。交融技術(shù)要點(diǎn):交融液:CaCl2·2H2O 810mmolKH2PO4 0.7mmo
4、l甘露醇或山梨醇 0.51.0molpH 5.6誘導(dǎo)液:交融液+PEG 2045%稀釋液:A液g/100mlpH6.0 B液g/100mlpH10.5葡萄糖 7.21 甘氨酸 0.375CaCl2·2H2O 0.79 NaOH 0.169DMSO 10ml2.電交融法與PEG交融比較起來(lái),電交融有三大優(yōu)點(diǎn):一是不存在對(duì)細(xì)胞的毒害問(wèn)題;二是交融效率高;三是交融技術(shù)操作簡(jiǎn)便。電交融儀的構(gòu)造特點(diǎn):一是交變電場(chǎng)部分;一是高頻直流電擊部分。電交融的根本過(guò)程:細(xì)胞膜的接觸:當(dāng)原生質(zhì)體置于電導(dǎo)率很低的溶液中時(shí),電場(chǎng)通電后,電流即通過(guò)原生質(zhì)體而不是通過(guò)溶液,其結(jié)果是原生質(zhì)體在電場(chǎng)作用下極化而產(chǎn)生偶極子,從而使原生質(zhì)體嚴(yán)密接觸排列成串??戳?amp;lt;高中生物植物體細(xì)胞雜交技術(shù)知識(shí)點(diǎn)>的人還看了:1.高中生物選修3知識(shí)點(diǎn)匯總2.高中生物植物組織培養(yǎng)知識(shí)
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