藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則

1、附錄XIX A藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證的目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測(cè)要求。在建立藥品質(zhì) 量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，分析方法需經(jīng)驗(yàn)證；在藥品生產(chǎn)工藝變更、制劑的組分變更、原分析方法進(jìn)行修訂 時(shí)、則質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法也需進(jìn)行驗(yàn)證。方法驗(yàn)證理由、過程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 起草說明或修訂說明中。需驗(yàn)證的分析項(xiàng)目有：鑒別試驗(yàn)，雜質(zhì)定量或限度檢查，原料藥或制劑中有效成分含量測(cè) 定，以及制劑中其他成分（如防腐劑等）的測(cè)定。藥品溶出度、釋放度等檢查中，其溶出量等 測(cè)試方法也應(yīng)作必要驗(yàn)證。驗(yàn)證內(nèi)容有：準(zhǔn)確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測(cè)限、 定量限、線性、范

2、圍和耐用性。視具體方法擬訂驗(yàn)證的內(nèi)容。附表中列出的分析項(xiàng)目和相應(yīng)的 驗(yàn)證內(nèi)容可供參考。方法驗(yàn)證內(nèi)容如下。一、準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度系指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近的程度，一般以回收率（%）表示。 準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)建立。1. 含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度原料藥可用已知純度的對(duì)照品或樣品進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一方 法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行比較。制劑可用含已知量被測(cè)物的各組分混合物進(jìn)行測(cè)定。如不能得到制劑的全部組分，可向制 劑中加入已知量的被測(cè)物進(jìn)行測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一個(gè)方法測(cè)定結(jié)果進(jìn) 行比較。如該分析方法已經(jīng)測(cè)試并求出了精密度、線性和專屬性，在準(zhǔn)確度也可推算出來的情況

3、下， 這一項(xiàng)不 必再做。2. 雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確度可向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。如果不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法 測(cè)定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典標(biāo)準(zhǔn)方法或經(jīng)過驗(yàn)證的方法。如不能測(cè)得雜質(zhì)或 降解產(chǎn)物的響應(yīng)因子或不能測(cè)得對(duì)原料藥的相對(duì)響應(yīng)因子的情況下，可用原料藥的響應(yīng)因子。 應(yīng)明確表明單個(gè)雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重量比（%或面積比（%。3. 數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，例如，設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各分 別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測(cè)定。應(yīng)報(bào)告已知加入量的回收率（%,或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差或可信限。二、精密度精密度系指在規(guī)定

4、的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接 近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。在相同條件下，由同一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性；在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室， 不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果的精密度，稱為中間精密度；在不同實(shí)驗(yàn)室由不 同分析人員測(cè)定結(jié)果的精密度，稱為重現(xiàn)性。含量測(cè)定和雜質(zhì)定量測(cè)定應(yīng)考慮方法的精密度。1. 重復(fù)性在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9個(gè)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，例如，設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度，每個(gè)濃度各分 別制備3份供試品溶液，進(jìn)行測(cè)定，或?qū)⑾喈?dāng)于1 00淞度水平的供試品溶液，用至少測(cè)定6 次的結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。2. 中間精密度為考察隨機(jī)變動(dòng)因素對(duì)精密

5、度的影響，應(yīng)設(shè)計(jì)方案進(jìn)行中間精密度試驗(yàn)。變動(dòng)因素為不同 日期、不同分析人員、不同設(shè)備。3. 重現(xiàn)性法定標(biāo)準(zhǔn)采用的分析方法，應(yīng)進(jìn)行重現(xiàn)性試驗(yàn)。例如，建立藥典分析方法時(shí)，通過協(xié)同檢 驗(yàn)得出重現(xiàn)性結(jié)果。協(xié)同檢驗(yàn)的目的、過程和重現(xiàn)性結(jié)果應(yīng)記載在起草說明中。應(yīng)注意重現(xiàn)性 試驗(yàn)用的樣品本身的質(zhì)量均勻性和貯存運(yùn)輸中的環(huán)境影響因素，以免影響重現(xiàn)性結(jié)果。4. 數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限。三、專屬性專屬性系指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的方法能正確測(cè) 定出被測(cè)物的特性。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查、含量測(cè)定方法，均應(yīng)考察其專屬性。如方法不夠?qū)?屬，應(yīng)采用多個(gè)方法予以補(bǔ)充。1.

6、鑒別反應(yīng)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。不含被測(cè)成分的樣品，以及結(jié)構(gòu)相似或組 分中的有關(guān)化合物，均應(yīng)呈負(fù)反應(yīng)。2. 含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定色譜法和其他分離方法，應(yīng)附代表性圖譜，以說明專屬性。并應(yīng)標(biāo)明諸成分在圖中的位置， 色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。在雜質(zhì)可獲得的情況下，對(duì)于含量測(cè)定，試樣中可加入雜質(zhì)或輔料，考察測(cè)定結(jié)果是否受 干擾，并可與未加雜質(zhì)或輔料的試樣比較測(cè)定結(jié)果。對(duì)于雜質(zhì)測(cè)定，也可向試樣中加入一定量 的雜質(zhì)，考察雜質(zhì)能否得到分離。在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進(jìn)行測(cè)定，與另一 個(gè)經(jīng)驗(yàn)證了的方法或藥典方法比較結(jié)果。用強(qiáng)光照射，高溫，高濕，酸（堿）水解

7、或氧化的方 法進(jìn)行加速破壞，以研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑。含量測(cè)定方法應(yīng)比對(duì)二法的結(jié)果，雜質(zhì) 檢查應(yīng)比對(duì)檢出的雜質(zhì)個(gè)數(shù)，必要時(shí)可采用光二極管陣列檢測(cè)和質(zhì)譜檢測(cè)，進(jìn)行峰純度檢查。四、檢測(cè)限檢測(cè)限系指試樣中被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低量。藥品的鑒別試驗(yàn)和雜質(zhì)檢查方法，均應(yīng)通 過測(cè)試確定方法的檢測(cè)限。常用的方法如下。1. 非儀器分析目視法用已知濃度的被測(cè)物，試驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。2. 信噪比法用于能顯示基線噪音的分析方法，即把已知低濃度試樣測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào) 進(jìn)行比較，算出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量。一般以信噪比為3:1或2:1時(shí) 相應(yīng)濃度或 注入儀器的量確定檢測(cè)限。3.

8、 數(shù)據(jù)要求應(yīng)附測(cè)試圖譜，說明測(cè)試過程和檢測(cè)限結(jié)果。五、定量限定量限系指試樣中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。 雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測(cè)定方法研究時(shí)，應(yīng)確定定量限。常用信噪比法確定定量限。一般以信噪比為1 0:1時(shí)相應(yīng)的濃度或注入儀器的量確定定量限。六、線性線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系。可用一貯備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系 列供試樣品的方法進(jìn)行測(cè)定，至少制備5份供試樣品。以測(cè)得的響應(yīng)信號(hào)作為被測(cè)物濃度的函 數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進(jìn)行線性回歸。必要時(shí)，響應(yīng)信號(hào)可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換

9、， 再進(jìn)行線性回歸計(jì)算。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。七、范圍范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定。原料藥和制劑 含量測(cè)定，范圍應(yīng)為測(cè)試濃度的80%- 12 0%制劑含量均勻度檢查，范圍應(yīng)為測(cè)試濃度的70%- 130 %根據(jù)劑型特點(diǎn)，如氣霧劑、噴霧劑，范圍可適當(dāng)放寬，溶出度或釋放度中的溶出量測(cè)定， 范圍應(yīng)為限度的土 20% 如規(guī)定限度范圍，則應(yīng)為下限的-20 %!上限的+20% 雜質(zhì)測(cè)定，研究 時(shí)，范圍應(yīng)根據(jù)初步實(shí)測(cè)，擬訂出規(guī)定限度的土 20%如果含量測(cè)定與雜質(zhì)檢查同時(shí)測(cè)定，用

10、 百分歸一化法，則線性范圍應(yīng)為雜質(zhì)規(guī)定限度的-20 %!含量限度（或上限）的+20 %八、耐用性耐用性系指在測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度，為使方法可用于提 供常規(guī)檢查依據(jù)。開始研究分析方法時(shí)，就應(yīng)考慮其耐用性。如果測(cè)試條件要求苛刻，則應(yīng)在 方法中寫明。典型的變動(dòng) ' 因素有：被測(cè)溶液的穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、' 時(shí)間等。液相色譜法 中典型的變動(dòng)因素有：流動(dòng)相的組成和pH值，不同廠牌或不同批號(hào)的同類型色譜柱，柱溫， 流速等。氣相色譜法變動(dòng)因素有：不同廠牌或批號(hào)的色譜柱、固定相，不同類型的擔(dān)體、柱溫， 進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度等。經(jīng)試驗(yàn)，應(yīng)說明小的變動(dòng)能否通過設(shè)計(jì)的系統(tǒng)適用