藥理實驗-半數(shù)致死量課件

1、章半數(shù)致死量章半數(shù)致死量 在動物毒理學和藥理學研究中，通常用試驗動在動物毒理學和藥理學研究中，通常用試驗動物對某種藥物、毒物、細菌及理化刺激等反應來測物對某種藥物、毒物、細菌及理化刺激等反應來測定其效力或毒性。定其效力或毒性。 常用的指標是半數(shù)效量常用的指標是半數(shù)效量(median effective dose: ED50)：指使半數(shù)實驗動物發(fā)生特定效應的劑量，：指使半數(shù)實驗動物發(fā)生特定效應的劑量， 如半數(shù)治愈量、半數(shù)麻醉量、半數(shù)感染量、半如半數(shù)治愈量、半數(shù)麻醉量、半數(shù)感染量、半數(shù)驚厥量、半數(shù)致死量等等數(shù)驚厥量、半數(shù)致死量等等第一節(jié)第一節(jié) 半數(shù)致死量概述半數(shù)致死量概述第一節(jié)第一節(jié) 半數(shù)致死量概

2、述半數(shù)致死量概述死死亡亡數(shù)數(shù)劑量劑量對數(shù)劑量對數(shù)劑量累累積積死死亡亡率率對數(shù)劑量對數(shù)劑量概概率率單單位位劑量劑量累累積積死死亡亡率率藥物的劑量與效應關系藥物的劑量與效應關系死死亡亡數(shù)數(shù)對數(shù)致死劑量對數(shù)致死劑量第一節(jié)第一節(jié) 半數(shù)致死量概述半數(shù)致死量概述第一節(jié)第一節(jié) 半數(shù)致死量概述半數(shù)致死量概述【測定【測定LD50的意義】的意義】 LD50反映藥物的毒性大小。反映藥物的毒性大小。 因為劑量與致死百分率曲線呈因為劑量與致死百分率曲線呈S形，因而形，因而LD50是劑量反應曲線上致死百分率變化最靈敏是劑量反應曲線上致死百分率變化最靈敏的劑量點，重現(xiàn)性好，準確性高。的劑量點，重現(xiàn)性好，準確性高。第一節(jié)第一

3、節(jié) 半數(shù)致死量概述半數(shù)致死量概述最小致死劑量和絕對致死量的不合適性最小致死劑量和絕對致死量的不合適性 在曲線的兩端即藥物在低濃度或高濃度時在曲線的兩端即藥物在低濃度或高濃度時藥物濃度的改變對動物死亡率的改變影響較小，藥物濃度的改變對動物死亡率的改變影響較小，動物的死亡率對藥物濃度不敏感。動物的死亡率對藥物濃度不敏感。 在動物試驗中，不同批動物求得的最小致在動物試驗中，不同批動物求得的最小致死劑量和絕對致死量的變動很大，以這種指標作死劑量和絕對致死量的變動很大，以這種指標作為藥物毒力的指標是不合適的。為藥物毒力的指標是不合適的。第一節(jié)第一節(jié) 半數(shù)致死量概述半數(shù)致死量概述第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的

4、測定方法半數(shù)致死量的測定方法 半數(shù)致死量的計算方法有多種，其中寇氏法半數(shù)致死量的計算方法有多種，其中寇氏法最為常用，目測概率單位法最為簡便，序貫法最最為常用，目測概率單位法最為簡便，序貫法最節(jié)約實驗動物。下面將分別介紹這三種方法。節(jié)約實驗動物。下面將分別介紹這三種方法。一、寇氏法一、寇氏法寇氏法是寇氏法是Kaeber（1931年）提出，又稱平均法年）提出，又稱平均法 它是根據(jù)對數(shù)劑量與致死百分數(shù)呈它是根據(jù)對數(shù)劑量與致死百分數(shù)呈S形曲線，形曲線，由由S形曲線包括的面積推導出致死百分率為形曲線包括的面積推導出致死百分率為50%相當?shù)膭┝俊Ｏ喈數(shù)膭┝?。第二?jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測

5、定方法 1111502/ )(lgkixiiixxppLDk為劑量組數(shù)為劑量組數(shù)xi+xi+1為相鄰兩組對數(shù)劑量之和為相鄰兩組對數(shù)劑量之和Pi+1-pi為相鄰兩組致死百分率之差為相鄰兩組致死百分率之差 使用此公式的條件是各組的動物數(shù)相等，最使用此公式的條件是各組的動物數(shù)相等，最小致死百分數(shù)為小致死百分數(shù)為0%，最大致死百分數(shù)為，最大致死百分數(shù)為100%1. 1. 計算計算50lg LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法 當劑量呈等比數(shù)列或對數(shù)劑量呈等差數(shù)列，當劑量呈等比數(shù)列或對數(shù)劑量呈等差數(shù)列，且最小和最大劑量組的致死百分數(shù)分別為且最小和最大劑量組的致死百分數(shù)分別為0%和和

6、100%時時 11150)(2lgkiiikppdxLD kiikpdxLD150)5 . 0(lg其中：其中： 為最大為最大對數(shù)對數(shù)劑量劑量 d 相鄰兩組相鄰兩組對數(shù)對數(shù)劑量之差，即相鄰劑量比值的對數(shù)劑量之差，即相鄰劑量比值的對數(shù) kx kikikpppdxLD11504/ )3(lg如果如果p1不為不為0且小于且小于20%，pk不等于不等于1且大于且大于80%時時第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法2. 2. 求求 的反對數(shù)得的反對數(shù)得 3. 3. 求求 的標準誤的標準誤 iiiLDnppdS)1(50lg4. 4. 求求 的的95%95%的置信區(qū)間的置信區(qū)間)96. 1

7、(lglg50lg501LDSLD 50lg LD50lg LD50lg LD50LD50lgLDs【應用條件【應用條件 】 1 劑量必須按等比級數(shù)（劑量對數(shù)按等級數(shù)）分劑量必須按等比級數(shù)（劑量對數(shù)按等級數(shù)）分組。組。 2 各組動物數(shù)應相等。各組動物數(shù)應相等。 3 最小劑量組的死亡率（最小劑量組的死亡率（Pn）應為）應為 0% ，最大劑，最大劑量組的死亡率（量組的死亡率（Pm）應為）應為 100% ；如果如果 Pn80% 需用校正公式計算；需用校正公式計算；如如 Pn20% 或或 Pm80% 則不能用此法計算。則不能用此法計算。 第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法【例】為了

8、研究銨碘消毒劑對建鯉毒力的影響，【例】為了研究銨碘消毒劑對建鯉毒力的影響，隨機撈取隨機撈取210尾規(guī)格基本一致的鯉魚，放入缸內，每尾規(guī)格基本一致的鯉魚，放入缸內，每缸缸30尾，尾，1組對照，組對照，6組處理。以等對數(shù)間距設置組處理。以等對數(shù)間距設置6個個劑量水平（單位：劑量水平（單位： ）分別為：）分別為：40.000、47.156、55.592、65.538、77.262、91.085，量取藥液并加入缸，量取藥液并加入缸內，攪拌均勻，內，攪拌均勻，96 h后所得資料見下表。試求銨碘對后所得資料見下表。試求銨碘對建鯉的半數(shù)致死量。建鯉的半數(shù)致死量。3/ mmL第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法

9、半數(shù)致死量的測定方法第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法本例中，相鄰劑量成等比級數(shù)，公比為本例中，相鄰劑量成等比級數(shù)，公比為0.8482，故，故對數(shù)劑量成等差級數(shù)。對數(shù)劑量成等差級數(shù)。具體計算步驟如下：具體計算步驟如下：50lgLD)(2lg150 iikppdxLD )000. 1900. 0()500. 0100. 0()100. 0000. 0(2000.40156.47lg085.91lg 第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法（2）求）求 的反對數(shù)得的反對數(shù)得 50lgLD50LD銨碘消毒劑對建鯉的半數(shù)致死量為：銨碘消毒劑對建鯉的半數(shù)致死量為： 72

10、2.58)(lglg50150 LDLD（3）求）求 的標準誤的標準誤 50lgLD iiiLDnppdS)1(50lg30000. 0000. 130900. 0100. 030000. 1000. 00714. 0 = 0.0577第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法（4）求）求 95%的置信區(qū)間的置信區(qū)間 50LD501150lglg (lg1.96)lg (1.7688 1.96 0.0577)LDLDS即銨碘消毒劑對建鯉即銨碘消毒劑對建鯉 的的95%置信區(qū)間為：置信區(qū)間為： 50LD33190.76258.45mmLmmL第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量

11、的測定方法1lg (1.76880.1131)第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法二、目測概率單位法二、目測概率單位法 目測概率單位法是一種較為簡單的計算方法，目測概率單位法是一種較為簡單的計算方法，其基本原理是將劑量改變成對數(shù)劑量，再將死亡其基本原理是將劑量改變成對數(shù)劑量，再將死亡率（率（%）轉換成）轉換成“概率單位概率單位”，則劑量反應曲線，則劑量反應曲線呈直線化，根據(jù)前述回歸分析畫出直線，再求呈直線化，根據(jù)前述回歸分析畫出直線，再求出出 。50LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法 所謂概率單位（所謂概率單位（Probit）就是指標準正態(tài)曲線）就是指

12、標準正態(tài)曲線下面積相當于某一死亡率時橫軸上的距離。為方下面積相當于某一死亡率時橫軸上的距離。為方便計算避免負號，標準正態(tài)變量便計算避免負號，標準正態(tài)變量u值一律加值一律加5，稱，稱為概率單位（為概率單位（y），即：），即：55 xuy 將死亡率轉換為概率單位后，對數(shù)劑量與死將死亡率轉換為概率單位后，對數(shù)劑量與死亡率呈直線關系。據(jù)此便可用回歸法進行半數(shù)致亡率呈直線關系。據(jù)此便可用回歸法進行半數(shù)致死量的估計。死量的估計。第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法【例】【例】 為弄清氟對禽類的毒性影響，選用為弄清氟對禽類的毒性影響，選用1日齡日齡羅曼褐蛋雞羅曼褐蛋雞48羽，隨機分為羽，隨

13、機分為6組，每組組，每組8羽，另羽，另設一組空白對照，經飲水添加不同量的氟化鈉，設一組空白對照，經飲水添加不同量的氟化鈉，1次性灌喂，觀察次性灌喂，觀察7 d天內雛雞中毒死亡的情況。天內雛雞中毒死亡的情況。計算計算 指標。指標。50LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法濃度濃度(mg/ml) 雛雞數(shù)（雛雞數(shù)（n） 死亡數(shù)（死亡數(shù)（r） 死亡率（死亡率（%）80.608675.064.518562.555.628450.041.278337.533.038337.526.428225.0服氟化鈉水溶液后對雛雞的毒性影響服氟化鈉水溶液后對雛雞的毒性影響第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的

14、測定方法半數(shù)致死量的測定方法1編制計算表編制計算表（1）將劑量換算成對數(shù)劑量）將劑量換算成對數(shù)劑量x。（2）將死亡率換算成概率單位）將死亡率換算成概率單位y。死亡率為。死亡率為0或或100%者，它們的相應概率單位是負無窮大和正無者，它們的相應概率單位是負無窮大和正無窮大，在直線化過程無意義，通常不計入計算，窮大，在直線化過程無意義，通常不計入計算，或用校正數(shù)，即或用校正數(shù)，即0/0校正為校正為0.25/n，100%校正為校正為（n-0.25）/n，n為該組試驗動物數(shù)，本例不需校為該組試驗動物數(shù)，本例不需校正。查附表正。查附表16時：如死亡率為時：如死亡率為75%，其概率單位，其概率單位為為5.

15、674，余類推。，余類推。第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法濃度濃度(mg/ml)雛雞數(shù)雛雞數(shù)（n）死亡數(shù)死亡數(shù)（r）死亡率死亡率（%）對數(shù)劑量對數(shù)劑量（x）概率單概率單位位(y)80.608675.01.90655.67464.518562.51.80965.33255.628450.01.74525.00041.278337.51.61564.69533.038337.51.51894.69526.428225.01.42194.326服氟化鈉水溶液后對雛雞的毒性影響服氟化鈉水溶液后對雛雞的毒性影響第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法2. 用回歸法求半

16、數(shù)致死量。用回歸法求半數(shù)致死量。 依表的對數(shù)劑量（依表的對數(shù)劑量（x）和概率單位）和概率單位(y)資料配置資料配置直線。先繪制直線。先繪制“散點圖散點圖”，橫軸為對數(shù)劑量，橫軸為對數(shù)劑量x，縱軸，縱軸為概率單位為概率單位y，繪制，繪制6個點，計算回歸方程，并作圖。個點，計算回歸方程，并作圖。本例中，回歸方程為本例中，回歸方程為 0.6360 2.5860yx第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法3. 求半數(shù)致死量的置信區(qū)間。求半數(shù)致死量的置信區(qū)間。上面求得的上面求得的 是一個樣本指標，只能作為總是一個樣本指標，只能作為總體體 的點值估計，同樣也可對總體的點值估計，同樣也可對總體

17、 作作區(qū)間估計，即求總體區(qū)間估計，即求總體 的置信區(qū)間。按公式的置信區(qū)間。按公式求各致死劑量對數(shù)值的標準差（求各致死劑量對數(shù)值的標準差（s）。）。50lgLD50lg LD50lg LD50lgLD2121xxsyy第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法 本例取第一點（本例取第一點（1.49, 4.5），）， 取第二點（取第二點（1.88, 5.5）代入公式得：）代入公式得： 21211.88 1.490.395.54.5xxsyy根據(jù)下面的公式求半數(shù)致死量對數(shù)值的標準誤根據(jù)下面的公式求半數(shù)致死量對數(shù)值的標準誤 50lg/2LDssN N 為概率單位為概率單位4至至6范圍內（即

18、死亡率為范圍內（即死亡率為15.87%至至84.13%范圍內）各組試驗動物數(shù)。范圍內）各組試驗動物數(shù)。第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法本例，此范圍內共用試驗動物數(shù)合計本例，此范圍內共用試驗動物數(shù)合計48頭，即頭，即N =48。故。故 進而半數(shù)致死量的進而半數(shù)致死量的95%置信區(qū)間。置信區(qū)間。50150lglg (lg1.96)LDLDs)156. 069. 1(lg)0796. 096. 169. 1(lg11 即即 34.197 94(mg/ml)70.145 53(mg/ml)0796. 024839. 0250lg NssLD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致

19、死量的測定方法 關于概率單位法常用的還有關于概率單位法常用的還有“概率單位法概率單位法”和和 “加權概率單位法加權概率單位法”（也叫（也叫“概率單位加權回歸概率單位加權回歸法法”），后者計算較為復雜，但常被看作最為有），后者計算較為復雜，但常被看作最為有效的方法。考慮到計算的復雜性，在多數(shù)統(tǒng)計軟效的方法?？紤]到計算的復雜性，在多數(shù)統(tǒng)計軟件包中均有估計件包中均有估計 和和 的程序，使用起來十的程序，使用起來十分方便。分方便。50ED50LD三、序貫法三、序貫法 序貫法是最能節(jié)省試驗動物的一種方法，又稱序貫法是最能節(jié)省試驗動物的一種方法，又稱“上上下法下法”。由于其把計量集中用在。由于其把計量集中

20、用在50%反應率的上下，反應率的上下，因此在確定因此在確定 時具有很高的效率。時具有很高的效率。 其一般方法是：根據(jù)以前的經驗選擇一個近其一般方法是：根據(jù)以前的經驗選擇一個近50%反反應率的等比級數(shù)劑量組，通常用應率的等比級數(shù)劑量組，通常用4-6個劑量組，然后將個劑量組，然后將動物一只一只有序地進行試驗，當動物出現(xiàn)陰性反應動物一只一只有序地進行試驗，當動物出現(xiàn)陰性反應時，就選用較高一級的劑量給予下一只動物，當出現(xiàn)時，就選用較高一級的劑量給予下一只動物，當出現(xiàn)陽性反應時，就選用較低一級的劑量給予下一只動物，陽性反應時，就選用較低一級的劑量給予下一只動物，直到試驗結束，試驗所需的動物總數(shù)直到試驗結

21、束，試驗所需的動物總數(shù)n應在試驗開始應在試驗開始前決定。前決定。50LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法 【例例】 為測定某試劑的安全性，用序貫法測定此試劑小白鼠為測定某試劑的安全性，用序貫法測定此試劑小白鼠腹腔注射的腹腔注射的 (mg/kg）, 選用選用1月齡小白鼠月齡小白鼠22只，給藥的對數(shù)只，給藥的對數(shù)劑量應盡量從估計最可能接近劑量應盡量從估計最可能接近 的劑量開始，本例從的劑量開始，本例從1.85開開始，死亡記為始，死亡記為“+”號，存活記為號，存活記為“-”號。后一動物的劑量上升號。后一動物的劑量上升或下降由前一動物的死亡（或下降由前一動物的死亡（S）或存活（）

22、或存活（F）來決定，從第一只）來決定，從第一只改變算起（即表中第一條虛線起），至改變算起（即表中第一條虛線起），至22只止，最后的終止號只止，最后的終止號（即第二條虛線后的（即第二條虛線后的“”）也作為一次試驗結果。其位置決定）也作為一次試驗結果。其位置決定于末一只動物的死亡或存活，末一只動物死亡者，下降一格給于末一只動物的死亡或存活，末一只動物死亡者，下降一格給“”，以存活論；末一只動物存活者上升一格繪，以存活論；末一只動物存活者上升一格繪“”號，以號，以死亡論。結果見表，其中死亡論。結果見表，其中S表示死亡，表示死亡，F(xiàn)表示存活。表示存活。50LD50LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法

23、半數(shù)致死量的測定方法對數(shù)劑量對數(shù)劑量（lgD）實驗動物號實驗動物號死亡死亡存活存活合計合計12 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 1920 21 22 23S(+)F()r1.95 +1011.90 + +2131.85+ + + + + +5271.80 + + +3581.75 033某藥物某藥物 的值測定結果的值測定結果50LD的計算公式為：的計算公式為： rdrLD)lg(lg5050LD第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法2275. 1380. 1885. 1790. 1395. 11lg50 LD=1.8295 50

24、LD=67.5376mg/kg 第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法 序貫法簡便易行，適于反應快速的藥物試驗，序貫法簡便易行，適于反應快速的藥物試驗，且使用動物較為節(jié)省，但不能估計誤差，無法進行且使用動物較為節(jié)省，但不能估計誤差，無法進行 顯著性檢驗，因此應用受到一定的限制。但也有一顯著性檢驗，因此應用受到一定的限制。但也有一些補充方法，可自行查閱相關資料。些補充方法，可自行查閱相關資料。（例如，利用寇氏法中的公式估計（例如，利用寇氏法中的公式估計 ，將其中，將其中的的 用本法的用本法的 代替，同時需計算本法中代替，同時需計算本法中 各劑量各劑量組的死亡率。）組的死亡率。）5

25、0lgLDSinir第二節(jié)第二節(jié) 半數(shù)致死量的測定方法半數(shù)致死量的測定方法 一、半數(shù)致死量試驗設計的要求一、半數(shù)致死量試驗設計的要求 1試驗劑量的確定試驗劑量的確定 （）劑量范圍的選擇（）劑量范圍的選擇 根據(jù)以往的實踐經驗，參根據(jù)以往的實踐經驗，參考有關資料或進行預備試驗，了解動物全致死和全不考有關資料或進行預備試驗，了解動物全致死和全不致死的劑量范圍。要求最小劑量等于致死的劑量范圍。要求最小劑量等于0%死亡率的劑死亡率的劑量，最大劑量等于量，最大劑量等于100%死亡率的劑量。死亡率的劑量。 （）劑量分組（）劑量分組 一般以一般以58組為宜，要求死亡率在組為宜，要求死亡率在50%上下約各有一半

26、的組。如用寇氏法計算半數(shù)致死上下約各有一半的組。如用寇氏法計算半數(shù)致死量，最好包括有死亡率為量，最好包括有死亡率為0%及及100%的計量組。的計量組。第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗設計與應用半數(shù)致死量的試驗設計與應用 一、半數(shù)致死量試驗設計的要求一、半數(shù)致死量試驗設計的要求 1試驗劑量的確定試驗劑量的確定（）各組劑量呈等比級數(shù)（）各組劑量呈等比級數(shù) 即換算成對數(shù)劑量后，即換算成對數(shù)劑量后，其相鄰對數(shù)劑量呈等差級數(shù)。劑量的比值可用下式其相鄰對數(shù)劑量呈等差級數(shù)。劑量的比值可用下式計算。計算。第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗設計與應用半數(shù)致死量的試驗設計與應用 求得比值以后，自第一劑量（最小劑量）開始

27、乘以求得比值以后，自第一劑量（最小劑量）開始乘以比值，即得相鄰的下一組劑量，其余類推。比值，即得相鄰的下一組劑量，其余類推。相鄰兩組劑量的比值相鄰兩組劑量的比值= = ）組組數(shù)數(shù)最最小小劑劑量量最最大大劑劑量量（1lglglg1 第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗設計與應用半數(shù)致死量的試驗設計與應用2試驗動物的選擇與分組試驗動物的選擇與分組（）試驗動物的選擇（）試驗動物的選擇 除動物的種屬選擇外，對動物個體的年齡、體重、除動物的種屬選擇外，對動物個體的年齡、體重、性別、生理狀態(tài)及健康狀況等均應嚴格注意。在同一性別、生理狀態(tài)及健康狀況等均應嚴格注意。在同一試驗中，動物的年齡、體重應盡可能一致。動物毒

28、性試驗中，動物的年齡、體重應盡可能一致。動物毒性試驗一般應雌、雄動物分組同時進行。若是性別混合試驗一般應雌、雄動物分組同時進行。若是性別混合編組，則要求雌雄各半。編組，則要求雌雄各半。第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗設計與應用半數(shù)致死量的試驗設計與應用 （）設試驗組與對照組（）設試驗組與對照組 對試驗組給予一定量受試物質以觀對試驗組給予一定量受試物質以觀察毒物的反應。試驗組與對照組除去處理因素（給受試物質）察毒物的反應。試驗組與對照組除去處理因素（給受試物質）不同外，其他條件應盡量相同。在試驗時，如果對照組的試驗不同外，其他條件應盡量相同。在試驗時，如果對照組的試驗動物出現(xiàn)死亡，一般應排除死亡原

29、因，重作試驗。但是作昆蟲動物出現(xiàn)死亡，一般應排除死亡原因，重作試驗。但是作昆蟲（如蚊子等）毒性試驗時，因小動物易發(fā)生自然死亡，當對照（如蚊子等）毒性試驗時，因小動物易發(fā)生自然死亡，當對照組的試驗昆蟲死亡率在組的試驗昆蟲死亡率在10%以下時，可對試驗組的死亡率進行以下時，可對試驗組的死亡率進行校正。然后根據(jù)校正死亡率計算半數(shù)致死量。校正。然后根據(jù)校正死亡率計算半數(shù)致死量。校正死亡率= %100%對照組死亡率對照組死亡率對照組死亡率對照組死亡率試驗組死亡率試驗組死亡率 第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗設計與應用半數(shù)致死量的試驗設計與應用 3操作規(guī)程與記錄等都應有統(tǒng)一的規(guī)格要求。操作規(guī)程與記錄等都應有統(tǒng)一的規(guī)格要求。 在試驗過程中，應嚴格遵守試驗設計的要求。特別是分批在試驗過程中，應嚴格遵守試驗設計的要求。特別是分批試驗時，更應注意條件一致，人員操作一致，以避免產生不試驗時，更應注意條件一致，人員操作一致，以避免產生不必要的誤差。必要的誤差。（）試驗動物分組，必須嚴格遵守隨機化原則，以減少誤差。（）試驗動物分組，必須嚴格遵守隨機化原則，以減少誤差。第三節(jié)第三節(jié) 半數(shù)致死量的試驗設計與應用半數(shù)致死量的試驗設計與應用二、半數(shù)致死量的應用二、半數(shù)致死量的應用 1