代寫外科論文山楂葉總黃酮抗衰老作用的實(shí)驗(yàn)研究

1、代寫外科論文山楂葉總黃酮抗衰老作用的實(shí)驗(yàn)研究    【摘要】  目的探討山楂葉總黃酮（TFHL）對大鼠和小鼠的抗氧化作用。方法分別灌胃給予自然衰老小鼠和D半乳糖致衰老大鼠TFHL，采用生化方法測定小鼠和大鼠全血的超氧化歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）活性，并檢測心、腦組織中脂質(zhì)褐質(zhì)（LF）、丙二醛（MDA）和SOD含量。結(jié)果給予TFHL的衰老小鼠和大鼠心、腦組織中SOD和全血中SOD和GSHPx活力顯著提高，而組織中MDA和LF含量則明顯下降。結(jié)論TFLH能提高組織中抗氧化酶的活性，抑制自由基損傷，防止脂質(zhì)過氧化，具有明顯的抗

2、氧化作用?！娟P(guān)鍵詞】  山楂葉總黃酮 抗氧化 超氧化物歧化酶 氧自由基Abstract:ObjectiveTo study the anti-aging effect of total flavone of hawthorn leaf (TFHL)in mice and in rats.MethodsThe old mice and aged rats induced by Dgalactose were treated with TFHL  through oral gavage.The activities of superoxide dismutase(SOD) an

3、d glutathione peroxidase (GSHPx) in blood, the contents of lipofuscin (LF),malodndaldegyde (MDA) and SOD in brain and heart were determined by biochemical methods.ResultsTFHL could significantly improve the activities of SOD in brain and heart by biochemical methods.ConclusionTFHL has obvious anti-a

4、ging effects.The mechanisms maybe associated with increasing the activities of antioxidation enzymes and preventing lipid peroxidation in tissues.Key words:Flavone;  Hawthorn leaf;  Antiaging;  Superoxide dismutase;  Oxygen free radical    山楂葉總黃酮（total flavone of h

5、awthorn leaf,TFHL）是從山楂葉中提取的總黃酮組分，含有多種黃酮苷、葒草素、葡荊牡黃酮等，具有調(diào)節(jié)血脂，抗心肌和腦缺血，能防止血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化的作用1。近年來，以TFHL作為主要成分的藥物益心酮片和注射液已用于臨床防治冠心病、心絞痛、高脂血癥等均取得一定療效，由此推測TFHL應(yīng)該具有較強(qiáng)的抗氧化和抗衰老的作用，但類似的研究少見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用灌胃給予TFHL探討其對小鼠和D半乳糖致衰老大鼠組織的抗衰老的作用，以期為THFL 在抗氧化和延緩衰老的應(yīng)用提供依據(jù)。1  材料1.1  藥品、試劑與儀器益心酮片購自太極集團(tuán)浙江東方制藥有限公司，0.1 g/片，每片含TF

6、HL32 mg。D半乳糖和硫酸奎寧為上海試劑二廠生產(chǎn)，其余試劑均采用國產(chǎn)分析純。超氧化歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及GSHPx(谷胱甘肽過氧化物酶)試劑盒購自南京建成生物工程研究所。UV2401PC型紫外可見分光光度計(jì)，RF5301PC熒光分光光度計(jì)均為日本SHMADZU公司產(chǎn)品。1.2  動(dòng)物昆明種小鼠，7月齡30只，體重3134 g，雌雄各半。雄性Wistar大鼠40只，體重180210 g，均購自湖北省醫(yī)學(xué)科學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。2  方法2.1  實(shí)驗(yàn)分組昆明種小鼠按性別隨機(jī)分為3組，每組10只。即：生理鹽水對照組和兩個(gè)劑量的益心酮0.1 g/kg或0.2

7、 g/kg（含TFHL32，64 mg/kg）組，另設(shè)1月齡幼年生理鹽水對照組小鼠10只，體重1415 g。小鼠灌胃給藥或生理鹽水。灌胃容積為0.5 ml/只，1次/d，連續(xù)36 d。大鼠隨機(jī)分為正常對照組、衰老模型組和兩個(gè)TFHL 劑量組，每組10只。模型組每日皮下注射D半乳糖48 mg/kg，同時(shí)生理鹽水灌胃10 ml/kg，TFHL劑量組，每組10只。模型組每日皮下注射D半乳糖48 mg/kg，同時(shí)生理鹽水灌胃10 ml/kg，TFHL組皮下注射D半乳糖并分別灌給益心酮0.1 g/kg或0.2 g/kg，連續(xù)40 d。    各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于末次給藥后12 h

8、稱重，取血，并剖取心臟、腦皮層組織，用預(yù)冷的4生理鹽水沖洗表面殘血，濾紙吸干水分，稱重并制備組織勻漿，-80凍存待測。2.2  全血GSH-Px活性及組織SOD活性，MDA含量的測定按DTNB直接法測定GSH-Px活性，SOD活性，MDA含量按試劑盒說明操作。2.3  組織脂褐質(zhì)（Lipofuscin ,LF）含量的測定按Sohal方法，取組織0.2 g用氯仿-甲醇（21）混合液制成勻漿，40水浴5 min，3 000 r/min，離心10 min，取氯仿層測定熒光強(qiáng)度。2.4  統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，以SigmaPlot8.0，SPSS11.0

9、軟件作統(tǒng)計(jì)分析，組間差異比較采用t檢驗(yàn)，P0.05為顯著性標(biāo)準(zhǔn)。3  結(jié)果3.1  TFHL對小鼠全血GSH-Px和SOD活性的作用結(jié)果見表1。7月齡生理鹽水對照組小鼠全血中GSH-Px和SOD活性顯著低于1月齡小鼠對照組（P0.01）。灌胃給予7月齡小鼠TFHL后，小鼠血液中GSH-Px和SOD活性明顯高于同齡小鼠對照組（GSH-Px：P0.05，P0.01；SOD：P0.05，P0.01）。3.2  TFHL對小鼠組織SOD，MDA及LF含量的作用見表1。7月齡生理鹽水對照組小鼠心臟、腦組織中的MDA和LF含量均高于1月齡對照組（均P0.01），而組織中SOD

10、活性亦明顯下降（均P0.01）。給予TFHL（32 mg/kg）后小鼠腦組織中LF和MDA顯著下降（均P0.05），而腦組織中SOD的活性顯著升高（P0.05）。64 mg/kg劑量組較7月齡對照組小鼠心臟、腦組織中MDA和LF含量小鼠呈顯著下降（MDA：P0.01，P0.05；LF：P0.05，P0.05），而心臟、腦組織中SOD的活性明顯增高（P0.01，P0.05）。表1  TFHL對小鼠全血GSH-Px和SOD活性，心臟、腦組織和LF含量的影響（略）TFHL組，32 mg/kg,TFHL組，64 mg/kg；與7月齡對照組比較，*P0.05，*P0.01；n=83.3

11、0; TFHL對大鼠全血SOD和GSH-Px活性的作用見表2。給予TFHL（32，64 mg/kg）后大鼠心肌組織中的MDA和LF含量較模型組顯著降低（MDA：P0.05，P0.01；LF：P0.05，P0.01），大鼠腦組織MDA和LF含量亦較模型組顯著降低（MDA：P0.05，P0.01；LF：P0.05，P0.01），大鼠心臟和腦組織SOD活性較模型組顯著提高（均P0.01）。表2  TFHL對大鼠全血GSH-Px和SOD活性，心臟、腦組織中SOD，MDA和LF含量的影響（略）與模型組比較，*P0.05，*P0.01；n=83.4  TFHL對大鼠全血SOD，MDA及

12、LF含量的作用見表2。給予TFHL（32，64 mg/kg）后大鼠心肌組織中MDA和LF含量較模型組顯著降低（MDA：P0.05，P0.01；LF：P0.05，P0.01），大鼠腦組織中MDA和LF含量亦較模型組顯著降低（MDA：P0.05，P0.01；LF：P0.01，P0.01），大鼠心臟和腦組織SOD活性較模型組顯著提高（均P0.01）。4  討論    氧自由基是機(jī)體內(nèi)氧化代謝的不全產(chǎn)物，主要包括超氧陰離子（O2-），OH-，過氧化氫（H2O2）等。許多心、腦血管疾病的發(fā)生、發(fā)展與氧自由基損傷密切相關(guān)，目前認(rèn)為，占當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域前3位的腫瘤、冠

13、心病和衰老均與自由基引起的膜脂質(zhì)氧化性員傷和DNA受損有關(guān)2。因此，有效抑制脂質(zhì)過氧化和DNA受損已成為生命科學(xué)領(lǐng)域的一項(xiàng)重要課題，一直備受國內(nèi)外學(xué)者和臨床醫(yī)生的重視。    近年葉希韻等3研究TFHL對大鼠局灶性腦缺血的作用表明，TFHL能增加血清SOD的含量，減少血清MDA水平，而紀(jì)影實(shí)等4的研究則表明TFHL能減輕H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。由此提示TFHL可能具有很強(qiáng)的抗氧化作用，而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，灌胃給予TFHL后，衰老小鼠和大鼠心、腦組織中SOD和全血中SOD和GSH-Px活力顯著提高，而機(jī)體的MDA和LF含量則明顯下降，提示TFHL可通過提高抗氧化酶的活

14、性，抑制自由基損傷，防止脂質(zhì)過氧化的作用。    目前國內(nèi)外已將TFHL為主要成分的益心酮等藥物廣泛應(yīng)用于臨床。從我國豐富的藥用植物資源中尋找安全低毒的新藥，是當(dāng)前新藥研究和開發(fā)的重要方向和發(fā)展趨勢。因此，應(yīng)用現(xiàn)代藥學(xué)、藥理的理論深入研究山楂葉總黃酮抗氧化的抗衰老的藥理作用機(jī)制，對進(jìn)一步開發(fā)TFHL的臨床應(yīng)用前景提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。【參考文獻(xiàn)】  1 紀(jì)影實(shí)，李 紅，楊世杰，等.山楂葉總黃酮對H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用J.中國藥理學(xué)通報(bào)，2006，22（6）：760.2 Hahn SM,Sullivan FJ,Deluca AM,Krishna CM,Werstto N,Venzon D.Evaluation of tempol radioprotection in a murine t