細胞生物學(xué)之筆記--第5章

1、第5章 細胞的內(nèi)膜系統(tǒng)與囊泡轉(zhuǎn)運第一節(jié) 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)#內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的蛋白分析， 表明膜中含有酶至少30多種，分三種類型與解毒相關(guān)的酶系 氧化反應(yīng)電子傳遞酶系與脂類物質(zhì)代謝功能相關(guān) eg 脂肪酸CoA連接酶與碳水化合物代謝功能相關(guān) 葡萄糖-6磷酸酶（內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的主要標志酶）內(nèi)質(zhì)蛋白（reticulo-plasmin）#內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)膜性三維管網(wǎng)結(jié)構(gòu)系統(tǒng)，基本“結(jié)構(gòu)單位”-小管（ER tubular）、小泡（ER vesicle）扁囊（ER lamina）平均厚度56nm內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向內(nèi)與核膜溝通，向外與高爾基體、溶酶體等轉(zhuǎn)換成分同一組織細胞中，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的數(shù)量和結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度往往與細胞的發(fā)育程度成正相關(guān)#內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的基本

2、類型根據(jù)電鏡觀察，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分為 粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(rough endoplasmic reticulum, RER) 和 滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(smooth endoplasmic reticulum, SER)糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)表面有核糖體附著多呈扁平囊狀，參與分泌型蛋白質(zhì)和多種膜蛋白的合成、加工和轉(zhuǎn)運分泌肽類激素和蛋白的細胞中，RER高度發(fā)達；腫瘤細胞、未分化細胞 則很少光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是呈表面光滑的管泡樣網(wǎng)狀形態(tài)結(jié)構(gòu)滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 與粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 相通，是多功能細胞器；在不同細胞或不同生理期，結(jié)構(gòu)分布和發(fā)達程度差別很大有的細胞以 RER為主，有的以 SER為主，隨著生理狀態(tài)改變，兩者可以互相轉(zhuǎn)換某些特殊的組織細胞中存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

3、的衍生結(jié)構(gòu) 髓樣體（myeloid body）見于視網(wǎng)膜色素上皮細胞 孔環(huán)狀片層體（annulate lamellae）出現(xiàn)于生殖細胞、快速增值細胞、某些哺乳動物的神經(jīng) 元和松果體細胞及一些癌細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能（1） 糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的主要功能是進行蛋白質(zhì)的合成、加工修飾、分選及轉(zhuǎn)運1. 信號肽指導(dǎo)的分泌性蛋白在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中合成信號肽是指導(dǎo)蛋白多肽鏈在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成與穿膜轉(zhuǎn)移的決定因素。核糖體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)合以及肽鏈穿越內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的轉(zhuǎn)移，還有賴于細胞質(zhì)基質(zhì)中信號識別顆粒（signal recognition particle，SRP）的介導(dǎo)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上信號識別顆粒受體（SRP-receptor，SRP-

4、R）以及被稱之為轉(zhuǎn)運體（translocon）的易位蛋白質(zhì)（易位子）的協(xié)助。新生多肽鏈的折疊與裝配內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中氧化型谷胱甘肽（GSSG）多肽鏈上半胱氨酸殘基之間二硫鍵形成的必要條件內(nèi)膜腔面蛋白二硫鍵異構(gòu)酶PDIProtein disulfide isomerase加快二硫鍵形成及多肽鏈的折疊速度分子伴侶（molecular chaperone）在其羧基端有一KDEL駐留信號肽。是細胞內(nèi)蛋白質(zhì)質(zhì)量監(jiān)控的重要因子。協(xié)助蛋白質(zhì)的折疊轉(zhuǎn)運，本身不參與最終產(chǎn)物的形成。免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白BiP阻止蛋白質(zhì)聚集或發(fā)生不可逆變性，協(xié)助蛋白質(zhì)折疊（與熱激蛋白70同源）內(nèi)質(zhì)蛋白endoplasmin又稱葡萄糖調(diào)節(jié)

5、蛋白94，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)標志性分子伴侶，參與新生肽鏈的折疊和轉(zhuǎn)運鈣網(wǎng)蛋白calreticulin在鈣平衡調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)折疊和加工、抗原呈遞、血管發(fā)生及凋亡與鈣離子結(jié)合鈣連蛋白calnexin與未完成折疊的新生蛋白質(zhì)的寡糖鏈結(jié)合，以避免蛋白質(zhì)彼此的凝集和泛素化；組織折疊尚不完全的蛋白質(zhì)離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，并促使其完全折疊蛋白質(zhì)的糖基化（glycosylation） 主要是寡糖與天冬氨酸殘基側(cè)鏈上的氨基團的結(jié)合，（N-鏈接糖基化），糖基轉(zhuǎn)移酶催化，始于一共同前體-14寡糖（2個N-乙酰葡萄糖胺+9甘露糖+3葡萄糖）最后，寡糖轉(zhuǎn)移酶 催化 14寡糖鏈 連接到 新生肽鏈 的特定 三肽序列：Asn-X-Ser 或 Asn

6、-X-Thr（X是 除Pro之外 的任何氨基酸）的 Asn上。糖基化后的 新生肽鏈，寡糖鏈末端的2個葡萄糖殘基被移去，殘留的葡萄糖殘基結(jié)合內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的 分子伴侶，然后在 分子伴侶幫助下 完成折疊，被移去最后一個葡萄糖殘基，包裝外送；錯誤折疊 導(dǎo)致肽鏈的疏水基團 外露，被GT（監(jiān)控酶）識別 并重新連接1個葡萄糖，重新結(jié)合分子伴侶 進行折疊蛋白質(zhì)的胞內(nèi)運輸?！俺鲅俊?A.轉(zhuǎn)運小泡進入高爾基復(fù)合體，加工濃縮，分泌顆粒排吐到細胞外。 B.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜泡大濃縮泡酶原顆粒排出細胞。（僅見于哺乳類胰腺細胞）2. 信號肽指導(dǎo)的穿膜駐留蛋白插入轉(zhuǎn)移的可能機制 （1）單次穿膜蛋白插入轉(zhuǎn)移機制 A.新生肽鏈共翻譯插入（

7、cotranslation insertion） 駐留蛋白含有位于肽鏈N端的起始轉(zhuǎn)移信號肽，停止轉(zhuǎn)移信號肽（特定氨基序列，疏水區(qū)段）。當停止轉(zhuǎn)移肽 進入 轉(zhuǎn)運體，轉(zhuǎn)運體 與之作用，從活性狀態(tài) 變?yōu)?失活狀態(tài)，終停止對肽鏈的轉(zhuǎn)移，停止轉(zhuǎn)移肽 形成-螺旋結(jié)構(gòu)，當信號肽被切除，肽鏈的N-端 朝向 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔B.由內(nèi)信號肽（internal signal peptide）介導(dǎo)的內(nèi)開始轉(zhuǎn)移肽（internal start-transfer peptide）插入轉(zhuǎn)移機制。當 內(nèi)信號肽 到達 移位子時，被保留在 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的脂雙層中，成為跨膜-螺旋結(jié)構(gòu)； 若 內(nèi)信號肽 的N-端 比C-端 有更多 帶正電氨基酸殘

8、基，則 C-端 插入 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔；反之，肽鏈插入方向相反 。（書P110圖） （2）多次穿膜蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移插入。 2個疏水性開始轉(zhuǎn)移肽、停止轉(zhuǎn)移肽 結(jié)構(gòu)序列。認為多次跨膜蛋白石以內(nèi)信號肽作為其開始轉(zhuǎn)移信號的。3. 糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是蛋白質(zhì)分選的起始部位 游離核糖體合成的胞內(nèi)蛋白包括：A非定位分布的細胞質(zhì)溶質(zhì)駐留蛋白。B定性分布的胞質(zhì)溶質(zhì)蛋白C核蛋白D線粒體、質(zhì)體等半自主性細胞器所必須的核基因編碼蛋白。 信號肽被視為蛋白質(zhì)分選的初始信號。信號斑（signal patch）是重要的蛋白質(zhì)分選的分選轉(zhuǎn)運信號。（二）光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)都是作為脂類物質(zhì)合成主要場所的多功能細胞器1.光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與脂質(zhì)的合成和轉(zhuǎn)運2.光面內(nèi)質(zhì)

9、網(wǎng)參與糖原的代謝3.光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是細胞解毒的主要場所4.光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是肌細胞鈣離子Ca2+ 的儲存場所5.光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與胃酸、膽汁的合成與分泌密切相關(guān)第2節(jié) 高爾基復(fù)合體（Golgi complex）1、 高爾基復(fù)合體的形態(tài)結(jié)構(gòu)（1） 高爾基復(fù)合體是由三種不同類型的膜性囊泡組成的細胞器1. 扁平囊泡（現(xiàn)統(tǒng)稱潴泡cisternae）最具特征的主體結(jié)構(gòu)。每38個潴泡整齊排列高爾基體堆（Golgi stack）寬1520nm；囊泡相距2030nm。朝細胞核=凸面=順面（cis-face）=形成面（forming face）6nm內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜；朝細胞膜=凹面=反面（trans-face）=成熟面（mature

10、face）8nm細胞膜厚度。2. 小囊泡（現(xiàn)統(tǒng)稱小泡vesicle）聚集于形成面，是直徑 4080nm的膜泡，多數(shù)是光滑小泡，較小的是有被小泡內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 芽生、分化而來，也稱運輸小泡（transfer-vesicle）功能完成從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向高爾基體的物質(zhì)轉(zhuǎn)運使潴泡的膜結(jié)構(gòu)及其內(nèi)含物不斷地更新、補充3. 大囊泡（現(xiàn)統(tǒng)稱液泡vacuole）見于成熟面的分泌小泡（secretory vesicle），直徑0.10.5nm，由扁平狀高爾基潴泡末端膨大、斷離形成。（2） 高爾基復(fù)合體具有顯著的極性形態(tài)結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成、功能不同，由順面到反面以此分為三個組成部分1. 順面高爾基網(wǎng)（cis-Golgi network

11、） 連續(xù)分分支的管網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，顯示嗜鋨反應(yīng)的化學(xué)特征（電鏡下，用鋨酸進行染色結(jié)合性強）功能分選來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)和脂類，A大部分轉(zhuǎn)入到高爾基中間膜囊B小部分重新送返內(nèi)質(zhì)網(wǎng)而成為駐留蛋白 進行蛋白質(zhì)修飾的O-鏈接糖基化&穿膜蛋白在細胞質(zhì)基質(zhì)側(cè)結(jié)構(gòu)域的?；?. 高爾基中間膜囊（medial Golgi stack）多層間隔囊、管結(jié)構(gòu)，糖基化修飾多糖&糖脂的合成3. 反面高爾基體網(wǎng)（trans-Golgi network）分選，分泌到細胞外/溶酶體；一些蛋白的修飾（3） 高爾基復(fù)合體在不同的組織細胞中呈現(xiàn)不同的分布形式細胞分布特征神經(jīng)細胞圍繞細胞核分布具有生理極性的細胞eg輸卵管內(nèi)皮、腸上皮粘膜、甲

12、狀腺和胰腺趨向于一極分布肝細胞沿膽小管分布在細胞邊緣精、卵&絕大多數(shù)無脊椎動物的某些細胞中分散的分布狀態(tài)非極性的細胞間期位于中心粒附近，與微管有關(guān)2、 高爾基復(fù)合體的化學(xué)組成（1） 脂類是高爾基復(fù)合體的基本成分高爾基體膜脂類成分，介于 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜與質(zhì)膜之間，脂類總含量45%（2） 高爾基復(fù)合體含有以糖基轉(zhuǎn)移酶為標志的多種酶蛋白體系#糖基轉(zhuǎn)移酶glycosyltransferas是高爾基復(fù)合體中最具特征性的酶，主要參與糖蛋白和糖脂的合成。氧化還原酶NADH-細胞色素C還原酶 NADPH-細胞色素還原酶磷酸酶類5-核苷酸酶、腺苷三磷酸酶、硫胺素焦磷酸酶磷脂酶類磷脂酶A1、磷脂酶A2參與磷脂合成的溶血

13、卵磷脂?；D(zhuǎn)移酶、磷酸甘油磷脂酰轉(zhuǎn)移酶酪蛋白磷酸激酶-甘露糖苷酶#生化區(qū)隔化/房室化：高爾基復(fù)合體 不同囊泡區(qū)間 分布不同 酶系#過渡性細胞器：高爾基復(fù)合體 蛋白與酶 的含量和復(fù)雜程度 介于內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 和細胞膜 間3、 高爾基復(fù)合體的功能（1） 高爾基復(fù)合體是細胞內(nèi)蛋白質(zhì)運輸分泌的中轉(zhuǎn)站外源性分泌蛋白具有連續(xù)分泌continuous secretion=恒定性分泌constitutive secretion=外源性蛋白質(zhì)在其分泌泡形成之后，隨即排放出細胞的分泌形式。非連續(xù)性分泌discontinuous secretion=先儲存于分泌跑中，在需要時再排放到細胞外的分泌形式（2） 高爾基復(fù)合體是胞

14、內(nèi)物質(zhì)加工和成的重要場所1. 糖蛋白的加工和成N-連接糖蛋白 糖鏈的合成和糖基化修飾始于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，完成于高爾基復(fù)合體O-連接糖蛋白 糖鏈的合成和糖基化修飾主要或完全在高爾基復(fù)合體完成N-連接糖蛋白& O-連接糖蛋白的主要差別N-連接糖蛋白O-連接糖蛋白糖基化發(fā)生的部位糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基復(fù)合體連接的氨基酸殘基天冬酰胺絲、蘇、酪、羥賴（脯）氨酸連接基團-NH2-OH第一個糖基N-乙酰葡糖胺半乳糖、N-乙酰半乳糖胺糖鏈長度525個糖基16個糖基糖基化方式寡糖鏈一次性連接單糖基逐個添加 蛋白質(zhì)糖基化意義：保護蛋白質(zhì)，免遭水解酶的降解糖基化具有運輸信號的作用，引導(dǎo)蛋白質(zhì)包裝運輸糖基化形成細胞膜表面的糖被，參

15、與保護、識別、聯(lián)絡(luò)等重要生命活動 2. 蛋白質(zhì)的水解加工某些蛋白質(zhì)或酶，只有在高爾基復(fù)合體被特異性水解后，才成熟或有活性；如 人胰島素、胰高血糖素、血清白蛋白 等A溶酶體酸性水解酶的磷酸化，B蛋白聚糖的硫酸化，均在高爾基復(fù)合體發(fā)生和完成（3） 高爾基復(fù)合體是胞內(nèi)蛋白質(zhì)的分選和膜泡定向運輸?shù)臉屑~ 可能機制：對蛋白質(zhì)修飾、加工，給蛋白質(zhì)帶上分選信號，進行選擇、濃縮，形成不同去向的運輸分泌小泡運輸小泡的三個去向：溶酶體酶，以有被小泡 被轉(zhuǎn)運到 溶酶體分泌蛋白，以有被小泡 運向 細胞膜/細胞外以分泌小泡形式 在胞質(zhì)中暫存，被調(diào)控釋放第3節(jié) 溶酶體lysosome1、 溶酶體的形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成（1）

16、溶酶體是一種具有高度異質(zhì)性的膜性結(jié)構(gòu)細胞器 溶酶體由一層單位膜包裹，膜厚6nm，球形，直徑0.20.8m，含60多種分解所有生物活性物質(zhì)的酸性水解酶，最適pH3.55.5 一個動物細胞 通常含幾百個溶酶體，不同溶酶體所含 酶的種類 不盡相同，導(dǎo)致形態(tài)大小、數(shù)量分布、理化性質(zhì)的高度異質(zhì)性（heterogeneous）（2） 溶酶體的共同特征是含有酸性水解酶盡管高度異質(zhì)性，溶酶體有許多 共同特征： 均是一層單位膜包裹成的囊球小體 均含豐富酸性水解酶，如 蛋白酶、核酸酶、脂酶、糖苷酶、磷酸酶、溶菌酶等。酸性磷酸酶是溶酶體的標志酶 溶酶體膜中兩種高度糖基化的跨膜整合蛋白：lgpA和lgpB，（具有高度

17、同源性）朝向溶酶體腔，防止酸性水解酶對自身膜的消化 溶酶體膜上嵌有質(zhì)子泵，依賴解ATP 釋放能量，逆濃度梯度，將H+泵人溶酶體中，維持低pH（3） 溶酶體膜糖蛋白機組具有高度同源性脊椎動物中 鑒定出 一個溶酶體膜糖蛋白家族溶酶體結(jié)合膜蛋白LAMP 或稱 溶酶體整合膜蛋白LIMP結(jié)構(gòu)特點：一個較短N-端信號肽序列一個高度糖基化的腔內(nèi)區(qū)一個單次跨膜區(qū)C-端 10個氨基酸殘基的胞質(zhì)尾區(qū)高度保守（同源性）不同物種溶酶體的不同蛋白，在功能結(jié)構(gòu)區(qū)都高度保守（同源性）(氨基酸序列)蛋白質(zhì)的極低等電點&呈酸性 溶酶體膜糖蛋白結(jié)構(gòu)的糖基化蛋白核心的天冬酰胺殘基上連接的寡糖成分占糖蛋白重量的 50%，寡糖鏈末端均

18、有唾液酸，大大降低了此蛋白的等電點并呈酸性通用識別信號 溶酶體整合膜蛋白 高度保守的 C-端 胞質(zhì)尾區(qū)，是該類蛋白 從高爾基體 向溶酶體運輸?shù)?識別信號2、 溶酶體的類型（1） 溶酶體以其功能狀態(tài)的不同可區(qū)分為三種基本類型1. 初級溶酶體 primary lysosome 剛產(chǎn)生的溶酶體，膜厚6nm，不含明顯顆粒物質(zhì)的透明圓球，其囊腔中的酶無活性。 =原溶酶體（proto-lysosome）=前溶酶體（prelysosome）2. 次級溶酶體 secondary lysosome #初級溶酶體 經(jīng)過成熟，與其它細胞內(nèi)外的膜泡融合，成為次級溶酶體，具有功能，又稱消化泡（digestive lys

19、osome） #體積較大，外形不規(guī)則，囊腔中有正被消化分解的顆粒物質(zhì)或殘損膜碎片。根據(jù)所含底物的性質(zhì)和來源，分為不同類型：由初級溶酶體經(jīng)X所形成底物自噬溶酶體=自體吞噬泡Autolysosome =autophagic vacuole融合自噬體細胞內(nèi)衰老蛻變或殘損破碎的細胞器/糖原顆粒等胞內(nèi)物質(zhì)異噬溶酶體=異體吞噬泡Heterophagic lysosome胞吞作用外來異物吞噬溶酶體phagolysosome融合由吞噬細胞吞入胞外病原體或其他外來較大顆粒性異物所形成的吞噬體細胞外來異物。（吞噬溶酶體&異噬溶酶體二者之間無本質(zhì)區(qū)別）3. 三級溶酶體 tertiary lysosome 又稱 后溶

20、酶體post lysosome，是次級溶酶體完成底物消化、分解后，殘留部分不能降解的物質(zhì)于溶酶體中，是溶酶體功能的終末狀態(tài)；也稱殘留小體residual body A這些殘留小體，有的以胞吐方式釋放到細胞外被清除； B 有的沉積于細胞內(nèi)，如神經(jīng)細胞、肝細胞、心肌細胞的脂褐質(zhì)lipofuscin或者腫瘤細胞、病毒感染細胞、大肺泡細胞、單核吞噬細胞中的髓樣結(jié)構(gòu)myelin、含鐵小體siderosome（2） 溶酶體以其形成過程的不同可區(qū)分為兩種基本類型內(nèi)體性溶酶體（endolysosome，也稱內(nèi)溶酶體）高爾基復(fù)合體 芽生小泡 結(jié)合 細胞吞飲形成的 內(nèi)體endosome 而來 初級溶酶體(前溶酶體

21、)吞噬性溶酶體=內(nèi)體性溶酶體+自噬體/異噬體3、 溶酶體的形成和成熟過程（1） 內(nèi)體性溶酶體是由運輸小泡和晚期內(nèi)體合并形成溶酶體的形成是一個有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體共同參與的過程溶酶體酶蛋白在附著型多聚核糖體上的合成為起始，在經(jīng)過以下階段1. 酶蛋白的N-糖基化與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)轉(zhuǎn)運 酶蛋白前體進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)網(wǎng)腔，經(jīng)過加工、修飾N-連接的甘露糖糖蛋白出芽運至高爾基復(fù)合體形成面2. 酶蛋白在高爾基復(fù)合體內(nèi)的加工與轉(zhuǎn)移 磷酸轉(zhuǎn)移酶&N-乙酰葡萄糖胺磷酸糖苷酶催化寡糖鏈上的甘露糖殘基 甘露糖-6-磷酸 磷酸化 （在高爾基復(fù)合體形成面的囊腔中） 甘露糖-6-磷酸（mannose-6-phosphate）=M-6-P=

22、溶酶體水解酶分選的重要識別信號3. 酶蛋白的分選與轉(zhuǎn)運 帶有M-6-P的溶酶體水解酶前體，到達高爾基體成熟面，被高爾基體網(wǎng)膜囊腔面的 受體蛋白識別，介導(dǎo)有被小泡（coated vesicle）形成，脫離高爾基體4. 內(nèi)體性溶酶體的形成和成熟內(nèi)體endosome=由細胞的胞吞作用形成的一類異質(zhì)性脫衣被膜泡，分為早期內(nèi)體（Early endosome）和晚期內(nèi)體。#早期內(nèi)體是指由經(jīng)過胞吞作用入胞后最初的脫衣被膜泡，其囊腔中含有胞吞物質(zhì)，是一個pH值和細胞外液大致相當?shù)膲A性內(nèi)環(huán)境。#晚期內(nèi)體由早期內(nèi)體他通過分揀、分離出帶有質(zhì)膜受體的再循環(huán)內(nèi)體（recycling endosome）轉(zhuǎn)換而來，再循環(huán)內(nèi)

23、體則返回并重新融入到質(zhì)膜中。#前溶酶體的形成脫離高爾基體的 有被小泡，脫去衣被，與胞內(nèi) 晚期內(nèi)吞體 融合，形成 前溶酶體內(nèi)體性溶酶體(初級溶酶體)晚期內(nèi)吞體：細胞膜 胞吞作用形成的小泡 與其他胞內(nèi)小泡 融合，降低了泡內(nèi) pH值，稱晚期內(nèi)吞體#溶酶體的成熟前溶酶體膜的 質(zhì)子泵 將胞質(zhì)中的H+不斷泵人，腔內(nèi)pH從7.4降到6.0左右，溶酶體酶的前體 從M-6-P膜受體 上解離，去磷酸化 而成熟而膜M-6-P受體 以出芽形式 重返 高爾基體 成熟面（2） 吞噬性溶酶體是內(nèi)體性溶酶體與來源于胞內(nèi)外的作用底物融合形成的4、 溶酶體的功能（1） 溶酶體能夠分解胞內(nèi)的外來物質(zhì)及清除衰老、損傷的細胞器（2）

24、溶酶體具有物質(zhì)消化與細胞營養(yǎng)功能（3） 溶酶體是機體防御保護功能的組成部分（4） 溶酶體參與某些腺體組織細胞分泌過程的調(diào)節(jié)（5） 溶酶體在生物個體發(fā)生于發(fā)育過程中起重要的作用第4節(jié) 過氧化物酶體（peroxisome）1、 過氧化物酶體的基本理化性質(zhì)（1） 過氧化物酶體是一類具有高度異質(zhì)性的膜性球囊狀細胞器#形狀 多為圓/卵圓形； 偶見 半月形、長方形。直徑0.21.7m；#(區(qū)別于溶酶體) 獨特特征：常含電子密度高、排列規(guī)則的晶格結(jié)構(gòu)尿酸氧化酶。被稱為類晶體/類核體；過氧化物酶體膜的內(nèi)表面可見高電子密度條帶狀結(jié)構(gòu)，稱為邊緣板（marginal plate）（2） 過氧化物酶體具有較高的物質(zhì)通

25、透性 過氧化物酶體膜不僅可以允許小分子物質(zhì)自由穿越，一定條件下還可以允許一些大分子物質(zhì)的非吞噬性穿膜轉(zhuǎn)運，從而保證了過氧化物酶體反應(yīng)底物及代謝產(chǎn)物的通常運輸。（3） 過氧化物酶體含有以過氧化物酶為標志的40多種酶氧化酶50%60%RH2+O2R+H2O2過氧化氫酶（標志性酶）40%2H2O22H2O+O2過氧化物酶2H2O22H2O+O2僅存在與血細胞等少數(shù)幾種細胞類型中蘋果酸脫氫酶、檸檬酸脫氫酶2、 過氧化物酶體的功能（1） 過氧化物酶體能有效地清除細胞代謝過程中產(chǎn)生的過氧化氫及其他有毒物質(zhì)氧化酶與過氧化氫酶催化偶聯(lián)，有效清除細胞代謝過程中產(chǎn)生的過氧化氫和毒性物質(zhì)，起到保護作用（2） 過氧化

26、物酶體能有效地進行細胞氧張力的調(diào)節(jié)過氧化物酶體耗氧占細胞耗氧量的20%，但是當細胞出現(xiàn)高濃度氧狀態(tài)時，可增強氧化能力 來調(diào)節(jié)，避免高濃度氧的損害（3） 過氧化物酶體參與對細胞內(nèi)脂肪酸等高能分子物質(zhì)的分解轉(zhuǎn)化過氧化物酶體參與對細胞內(nèi)脂肪酸等高能分子物質(zhì)的分解轉(zhuǎn)化過氧化物酶體的另一功能：分解 脂肪酸等 高能分子，使之 轉(zhuǎn)化為 乙酰輔酶A；然后將其轉(zhuǎn)運到細胞質(zhì)中 再利用，或 供能(進入線粒體內(nèi))3、 過氧化物酶體的發(fā)生兩種觀點： 與溶酶體起源相似，酶蛋白在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成，加工后以 小泡形式 轉(zhuǎn)移、分化 與線粒體相似，一分為二 而來，其酶蛋白等在胞質(zhì)中 游離核糖體上合成，經(jīng) 分選信號序列 或 導(dǎo)肽

27、引導(dǎo)進入 新的過氧化物酶體第5節(jié) 囊泡與囊泡運輸1、 囊泡在胞內(nèi)蛋白質(zhì)運輸中的作用（1） 門控運輸gated transport 有特定的分選信號（eg核定位信號）介導(dǎo)，并通過核孔復(fù)合體的選擇性作用，在細胞溶質(zhì)與細胞核之間所進行的蛋白質(zhì)運輸（2） 穿膜運輸transmembrane transport通過結(jié)合在膜上的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運體進行的蛋白質(zhì)運輸，細胞溶質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體（3） 小泡運輸vesicular transport 膜性細胞器之間 （是真核細胞特有）2、 囊泡的類型與來源 細胞內(nèi)物質(zhì)定向運輸?shù)哪遗蓊愋?至少10種以上（1） 網(wǎng)格蛋白有被小泡產(chǎn)生于高爾基復(fù)合體及細胞膜網(wǎng)格蛋白有被囊泡 可產(chǎn)

28、生于高爾基復(fù)合體，也可介導(dǎo)細胞內(nèi)吞作用有被囊泡產(chǎn)生過程如前述(受體介導(dǎo)的胞吞作用)1 高爾基體產(chǎn)生的網(wǎng)格蛋白囊泡，介導(dǎo)從高爾基體溶酶體、質(zhì)膜外的物質(zhì)轉(zhuǎn)運2 細胞內(nèi)吞作用形成的網(wǎng)格蛋白有被小泡則是將外來物質(zhì)轉(zhuǎn)送到細胞質(zhì)或從胞內(nèi)體輸送到溶酶體#結(jié)構(gòu)特點（直徑50100nm）1) 外被以網(wǎng)格蛋白纖維構(gòu)成的 網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，并因此得名2) 在網(wǎng)格蛋白結(jié)構(gòu)外框與囊膜之間約20nm額間隙內(nèi)填充覆蓋著大量的銜接蛋白 銜接蛋白：形成相對于外側(cè)網(wǎng)格蛋白框架而言囊泡內(nèi)殼結(jié)構(gòu)；介導(dǎo)網(wǎng)格蛋白和囊膜穿膜蛋白受體的連接，形成和維系了網(wǎng)格蛋白-囊泡的一體化結(jié)構(gòu)體系 發(fā)動蛋白/ 縊斷蛋白（dynamin）：在膜囊芽生形成時，發(fā)動蛋

29、白與GTP結(jié)合，并在外凸（或內(nèi)凹）芽生囊膜的頸部聚合形成環(huán)狀；隨著其對GTP的水解，發(fā)動蛋白向心縊縮，直至囊泡斷離形成（2） COPII有被小泡產(chǎn)生于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、介導(dǎo)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基復(fù)合體的物質(zhì)轉(zhuǎn)運1 COPII有被小泡由糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)所產(chǎn)生，因覆蓋有衣被蛋白II（coatomer protein II，COPII）而得名。屬于非網(wǎng)格蛋白有被囊泡類型。2 COP外被蛋白 由5種亞基組成，其中 Sar蛋白 屬于一種小的 GTP結(jié)合蛋白，通過水解GTP，調(diào)節(jié)囊泡外被裝配3 當Sar蛋白結(jié)合的 GTPGDP，活性失活，囊泡去裝配無被小泡4 COP囊泡 負責 從內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 到高爾基體 物質(zhì)轉(zhuǎn)運；阻斷 此囊泡 外被

30、蛋白聚合，能阻止 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形成出芽小泡5 當COP囊泡 從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)生成后，在向高爾基體轉(zhuǎn)移中，常彼此間融合，形成“內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體 中間體”，然后 沿微管運行到 高爾基體的 形成面6 當COP囊泡 與靶膜融合前，水解結(jié)合的GTP，囊泡脫包被蛋白7 COP囊泡 對物質(zhì)轉(zhuǎn)運的選擇性 機制： COP蛋白 能識別 結(jié)合 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 跨膜受體蛋白 胞質(zhì)側(cè)的信號序列；而 跨膜受體蛋白 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔側(cè) 選擇性結(jié)合 可溶蛋白質(zhì)（3） COPI有被小泡的主要功能室回收轉(zhuǎn)運內(nèi)質(zhì)網(wǎng)逃逸蛋白1 COP也屬于 非網(wǎng)格蛋白，COP囊泡 最早發(fā)現(xiàn)于 高爾基體；負責 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)逃逸蛋白的捕捉、回收轉(zhuǎn)運，及 高爾基體 膜內(nèi)蛋白 逆向運輸2 C

31、OP外被蛋白 有幾個蛋白亞基組成，其中蛋白是GTP結(jié)合蛋白，可調(diào)控 外被蛋白復(fù)合物的聚合、裝配、囊泡運輸3 COP囊泡形成過程： 胞質(zhì)中游離的 蛋白 結(jié)合 GTP GTP-蛋白 結(jié)合 高爾基體膜上的 受體 COP蛋白亞基聚合，誘導(dǎo)轉(zhuǎn)運囊泡芽生一旦COP有被囊泡 脫離高爾基， COP蛋白 即解離(GTP水解)3、 囊泡轉(zhuǎn)運（1） 囊泡轉(zhuǎn)運是細胞物質(zhì)定向運輸?shù)幕就緩?. 囊泡的芽生是主動的自我裝配過程，參與此過程的成分 在進化上非常保守2. 囊泡的形成 伴隨物質(zhì)的轉(zhuǎn)運；囊泡的軌跡和歸宿，取決于其轉(zhuǎn)運物質(zhì)的定位、去向3. 細胞外物質(zhì)膜囊泡胞內(nèi)體/溶酶體4. 外輸性蛋白內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 囊泡高爾基體細胞膜/溶

32、酶體細胞膜5. 囊泡雙向運輸，是細胞內(nèi)外 物質(zhì)交換、信息傳遞 重要途徑&基本形式（2） 囊泡轉(zhuǎn)運是一個高度有序并受到嚴格選擇和精密控制的物質(zhì)運輸過程1. 囊泡短距離轉(zhuǎn)運：簡單彌散方式運行，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體2. 囊泡轉(zhuǎn)運長距離：骨架蛋白和運動蛋白協(xié)助完成，如 神經(jīng)細胞3. 囊泡轉(zhuǎn)運，對運輸?shù)鞍?，嚴格檢查質(zhì)量、加工修飾，決定去向；對于逃逸蛋白，高爾基體及時甄別捕捉，由COP有被囊泡遣返（3） 特異性識別融合是囊泡物質(zhì)定向轉(zhuǎn)運和準確卸載的基本保證1. 囊泡抵達 靶膜后，正確識別 是相互融合的 前提，然而識別機制 所知甚少2. 可溶性N-乙基馬來酰亞胺敏感因子結(jié)合蛋白受體 soluble N-ethyl

33、 maleimide-sensitive factor attachment protein receptor, SNAREs 家族在囊泡運輸 和選擇性錨泊融合 過程的作用 引起近年的關(guān)注和研究。該家族一對成員 參與：囊泡相關(guān)膜蛋白VAMP 與 聯(lián)接蛋白syntaxin 。被轉(zhuǎn)運囊泡表面有VAMP類似蛋白，叫 v-SNAREs，靶膜上存在對應(yīng)序列（聯(lián)接蛋白）靶SNAREs，叫 t-SNAREs。以上兩者 互相識別，特異互補3. 普遍認為：轉(zhuǎn)運囊泡與細胞器膜上有各自特征的SNAREs互補序列它們之間高度特異的相互識別和作用，使轉(zhuǎn)運囊泡在靶膜上?？?，從而保證了定向運輸與準確卸載（4） 囊泡轉(zhuǎn)運是實

34、現(xiàn)細胞膜及內(nèi)膜系統(tǒng)功能結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)換和代謝更新的橋梁1. 囊泡轉(zhuǎn)運的發(fā)源地：細胞膜 & 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)2. 囊泡轉(zhuǎn)運集散中心：高爾基復(fù)合體3. 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)產(chǎn) 囊泡高爾基體(形成面成熟面)細胞膜/溶酶體細胞膜4. 細胞膜 來源： 囊泡胞內(nèi)體/吞飲體溶酶體5. 囊泡不斷產(chǎn)生、存在、穿梭于 質(zhì)膜與內(nèi)膜系統(tǒng)間，介導(dǎo)物質(zhì)運輸，并融匯更替 內(nèi)膜系統(tǒng) 不同成分之間的膜，形成 膜流 第六節(jié) 細胞內(nèi)膜系統(tǒng)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的病理變化1) 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)最常見的病理改變是腫脹、肥大或囊池塌陷2) 腫脹主要由于 鈉離子和水分的 滲入3) 低氧、輻射、慢性肝炎 等 引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 腫脹，甚至囊池塌陷，核糖體脫落4) 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)囊腔中包含物的形成和出現(xiàn)

35、是某些疾病或病理過程的表現(xiàn)特征5) 藥物中毒/腫瘤 導(dǎo)致代謝障礙，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中出現(xiàn)包含物；6) 某些遺傳性疾病 導(dǎo)致蛋白質(zhì)、糖原、脂類 在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中 累積7) 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在不同腫瘤細胞中呈現(xiàn)多樣性的改變8) 低分化癌細胞：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)稀少9) 高分化癌細胞：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達10) 低侵襲力癌細胞：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)少，葡萄糖-6-磷酸酶 活性下降，分泌蛋白合成較多11) 高侵襲力癌細胞：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較發(fā)達，各種蛋白合成 比低侵襲力癌細胞 均顯著增高12) 有人認為 孔環(huán)片層 也是 腫瘤細胞常見 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)改變 高爾基復(fù)合體的病理形態(tài)變化1. 功能亢進導(dǎo)致高爾基體的代償性肥大2. 細胞分泌功能亢進，高爾基體結(jié)構(gòu)肥大，分泌旺盛3. 毒性物質(zhì)

36、作用導(dǎo)致高爾基體的萎縮與損壞4. 乙醇等 毒性物質(zhì)，造成肝細胞 高爾基體 脂蛋白合成分泌功能 喪失，高爾基體自身萎縮、破壞；脂類堆積脂肪肝5. 腫瘤細胞分化狀態(tài)影響高爾基復(fù)合體形態(tài)6. 低分化癌細胞：高爾基體不發(fā)達，只是些 核周圍的分泌小泡7. 高分化癌細胞：高爾基體特別發(fā)達，典型高爾基體形態(tài)結(jié)構(gòu) 溶酶體與疾病1 溶酶體酶缺乏或缺陷疾病多為一些先天性疾病2 40余種 先天性 溶酶體病，因某些酶的缺乏或缺陷導(dǎo)致3 1.泰-薩氏?。ê诿尚园V呆）4 患者 缺乏 氨基己糖酶A，阻斷GM2神經(jīng)節(jié)苷脂的代謝，導(dǎo)致其在腦、神經(jīng)系統(tǒng)、心、肝的大量累積，致病5 2. 型糖原累積病6 缺乏 -糖苷酶，糖原 代謝受阻，沉積于全身組織，如 腦 肝 腎 心7 某些藥物 引起獲得性 溶酶體酶缺乏疾?。夯前奉愃?導(dǎo)致 巨噬細胞pH升高，溶酶體酸化低，不能有效殺菌，導(dǎo)致炎癥8 抗瘧疾、抗組胺、抗抑郁藥 在溶酶體中蓄積，或代謝中產(chǎn)物蓄積，導(dǎo)致溶酶體病，比較少見9 溶酶體酶的釋放或外泄造成細胞或組織損傷性疾病10 1.矽肺11