氧化苦參堿與拉米夫定在Beagle犬體內(nèi)的藥物動力學(xué)相互作用研究

1、史上最快最全的網(wǎng)絡(luò)文檔批量下載批量上傳，盡在：史上最快最全的網(wǎng)絡(luò)文檔批量下載批量上傳，盡在：氧化苦參堿與拉米夫定在Beagle犬體內(nèi)的藥物動力學(xué)相互作用研究劉曉紅 孫英華 孫進(jìn) 何仲貴（沈陽藥科大學(xué) 藥學(xué)院 生物藥劑學(xué)研究室，遼寧 沈陽，110016）摘要 目的：評價氧化苦參堿（OM）和拉米夫定（3TC）在體內(nèi)的藥物動力學(xué)相互作用，為指導(dǎo)臨床用藥提供理論依據(jù)。方法：同時灌胃或靜注給予Beagle犬單劑量OM和3TC，采用固相萃?。⊿PE）和HPLC-UV法分析不同時刻Beagle犬血藥濃度。結(jié)果：3TC和OM聯(lián)合用藥后不改變二者在Beagle犬的體內(nèi)藥動學(xué)參數(shù)，也不改變OM代謝產(chǎn)物苦參堿（M）

2、的生物轉(zhuǎn)化率和體內(nèi)藥動學(xué)參數(shù)（p0.05）。結(jié)論：3TC和OM配伍使用后在Beagle犬體內(nèi)未發(fā)生藥物動力學(xué)相互作用。關(guān)鍵詞：氧化苦參堿；苦參堿；拉米夫定；藥物相互作用Single-dose pharmacokinetics of lamivudine and oxymatrine administrated alone and in combination to beagle dogsXiaohong Liu, Yinghua Sun, Jin Sun, Zhonggui He(School of Pharmacy, Shenyang Pharmaceutical University, S

3、henyang 110016, ChinaABSTRACT: OBJECTIVE To evaluate the single-dose pharmacokinetic interaction of lamivudine and oxymatrine in combination to beagle dogs, both of drugs which are active against hepatitis B virus and which exert synergetic antiviral effect by co-administration. METHODS A randomized

4、 3 way crossover-Latin square experiment was designed. Twelve healthy adult male beagle dogs were divided into two groups. Six dogs were randomly intravenously administrated with lamivudine (2.5 mg/kg and oxymatrine (15 mg/kg alone and in combination, while the other six dogs were orally administrat

5、ed with lamivudine (5 mg/kg and oxymatrine (30 mg/kg alone and in combination. RESULTS Simultaneous oral treatment with lamivudine and oxymatrine did not significantly affect the in vivo pharmacokinetic behavior of the two drugs, even including matrine, the active metabolite of oxymatrine. Furthermo

6、re, the main pharmacokinetic parameters of three compounds were not significantly influenced by the simultaneous intravenous administration of lamivudine and oxymatrine. CONCLUSIONS The concomitant oral or intravenous use of lamivudine and oxymatrine did not lead to significant pharmacokinetic inter

7、actions in beagle dogs. Moreover, the present study provides the in vivo pharmacokinetic basis for supporting the recent clinical practices in China that no dosage adjustment is needed when lamivudine and oxymatrine are co-administrated.Keywords: Oxymatrine; Lamivudine; pharmacokinetic interaction.拉

8、米夫定（3TC）為胞嘧啶核苷類似物，屬于RNA逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，對乙肝病毒（HBV）有抑制作用1, 2。然而其長期應(yīng)用會產(chǎn)生耐藥現(xiàn)象，影響其療效3, 4。氧化苦參堿（OM）可直接抗HBV，并且具有穩(wěn)定肝細(xì)胞膜、阻斷肝細(xì)胞凋亡等作用5。臨床研究已經(jīng)表明6-8，二者聯(lián)合應(yīng)用，可協(xié)同提高療效，縮短療程，是目前治療慢性乙型肝炎的較好選擇。但兩藥以及OM的代謝產(chǎn)物苦參堿（M）聯(lián)合用藥后在體內(nèi)的藥物動力學(xué)性質(zhì)還不清楚，故本文考察同時給予3TC和OM后二者在犬體內(nèi)的藥動學(xué)相互作用，為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。1、藥物、試劑、動物與主要儀器氧化苦參堿、苦參堿（含量98.5%，寧夏博爾泰力藥業(yè)股份有限公司）；拉米

9、夫定（含量98.5%，合肥市森瑞化工有限責(zé)任公司）；法莫替丁對照品（中國藥品生物制品檢定所）；甲醇、乙睛（色譜純，天津康科德科技有限公司）；其他試劑均為分析純。雄性Beagle犬（沈陽藥科大學(xué)動物實驗中心）12只，體重10±1.3 kg，隨機(jī)分為靜脈給藥組和口服給藥組，每組6只。高效液相色譜儀（日本HITACHI公司）；LDZS-2型低速自動平衡離心機(jī)（北京醫(yī)用離心機(jī)廠）；CETIVAP 78120-03離心濃縮干燥儀（美國LABOCONCO公司）；OASIS® HLB 固相萃取小柱 (1cc, 30 mg, Waters Corp.。2 實驗方法2.1 給藥方案各組內(nèi)進(jìn)行

10、3周期二重3×3拉丁方交叉試驗，清洗期為1周。實驗前禁食12 h。靜脈給藥組：單獨給予OM（15 mg/kg）；單獨給予3TC（2.5 mg/kg）；聯(lián)合給予同劑量3TC和OM；于藥后2、5、10、15、30、45、60、90、120、150、180、240、360和480 min取血4 mL，取血漿分析。灌胃給藥組：單獨給予OM（30 mg/kg）；單獨給予3TC（5 mg/kg）；聯(lián)合給予同劑量3TC和OM；于藥后10、20、30、45、60、90、120、150、180、240、300、360、540和720 min取血4 mL，取血漿分析。2.2 OM、M和3TC血藥濃度測定

11、OM、M和3TC血藥濃度測定采用固相萃?。⊿PE），HPLC-UV檢測9。方法如下：C18色譜柱（4.6×200 mm, 5 m ID）；流動相：乙腈-水（13:87，5 mmol/L庚烷磺酸鈉，pH 3.2）；220 nm檢測。取固相萃取小柱，依次加甲醇、重蒸水各2 mL沖洗，備用。取血漿樣品0.5mL，加入內(nèi)標(biāo)100 L（法莫替丁60 g/mL），重蒸水400 L，渦旋，轉(zhuǎn)移至備用的小柱中，加2乙腈溶液1 mL沖洗，用1 mL乙腈洗脫，收集洗脫液，于40 真空離心干燥儀揮干，殘渣以200 L流動相溶解，旋渦，離心，取上清液50 L進(jìn)樣。2.3 數(shù)據(jù)處理采用非隔室模型依賴方法進(jìn)行血

12、藥濃度數(shù)據(jù)處理，求算藥動學(xué)參數(shù)。另外，相對生物利用度：FrAUCco-administration/AUCalone；代謝轉(zhuǎn)化率：Conversion rateAUC0, M/AUC0, OM+M×100。采用雙單側(cè)t-檢驗（p0.05）評價單獨給藥和聯(lián)合給藥后藥動學(xué)參數(shù)的顯著性差異。3 結(jié)果3.1 聯(lián)合給藥后3TC在犬體內(nèi)的藥物動力學(xué)研究Beagle犬單獨靜注3TC（2.5 mg/kg）和與OM同時靜脈給藥后，其體內(nèi)血藥濃度時間曲線見圖1a；Beagle犬單獨灌胃3TC（5 mg/kg）和與OM同時灌胃給藥后，其體內(nèi)血藥濃度時間曲線見圖1b；所得藥動學(xué)參數(shù)見表1。與單獨靜注3TC相

13、比的絕對生物利用度為：單用組80.5%，合用組73.3%。統(tǒng)計學(xué)結(jié)果表明，在實驗劑量下，聯(lián)合用藥組與單獨用藥組的3TC主要藥動學(xué)參數(shù)無顯著性變化（p0.05），無論灌胃還是口服給藥OM不能改變3TC的體內(nèi)藥動學(xué)過程。圖1 Fig 1 表1 Tab 1 3.2 聯(lián)合給藥后OM在犬體內(nèi)的藥物動力學(xué)研究Beagle犬單獨靜注OM（15 mg/kg）和與3TC同時靜脈給藥后，其體內(nèi)血藥濃度時間曲線見圖2a；Beagle犬單獨灌胃OM（30 mg/kg）和與3TC同時灌胃給藥后，其體內(nèi)血藥濃度時間曲線見圖2b；所得藥動學(xué)參數(shù)見表2。統(tǒng)計學(xué)結(jié)果表明，在實驗劑量下，聯(lián)合用藥組與單獨用藥組的OM主要藥動學(xué)參數(shù)

14、無顯著性變化（p0.05），無論灌胃還是口服給藥3TC不能改變OM的體內(nèi)藥動學(xué)過程。圖2 Fig 2 表2 Tab 2 3.3 聯(lián)合給藥后OM的代謝產(chǎn)物M在犬體內(nèi)的藥物動力學(xué)研究Beagle犬單獨靜注OM（15 mg/kg）和與3TC同時靜脈給藥后，其代謝產(chǎn)物M體內(nèi)血藥濃度時間曲線見圖3a；Beagle犬單獨灌胃OM（30 mg/kg）和與3TC同時灌胃給藥后，其代謝產(chǎn)物M體內(nèi)血藥濃度時間曲線見圖3b；所得藥動學(xué)參數(shù)見表3。OM口服的代謝轉(zhuǎn)化率為：單用組49.8%，合用組51.2%；靜注的代謝轉(zhuǎn)化率為：單用組6.74%，合用組8.75%。統(tǒng)計學(xué)結(jié)果表明，在實驗劑量下，聯(lián)合用藥組與單獨用藥組OM

15、的代謝產(chǎn)物M的主要藥動學(xué)參數(shù)無顯著性變化（p0.05），無論灌胃還是口服給藥3TC不能改變OM在Beagle犬體內(nèi)的代謝過程。圖3 Fig 3 表3 Tab 3 4 討論4.1 3TC的藥物動力學(xué)研究單劑量口服3TC，其無顯著代謝，主要以原型經(jīng)腎排泄，僅有約有5-10的原型化合物被代謝為無生理活性的對位硫氧化代謝物，并且僅在尿中檢測到該代謝產(chǎn)物。3TC在人體體內(nèi)迅速吸收和消除，平均生物利用度較為80-90，70的原型藥物的消除經(jīng)腎小管主動分泌3, 10。單獨靜脈給予3TC后，測得的CL（0.57±0.12 L/h/kg）和Vss（1.03±0.20 L/kg）滿足3TC靜注

16、給藥的藥動學(xué)種屬外推公式11：CL0.74×W0.76（0.48 L/h/kg），Vss1.09×W0.94（0.95 L/kg）。4.2 OM與3TC聯(lián)合用藥的藥物動力學(xué)相互作用研究3TC和OM聯(lián)合用藥后不改變二者在Beagle犬的體內(nèi)藥動學(xué)參數(shù)，也不改變OM代謝產(chǎn)物M的生物轉(zhuǎn)化率和體內(nèi)藥動學(xué)參數(shù)（p0.05），說明3TC和OM配伍使用未發(fā)生藥物動力學(xué)相互作用。而藥物相互作用發(fā)生的基礎(chǔ)就是某一藥物改變另一種藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄過程中的任一個過程。3TC為高溶解度和高通透性藥物，其通過被動擴(kuò)散的方式通過消化道壁3，Caco-2細(xì)胞試驗表明12，OM和M同樣以被

17、動擴(kuò)散的方式被吸收。因此，3TC與OM在吸收過程中不發(fā)生相互作用。由于3TC（229 D）相對較低的分子量和血漿蛋白結(jié)合率（36），使其在體內(nèi)分布廣泛，可自由的從體循環(huán)進(jìn)入組織；而且OM和M的血漿蛋白結(jié)合率也不高13，因此3TC和OM在體內(nèi)分布過程也無明顯的相互作用。OM主要經(jīng)肝臟和胃腸道菌群代謝，生成代謝產(chǎn)物M，Beagle犬體內(nèi)兩代謝部位的代謝比例約為1:4，而3TC無顯著性代謝，其代謝產(chǎn)物僅為母體化合物的5-10，并且3TC與CYP3A的探針底物均無相互作用，因此，3TC和OM的代謝過程中也無明顯的相互作用。雖然3TC的排泄經(jīng)腎小球濾過和腎小管主動分泌（有機(jī)氧離子轉(zhuǎn)運系統(tǒng)）3，并且OM和

18、M也主要經(jīng)腎臟排泄，但是聯(lián)合給藥后3TC和OM的AUC，CL和Vss均未發(fā)生明顯的改變（p0.05），說明二者在排泄過程中，也無明顯的相互作用。文獻(xiàn)報道了3TC為不易發(fā)生藥物相互作用的藥物3，本文試驗進(jìn)一步證明了3TC與OM不論靜注還是灌胃給藥在Beagle犬體內(nèi)均未發(fā)生相互作用。另外，由于3TC和OM以及M的藥動學(xué)參數(shù)均可進(jìn)行種屬外推，因此臨床上，對HBV感染的患者給予3TC和OM聯(lián)合用藥時，無需進(jìn)行劑量調(diào)整。5 結(jié)論3TC和OM聯(lián)合用藥后不改變二者在Beagle犬的體內(nèi)藥動學(xué)參數(shù)，也不改變OM代謝產(chǎn)物M的生物轉(zhuǎn)化率和體內(nèi)藥動學(xué)參數(shù)（p0.05），說明3TC和OM配伍使用后在Beagle犬體

19、內(nèi)未發(fā)生藥物動力學(xué)相互作用。臨床上，對HBV感染的患者給予3TC和OM聯(lián)合用藥時，無需進(jìn)行劑量調(diào)整。參考文獻(xiàn)1 SOKAL EM, ROBERTS EA, MIELI-VERGANI G, et al. A dose ranging study of the pharmacokinetics, safety, and preliminary efficacy of lamivudine in children and adolescents with chronic hepatitis BJ. Antimicrob Agents Chemother, 2000, 44(3: 590597.2

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25、劉曉東, 黃圣凱, 袁惠南. 苦參堿類似物的油/水分配系數(shù)與藥代動力學(xué)的關(guān)系J. 中國藥科大學(xué)學(xué)報, 1987, 18(3: 216-218.表1 聯(lián)合給藥后3TC在Beagle犬體內(nèi)的藥物動力學(xué)參數(shù)Tab. 1 Pharmacokinetic parameters of 3TC following intravenous and oral administration alone and in combination with OM （n=6, mean±SD）Intravenous administrationOral administrationAloneCombination

26、AloneCombinationCmax (g/mL4.12 ± 0.483.75 ± 0.82Tmax (h1.25 ± 0.111.08 ± 0.20t1/2 (h1.79 ± 0.191.81 ± 0.161.76 ± 0.191.58 ± 0.16AUC0 (g·h/mL6.35 ± 1.625.50 ± 0.6810.22 ± 0.999.31 ± 1.30MRT (h2.05 ± 0.192.09 ± 0.162.63 ±

27、0.142.95 ± 0.13CL (L/h/kg0.57 ± 0.120.53 ± 0.070.51 ± 0.05 a0.59 ± 0.08 aVss (L/kg1.03 ± 0.201.07 ± 0.141.35 ± 0.16 b1.77 ± 0.28 bFr(%86.7191.10a Apparent oral clearance (CL/F was calculated as dose/ AUC0; b Apparent oral steady-state volume of distributi

28、on (Vss/F was calculated as (dose×AUMC0/(AUC02表2 聯(lián)合給藥后OM在Beagle犬體內(nèi)的藥物動力學(xué)參數(shù)Tab. 2 Pharmacokinetic parameters of OM following intravenous and oral administration alone and in combination with 3TC （n=6, mean±SD）. Intravenous administrationOral administrationAloneCombinationAloneCombinationCma

29、x (mol/L21.64 ± 2.7023.46 ± 3.87Tmax (h1.25 ± 0.171.08 ± 0.14t1/2 (h1.51 ± 0.151.35 ± 0.162.18 ± 0.312.14 ± 0.26AUC0(mol·h/L91.85 ± 22.4982.42 ± 10.5356.82 ± 8.9248.36 ± 8.36MRT (h2.19 ± 0.291.92 ± 0.182.85 ± 0.192.61 &#

30、177; 0.13CL (L/h/kg0.76 ± 0.150.74 ± 0.092.28 ± 0.38 a2.64 ± 0.35 aVss (L/kg1.57 ± 0.271.37 ± 0.126.65 ± 1.25 b6.97 ± 1.08 bFr(%89.7385.11a Apparent oral clearance (CL/F was calculated as dose/ AUC0; b Apparent oral steady-state volume of distribution (Vss/F w

31、as calculated as (dose×AUMC0/(AUC02表3 聯(lián)合給藥后OM的代謝產(chǎn)物M在Beagle犬體內(nèi)的藥物動力學(xué)參數(shù)Tab. 3 Pharmacokinetic parameters of metabolite M following OM intravenous and oral administration alone and in combination with 3TC （n=6, mean±SD）. Intravenous administrationOral administrationAloneCombinationAloneCombin

32、ationCmax (mol/L2.87 ± 0.852.59 ± 0.1612.30 ± 4.1010.06 ± 2.88Tmax (h0.09 ± 0.030.06 ± 0.023.75 ± 0.364.50 ± 0.22t1/2 (h3.07 ± 0.562.93 ± 0.543.53 ± 0.163.39 ± 0.12AUC0(mol·h/L6.64 ± 1.597.90 ± 2.2356.31 ± 19.1350.64

33、77; 8.25MRT (h4.59 ± 0.754.83 ± 0.984.59 ± 0.284.99 ± 0.19Fr(%118.9189.93 a b圖1 Beagle犬單獨給予3TC和與OM同時給藥后3TC的體內(nèi)血藥濃度-時間曲線圖Fig.1. Mean plasma concentration time curves of 3TC following intravenous and oral administration alone and in combination with OM to beagle dogs.(a two intravenous regimens involving a single dose of 2.5 mg/kg 3TC to beagle dogs: alone ( and in combination with a single dose of 15 mg/kg OM (; (b two oral regimens involving a single dose of 5.0 mg/kg 3TC to beagle dogs: alone ( and in combination with a singl