水楊酸鈉藥代動力學(xué)實(shí)驗(yàn)分析.

1、全血水楊酸鈉藥物代謝動力學(xué)參數(shù)的測定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆账幬锎x動力學(xué)參數(shù)的意義及其測定方法，掌握用分光光度法測定水楊酸鈉（ sodium salicylate ）的血藥濃度。二、實(shí)驗(yàn)動物：家兔 體重 2.585kg性別：雌三、實(shí)驗(yàn)藥品：20%烏拉坦、生理鹽水、0.5%水楊酸鈉、0.06%水楊酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液、10%三氯醋酸、10%三氯化鐵、蒸餾水水楊酸鈉在酸性環(huán)境中成為水楊酸（salicylic acid ），與三氯化鐵生成一種紫色絡(luò)合物。該絡(luò)合物在520nm 波長下比色，其光密度與salicylic acid濃度成正比。反應(yīng)式為：四、實(shí)驗(yàn)器材：電子天平、兔臺、5ml球、頭皮針、 10ml 離心管、

2、和 1ml 槍頭、 5ml 注射器、 6 號針頭、手術(shù)器械、動脈插管、棉722 分光光度計(jì)、離心機(jī)、渦旋混勻器五、實(shí)驗(yàn)方法1、 取 10 支 10ml 試管，用0.5%肝素潤濕管壁。2、 家兔稱重，從兔耳緣靜脈注射20%烏拉坦（ 1g/kg 體重，注射了13ml），待兔麻醉后，將其仰臥，先后固定四肢及兔頭(此時(shí)家兔驚醒，補(bǔ)助烏拉坦6ml) 。3、 剪去頸前部兔毛，正中切開皮膚5-6cm，用止血鉗縱向分離軟組織及頸部肌肉，暴露器官及與氣管平行的頸動脈。分離頸動脈，行頸動脈插管。手術(shù)完畢后，用溫?zé)岬纳睇}水紗布覆蓋手術(shù)創(chuàng)口。靜脈注射肝素， 劑量為 1000U/kg 體重（約為 2.58ml ）。4

3、、 取 1 支 10ml 試管，家兔頸動脈取血1.5ml，搖勻試管內(nèi)血液，防止凝血。5、 沿對側(cè)耳緣靜脈緩慢注射10%水楊酸鈉150mg/kg （因注射過程中發(fā)現(xiàn)部分藥品漏出，補(bǔ)注了一部分，估計(jì)約為3.9ml）。于注射后1、3、5、10、20、50、80、110min分別頸動脈放血1.5ml 入相應(yīng)的試管并搖勻。6、 取 10 支 10ml 離心管，水楊酸注射前取血管子標(biāo)為“對照”，水楊酸注射之后不同時(shí)間取血管標(biāo)為相應(yīng) “取血時(shí)間” ，另有 1 個(gè)管子沒有取血， 直接加入配置好的0.06%水楊酸鈉標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)為“標(biāo)準(zhǔn)”，按下表加入樣品及試劑：試管號10%三氯制酸全血（ ml）0.06%水楊酸蒸餾水

4、（ ml ）（ ml）鈉（ ml ）對照4101標(biāo)準(zhǔn)4110各取血時(shí)間41017、 各試管用渦旋混勻器充分混勻，2000rpm，離心 10min。8、 各試管取上清液3ml 加入另一套干凈試管中，再加入10%三氯化鐵0.3ml ，混勻顯色。以對照管調(diào)零，再722 分光光度計(jì)上讀取 520nm 的 OD 值。9、 求出水楊酸鈉在家兔體內(nèi)的血藥濃度（ Y ）。先求出標(biāo)準(zhǔn)管濃度 （ Y 0）與 OD 值（ X 0）的比值（ K ）， K=Y 0/X 0, Y=XK 。10、繪出藥 -時(shí)曲線，以水楊酸鈉濃度的對數(shù)值為縱坐標(biāo)，對應(yīng)時(shí)間橫坐標(biāo)作圖，分析水楊酸鈉藥動力學(xué)模型及藥動學(xué)參數(shù)計(jì)算。六、注意事項(xiàng)1.

5、頸總動脈插管術(shù)。2.取血前注意用肝素潤濕注射器和針頭，取血后注意用肝素封管，避免血液凝固。3.注意取藥時(shí)間的精準(zhǔn)性。4.注意先放掉殘留在管中的液體后再放出的血才為該被收集的血液， 不要誤取了管中殘留的血液和肝素等。5.離心后不要用力搖晃細(xì)管避免沉淀物溶解。6.每次加樣時(shí)劑量一定要準(zhǔn)確。七、實(shí)驗(yàn)記錄采血時(shí)間校零前實(shí)測數(shù)據(jù)校零后數(shù)據(jù)計(jì)算所得藥物濃度(mg/ml)對照0.18500標(biāo)準(zhǔn)0.2260.0410.06010.260.0750.10930.2290.0440.06450.2330.0480.070100.2280.0430.063200.2220.0370.054500.165-0.020

6、-0.029800.163-0.022-0.0321100.154-0.031-0.045八、數(shù)據(jù)分析：因?yàn)楹笕M測量數(shù)據(jù)偏低， 甚至低于對照組， 導(dǎo)致計(jì)算所得的血藥濃度變?yōu)樨?fù)數(shù)， 這明顯是不現(xiàn)實(shí)的。 因此在之后的軟件分析中， 將后三組血藥濃度視為 0 進(jìn)行分析 （即舍棄后三組數(shù)據(jù)）。分析時(shí)采用的程序?yàn)?PKSolver Compartmental Analysis Report （ Version 2.0 ），具體分析結(jié)果如下：PKSolver Compartmental Analysis Report= Version 2.0 =User InformationAnalyst:UserDa

7、te:2014-4-15Time:15:03:48User SettingsTime Unit:minConcentration Unit:mg/mlDose:390Dose Unit:mgNumber of compartment:2Fitting Weight:1Model PKSolver #206:Compartmental Analysis of Plasma Data after IV Bolus InputSummary TableTimeConcln(Conc)Conc_preResidualWeight11.092560.0885235661.092552357.64997E

8、-06130.6439-0.440211840.680482934-0.03658293150.70244-0.353195290.6636059430.0388340571100.62927-0.463194860.6233290470.0059409531200.54146-0.613486080.54996059-0.008500591Calculation ResultsParameterUnitValueAmg/ml36.30245325Alpha1/min4.521111854Bmg/ml0.706485351Beta1/min0.012522792ParameterUnitVal

9、uek101/min0.574267217k121/min3.860777535k211/min0.098589895t1/2Alphamin0.153313433t1/2Betamin55.3508486C0mg/ml37.00893861V(mg)/(mg/ml)10.53799473CL(mg)/(mg/ml)/min6.051624903V2(mg)/(mg/ml)412.6675785CL2(mg)/(mg/ml)/min40.68485331AUC 0-tmg/ml*min20.52873111AUC 0-infmg/ml*min64.44550121AUMCmg/ml*min24

10、506.838365MRTmin69.932552Vssmg/(mg/ml)423.2055732DiagnosticsValuer obs-pre0.991984112SS0.00295395WSS0.00295395R20.998941569WR20.998941569SE0.054350253AIC-21.1230601SC-22.68530845Charts Output1.2Observed1Predicted)lm/0.8gm(noit0.6artnecn0.4oC0.200510152025Time (min)10ObservedPredicted)lm/gm(noita1rtnecnoC0.10510152025Time (min)分析：由于靜脈給藥， 所以并沒有表示藥物在體內(nèi)吸收分布的上升峰，圖示的是給藥后血藥濃度直接大幅上升， 然后表現(xiàn)為持續(xù)較長時(shí)間的下降支， 反映藥物的代謝排泄相。由圖及表格分析可知 :T=0 時(shí)， C=0.109T=20 時(shí)， C=0