唾液腺染色體觀察_圖文

1、果蠅唾腺染色體標(biāo)本的制作和觀察一、實驗?zāi)康?、練習(xí)果蠅幼蟲唾腺的分離技術(shù)；2、學(xué)習(xí)制作唾腺染色體標(biāo)本的方法；3、觀察、識別果蠅唾腺染色體的特征。二、實驗原理果蠅幼蟲唾腺的細胞核非常大，唾腺染色體比其他細胞染色體大200多倍。由于重復(fù)復(fù)制后的眾多染色線沒有分開，一條染色體內(nèi)含有染色體線多達千條以上，是通過核內(nèi)有絲分裂形成的多線染色體。一般來說，多線染色體是處于永久性前期中的一種體細胞染色體配對形式，普遍存在于雙翅目昆蟲某些物種的幼蟲唾腺細胞內(nèi)。唾腺染色體的特征：巨大；體細胞配對，染色體只有半數(shù)（n）；各染色體著絲粒部分互相靠攏形成染色中心；有深淺不同、疏密各別的橫紋。唾腺染色體經(jīng)染色后出現(xiàn)的橫紋

2、的數(shù)目和位置常常恒定，標(biāo)志著物種的特征。當(dāng)染色體上有結(jié)構(gòu)變異，如缺失、重復(fù)、倒位、易位等，很容易在唾腺染色體上鑒別。例如：果蠅號染色體上16A區(qū)中有六條橫紋的是正常復(fù)眼，有12條橫紋的是棒狀眼，有18條橫紋的是加倍棒狀復(fù)眼。三、實驗材料果蠅三齡幼蟲；解剖鏡，顯微鏡，鑷子，解剖針，載玻片，蓋玻片，吸水紙，生理鹽水，醋酸洋紅四、實驗步驟1、幼蟲培養(yǎng)置于16-18下飼養(yǎng)，當(dāng)幼蟲爬上瓶壁準(zhǔn)備化蛹前，即為三齡幼蟲，此時蟲體肥大，便于解剖，是制備唾腺染色體的最理想時期。2、幼蟲的解剖將載玻片置于解剖鏡下，滴一滴生理鹽水，將幼蟲置于其中，左手持解剖針按住幼蟲前端1/3處，固定幼蟲。右手持針按住幼蟲頭部正中，

3、快速用力向右拉，把頭部從身體拉開，腺體即隨之而出。唾腺為半透明小囊狀，其上附有脂肪帶，食道兩側(cè)各一個。找到唾腺后盡可能把腺體上的脂肪剔除。3、染色前處理清除殘體，使載片上只留下唾腺。4、酸解：把腺體放入1N HCl中浸泡2-3分鐘，dH2O洗3次。5、染色滴上幾滴醋酸洋紅于唾腺上，染色30分鐘，染色時用鑷子將唾腺稍搗碎。6、壓片在載片上加蓋玻片，蓋片上覆蓋一吸水紙，然后以拇指適當(dāng)用力壓片，將唾腺細胞核壓破，以染色體伸展而不破碎為好。7、顯微鏡下觀察五、實驗結(jié)果從圖中能明顯觀察到：唾腺染色體上巨大，具有深淺不一和疏密相間的橫紋及條帶，也大致能將各對染色體分開（但無法具體辨別是哪一條對染色體）。六

4、、分析與討論1、本次實驗關(guān)鍵操作有以下幾步：1）從果蠅幼蟲中拉出唾液腺。解剖針的位置一定要找準(zhǔn)，然后迅速將幼蟲頭部與身體分離，這樣才能完整清晰的分離出人字形的唾液腺，而且這樣分離出的唾液腺上不帶或很少帶脂肪袋。若不幸將唾液腺與腸道、頭部其他組織混在一起，掌握以下技巧也能成功將唾液腺找出來：唾液腺與腸道的顏色不同，腸道更偏黃，而唾液腺是白色并更加透明。唾液腺上帶的脂肪袋也是很好的判斷依據(jù)。2）解離、染色。解離及染色的過程中一定要注意滴加液體時小心唾液腺被洗跑或者被吸水紙吸走。染色時間要視染色劑的質(zhì)量來定，若染色劑顏色淺，應(yīng)染30min以上。注意染色劑中是否有殘渣，若殘渣太多應(yīng)用吸水紙吸去。3）壓片。這是最容易出錯的一步。壓片時應(yīng)滴加一小滴水，將蓋玻片輕輕放在載玻片上，其上蓋一張吸水紙。用手固定住蓋玻片邊緣使其不會移動，找準(zhǔn)唾液腺所在位置后果斷用力地用解剖針針柄向下壓或者敲擊，才能壓出云霧狀的效果。4）觀察。由于這次染色不是很深，在顯微鏡下難以將沒有染太深的染色體與背景中大量破碎的細胞（爆漿）區(qū)分開，如果不仔細觀察尋找，很容易錯誤地以為視野里沒有壓好的染色體。2、總結(jié)本次