左旋門冬酰胺酶兩種用藥方式治療兒童淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤的藥代動(dòng)力

1、    左旋門冬酰胺酶兩種用藥方式治療兒童 淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤的藥代動(dòng)力學(xué)研究        【摘要】目的通過對20例惡性淋巴系統(tǒng)腫瘤患兒的治療，探索左旋門冬酰胺酶(L-ASP)安全、有效的用藥方式，指導(dǎo)臨床治療。方法將20例患兒隨機(jī)分為每天用藥組及隔天用藥組，兩組均用8次L-ASP，每次6 000 KU/m2(1 KU=1 IU)靜脈滴注，每次用藥前檢測血清中L-ASP活性及其底物門冬酰胺水平，以比較兩種用藥方法的差異性，并觀察其不良反應(yīng)之差異。結(jié)果每天用藥組血清中

2、L-ASP谷值水平明顯高于隔天用藥組(P<0.01)；兩組門冬酰胺最低濃度的平均水平及分布情況差距不大(P>0.05)；每天用藥組消化道反應(yīng)、血清清蛋白水平下降及ALT(GPT)升高的發(fā)生率明顯高于隔天組(P<0.05)。結(jié)論隔天每次L-ASP 6 000 KU/m2靜脈滴注為安全、有效的用藥方法?！娟P(guān)鍵詞】天冬酰胺酶淋巴系統(tǒng)疾病藥代動(dòng)力學(xué) Comparative pharmacokinetic study of two different ways of using L-asparaginase as the main drug in combination chemoth

3、erapWANG Yaoping?,JIANG Hui,XIE Xiaotian, et al.Shanghai Pediatric Medical Center, Shanghai Second Medical University, Shanghai200092【Abstract】ObjectiveTo search for a safer and more effective way of using L-asparaginase as the main drug in combination protocol. MethodTwenty children with lymphoid m

4、alignancies were randomly divided into two groups: Group A and Group B, for L-asparaginase therapy. Group A: Leunase 6 000 KU/m2，continuous intravenous injection every day for 8 times；Group B:Leunase 6 000 KU/m2，continuous intravenous injection every other day for 8 times. Blood samples were collect

5、ed every day for group A and every other day for group B and serum L-asparaginase and L-asparagine levels were tested. ResultsThe pre-treatment mean value of serum L-asparaginase in group A was significantly higher than that in group B (P<0.01).The levels of L-asparaginase in group A tended to in

6、crease day by day during the therapeutic course while those in group B without increasing tendency. The L-asparagine levels and their dynamic changes were not significantly different between the two groups (P>0.05).ConclusionThe administration of Leunase by continuous intravenous injection every

7、other day is a much safer and effective protocol and worthy of recommendation.【Key words】AsparaginasesLymphatic diseasesPharmacokinetics淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤是危及兒童生命的主要惡性腫瘤。近年來由于應(yīng)用以左旋門冬酰胺酶(L-ASP)為主的聯(lián)合化療1-3，預(yù)后有了明顯改觀，完全緩解(CR)率達(dá)98以上，5年以上無病生存率已大于70。L-ASP的作用機(jī)制為使對左旋門冬酰胺為必需營養(yǎng)素的淋巴系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞，通過L-ASP的作用，分解而減少宿主血中左旋門冬酰胺，使腫瘤呈營養(yǎng)障

8、礙以抑制增殖。L-ASP進(jìn)入中國市場多年，療效肯定。現(xiàn)國內(nèi)基本存在每天和隔天應(yīng)用兩種用藥方法。我們通過檢測用了L-ASP后，血中L-ASP的活性及其底物（左旋門冬酰胺）的水平，比較兩種用藥方式在治療兒童淋巴系統(tǒng)腫瘤中的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及臨床不良反應(yīng)，以探索L-ASP安全、有效的用藥方式，指導(dǎo)臨床治療。病例和方法1病例20例淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤患兒19例急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL），1例非霍奇金淋巴瘤期，其中男15例，女5例，中位年齡8歲（214歲），相繼于1997年6月1998年1月入住本協(xié)作組各醫(yī)院，隨機(jī)分為兩組（每組10例)。兩組基本聯(lián)合用藥方案均相同，為潑尼松柔紅霉素長春新堿，在此基礎(chǔ)上再加L

9、-ASP（日本協(xié)和發(fā)酵工業(yè)株式會(huì)社產(chǎn)品）。A組：L-ASP 6 000 KU/m2，每天靜脈滴注，共8天；B組：L-ASP 6 000 KU/m2，隔天靜脈滴注，共8次。每例患兒在每次靜脈滴注L-ASP前12小時(shí)抽靜脈血3 ml，以3 000×g離心5分鐘，分離血清，共8次（第1次為治療之前，后7次為治療中）。分離出的血清等分為A、B兩份。A部分（400 l）立即加100 g/L磺基水楊酸100 l充分混勻，以進(jìn)行脫蛋白處理，然后在常溫下以3 000×g離心5分鐘，取出上清液，80 冰箱保存。整個(gè)處理過程盡量在1520分鐘內(nèi)完成，此標(biāo)本用于測定天門冬酰胺濃度；B部分（400

10、 l）立即置于80 冰箱中保存，用于測定L-ASP活性（到此為止標(biāo)本的前處理工作由各協(xié)作醫(yī)院完成，以下正式實(shí)驗(yàn)部分在上海市衛(wèi)生防疫站中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行）。2L-ASP活性測定4，5將100 l血清加于900 l 0.044 mmol/LL-ASP緩沖液中，在37 中孵育45分鐘，然后加入245 g/L 三氯醋酸250 l，離心沉淀后取500 l上清液加到納氏（Nesslers）溶液中（納氏試劑由上海市衛(wèi)生防疫站提供），混勻放置10分鐘，然后用Shimadzu UV260紫外比色計(jì)比色，波長450 nm，然后將讀得的吸光度與按標(biāo)準(zhǔn)濃度(0.01，0.02，0.04，0.05，0.10，0.50，1.

11、00，2.50 mmol/L)所作的硫酸銨-納氏標(biāo)準(zhǔn)曲線所得的吸光度相比較，按每分鐘釋放出的氨的微克分子數(shù)作為酶活性單位。3門冬酰胺測定按Lenda等報(bào)道的方法6，用RP-HPLC技術(shù)檢測血清中門冬酰胺水平，并用RF535儀，在波長455 nm及波長335 nm處作熒光讀數(shù)，將此測定值與按標(biāo)準(zhǔn)濃度0.10，0.25，0.50，1.00，5.00，10.00，50.00，100.00 mol/L作的標(biāo)準(zhǔn)曲線所得的讀數(shù)作比較。本方法測定限度為0.1 mol/L。4評估標(biāo)準(zhǔn)5谷值是指前一次輸注L-ASP后接著應(yīng)用L-ASP前血中門冬酰胺酶的活性和門冬酰胺的濃度。生理情況下，血門冬酰胺水平約為40.0

12、0 mol/L?；純褐委熐伴T冬酰胺值在正常范圍內(nèi)，用L-ASP后門冬酰胺缺乏程度分級：完全缺乏為0.1 mol/L；幾乎完全消失為>0.10.5 mol/L；中度減少為>0.51.0 mol/L；輕度減少為>1.040.0 mol/L；不減少為>40.0 mol/L。將兩組所得的結(jié)果，進(jìn)行t檢驗(yàn)。結(jié)果1兩組L-ASP活性水平比較在每天序貫應(yīng)用L-ASP前測得的L-ASP活性為（2 110±349）U/L（10例患兒70份標(biāo)本中位值2 250 U/L），發(fā)現(xiàn)每天用藥組體內(nèi)L-ASP酶水平有日漸增高的趨勢；隔天序貫應(yīng)用L-ASP前測得的L-ASP活性為（695&#

13、177;92）U/L（10例患兒68份標(biāo)本中位值554 U/L），隔天用藥組體內(nèi)L-ASP酶水平分布較均勻，無增高趨勢。提示每天用藥組的L-ASP活性谷值水平的平均值明顯高于隔天用藥組（P<0.01）。2兩組門冬酰胺水平比較2.1每天序貫應(yīng)用L-ASP前測得的門冬酰胺水平為（0.49±0.05） mol/L（10例患兒69份標(biāo)本中位值0.46 mol/L）；隔天序貫用藥組所測得的門冬酰胺水平為（0.45±0.06）mol/L（10例患兒69份標(biāo)本中位值0.43 mol/L）。2.2根據(jù)評估標(biāo)準(zhǔn)：每天序貫應(yīng)用L-ASP組，門冬酰胺完全缺乏率為1.5（69份標(biāo)本中1份），

14、幾乎完全消失率為59.4（69份標(biāo)本中41份），中度缺乏率為39.1（69份標(biāo)本中27份）；隔天序貫用藥組，完全缺乏率為5.8（69份標(biāo)本中4份），幾乎完全消失率為56.5（69份標(biāo)本中39份），中度缺乏率為37.7（69份標(biāo)本中26份）。提示兩組每次用藥前測定的門冬酰胺最低濃度的平均水平及分布情況的差距不大（P>0.05）。3兩組不良反應(yīng)比較每天用藥組納差6例，惡心、嘔吐6例，血清清蛋白降低3例，ALT(GPT)升高7例；隔天用藥組納差7例，惡心、嘔吐4例，ALT升高3例。以上結(jié)果提示，每天用藥組的消化道反應(yīng)、血清清蛋白水平下降及ALT(GPT)水平升高的發(fā)生率均明顯高于隔天組（經(jīng)U檢

15、驗(yàn)，P<0.05）。討論從本研究結(jié)果可以看出，雖然每天用藥組患兒血清中L-ASP活性較隔天用藥組高2倍以上，但血清中門冬酰胺水平同隔天用藥組相近，亦只不過達(dá)到幾乎完全消失標(biāo)準(zhǔn)。提示如以門冬酰胺水平作為一個(gè)效果指標(biāo)，隔天用藥組已可達(dá)到足夠低的門冬酰胺的水平，故在臨床治療上，隔天用6 000 KU/m2 的L-ASP劑量已經(jīng)足夠。同時(shí)，每天用藥組的不良反應(yīng)發(fā)生率明顯高于隔天用藥組，這與每天用藥組所達(dá)到的過高的酶活性有關(guān)系。故提示：隔天用L-ASP 6 000 KUm2靜脈滴注為安全、有效的方案，值得推薦應(yīng)用。作者單位：王耀平200092上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬上海兒童醫(yī)學(xué)中心蔣慧陸正華上海市兒童

16、醫(yī)院謝曉恬上海鐵道醫(yī)科大學(xué)附屬甘泉醫(yī)院杜玲珍王耀莉上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬瑞金醫(yī)院參考文獻(xiàn)1Sallas SE,Hitchcock BS,Gelber R,et al.Influence of intensive asparaginase in the treatment of childhood non-T-cell acute lymphoblastic leukemia. Cancer Res,1983,43：5601-5607.2Broome JD. L-asparaginase:discovery and development as a tumor-inhibitory agent.C

17、ancer Treat Rep,1981,65 Supp14:111-114.3Chabner BA.Enzyme therapy:L-asparaginase.In: Chabner BA,Collins JM,eds.Cancer chemotherapy.Principles and practice.Philadelphia:J B Lippincott Company,1990. 397-407.4Boos J.Pharmacokinetics and drug monitoring of L-asparaginase treatment.Intern J Clin Pharmacol Ther, 1997，35：96-98.5Boos J,Werber G,Ahike E,et al.Monitoring of asparaginase activity and asparagi