克隆酶供體免疫分析

1、克隆酶供體免疫分克隆酶供體免疫分析（析（CEDIACEDIA）主要內(nèi)容主要內(nèi)容n定義n原理n特點(diǎn)n應(yīng)用大片段稱為酶受體（大片段稱為酶受體（E Enzyme nzyme A Acceptor) cceptor) 小片段稱為酶供體（小片段稱為酶供體（E Enzyme nzyme D Donoronor） 有活性的酶有活性的酶有活性的酶有活性的酶ED標(biāo)記的抗原標(biāo)記的抗原一、定義一、定義標(biāo)本中的抗原標(biāo)本中的抗原EDED標(biāo)記的抗原標(biāo)記的抗原活性酶活性酶二、原理二、原理基本原理基本原理：標(biāo)本中的抗原標(biāo)本中的抗原和和ED標(biāo)記的抗原標(biāo)記的抗原與特與特異性抗體競爭結(jié)合，形成兩種抗原抗體復(fù)合物。異性抗體競爭結(jié)合，

2、形成兩種抗原抗體復(fù)合物。ED標(biāo)記的抗原與抗體標(biāo)記的抗原與抗體結(jié)合后由于空間位阻，結(jié)合后由于空間位阻，不能再與不能再與EA結(jié)合結(jié)合。反應(yīng)平衡后，剩余的。反應(yīng)平衡后，剩余的ED標(biāo)標(biāo)記抗原與記抗原與EA結(jié)合，形成具有活性的酶，加入結(jié)合，形成具有活性的酶，加入底物測定酶活力，酶活力的大小與標(biāo)本中抗原底物測定酶活力，酶活力的大小與標(biāo)本中抗原含量呈正比。含量呈正比。三、特點(diǎn)三、特點(diǎn)n1.劑量反應(yīng)曲線線性劑量反應(yīng)曲線線性n2.高敏感度高敏感度n3.操作簡便，快速操作簡便，快速劑量反應(yīng)曲線線性劑量反應(yīng)曲線線性高敏感度高敏感度na. -半乳糖苷的高轉(zhuǎn)換率;nb. 大量的可供選擇的商品化的色原底物, 如氯酚一紅色

3、-半乳糖苷；nc. ED上有許多可供選擇的結(jié)合配體的特殊位點(diǎn)操作簡便操作簡便n可直接在自動生化分析儀中應(yīng)用，節(jié)省了檢驗(yàn)項(xiàng)目的操作時(shí)間n該方法易普及,樣品預(yù)處理快速 , 能夠滿足臨床大批量分析的需要自動生化分析儀自動生化分析儀外觀及主要部件儀器主要性能介紹儀器主要性能介紹n分析速度：分析速度： 800個(gè)測定個(gè)測定/小時(shí)（最大），約小時(shí)（最大），約4.5秒加樣一次秒加樣一次n可分析項(xiàng)目：可分析項(xiàng)目： 86項(xiàng)（帶項(xiàng)（帶ISE的話，最大可達(dá)的話，最大可達(dá)89項(xiàng)），計(jì)算項(xiàng)目項(xiàng)），計(jì)算項(xiàng)目8項(xiàng)項(xiàng)n樣本量：樣本量： 1.535.0l，0.1l可調(diào)可調(diào)n試劑量：試劑量： 20270l，1l可調(diào)可調(diào)n總反應(yīng)體積

4、：總反應(yīng)體積： 120300l, 測光時(shí)必須滿足該條件測光時(shí)必須滿足該條件n光源燈：光源燈： 保質(zhì)期保質(zhì)期750小時(shí)小時(shí)n比色杯：比色杯： 20只只8組共組共160只，依據(jù)杯空白值進(jìn)行更換只，依據(jù)杯空白值進(jìn)行更換n測光系統(tǒng)：測光系統(tǒng)： 采用凹面蝕刻光柵的后分光、雙波長測定方式采用凹面蝕刻光柵的后分光、雙波長測定方式n12個(gè)波長：個(gè)波長：340、405、450、480、505、546、570、600、660、700、750、800nmn穩(wěn)定性高且可有效補(bǔ)償樣本混濁、溶血、黃疸及電源電壓變動引發(fā)的干擾穩(wěn)定性高且可有效補(bǔ)償樣本混濁、溶血、黃疸及電源電壓變動引發(fā)的干擾n測定過程：測定過程： 全反應(yīng)監(jiān)測

5、，全反應(yīng)監(jiān)測，10分鐘測定分鐘測定34次吸光度值。次吸光度值。15分鐘測定分鐘測定53次吸光度次吸光度值值n依據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇相應(yīng)測光點(diǎn)的吸光度值計(jì)算結(jié)果依據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇相應(yīng)測光點(diǎn)的吸光度值計(jì)算結(jié)果n樣本容器：樣本容器： 樣本針有液面探測裝置，可使用原始采血管離出血清后直接上機(jī)測樣本針有液面探測裝置，可使用原始采血管離出血清后直接上機(jī)測定定n試劑試劑： 同一項(xiàng)目最多可加入四步試劑，兩試劑艙位置各同一項(xiàng)目最多可加入四步試劑，兩試劑艙位置各45個(gè)，溫度個(gè)，溫度515。n反應(yīng)溫度：反應(yīng)溫度： 370.1水浴水浴n試劑和樣本試劑和樣本微量化微量化。n儀器儀器線性寬線性寬，量程，量程0-32000。n同樣

6、一個(gè)項(xiàng)目可以同時(shí)輸入血清和尿液同樣一個(gè)項(xiàng)目可以同時(shí)輸入血清和尿液兩兩套參數(shù)套參數(shù)（不占試劑通道）。（不占試劑通道）。n反應(yīng)反應(yīng)過程監(jiān)測過程監(jiān)測，可以察看任意時(shí)間反應(yīng)曲，可以察看任意時(shí)間反應(yīng)曲線和吸光度線和吸光度n樣品可以樣品可以自動預(yù)稀釋自動預(yù)稀釋，便于分析高值樣本。，便于分析高值樣本。四、臨床應(yīng)用四、臨床應(yīng)用n測定茶堿血藥濃度n測定血清地高辛 n監(jiān)測環(huán)孢菌素A的濃度測定茶堿血藥濃度測定茶堿血藥濃度EA 試劑盒（定量的試劑盒（定量的 EA和多克隆抗體）和多克隆抗體）ED 試劑盒（試劑盒（ED 茶堿茶堿 結(jié)合體和酶反應(yīng)底物）結(jié)合體和酶反應(yīng)底物）測定酶活力可以計(jì)算得茶堿濃度測定酶活力可以計(jì)算得茶堿濃度(正比正比)CEDIA420nm測定茶堿血藥濃度測定茶堿血藥濃度試劑盒所帶低標(biāo)和高標(biāo)試劑盒所帶低標(biāo)和高標(biāo)自動生成標(biāo)準(zhǔn)曲線自動生成標(biāo)準(zhǔn)曲線按輸入樣本號順序自動測定按輸入樣本號順序自動測定得到樣