武漢大學(xué)天然產(chǎn)物的提取板藍(lán)根

1、天然產(chǎn)物的提取 板藍(lán)根武漢大學(xué)專業(yè)：應(yīng)用化學(xué)學(xué)號：200622030135研究內(nèi)容v板藍(lán)根簡介v化學(xué)成分及藥理作用v藥用成分的提取方法及流程v臨床應(yīng)用及不良反應(yīng)v市場效用及研究進(jìn)展 1.板藍(lán)根 板藍(lán)根為十字花科植物菘藍(lán)Isatisindigotica Fort.、歐洲菘藍(lán)Itinctoria L.、爵床科植物馬藍(lán)Bap hicacanthus cusia(Nees) Brem.的根莖及根。 別名大藍(lán)根、大青根、靛青根、藍(lán)靛根、靛根 。 主產(chǎn)于河北、江蘇等省。 1.1 板藍(lán)根形態(tài)1.2 板藍(lán)根栽培技術(shù)1.選地與整地 板藍(lán)根系深根植物, 宜選土層深厚, 疏松肥沃, 排水良好, 遠(yuǎn)離城市污染的土壤種

2、植。前茬作物收獲后及時(shí)深耕, 耕前每公頃施腐熟農(nóng)家肥7. 5 10. 5 萬kg, 均勻撒入地內(nèi), 翻耕深度2535cm , 耕后耙細(xì)、整平、作畦。雨水多的地方作高畦, 雨水少的地方作平畦。 2.播種 種子成熟后采收、曬干,存放于通風(fēng)干燥處備用。春播在5 月上旬,播種量每公頃30kg ,播深23cm ,覆土1cm ,稍加鎮(zhèn)壓,保持土壤濕潤,當(dāng)氣溫在1820 時(shí),經(jīng)7d 左右即可出苗。3.田間管理 中耕除草、間苗、追肥、病蟲防治2.1 化學(xué)成分v1. 吲哚類化合物v2. 喹唑酮類化合物v4. 芥子苷類化合物 v3. 喹啉酮類化合物v5. 含硫類化合物v6. 有機(jī)酸類化合物v7. 氨基酸類化合物v

3、8. 甾醇類化合物v9. 其他2.2 藥理作用v1. 抗菌作用v2. 抗病毒作用(1)對一般病毒的作用(2) 對腎綜合征出血一熱病毒(HFRSV)的作用(3) 對人巨細(xì)胞病毒(HCMV)的作用(4) 對肝炎病毒(HBV)的作用v3. 對內(nèi)毒素的作用v4. 對免疫系統(tǒng)的作用v5. 抗癌作用v6. 活血作用v7. 藥代動(dòng)力學(xué)的研究3.藥用成分的提取流程及方法3.1 板藍(lán)根藥用的主要有效成分 目前認(rèn)為具有治療作用的活性成分主要存在于靛藍(lán)、靛玉紅和多糖中。v1.靛玉紅 別名炮彈樹堿，為紅色針狀品體，熔點(diǎn)356358攝氏度，可升華，稍溶于乙醇和酷酸，不溶于水，分子式及分子量分別為：C16H10N2O2；

4、262. 26靛玉紅的藥理作用: 1.抗癌作用:對小鼠白血病L7212的抑制率較高，對小鼠肉瘤也有一定抑制作用，對小鼠Lewis肺癌也有明顯抑制作用。 2.臨床治療慢性粒細(xì)胞性白血病總有效率達(dá)90%以上，療效快，副作用小。NHONOHv2.靛藍(lán) 藍(lán)色針狀結(jié)晶，有升華性，易溶于吡啶，可溶于乙酸乙酯。分子式C16H10O2N2。靛藍(lán)的藥理作用主要表現(xiàn)為對肝的保護(hù)作用，據(jù)報(bào)道，靛藍(lán)混懸液對四氯化碳引起的小鼠肝損傷有一定的保護(hù)作用。 NNHHOOv3.多糖 多糖一般為無定型粉末，無甜味，無還原性，多數(shù)具有旋光性。難溶于水或溶于熱水成膠體，不溶于親脂性有機(jī)溶劑。多糖具有多種生物活性，是理想的免疫增強(qiáng)劑，

5、它能促進(jìn)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能，還能促進(jìn)白介素、干擾素、腫瘤壞死因子等細(xì)胞因子的產(chǎn)生。3.2 有關(guān)板藍(lán)根有效成分研究工作v（1）趙萍萍等采用雙波長薄層掃描定量法測定靛玉紅的含量;測定標(biāo)準(zhǔn)偏差為2%，加樣回收率達(dá)95%以上 .v（2）梁文法等使用薄層掃描法測定了板藍(lán)根中靛藍(lán)和靛玉紅的含量，直接掃描測定，加樣平均回收率為102.1%;v（3）許禎燦等應(yīng)用薄層掃描法測定同一產(chǎn)地不同采收期的板藍(lán)根中靛玉紅與靛藍(lán)含量，結(jié)果表明:12月份靛玉紅含量最高，11月份靛藍(lán)含量最高;v（4）崔熙等報(bào)道了板藍(lán)根中游離氨基酸的含量，故認(rèn)為精氨酸很可能是板監(jiān)根中起藥理作用的一個(gè)主要有效成分。3.3 有

6、效成分的提取分離及含量測定的研究現(xiàn)狀3.3.1 多糖的提取分離及含量測定研究現(xiàn)狀3.3.1.1 多糖的提取與分離1.提取水煮醇沉微波方法 2.分離純化分步沉淀法鈣、銀及鋇復(fù)鹽形成法凝膠過濾法Sevag法另外還可用離子交換法，活性炭吸附等方法純化和分離。3.多糖含量測定研究現(xiàn)狀及測定方法（1）多糖的定性測試：甲醇法 將多糖樣品配成1 mg/ml溶液，取0.1m1 0.5molNaOH，加入甲醇1ml，出現(xiàn)白色混濁現(xiàn)象，則判斷有多糖。(以水作為對照)蒽酮法 將多糖樣品配成1 mg/ml溶液，取0.1mo1，加入0.1 ml 0.5mol NaOH，再加入蒽酮試劑幾滴，呈藍(lán)色，則判斷有多糖。(以水為

7、對照)薄層層析法 吸附劑為硅膠H薄層板。展開劑為乙酸乙酯-水-乙酸-甲酸。（2）多糖的定量測定3, 5-二硝基水楊酸(DNS )法 此法是根據(jù)糖的還原性進(jìn)行的測定，其原理是利用3, 5-二硝基水楊酸與多糖水解產(chǎn)物共熱后還原成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)還原糖的量與反應(yīng)液的顏色強(qiáng)度呈比例關(guān)系，利用比色法可測定樣品中的含糖量。苯酚-硫酸法 此種方法是將糖轉(zhuǎn)變成糖醛衍生物進(jìn)行測定，其原理是根據(jù)單糖、多糖和它們的衍生物與苯酚-硫酸試劑反應(yīng)可生成橙黃色溶液，此溶液在490nm波長處有特征吸收。蒽酮-硫酸法 糖類遇濃硫酸脫水生成糖醛或其衍生物，可與蒽酮試劑縮合產(chǎn)生顏色物質(zhì)，反應(yīng)后溶液呈亮綠色，于630

8、nm處有最大吸收，顯色與多糖含量呈線性關(guān)系。3.3.2 靛藍(lán)、靛玉紅的提取分離及含量測定研究現(xiàn)狀3.3.2.1 靛藍(lán)、靛玉紅的提取分離水煮，醇沉法：提出的靛藍(lán)、靛玉紅含量甚少； 滲漉法：用70%乙醇作滲漉溶媒，具有分離、提取效果好，無需加熱，減少了藥物水解和氧化的機(jī)會，工藝簡單；根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的具體條件，可采用回流法。3.3.2.2 靛藍(lán)、靛玉紅含量測定研究現(xiàn)狀及測定方法氧化滴定法直接比色測定法薄層色譜法雙波長分光光度法正交函數(shù)分光光度法導(dǎo)數(shù)光譜法柱色譜比色法反相高效液相色譜法等3.4板藍(lán)根多糖的提取分離及含量測定3.5靛藍(lán)、靛玉紅的提取分離及含量測定 3.5.1 靛藍(lán)、靛玉紅的提取試驗(yàn)方法： 精

9、確稱取四份各為60g的干燥板藍(lán)根粗粉，分別加入不同濃度(90%、75%、60%、45%）的乙醇480ml，回流提取4hrs，過濾，將濾液減壓濃縮至無醇味，用氯仿萃取，直至氯仿層透明。取氯仿層，減壓回收氯仿，在60的恒溫干燥箱中烘干、稱重、粉碎，得靛藍(lán)、靛玉紅的混合物，以該提取物為指標(biāo)，測定產(chǎn)率。3.5.2 靛藍(lán)、靛玉紅的分離利用靛藍(lán)、靛玉紅的溶解性將它們分開 將得到的靛藍(lán)、靛玉紅混合物粉末放置在50ml燒杯里，加入適量吡啶，充分振搖，使其溶解，然后過濾，將濾渣直接在60的恒溫烘箱中烘干，得到靛玉紅;將濾液減壓回收溶劑，同樣在60的恒溫烘箱中烘干，得到靛藍(lán)。4.臨床應(yīng)用及不良反應(yīng)4.1臨床應(yīng)用呼吸系統(tǒng)疾病的應(yīng)用消化系統(tǒng)疾病的應(yīng)用皮膚及骨胳疾病的應(yīng)用眼科疾病的應(yīng)用病毒性心肌炎代謝性疾病的應(yīng)用泌尿系統(tǒng)疾病的應(yīng)用4.2 不良反應(yīng)v皮膚過敏反應(yīng)v過敏性休克v過敏致死亡v腎損害v多發(fā)性肉芽腫v溶血反應(yīng) 此外,還有報(bào)道口服含有板藍(lán)根的消炎片和中藥煎劑出現(xiàn)上消化道出血。 5.市場效用及研究進(jìn)展5.1 板藍(lán)根走勢分析2006 年的板藍(lán)根生產(chǎn)不會有突破性發(fā)展 走勢行情影響因素： 其一，禽流感疫情。 其二，排除禽流感因素，單就其需求和庫存而言，市場供求關(guān)系應(yīng)為供求偏緊狀態(tài)。 其三，就種植者心態(tài)而言，種植面積不會發(fā)展到生產(chǎn)過剩的地步。5.2 展望v