基底細(xì)胞雞尾酒標(biāo)記法在前列腺穿刺組織中的應(yīng)用價值

1、基底細(xì)胞雞尾酒標(biāo)記法在前列腺穿刺組織中的應(yīng)用價值 07-11-23 11:16:00 作者：李雯，劉國榮，梁顏笑編輯：studa20【關(guān)鍵詞】 前列腺腫瘤；免疫組織化學(xué)；基底細(xì)胞雞尾酒；P63；34E12摘要 目的：評價基底細(xì)胞雞尾酒抗體P63/34E12在前列腺穿刺組織中的應(yīng)用及價值。方法：應(yīng)用免疫組化Envision二步法，檢測70例良性前列腺增生及28例前列腺腺癌中P63/34E12的表達(dá)情況，并同時用P63、34E12單標(biāo)記法作為對照。結(jié)果：P63/34E12雞尾酒及P63、34E12標(biāo)記前列腺基底細(xì)胞的強陽性率分別為87.1%、60%和41.4%，雞尾酒法與單標(biāo)記法相比具差異有顯著性

2、，(P0.01)，且P63與34E12的強陽性率二者差異具有顯著性意義(P0.05)。結(jié)論：雞尾酒標(biāo)記法能明顯提高對基底細(xì)胞免疫反應(yīng)的強度和敏感性，且特異性強，可作為前列腺疾病診斷及鑒別診斷的一種有效輔助手段，具有重要的臨床應(yīng)用價值。關(guān)鍵詞 前列腺腫瘤；免疫組織化學(xué)；基底細(xì)胞雞尾酒；P63；34E12Value and Application of Basal Cell Cocktail(P63/34E12)in Prostate Needle Biopsy SpecimensAbstract:Objective To evaluate the application and value of

3、 basal cell cocktail antibodies(P63/34E12)in prostate needle biopsy tissue.Methods Immunohistochemistry Envision 2step techniques was used to detect the expression of P63/34E12 in 70 cases of benign prostatic hyperplasia and 28 cases of prostatic adenocarcinoma,in contrast to P63 and 34E12 single ma

4、rk methods.Results The strong positive rates of the basal cells marked by P63/34E12 cocktail,P63 and 34E12 methods are respectively87.1%,60.0% and 41.4%.There is significantly difference between cocktail and single mark methods.The P values are both less than 0.01,with notable significance in the di

5、fference of strong positive rates of P63 and 34E12(P0.001).Conclusion Cocktail marking can significantly raise the intensity and sensitivity of reaction to the immunoreaction of the basal cells.With its notable specificity,it can be used as an effective supplementary means in the diagnosis and discr

6、imination and thus has significant application value.Key words:Prostatic neoplasms;Immunohistochemistry;Basal cell cocktail;P63;34E12前列腺良、惡性疾病鑒別診斷是臨床病理診斷中的難題之一，尤其是對病灶局限的穿刺活檢標(biāo)本，僅僅依靠常規(guī)HE切片極易造成誤診，常需借助免疫組化染色證實基底細(xì)胞的存在與否作為前列腺癌的診斷工具之一。我們把基底細(xì)胞特異性標(biāo)記物P63和34E12聯(lián)合使用，采用雞尾酒標(biāo)記法進(jìn)行染色，同步觀察其表達(dá)情況，探討P63/34E12雞尾酒抗體在前列腺穿刺

7、組織中的應(yīng)用價值。1材料與方法1.1材料選取本院2000年至2005年前列腺穿刺活檢標(biāo)本共98例，其中前列腺良性增生70例，前列腺腺癌28例?；颊吣挲g61歲90歲，平均年齡70歲。所有標(biāo)本經(jīng)10%中性甲醛液固定，常規(guī)石蠟包埋，2 m厚連續(xù)切片，每例3張，粘附于經(jīng)APES處理的玻片上，分別用于P63、34E12單標(biāo)記和P63/34E12雞尾酒聯(lián)合標(biāo)記。P63及34E12均為單克隆濃縮型抗體，購自上海長島公司?？贵w稀釋液及Envision試劑盒為DaKo公司產(chǎn)品。1.2方法先用抗體稀釋液分別配制P63單克隆抗體(1200)和34E12單克隆抗體(1100)若干量，然后將二者等量混合，充分搖勻，備用

8、。免疫組化染色采用Envision二步法，組織切片首先用0.3%過氧化氫阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，然后經(jīng)微波抗原修復(fù)，PBS沖洗，分別滴加上述已配制好的一抗，37 孵育45 min，PBS沖洗，滴加Envision試劑，37 孵育25 min，PBS沖洗，DAB顯色2 min10 min，蘇木素復(fù)染、脫水、透明、封片。1.3結(jié)果判定P63蛋白陽性定位于前列腺基底細(xì)胞的胞核，呈棕黃色，34E12表達(dá)于前列腺基底細(xì)胞胞質(zhì)，呈棕黃色，雞尾酒P63/34E12陽性細(xì)胞胞核、胞漿同時呈棕黃色。著色細(xì)胞5%為弱陽性(+)；2650%為中度陽性(+)；50%為強陽性(+)；不著色為陰性(-)。1.4統(tǒng)計學(xué)處理采

9、用2檢驗。2結(jié)果見表1。表1P63、34E12及P63/34E12標(biāo)記結(jié)果(略)注：各組強陽性率對比，P63與P63/34E12：2=13.26，P0.01；34E12與P63/34E12：2=31.86，P0.01；P63與34E12：2=4.829，P0.05。70例良性前列腺增生中，P63單標(biāo)記法基底細(xì)胞胞核呈陽性表達(dá)，強陽性率為60.0%，少數(shù)腺體可見跳躍式陽性，結(jié)構(gòu)不連續(xù)，個別腺體未見基底細(xì)胞圍繞。34E12單標(biāo)記基底細(xì)胞胞漿陽性，強陽性率為41.4%，部分腺體呈間斷性表達(dá)，甚至完全陰性；P63/34E12雞尾酒標(biāo)記法染色結(jié)果基底細(xì)胞胞核及胞質(zhì)均呈陽性表達(dá)，強陽性率為87.1%，極少見不連續(xù)表達(dá)現(xiàn)象，染色結(jié)果明顯強于單標(biāo)記法，強陽性表達(dá)率差異有顯著性(P0.01)。28例前列腺腺癌，P63、34E12單標(biāo)記法及P63/34