大鼠取材方案

1、實(shí)驗(yàn)大鼠取材方案取材內(nèi)容 1. 取人皿汀脈L分頁亠漿、亠涓-80 C保存。2. 取人.帚門叩獻(xiàn)血 分島血I青-80 C保存。3. 農(nóng)人鼠巾 : 犬腺卻 織制各甲狀腺匚瓷觀察標(biāo)木乂余菲 . 沢淺氮訛廉保存峯比 .4. 戰(zhàn)人就胸腺細(xì)次制卜比版汨次匸饑(蟲肅 :木、免寢汎化規(guī)察呼 Y JU 汨織液殂沐橋 保存?zhèn)溆谩?. 敗人和門廠漢 各F嘰織1筈撫農(nóng)琳？仁免疫汕牛觀察標(biāo)木比余匯漢分裝液齟沐揀 保存?zhèn)溆谩?. 敗,m即織 制幻匚漢匚後証瞬林仁免疫汨？化觀護(hù)必 具余汀織分炷液也 冰凍保存?zhèn)溆谩?. 敗人細(xì)燦腳卻制紐川瀏漢匚後証瞬標(biāo)仁免疫汨？化觀護(hù)必貝氏側(cè)分炷液也 冰凍保存?zhèn)溆谩?. 取人闕揚(yáng)系膜淋巴結(jié)落

2、織 制備暢聚慎淋巴 紜免疫糾化 斑察標(biāo)木 貫余組織液氮冰揀保 存。9. 収人和惻卻 制紐| 粘琪嘰織電遵觀嚶標(biāo) -仁免疫汕牛亦鈾 ？訃 兀余紜織分蕙我 氮冰凍保存?zhèn)?用。10. 取大鼠 空腸沮織 制金腸迫粘膜幼織 匚說觀秦械 仁免疫汨 化觀祭標(biāo)木 英余組織分號 液氮冰凍保存?zhèn)?用。11. 敗丿爲(wèi)£可腸汨漢制徉場道牯慎汀漢匚槿死察杠木 .先疫汕比現(xiàn)察標(biāo)木兀余淚漢分臨液氮冰凍保存?zhèn)溆谩?2. 堰人訛?zāi)I糾織 制備芹仔糾親電鏡觀密標(biāo)木 、免疫淚化觀察標(biāo)爪 右腎組織液氮冰棟探 存?zhèn)溆谩?3. 堰興甌 腎匕腺組織 芹測制備腎匕 II 赴匚貌免疫紳 化觀察標(biāo)木 右切腎上腺掖氮彼凍保 存 備用。14

3、. 脫乂誠里凡汨漢 片啊匸備電筈觀奧瑞木、免疫淚化規(guī)験對；木 左怛里丸液氮沐洙保辛備有。試劑及藥品 戊巴比妥鈉或 1 0%水合氯醛、 75%酒精、生理鹽水、多聚甲醛或福爾馬林液、3 戊鯊磷酸器材備皮刀、解剖臺、彎盤、組織剪、眼科剪、 手術(shù)刀柄、刀片、小號彎式血管鉗、 蚊式血管鉗、 眼科鑷、無損傷血管夾、聚乙烯管、三通管、絲線、培養(yǎng)皿、天平、一次性離 2ml 、 1.5ml 、揀存管、那點(diǎn)鉀真空采血佇、徽量移液器、高返離心機(jī)、注肘器10ml 、5ml、2ml 、丿二菌亍貢冰彩、護(hù) : 令：、浪罠取材動(dòng)物 Wistar 大鼠取材步驟 1. 脫材人氐孑視雜食門中竹2. 腹腔注射戊巴比妥鈉 45mg/

4、kg 或 10% 水合氯醛 300mg/kg 將動(dòng)物麻醉。用 5ml 的注射?昭 "IL 5.57 號針頭。腹腔注射時(shí)右手特 注射器 定手的小拒和無 ?名拾孤 住人 窩的尾巴 顯外三個(gè)手拒抓住人 鼠的頸部 便人蹴 対頭部向 孔這樣腹腔屮的器言就公 口然便向胸部 防止注射器刺入時(shí)抵 ?傷人呵、小腸竽器 官。進(jìn)貂涮作輕柔防上蝦傷腹部器官 : ：尤其是對于體重較小的大鼠 腹腔注射時(shí)針頭可以生腹部 皮卞 穿行一小股原離 赧好是札腹部一側(cè)逬針 穿過腹中線站 在腹部的另一側(cè)進(jìn)入腹腔注射左藥物麻緩緩抜出 針頭并輕微旋轉(zhuǎn)針頭 防止漏液匚待 動(dòng)物麻醉成功后仰臥位固定于解剖臺。3. 空英丄引部農(nóng)腹汽毛發(fā)

5、 75% 酒精消毒。4. 沿腹惻匚屮鍍丁刃莖上緣由卜一而I嗚開腹部反狀首卒劍突向兩側(cè)純性剝開.皮肚與皮卜涓織晁嵌腹至淺川氐沿IIMt性別離腹對JL肉剪開腹？旗躺腹腔將肝臚向上融起 顯嵌門并游離靜牒將剪成 斜 11的集乙烯營尖繪廿向肝門方向抽入門苗做 抖取門靜脈血2ml兀卸朮訂犬.燈H節(jié);燈仏將抖取門訕 mu人一次怦.茨心芳 益；I 了置過熨4 國心3000-3500/min10分種？收匕匕沽液 分:吏-80攝氏度保存?zhèn)溆谩?. 巴門F1DI的M吐/ 丿: | :說釗利工卜T L飛訊拽M旳閔？織；卜溝鈍銳結(jié)合:7在卜肢腺補(bǔ)wq仙.丄.-;?. T.r'臚點(diǎn)芳二盛?；皿卞嘰汀卞占養(yǎng)皿中涮洗

6、去血跡。 切取胰腺體部約 1mm x 1mm x 1mm 組織 3 二: 3 ；龍了訐陵也沈沖福爾鳥林液 屮固定 其余組織全部液氮冰凍 保存?zhèn)溆秘闻＠砜偹?帖洗援作器械 ?6. 別眾胛I自汨紜 放置脾臟于盛有無菌生理鹽水的培養(yǎng)皿中涮洗去血跡。從脾臟一端切取 5x 5mm W 當(dāng)廠呼 匸 曠二萃; "i 自二: 二; 汽 月 J 1mm x 1mm x 1mm組織33氏玉陰:吐AM際(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4龍H二:;；上創(chuàng)注液氮冰凍保存?zhèn)溆谩??從劍陽崔加卜衛(wèi)卅文m 拡卜向扶測飩性剝尸！辺心哎卜卿 崔了汕宦忠：誡工空。沿幣屮剪幵胸卿、側(cè)膜 防止損傷胸腺的胸腔阮器:

7、暴肅心臟 找戛I?卜-腔靜脈后惟認(rèn)右心烏 5ml 注射器直接穿刺右心房最大量抽取外周回心靜脈血。加4ml 靜脈血入肝梟禪真亍采擊疔京和置 10 兮匸 4*離心 3000-3500/min 5 分鐘吸出 上 清液 分裝-80 攝氏度 保存?zhèn)溆谩?2ml 參加普通真空 XlUT 氏祁忻置汕複 4C 離心3000-3500/min5 分種吸出上沽液少裝 -80 攝氏度保存?zhèn)溆谩?. 庇卄腸系慎 丁腸系膜根郵計(jì)找淡藍(lán)蘭紿牡樣 淋口結(jié)織織 剔取揚(yáng)系 . 膜湫巴紀(jì)數(shù)枚 hi置于盛有無菌生理鹽水的培養(yǎng)皿中涮洗去血跡。取局部淋巴結(jié)組織浸入多聚甲醛或福爾馬林液屮同定 貞余織織放置丁 -無菌揀耳管 洩氮冰凍保存?zhèn)?/p>

8、用,心管5ml、9上端丁貫門 上端結(jié)扎食管 卜皓首暢遠(yuǎn)端沽扎口腸末端 鈍銳結(jié)仟兀整収 l<W.i?J3o10. 離時(shí)肢J蒂怕希川 熾端姑九沿鬥人看削卄I列鹽水沅洋 那么燈1mmx 1mm x 1mm 胃竇和胃體黏膜組織各 3 京 3 戊為;: 磷燮鹽緩沖液 (PBS0.01mol/LP pH7.4)或 4 戊 週上 咧取比的 0.5-1.0cm 包含胃竇、胃體組織 1 糸 息人禺遼屮舀匚殳懺爾馬林液屮同定 其余胃組織底置丁 -無闌凍徉管 液氮冰襪探存 峯用 .11. 距 treitz 韌帶 10cm 處切取空腸 10cm 冋肓不 10cm 處切取回腸 10cm牛. 口鹽水洗濟(jì)切取約 1m

9、m x 1mm x 1mm 空腸和回腸黏膜組織各 33:. 文喀諫耳芟鹽緩沖液全部啟置丁無菌揀存管液氮冰凍保存?zhèn)溆?12. 沽L哪:切匚管道殺統(tǒng)1:說忙fr: ； L' ； v<4<Hk.? 口臟，般.無由卅匚 栄業(yè)水 沖汎 納烏其収葉和十約 1mm x 1mm x 1mm組織3決3戊 龍滴酸鹽級沖液 (PBS0.01mol/LPpH7.4)或4戊舌兇H芹比，汩織浸人另渥中鯊攻荷爾馬林液屮固定左葉J卜組織稱塵記錄分裝盼全部肢置丁 無菌揀存管液氮冰凍保存?zhèn)溆谩?3. ：腹洪外熾汩袖 狀測石我亍出臟 衣li比氷卄腹啊子匚在腎臟的前方內(nèi)側(cè)和腰卜次的腹面相援 處寸找到皆上腺:右側(cè)腎

10、上腺呈豆?fàn)?長軸指向后內(nèi)側(cè) 方測卵 圖形f軸指向腹 外側(cè)。鈍銳結(jié)合旅取 兩ft!腎匕腺。方側(cè)骨上腺浸入?yún)?聚甲酵或雀爾 馬林液右葉腎r腺放置于 無菌揀存管 液氮冰探保存帛14. 萌開汗腹膜姑扎剪斷雙 側(cè)腎門鈍銳汁介眼卜一雙切？ f肌剔除腎堆吩膜織織股置/盛有無菌匚珅鹽水的堆養(yǎng)山中涮就去血匹J；中間腎門部橫行切卄片側(cè)陰臟 切取上端腎臟1mm x 1mm x 1mm組織33 !殳 舀暁酉；鹽綴沖箱(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4 戊吾同空 %" ' '. 、.菌凍存管心氓;汛浜衛(wèi)存島巾:15. 大鼠的陰囊是由肛門腹側(cè)會陰部皮膚下垂所形成的囊袋。性成熟的大鼠睪

11、丸和附睪下降入？ 1駆續(xù)表川出并突向Q方小心剪開雙側(cè)胡克叮見瑚闘形卑丸鈍銳結(jié)0 ?舷雙側(cè)睪丸、附睪 欣置??？盛有 無菌上理 鹽水曲培養(yǎng)皿屮涮洗去血跡 16?爼門錢述錘貯"別離勺心川樣 口氣借 向上-匚即屮默氐S+捉作 切収仏兀半狀軟骨在內(nèi)的甲狀腺。切取約1mm x 1mm x 1mm組織各3典3戊 ;磷般鹽緩沖液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊一酵固 述共余組織仝部浸入務(wù)聚甲醛或袒爾馬林液中固定。切取左側(cè)睪丸下端1mm x 1mm x 1mm組織3 .袞3 .戊一乍磷腹鹽綻沖液液屮固定 右側(cè)旱丸組？織欣萱丁 無菌揀存管 掖氮冰凍保存?zhèn)?也17. 丈反翩丘=1兩心匚成 敢養(yǎng)辿一們！兌£鄒井位長.腔前縱爲(wèi)1隙世門財(cái)?shù)诨撞扛街⌒囊哺拱俚那柏胺?。找頓結(jié)合兀整聯(lián)卜胸腺敗置丁盛有無 兩牛理鹽水知培養(yǎng)口屮涮洗去血跡。切取胸腺 1mm x 1mm x 1mm組織3-映3戊Hi;琲桂鹽緩沖彼(PBSOQmol/LP pH7.4)或4 戊一 5i;同定切取胸腺5mm x 5mm x 5mm組織1塊浸入多聚甲蘇戍福爾馬林液屮固定其余組織置于無菌凍存管液氮冰凍保存峯用。18. 密牟以卜人骰心總洱很剪開別離雙側(cè)肺臟置于盛有無菌生理鹽水的培養(yǎng)皿中涮洗去血跡。切取左肺 1mm x