戒毒膠囊質(zhì)量標準的研究

1、戒毒膠囊質(zhì)量標準的研究         09-09-02 15:02:00     編輯：studa20              作者：靳怡然，杜英峰，許慧君，郭瑋，袁志芳，張?zhí)m桐 【摘要】  目的建立戒毒膠囊的質(zhì)量標準。方法采用薄層色譜（TLC）法對戒毒膠囊中的金銀花、丹參、黃芩、梔子、白芍、人參、熟地黃進行定性鑒

2、別；采用高效液相色譜（HPLC）法對制劑中的綠原酸進行含量測定。色譜條件：用C18分析柱，以乙腈-0.4%磷酸溶液（12:88）為流動相，檢測波長為327 nm，進樣量為20 l。結(jié)果薄層色譜中，供試品溶液色譜在與對照藥材或?qū)φ掌废鄳恢蒙铣霈F(xiàn)相同顏色的斑點，陰性對照無干擾；高效液相色譜中，綠原酸在1.829.10 g·ml-1范圍內(nèi)線性關系良好（r=0.999 7），平均回收率為99.09%。結(jié)論薄層色譜法呈現(xiàn)斑點清晰、特異性強，可用于戒毒膠囊的鑒別；高效液相色譜法簡便快速、精密度高、準確度好，可用于該藥的質(zhì)量控制。 【關鍵詞】  戒毒膠囊； 薄層色譜； 高效液相色譜；

3、綠原酸Abstract：ObjectiveTo establish the quality standard for Jiedu Capsules.MethodsFlos Lonicerae,Radix Salviae Miltiorrhizae,Radix Scutellarine,Fructus Gardeniae,Radix Paeoniae Alba,Radix Ginseng and Radix Rehmanniae were identified using TLC.The content for chlorogenic acid in Jiedu Capsules was det

4、ermined with HPLC.HPLC analytical method was carried out using a C18 column and a mixture containing 12 volume of acetonitrile and 88 volume of 0.4% phosphoric acid solution as the mobile phase.The detection wavelength was set at 327 nm.ResultsSpots obtained from the test solutions had the same colo

5、r in reference solution and medical material in the same location,and the bland solution had no interference. The linear range of albiflorin was from 1.82 to 9.10 g·ml-1(r=0.999 7),the average recovery was 99.09%.ConclusionIn TLC,the spots are very clear and specific to identify the herbal medi

6、cine in Jedu Capsules.HPLC is simple,quick,high precise and accurate for  the quality control of Jiedu Capsules.Key words：Jiedu Capsules;  TLC;  HPLC;  Chlorogenic acid    戒毒膠囊處方為治療吸食阿片類成癮者的臨床經(jīng)驗方，戒毒膠囊是依據(jù)中醫(yī)理論，結(jié)合多年的臨床用藥經(jīng)驗研制的，并且在研制該制劑時，進行了相關藥理學等多方面研究，以期發(fā)揮中醫(yī)中藥優(yōu)勢，為阿片類毒癮

7、者提供療效確切、服用安全的中藥新制劑，由金銀花、黃芩、梔子、丹參、黃芪等13味藥制成。本實驗采用TLC和HPLC建立鑒別和含量測定方法，以期為戒毒膠囊的質(zhì)量控制提供實驗方法。1  儀器與試藥1.1  儀器Waters 高效液相色譜儀（美國）：510泵，2487 紫外檢測器；色譜工作站（Empower 色譜工作站)；TCQ-250 超聲波清洗器9北京醫(yī)療設備二廠）。1.2  試藥綠原酸對照品及對照藥材（均購自中國藥品生物制品檢定所）；戒毒膠囊（自制）。缺味陰性樣品按處方分別配成相應的缺位處方藥，模擬制劑工藝，加相應輔料制備。藥材均購自石家莊藥材站，并經(jīng)生藥鑒定。乙腈

8、為色譜純，超純水，其余試劑均為分析純。2   方法與結(jié)果2.1  定性分析2.1.1  金銀花的鑒別1取本品內(nèi)容物2 g，加甲醇20 ml，超聲處理10 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5 ml使溶解，作為供試品溶液。取金銀花對照藥材0.2 g，照“供試品溶液的制備”項下同法操作制備對照藥材溶液。另取綠原酸對照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作為對照品溶液。再取缺金銀花的陰性樣品，同供試品溶液的制備方法，制成陰性對照溶液。吸取上述4種溶液各10 l，分別點于同一塊硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（7.5:3.5:1.5）的上層溶液為展開劑，展

9、開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品和對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點。陰性對照色譜無干擾。見圖1。2.1.2  丹參的鑒別取本品內(nèi)容物12 g，加乙醚200 ml，超聲處理10 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加醋酸乙酯1 ml使溶解，作為供試品溶液。取丹參對照藥材1 g，照供試品溶液制備項下同法操作，作為對照藥材溶液。另取丹參酮A對照品，加醋酸乙酯溶解并制成每毫升含2 mg的溶液，作為對照品溶液。再按處方工藝制備缺丹參陰性對照，再按“供試品溶液的制備”制成陰性對照品溶液。吸取上述4種溶液各10 l，分別點于同一塊硅膠G薄層板上，以苯-醋酸

10、乙酯（19:1）為展開劑，展開，取出，晾干，在日光下直接檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯一相同的暗紅色斑點；陰性在相應位置無干擾。見圖2。2.1.3  黃芩的鑒別取本品內(nèi)容物1 g，加甲醇20 ml，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 ml超聲使溶解，加到已處理好的AB-8型吸附樹脂柱（內(nèi)徑1.5 cm，長20 cm，濕法裝柱）上，用水30 ml洗脫，棄去洗脫液，再用30乙醇30 ml洗脫，棄去洗脫液，繼用80乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇1 ml使溶解，作為供試品溶液。取黃芩對照藥材1 g，按

11、供試品溶液制備項下操作制成對照藥材溶液。取黃芩苷對照品，加甲醇制成每毫升含0.5 mg的溶液，作為對照品溶液。按處方工藝制備缺黃芩陰性對照，再按“供試品溶液的制備”制成陰性對照品溶液。吸取上述4種溶液各10 l，分別點于同一塊含4醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5:3:1:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1三氯化鐵乙醇溶液供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。在與對照品色譜相應的位置上，顯一相同顏色的斑點。陰性在相應位置無干擾，見圖3。圖1  戒毒膠囊中金銀花的薄層色譜圖（略）   

12、  圖2  戒毒膠囊中丹參的薄層色譜圖 （略）                     2.1.4    梔子的鑒別1取本品內(nèi)容物2 g，加75乙醇20 ml，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10 ml超聲使溶解，加水飽和的正丁醇振搖提取3次，10 ml/次，合并正丁醇液，用水洗滌3次，10 ml/次，棄去水洗液，將正丁醇液

13、置水浴上蒸干，殘渣加乙醇1 ml使溶解，作為供試品溶液。取梔子對照藥材1 g，照對照藥材溶液制備項下的方法同法操作，作為對照藥材溶液。另取梔子苷對照品，加乙醇制成每毫升含4 mg的溶液，作為對照品溶液。按處方工藝制備缺梔子陰性對照，再按“供試品溶液的制備”制成陰性對照品溶液。吸取上述4種溶液各5 l，分別點于同一塊硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水（5:5:1:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇（510）溶液，在105 加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。在與對照品色譜相應的位置上，顯一相同顏色的斑點。陰性在相應位置無干擾，見圖4

14、。圖3  戒毒膠囊中黃芩的薄層色譜圖 （略）          圖4  戒毒膠囊中梔子的薄層色譜圖  （略）                    2.1.5    白芍的鑒別1取本品4 g，加乙醇20 ml，超聲處理10 min，濾過，濾液蒸干，殘

15、渣加水20 ml超聲使溶解，加到已處理好的AB-8型吸附樹脂柱（內(nèi)徑1.5 cm，長20 cm，濕法裝柱）上，用水30 ml洗脫，棄去洗脫液，再用20乙醇30 ml洗脫，棄去洗脫液，繼用70乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加乙醇1 ml使溶解，作為供試品溶液。取白芍對照藥材2 g，同法制成對照藥材溶液。按處方工藝制備缺白芍陰性對照，再按“供試品溶液的制備”制成陰性對照品溶液。    吸取上述3種溶液各10 l，分別點于同一塊硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（40:5:10:0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5香草醛硫酸溶液，在105 加熱至斑點顯

16、色清晰。陰性對照色譜無干擾，見圖5。2.1.6  人參的鑒別1取本品4 g，加氯仿40 ml，置水浴中加熱回流1h，棄去氯仿液，殘渣揮去氯仿，加水0.5 ml拌勻濕潤后，加水飽和的正丁醇40 ml，超聲處理30 min，濾過，濾液加3倍量氨試液，搖勻，放置分層，取上層液蒸干，殘渣加甲醇1 ml使溶解，作為供試品溶液。取人參對照藥材，照供試品溶液制備項下同法操作制備對照藥材溶液。取人參皂苷Rb1、Re和Rg1對照品，加甲醇分別制成每毫升各含0.5 mg的溶液，作為對照品溶液。按處方工藝制備缺人參陰性對照，再按“供試品溶液的制備”制成陰性對照品溶液。吸取上述6種溶液各10 l，分別點于同

17、一塊硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-正丁醇-水（2:1:4:2）的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10硫酸乙醇溶液，在105 加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的紫紅色斑點。陰性在相應位置無干擾，見圖6。2.1.7  熟地黃的鑒別2取本品10 g，加水50 ml，煮沸1 h，趁熱濾過，濾液放冷后，加醋酸乙酯25 ml振搖提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇1 ml使溶解，作為供試品溶液。另取熟地黃對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。按處方工藝制備缺熟地黃陰性對照，再按“供試品溶液的制備”制成陰性對照品溶液。吸取上述3種溶液各10 l，分別點于同一塊硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯（1:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2，4-二硝基苯肼試液，在105加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。陰性在相應位置無干擾，陰性對照色譜無干擾，見圖7。圖5