α-乳白蛋白可提高提高壓力承受力差降低面對(duì)壓力時(shí)皮質(zhì)醇水平并改善情緒

1、.-乳白蛋白可提高血漿Trp-LNAA比率、提高壓力承受力差個(gè)體大腦5-羥色胺的活性，降低面對(duì)壓力時(shí)皮質(zhì)醇水平并改善情緒C Rob Markus, Berend Olivier, Geert EM Panhuysen, Jan Van der Gugten, Martine S Alles, Adriaan Tuiten,Herman GM Westenberg, Durk Fekkes, Hans F Koppeschaar, and Edward EHF de HaanAm J Clin Nutr 2000;71:153644. Printed in USA. © 2000 Am

2、erican Society for Clinical Nutrition摘要：研究背景：腦中5-羥色胺的升高可以提高應(yīng)對(duì)壓力的能力，反之負(fù)面情緒與5-羥色胺的降低有關(guān)。大腦對(duì)5-羥色胺合成前體色氨酸的攝取依賴于大腦對(duì)色氨酸的利用率，其因血漿中色氨酸與其他大分子中性氨基酸比值(Trp-LNAA比率)的改變而改變。因此，飲食導(dǎo)致的色氨酸可利用性升高可導(dǎo)致大腦中5-羥色胺的合成增多，尤其有利于提高壓力承受能力差者應(yīng)對(duì)負(fù)面情緒的能力。目的：測(cè)定-乳白蛋白 一種色氨酸含量高的乳清蛋白，是否能夠提高血漿中Trp-LNAA比率、減少負(fù)面情緒以及降低壓力承受力差的個(gè)體面對(duì)急性壓力時(shí)皮質(zhì)醇水平。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：29

3、個(gè)壓力承受力差的受試者和29個(gè)相對(duì)壓力承受力強(qiáng)的受試者參加雙盲、安慰劑控制的實(shí)驗(yàn)研究。受試者在攝入含有豐富-乳白蛋白或酪蛋白后暴露在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的壓力環(huán)境中。并且測(cè)試飲食導(dǎo)致的血漿中Trp-LNAA比率和催乳素的變化。實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)后分別測(cè)試情緒變化、脈搏，皮膚傳導(dǎo)性以及皮質(zhì)醇濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：-乳白蛋白飲食組比酪蛋白飲食組的血漿Trp-LNAA比率高48%（P = 0.0001）。壓力承受力差的個(gè)體伴隨有催乳素的升高（P = 0.001）、皮質(zhì)醇的降低（P = 0.036）以及在壓力環(huán)境中抑郁感的減少（P = 0.007）。結(jié)論：飲食中攝入富含-乳白蛋白可提高血漿中Trp-LNAA比率，且提高壓力承

4、受力差者的應(yīng)對(duì)能力，該調(diào)節(jié)途徑可能是通過大腦中5-羥色胺的變化來調(diào)節(jié)的。關(guān)鍵詞：色氨酸，-乳白蛋白，5-羥色胺，催乳素，皮質(zhì)醇，壓力，情緒前言：大腦5-羥色胺的活性提高很明確是受壓力影響（1,2），而且實(shí)驗(yàn)證實(shí)中樞5-羥色胺功能缺陷會(huì)造成情緒失常例如抑郁癥(3,4)。因此，提高5-羥色胺可以改善對(duì)壓力的適應(yīng)(58)以及預(yù)防情緒的惡化。5-羥色胺由膳食氨基酸色氨酸合成，色氨酸主導(dǎo)或者碳水化合物豐富，蛋白質(zhì)貧乏的（CR-PP）飲食可導(dǎo)致大腦5-羥色胺的含量升高，因?yàn)閮烧叨继岣吡搜獫{中色氨酸與其他大分子中性氨基酸比值(Trp-LNAA比率)，使色氨酸在大腦營養(yǎng)物質(zhì)攝入中占優(yōu)勢(shì)(912)。CR-PP飲

5、食可使血漿中Trp-LNAA比率增高是由于碳水化合物攝入導(dǎo)致葡萄糖濃度升高，引起胰島素的分泌，從而促進(jìn)除了色氨酸的其他大分子中性氨基酸被骨骼肌肉吸收。富含蛋白質(zhì)的飲食會(huì)降低Trp-LNAA比率，因?yàn)樯彼嶂械鞍踪|(zhì)含量極低（1-2%），但其他氨基酸例如纈氨酸、酪氨酸，亮氨酸，異亮氨酸和苯丙氨酸中蛋白質(zhì)含量豐富（25%）。這些飲食對(duì)血漿中Trp-LNAA比率的影響已被多次證實(shí)（13-15）一些研究調(diào)查了飲食改變血漿中Trp-LNAA比率是否對(duì)情緒有影響。雖然在臨床人群中血漿中Trp-LNAA比率升高被證實(shí)會(huì)改善情緒（15，16），但在健康受試者中，證據(jù)薄弱，而且結(jié)果往往是不一致的（17，18）。我

6、們之前認(rèn)為面對(duì)壓力的脆弱程度不同也許可以解釋之前文獻(xiàn)中一些不一致的結(jié)果（14,19）。假設(shè)面對(duì)壓力時(shí)的脆弱程度可以表現(xiàn)為大腦5-羥色胺活動(dòng)水平的升高，在壓力承受力差的個(gè)體面對(duì)急性壓力時(shí)，5-羥色胺系統(tǒng)可能處于超負(fù)荷狀態(tài)，隨后5-羥色胺活性降低，不能滿足功能需求。最新研究發(fā)現(xiàn)，CR-PP膳食可以提高血漿中Trp-LNAA比率并且減少由壓力引起的負(fù)面情緒、降低壓力承受力差個(gè)體的皮質(zhì)醇水平（14）。隨后的研究發(fā)現(xiàn)，在可控或不可控的壓力環(huán)境中，CR-PP膳食均可以減少壓力承受力差個(gè)體的皮質(zhì)醇反應(yīng)和負(fù)面情緒(CR Markus, G Panhuysen, A Tuiten, H Koppeschaar,

7、 未發(fā)表的研究結(jié)果 1999).。飲食對(duì)皮質(zhì)醇濃度的影響令人非常吃驚，因?yàn)橥ǔ０l(fā)現(xiàn)5-羥色胺的前體活動(dòng)會(huì)刺激皮質(zhì)醇的分泌（3）。但是，在急性壓力條件下，大腦5-羥色胺活性提高有利于應(yīng)對(duì)壓力，而且在整個(gè)壓力反應(yīng)過程中5-羥色胺的不同反應(yīng)途徑都參與了進(jìn)來（7,8）。皮質(zhì)醇濃度與抑郁情緒及壓力調(diào)適都有關(guān)系（20,21）；因此，我們假設(shè)對(duì)于壓力承受力差的個(gè)體，CR-PP膳食可通過提高大腦5-羥色胺活性，從而提高應(yīng)對(duì)壓力的能力并減少皮質(zhì)醇反應(yīng)。對(duì)于壓力承受力差的個(gè)體，5-羥色胺活性由于血漿中Trp-LNAA比率的提高會(huì)提高更多，因?yàn)槁詨毫?huì)激發(fā)5-羥色胺系統(tǒng)的敏感性。慢性壓力可以降低大腦5-羥色胺活性

8、，并可通過一個(gè)代償機(jī)制增加5-羥色胺受體功能（22,23）。因此，5-羥色胺受體的敏感性變化被認(rèn)為可以調(diào)解色氨酸增減的效果或抑郁癥的抗抑郁治療效果（24,25）與先前的研究結(jié)果一致，本研究的目的是為了測(cè)定，對(duì)于壓力承受力差的個(gè)體，是否色氨酸可用性和大腦5-羥色胺的增加，是膳食對(duì)負(fù)面情緒和皮質(zhì)醇?jí)毫Ψ磻?yīng)產(chǎn)生影響的原因。如果色氨酸可用性和大腦5-羥色胺的增加是主要原因，那么富含色氨酸的蛋白質(zhì)和CR-PP膳食會(huì)有一樣的效果。因?yàn)?乳白蛋白在所有牛蛋白組分中色氨酸含量最高（26），我們假設(shè)富含-乳白蛋白的蛋白質(zhì)飲食，一樣可以提高Trp-LNAA比率以及中樞的5-羥色胺活性，從而減少壓力承受力差的個(gè)體面

9、對(duì)急性壓力時(shí)的負(fù)面情緒和皮質(zhì)醇反應(yīng)。為了檢驗(yàn)這個(gè)假設(shè)，壓力承受能力高和低的受試者，參加了這個(gè)雙盲、安慰劑控制的壓力實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)中他們獲得富含-乳白蛋白或者酪蛋白的等能量飲食。因?yàn)榇呷樗氐姆置谑艽竽X5-羥色胺機(jī)制的影響（27,28），因此血漿中催乳素的濃度增加就作為大腦5-羥色胺活動(dòng)的增強(qiáng)（29,30）和5-羥色胺系統(tǒng)的敏感性增加的指標(biāo)（31,32）。實(shí)驗(yàn)對(duì)象和方法實(shí)驗(yàn)對(duì)象烏特勒支大學(xué)學(xué)生（n=455）填寫了個(gè)人信息表和荷蘭人格量表中的神經(jīng)過敏癥（IN）測(cè)量測(cè)試表。神經(jīng)過敏癥和以下特征密切相關(guān)：消極情緒（34）、遇事?lián)鷳n傾向、厭惡情緒體驗(yàn)（35）、易受壓力影響（36）。因此，神經(jīng)過敏程度高的個(gè)體經(jīng)

10、常感受到壓力（37）?；谶@些調(diào)查結(jié)果，從這些IN分?jǐn)?shù)在四分位數(shù)最高的學(xué)生中選出29個(gè)受試者（10男和19女）作為壓力承受力差（HS）組（IN分?jǐn)?shù)=26±6；范圍：18-38）。從這些IN分?jǐn)?shù)在四分位數(shù)最低的學(xué)生中選出29個(gè)受試者（9男和20女）作為相對(duì)壓力承受力強(qiáng)（LS）組（IN分?jǐn)?shù)=4.6±1.3；范圍：2-6）。受試者年齡從17歲到34歲（HS組平均年齡為：20.5±3.10歲；LS組平均年齡為：20.9±3.18歲）。排除標(biāo)準(zhǔn)為慢性和當(dāng)前疾病，精神病史，服藥，或長時(shí)間不規(guī)則的飲食。實(shí)驗(yàn)選擇的所有受試者身體質(zhì)量指數(shù)（BMI；單位kg/m2）均在正常

11、范圍，即都在20到25之間（HS組平均BMI：23.15±1.86；LS組平均BMI：23.74±2.0）。因?yàn)榭诜茉兴幙赡軙?huì)影響皮質(zhì)醇反應(yīng)（38），女性受試者會(huì)根據(jù)避孕方法分組。烏特勒支大學(xué)實(shí)驗(yàn)研究機(jī)構(gòu)董事會(huì)批準(zhǔn)了本研究的方案。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)的2天期間，受試者處于實(shí)驗(yàn)壓力環(huán)境中，并給以含有濃縮-乳白蛋白（a-lac飲食）或者酪蛋白（casein飲食）的均衡飲食。這些飲食等能量，并含有等量的蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂肪。a-lac飲食和casein飲食出現(xiàn)順序的影響在受試者間是相互抵消的。考慮到女性受試者的月經(jīng)期，2天的實(shí)驗(yàn)時(shí)間在四個(gè)周均有安排。沒有口服避孕藥的女受試者在月經(jīng)期

12、的中后期（4-10天）參加實(shí)驗(yàn)，口服避孕藥的女受試者在她們服用避孕藥的期間參加實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)期間，2個(gè)受試者分別在9:00和10:00來到實(shí)驗(yàn)室。受試者都是久坐的，并且只允許在書房閱讀。受試者在夜間是禁食的，只允許喝不加糖的水或茶。他們抵達(dá)時(shí)會(huì)吃早餐，10:15或者11:15吃小吃，11:00或12:00吃午餐。午餐后一個(gè)半小時(shí)，取第一個(gè)皮質(zhì)醇唾液樣本，3分鐘后取血液樣本（轉(zhuǎn)移到含EDTA的10ml試管中）。然后受試者被帶到一個(gè)溫控實(shí)驗(yàn)室，坐在電腦屏幕前，給以實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。固定測(cè)量皮膚傳導(dǎo)性的電極和測(cè)量心率的手指傳感器，接下來10分鐘測(cè)量受試者的基礎(chǔ)值。隨后，受試者進(jìn)行一連串計(jì)算機(jī)輔助的測(cè)試和實(shí)驗(yàn)任務(wù)

13、，數(shù)據(jù)都被記錄到實(shí)驗(yàn)軟件包MINDS中（39）。實(shí)驗(yàn)由以下幾部分構(gòu)成：一次情緒量表測(cè)試（POMS；40，）一個(gè)誘導(dǎo)精神壓力的算術(shù)任務(wù)（41），又一次情緒量表測(cè)試（POMS）。第二次唾液樣本在誘導(dǎo)精神壓力任務(wù)結(jié)束時(shí)提取，約在誘導(dǎo)開始后25分鐘；第三次皮質(zhì)醇樣本在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后提取，約在誘導(dǎo)開始后35分鐘。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中記錄心率和皮膚傳導(dǎo)性。第一次情緒量表測(cè)試（POMS）受試者平均花費(fèi)4分鐘，誘導(dǎo)壓力的任務(wù)，25分鐘，第二次情緒量表測(cè)試（POMS），4分鐘。飲食經(jīng)嚴(yán)格控制，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)由一個(gè)并不了解實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮惋嬍碃顩r的實(shí)驗(yàn)助理記錄。飲食實(shí)驗(yàn)期間，等能量的飲食由固定標(biāo)準(zhǔn)的食品組成，并且都提供7995千焦的

14、能量，其中蛋白質(zhì)提供10%能量，碳水化合物提供60%能量，脂肪提供30%能量（表1）。這兩種飲食是很相似的，只有巧克力飲料中蛋白質(zhì)的來源不同。a-lac飲食中的巧克力飲料含有濃縮-乳白蛋白（荷蘭進(jìn)口商，城市，荷蘭），casein飲食中的巧克力飲料含有酪蛋白酸鈉（DMV國際，菲豪，荷蘭）。巧克力飲料是將特意準(zhǔn)備的巧克力粉末與200 mL水混合（在75-80的恒定溫度下），并在早餐20分鐘前后和午餐前20分鐘提供給受試者。這兩種巧克力飲料是等能量的，并且含有等量的蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂肪。添加了調(diào)味朗姆酒以掩蓋巧克力飲料的口味差異。實(shí)驗(yàn)期間，為確保食物都被吃完，每次就餐都有人監(jiān)督。兩種巧克力飲料的

15、營養(yǎng)成分和氨基酸組成都由高效液相色譜分析（Ansynth Service BV, 羅森達(dá)爾，荷蘭），如表2所示。從表中可知，a-lac飲食中的巧克力飲料每千克含12.32g色氨酸（Trp-LNAA比率為8.7），casein飲食中的巧克力飲料每千克含9.51g色氨酸（Trp-LNAA比率為4.7）。情緒量表情緒變化的2次測(cè)定應(yīng)用電腦屏幕上顯示的POMS問卷（40）的荷蘭縮減版，從“完全不同意”到“強(qiáng)烈同意”有5分的差值。第一次測(cè)試在壓力誘導(dǎo)任務(wù)開始之前（5分鐘），第二次測(cè)試在誘導(dǎo)結(jié)束后（25分鐘）。POMS量表包含5個(gè)不同的情緒分量表。其中憤怒量表（范圍：735），抑郁量表（范圍：840），疲

16、勞量表（范圍：630）以及緊張量表（范圍：630）都表示消極的情緒狀態(tài)，活力量表（范圍：525）表示積極的情緒狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)壓力受試者被要求進(jìn)行連續(xù)18次分鐘的小測(cè)試，由于時(shí)間限制他們只能心算，同時(shí)通過耳機(jī)他們會(huì)聽到不同程度的工業(yè)噪音（65,70或者80分貝）。每次小測(cè)試，選擇計(jì)算題在電腦屏幕上一次顯示一個(gè)。固定數(shù)目的計(jì)算題（稱為標(biāo)準(zhǔn)）要做對(duì)。受試者被告知，通過他們的表現(xiàn)可以控制實(shí)驗(yàn)中聽到的噪音強(qiáng)度。如果沒有達(dá)到這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，則不能選擇噪音的強(qiáng)度，而由電腦設(shè)定下次測(cè)試中的噪音強(qiáng)度；達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)則可以選擇下次測(cè)試的噪音強(qiáng)度。正式實(shí)驗(yàn)開始之前，受試者進(jìn)行2次練習(xí)實(shí)驗(yàn)，第一次在無噪音的條件下完成一些算術(shù)題，第二

17、次在3種噪音水平都出現(xiàn)的條件下測(cè)試。通過在電腦屏幕上顯示測(cè)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)、已正確完成的數(shù)目以及測(cè)試剩余時(shí)間，來提高任務(wù)的可信性以及受試者的動(dòng)機(jī)水平。通過操縱測(cè)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)壓力：使所有受試者每個(gè)測(cè)驗(yàn)都無法通過，因而不能選擇下次測(cè)驗(yàn)的噪音強(qiáng)度。通過計(jì)算之前測(cè)試每次計(jì)算所需的平均時(shí)間，設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)總是在受試者能達(dá)到的數(shù)目之上。此任務(wù)已被證明是難以完成的，并可誘發(fā)心理和生理壓力（14,41）。生化分析用含有EDTA的10毫升真空試管收集血樣，并在20下以2650×gmax的轉(zhuǎn)速離心20分鐘。上清液在70下儲(chǔ)存直至分析。血漿中氨基酸含量的測(cè)量，使用了一種先前描述過的、靈敏的、重復(fù)性好并且完全全自動(dòng)的

18、方法（42）。這種方法是基于反相HPLC和鄰苯二柱前衍生，利用一個(gè)5毫米十八烷基硅烷雙色譜柱（125×3毫米內(nèi)徑;相分離，Queenspenny，英國）進(jìn)行測(cè)定。血漿Trp-LNAA比率用血漿色氨酸濃度除以血漿中其他LNAAs的總和，即纈氨酸，異亮氨酸，亮氨酸，酪氨酸，和苯丙氨酸。血漿中催乳素的濃度通過使用標(biāo)準(zhǔn)的放射免疫分析試劑盒（ImmuChem IRMA;ICN制藥，科斯塔梅薩，CA）一式兩份地進(jìn)行測(cè)定，批內(nèi)和批間變異系數(shù)分別為3%和5%。催乳素濃度表示為ug / L。唾液皮質(zhì)醇的測(cè)量第一個(gè)基礎(chǔ)皮質(zhì)醇樣本（-15分鐘），第二個(gè)壓力后樣本（25分鐘），和第三個(gè)壓力后樣本（35分鐘）

19、的獲得都使用Salivette采樣裝置(Sarstedt,Etten-Leur、荷蘭)。利用這種設(shè)備，收集了唾液的小棉簽存儲(chǔ)在特殊試管里直至離心。唾液樣本在20下以2650×gmax的轉(zhuǎn)速離心3分鐘，然后在-23下存儲(chǔ)直至分析。皮質(zhì)醇樣本沒有進(jìn)行分離，而是在一個(gè)烏得勒支大學(xué)醫(yī)院授權(quán)的實(shí)驗(yàn)室利用內(nèi)部競爭放射免疫法和多克隆anticortisol抗體（-K7348）進(jìn)行測(cè)定。1,2-3HN-氫化可的松(NET185;NEN-Dupont,Dreiech、德國)作為示蹤劑檢驗(yàn)色譜的純度。檢測(cè)的下限是0.5nmol/L,批間變異在4.7、9.7和14.0 nmol/L時(shí)分別為11%、8.2%

20、和7.6%（n=20）。成人在8:00到10：00的參考標(biāo)準(zhǔn)為4-28 nmol/L。皮膚傳導(dǎo)性測(cè)試皮膚傳導(dǎo)性測(cè)試使用充滿了固體凝膠(ARBOH91;布倫瑞克、德國)的Ag-AgCl電極(表面面積0.5平方厘米)進(jìn)行測(cè)試。這些電極雙極固定在受試者非優(yōu)勢(shì)手的大魚際和小魚際。皮膚傳導(dǎo)性在0.5V（采樣頻率為2赫茲）的恒定電壓下測(cè)定。皮膚傳導(dǎo)水平從實(shí)驗(yàn)前10分鐘的基礎(chǔ)水平開始記錄，一直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。脈搏的測(cè)量應(yīng)用反射光電容積描記技術(shù)測(cè)量受試者非優(yōu)勢(shì)手中指的表面脈搏?；谡环謴?fù)用(QDM)技術(shù),通過脈沖血氧計(jì)(SensorMedics集團(tuán)、比爾、荷蘭)，追蹤處理信號(hào)（采樣頻率65赫茲）。脈搏樣本以1赫

21、茲的采樣頻率采集，并儲(chǔ)存在電腦中。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與統(tǒng)計(jì)分析 前言中陳述的主要研究問題采用一般線性模型（SPSS7.5版本為WINDOWS SPSS公司，芝加哥），通過重復(fù)測(cè)量多元分析及單因素方差分析（變異數(shù)分析和方差分析）進(jìn)行分析，一般線性模型由主體間因子，“壓力承受能力”（HS與LS，作為獨(dú)立變量），和主體內(nèi)因子，“飲食”（a-lac飲食與casein飲食，作為獨(dú)立變量）和“實(shí)驗(yàn)壓力”（誘導(dǎo)壓力任務(wù)前后的的測(cè)試，脈搏，皮膚傳導(dǎo)性，皮質(zhì)醇和情緒，作為因變量）構(gòu)成。雖然我們想抵消飲食順序影響（先a-lac飲食，而后casein飲食對(duì)相反的順序），但飲食順序仍被初步作為一個(gè)主體間因子。對(duì)于實(shí)驗(yàn)壓力對(duì)脈搏

22、、皮膚傳導(dǎo)性及皮質(zhì)醇濃度的影響，應(yīng)用多元方差分析第一和第二階多項(xiàng)式對(duì)比（線性和二次效果）進(jìn)行分析。多元分析處理后結(jié)果顯著，有待進(jìn)一步進(jìn)行單因素分析。球形假設(shè)并未成立時(shí)，F(xiàn)eldt或 Greenhouse-Geisser校正P值，其對(duì)應(yīng)的e值，以及原始（即未校正）自由度就被報(bào)道過。利用皮爾森相關(guān)系數(shù)計(jì)算檢驗(yàn)血漿Trp-LNAA比率和催乳素的關(guān)系。因?yàn)轱嬍稠樞颉⑿詣e以及避孕藥劑的使用對(duì)結(jié)果不造成影響，最后的數(shù)據(jù)分析只應(yīng)用壓力承受能力作為主體間因子。對(duì)預(yù)期會(huì)變化的變量（如皮質(zhì)醇和抑郁）應(yīng)用了單項(xiàng)評(píng)估比較（43）。所有統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)均在5的顯著性水平。報(bào)告數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。結(jié)果血漿Trp-LN

23、AA比率數(shù)據(jù)顯示飲食有顯著性影響（F1,56=327.557，P<0.0001），即a-lac飲食與casein飲食相比，血漿Trp-LNAA比率有48%的顯著增加。如圖1所示，casein飲食后平均血漿Trp-LNAA比率為0.071±0.012，a-lac飲食后平均血漿Trp-LNAA比率為0.104±0.013。沒有發(fā)現(xiàn)壓力承受能力或其他因素的影響。催乳素應(yīng)用方差分析發(fā)現(xiàn)飲食與壓力承受能力間有顯著關(guān)系（F1,49=5.224，P=0.027），表明飲食對(duì)催乳素濃度的影響取決于受試者的壓力承受能力。如圖1所示，HS組催乳素在不同飲食條件下有40%的顯著性差異（ca

24、sein飲食后為12.60±4.0ug/L，a-lac飲食后為17.70±8.2ug/L;P=0.001）,而LS組受試者沒有發(fā)現(xiàn)飲食的影響（16.21±8.4和15.76±9.0 ug/L；P=0.79）。受試者間承受能力沒有顯著影響。HS組受試者，a-lac飲食與casein飲食相比，血漿Trp-LNAA比率和催乳素濃度有明顯正相關(guān)（R=0.45,P=0.028），但在LS組并未發(fā)現(xiàn)此關(guān)系（R=0.24，P=0.21）。生理測(cè)試應(yīng)用多元方差分析發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)壓力對(duì)脈搏（F2,55=115.65，P<0.0001）和皮膚傳導(dǎo)性（F2,55=120，P&

25、lt;0.0001）均有顯著影響。如圖2所示，實(shí)驗(yàn)壓力使脈搏從實(shí)驗(yàn)任務(wù)前76.12±10次每分，上升至實(shí)驗(yàn)任務(wù)時(shí)的85.20±11.5次每分（F1,56=21.88，P<0.0001，e=0.781）;皮膚傳導(dǎo)性從4.0±2.63增加到8.8±4.30us（F1,56=201.13，P<0.0001，e=0.644）。多變量分析顯示壓力承受能力、飲食及實(shí)驗(yàn)壓力3方面對(duì)脈搏有交互影響（F2,55=6.44，P=0.003）。更進(jìn)一步的單因素分析發(fā)現(xiàn)，這種交互影響是由一階多項(xiàng)式對(duì)比得出（F1,56=11.71，P=0.001，e=0.915），意

26、味著在實(shí)驗(yàn)壓力條件下，HS組受試者脈搏在casein飲食后（從77.90±8.65到88.17±10.51次每分）比a-lac飲食后（從80.41±9.10到87.93±10.22）增長更多。壓力承受能力和飲食對(duì)皮膚傳導(dǎo)性沒有影響。應(yīng)用多元方差分析發(fā)現(xiàn)壓力承受能力與飲食及實(shí)驗(yàn)壓力有密切相關(guān)（F2,54=2.14，P=0.06），因?yàn)槠べ|(zhì)醇濃度呈線性變化（F1,55=3.35，P=0.036），意味著實(shí)驗(yàn)壓力條件下飲食對(duì)皮質(zhì)醇反應(yīng)的影響取決于受試者的壓力承受能力。如圖2所示，實(shí)驗(yàn)壓力條件下，HS組在casein飲食后皮質(zhì)醇濃度從9.36±2.41

27、增長到10.65±3.09nmol/L，在a-lac飲食后皮質(zhì)醇?jí)毫Ψ磻?yīng)被阻止（壓力前后濃度為：10.73±3.64和10.20±3.86 nmol/L）。在LS組沒有發(fā)現(xiàn)這種變化。沒有發(fā)現(xiàn)壓力承受能力和飲食的其他影響。情緒狀態(tài)方差分析顯示壓力承受能力與飲食及實(shí)驗(yàn)壓力對(duì)POMS量表的抑郁分量表分?jǐn)?shù)有輕微影響（F1,56=2.116，P=0.07）。因?yàn)樵诩毙詨毫l件下，飲食影響預(yù)期只在HS組受試者出現(xiàn)，我們對(duì)casein飲食條件下，在壓力過程中產(chǎn)生生理反應(yīng)（測(cè)得的脈搏、皮膚傳導(dǎo)性增加）的18個(gè)HS組受試者和21個(gè)LS組受試者進(jìn)行了第二次分析。方差分析發(fā)現(xiàn)壓力承受能

28、力、飲食和實(shí)驗(yàn)壓力的顯著影響（F1,37=6.629，P=0.007），表明在急性壓力條件下，飲食對(duì)抑郁感的影響取決于受試者的壓力承受能力。如圖3所示，HS組受試者在casein飲食后，實(shí)驗(yàn)壓力下抑郁感略有增加：分?jǐn)?shù)從15.19±5.7增加到16.19±5.7，在a-lac飲食后，分?jǐn)?shù)從15.62±5.7減少到14.86±5.2。在LS組受試者中并未發(fā)現(xiàn)這一變化。應(yīng)用多變量分析發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)壓力對(duì)POMS剩余的憤怒、緊張、活力和疲勞量表有顯著影響（F4,53=16.75，P<0.0001）。更進(jìn)一步的單因素分析發(fā)現(xiàn)，這一影響源自憤怒量表分?jǐn)?shù)的變化（F1

29、,56=60.20，P<0.0001），意味著在兩種飲食條件下，實(shí)驗(yàn)壓力使憤怒感顯著增加（a-lac飲食：從9.59±3.51增加到14.16±6.5；casein飲食：從9.62±3.21增加到13.74±5.5）。POMS分?jǐn)?shù)變化的分析結(jié)果如表3所示。多變量分析顯示，壓力承受能力和實(shí)驗(yàn)壓力間有顯著的相互影響（F4,53=3.68，P=0.01），源自緊張量表（F1,56=5.34，P=0.025）和疲勞量表的變化（F1,56=3.90，P=0.05）。HS組在實(shí)驗(yàn)壓力后變得更緊張（實(shí)驗(yàn)前12.2±3.6，實(shí)驗(yàn)后14.4±4.

30、2），而LS組前后變化可忽略不計(jì)（實(shí)驗(yàn)前9.38±3.24，實(shí)驗(yàn)后9.91±3.29）。而且，HS組受試者實(shí)驗(yàn)后并未更加疲勞（實(shí)驗(yàn)前16.73±5.25，實(shí)驗(yàn)后16±4.45），而LS組受試者實(shí)驗(yàn)后更加疲勞（實(shí)驗(yàn)前11±5，實(shí)驗(yàn)后12.70±5.9）。應(yīng)用多變量分析發(fā)現(xiàn)承受能力強(qiáng)弱（F4,53=8.60，P<0.0001）對(duì)憤怒量表（F1,56=16.53，P<0.0001）、緊張量表（F1,56=18.818，P<0.0001）、活力量表（F1,56=15.65，P<0.0001）以及疲勞量表（F1,56=1

31、8.59，P<0.0001）的基礎(chǔ)值具有顯著影響。承受能力差（HS組）的受試者與LS組受試者相比，憤怒量表（HS：11.0±3.87，LS：8.35±2.18），緊張量表（HS：12.12±3.64，LS：9.38±3.23），疲勞量表（HS：16.74±5.26，LS：11.0±5.0），HS組分?jǐn)?shù)更高，活力量表（HS：13.40±3.37，LS：16.18±3.91），HS組的分?jǐn)?shù)較低（見表3）。沒有發(fā)現(xiàn)其他顯著性影響。討論這項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，在壓力承受能力差和承受能力相對(duì)較好的受試者中，濃縮-乳白蛋白均可以提

32、高血漿Trp-LNAA比率。通過飲食實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在壓力承受能力差受試者中，催乳素濃度增加，情緒狀態(tài)改善，皮質(zhì)醇反應(yīng)降低。內(nèi)部效度我們相信本研究中，飲食對(duì)血液指標(biāo)、情緒狀態(tài)以及皮質(zhì)醇的影響，并不是由于飲食差異、或?qū)κ澄镄?yīng)的預(yù)期、或?qū)嶒?yàn)?zāi)康幕驅(qū)嶒?yàn)數(shù)據(jù)分析不充分引起的。我們的研究是在完全雙盲、嚴(yán)格控制飲食的條件下進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)中所有受試者在監(jiān)督下進(jìn)食，2種飲食在營養(yǎng)組成、外觀以及味道上非常相似。實(shí)驗(yàn)助理和所有受試者對(duì)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮惋嬍硹l件都不知情，只在實(shí)驗(yàn)的最后一天對(duì)每個(gè)受試者進(jìn)行簡短的介紹。為了發(fā)現(xiàn)顯著性水平在5%的微小飲食影響，要求受試者個(gè)數(shù)超過14個(gè)；本實(shí)驗(yàn)很好地滿足了這一要求。因此，本實(shí)驗(yàn)的多變量分

33、析顯著性水平均在0.70到0.81。飲食對(duì)Trp-LNAA比率和大腦5-羥色胺的影響血漿Trp-LNAA比率在a-lac飲食后比casein飲食后高出了48%，意味著a-lac飲食期間，更多的色氨酸可用于大腦吸收。預(yù)計(jì)這將導(dǎo)致中樞5-羥色胺的合成增加（9-12）。此次實(shí)驗(yàn)中血漿Trp-LNAA比率高出之前CR-PP膳食實(shí)驗(yàn)42%（14）。富含蛋白質(zhì)的飲食通常被發(fā)現(xiàn)會(huì)減少Trp-LNAA比率，現(xiàn)在的結(jié)果表明，富含濃縮-乳白蛋白的飲食可以有效提高Trp-LNAA比率；這也許可以作為提高大腦色氨酸和5-羥色胺濃度的更實(shí)用方法。假設(shè)a-lac飲食可增加Trp-LNAA比率，增加大腦色氨酸和5-羥色胺濃

34、度，那么這種飲食應(yīng)該會(huì)使壓力承受能力差的受試者大腦5-羥色胺功能增強(qiáng)更多。因?yàn)閴毫ζ陂g越多的5-羥色胺活動(dòng)，會(huì)導(dǎo)致5-羥色胺的越多分解，對(duì)于壓力承受能力差的受試者，慢性壓力可能最終會(huì)導(dǎo)致可利用的色氨酸和大腦5-羥色胺的功能不足。因此，5-羥色胺系統(tǒng)可能會(huì)更加敏感因?yàn)榇鷥斒荏w增敏（21,22）。目前對(duì)催乳素的研究結(jié)果支持這一假設(shè)：僅在HS組，a-lac飲食后比casein飲食后催乳素的濃度高了40%。因?yàn)榇呷樗氐脑黾涌赡芊从沉酥袠?-羥色胺神經(jīng)遞質(zhì)和受體敏感性的增加（30,31），目前飲食對(duì)血漿Trp-LNAA比率和催乳素的影響，表明5-羥色胺系統(tǒng)在HS組公認(rèn)比在LS組受試者中更敏感。然而，下面

35、會(huì)給出解釋。雖然兩種飲食的受試者，空腹時(shí)的催乳素濃度也許具有可比性，嚴(yán)格來說，我們并不清楚在HS組和LS組是否會(huì)不同。將來的研究中應(yīng)該考慮這一可能性。當(dāng)前發(fā)現(xiàn)表明壓力承受能力可能是誘發(fā)大腦易受飲食的有益影響、血漿Trp-LNAA比率增加的一個(gè)主要因素。HS組受試者5-羥色胺敏感性增加可能是抑郁的誘導(dǎo)因素。因此，慢性壓力誘導(dǎo)的生化適應(yīng)，最終可能會(huì)導(dǎo)致5-羥色胺系統(tǒng)惡化，然后可能會(huì)導(dǎo)致一種情緒障礙的癥狀（44）。因此，抑郁癥的發(fā)展（45）和生活壓力事件有關(guān)，并會(huì)伴隨大腦5-羥色胺系統(tǒng)的功能受損（3,4,24）。飲食對(duì)壓力的影響：情緒和皮質(zhì)醇與先前的研究結(jié)果一致（14），壓力任務(wù)會(huì)明顯提高脈搏和皮膚

36、傳導(dǎo)性，并會(huì)導(dǎo)致情緒的明顯惡化。這表明實(shí)驗(yàn)壓力誘導(dǎo)比較成功。假設(shè)HS組5-羥色胺系統(tǒng)功能增強(qiáng)是應(yīng)對(duì)壓力的生物學(xué)手段，由此推測(cè)，a-lac飲食會(huì)抑制HS組受試者皮質(zhì)醇的急性應(yīng)激反應(yīng)和抑郁心情。關(guān)于情緒，我們的確只在HS組受試者中發(fā)現(xiàn)，a-lac飲食與casein飲食相比，實(shí)驗(yàn)壓力后的抑郁感會(huì)降低。在HS組中表現(xiàn)出生理應(yīng)激反應(yīng)的受試者，飲食對(duì)抑郁感受的影響非常顯著（P=0.007）。這一點(diǎn)非常重要，但臨床觀察結(jié)果并不顯著，因?yàn)轱嬍硨?duì)情緒的影響很小。我們同樣發(fā)現(xiàn)HS組比LS組受試者的基礎(chǔ)抑郁水平更高。這一發(fā)現(xiàn)與慢性壓力會(huì)惡化情緒并能反應(yīng)抑郁的易感性相一致（45）。與先前的研究結(jié)果一致（14），我們發(fā)現(xiàn)隨著飲食使血漿Trp-LNAA比率增加，急性壓力條件下，HS組受試者的皮質(zhì)醇反應(yīng)被阻止。乍一看，皮質(zhì)醇濃度下降好像與5-羥色胺前體活動(dòng)會(huì)刺激人體皮質(zhì)醇分泌的發(fā)現(xiàn)相矛盾（3）。大腦5-羥色胺增加好像會(huì)通過改變5-羥色胺位于下丘腦和垂體的1A和2受體站點(diǎn)，來觸發(fā)腎上腺皮質(zhì)反應(yīng)（3）。然而，這些5-羥色胺對(duì)皮質(zhì)醇濃度的有利影響并不一定和這個(gè)概念相矛盾：急性壓力條件下，5-羥色胺活動(dòng)可以提